盐生卤虫BADH基因的克隆及序列分析

实验以盐生动物卤虫（Artemia）为材料,采用酚-氯仿法提取总DNA,以已报道的BADH基因的保守序列设计引物,通过PCR技术,从卤虫的基因组DNA中分离得到了1个BADH基因片段,经测序,得到一段868 bp的核苷酸序列,输入Gen-Bank进行BLAST同源性比较,发现所得片段与植物中的籽粒苋的BADH4基因中的一段序列有96%的同源性,此项研究为更深入地研究抗盐动物的BADH基因奠定了良好的基础.     

几种海水经济贝类DNA提取方法探讨

以缢蛏、美人蛏、文蛤、扇贝和鲍鱼等几种经济贝类为研究对象，分别用苯酚／氯仿／异戊醇法，CTAB法，SDS法等不同方法提取其基因组DNA，寻找适宜于研究对象基因组DNA提取的方法，结果表明，3种方法均可以从目标材料中提取到DNA，但苯酚／氯仿／异戊醇法无论从数量和质量上都不理想，而SDS和CTAB可根据具体情况选择使用。即对纯度要求不高时均可选用SDS法，但为了分子生物学研究的应用。需要较高纯度，则缢蛏、美人蛏、文蛤和扇贝等瓣腮纲贝类推荐用SDS法，而鲍鱼等腹足纲贝类推荐用CTAB法。     

从皂苷糖基水解酶产生菌sp.48g提取基因组DNA

采用试剂盒法、饱和酚抽提法、高盐沉淀法和氯化苄法从皂苷糖基水解酶产生菌sp．48g提取基因组DNA。经比色法和琼脂糖凝胶电泳分析检测。结果用氯化苄法提取的基因组DNA在质量上和得率上优于其他方法。A260／A280为1.7，DNA产量为0.11mg／g湿菌体。达到下部实验要求。     

牦牛乳中DNA提取方法的建立与优化

为加速牦牛重要基因的挖掘和功能鉴定,以牦牛乳作为试验材料,建立简便的牦牛基因组DNA提取方法.采用常规离心法,从牦牛乳中获得体细胞,进而提取基因组DNA.研究不同去除蛋白方法、不同DNA沉淀剂、不同贮藏条件对牦牛乳中DNA提取质量的影响.DNA质量通过PCR评价.结果表明:高盐法与酚/氯仿法去除蛋白效果相当.高盐法简便...     

奶粉基因组DNA不同提取方法的比较

为选择适合奶粉材料进行分子标记检测的DNA提取方法,以市售奶粉为材料,采用6种不同的方法提取基因组DNA,并比较这6种方法的提取效果．结果表明,除异丙醇沉淀法和十二烷基硫酸钠法(SDS法)外,其他4种方法提取的基因组DNA均适用于聚合酶链式反应(PCR)检测．同时,结合基因组DNA的纯度和质量浓度,明确奶粉基因组DNA提取方法的优劣依次为:热解法、异硫氰酸胍法、高盐低pH法和十六烷基三甲基溴化铵法(CTAB法)．     

酸面团中微生物基因组DNA提取方法的优化

为有效提高酸面团中微生物基因组DNA的提取纯度与浓度,采用改良的CTAB法、STES法以及两种不同的基因组DNA提取试剂盒对酸面团中微生物基因组DNA进行了提取,并且重点优化了酸面团样品的前处理方法,经分光光度法和电泳法检测,确定了采用不同方法所获得DNA产物的浓度与纯度.结果表明:离心沉淀法、洗去面筋法和烘干法3种前...     

卤虫有效抗炎部位的研究

以药理实验为指导,利用溶剂法、大孔吸附树脂吸附法、硅胶柱层析法及高效液相色谱法提取分离卤虫的有效抗炎部位,对卤虫的抗炎作用进行初步的研究。通过急性炎症———二甲苯致小鼠耳廓肿胀反应。结果表明,利用本方法提取分离的卤虫有效抗炎部位,具有明显的抗急性炎症作用,对炎症的抑制率最高可达80.70%,与对照品相比P<0.001(t值检验)。     

卤虫有效抗炎部位的研究

以药理实验为指导,利用溶剂法、大孔吸附树脂吸附法、硅胶柱层析法及高效液相色谱法提取分离卤虫的有效抗炎部位,对卤虫的抗炎作用进行初步的研究。通过急性炎症———二甲苯致小鼠耳廓肿胀反应。结果表明,利用本方法提取分离的卤虫有效抗炎部位,具有明显的抗急性炎症作用,对炎症的抑制率最高可达80.70%,与对照品相比P<0.001(t值检验)。     

盐生动物卤虫甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆

以已报道的BADH基因的保守序列设计引物,通过PCR技术,从卤虫的基因组DNA中分离了2个BADH基因片段,分别是800和900 bp,表明卤虫BADH基因是一个多基因家族,至少存在2个成员.     

嗜盐菌在浓海水条件下生长规律的研究

通过海水淡化预处理中添加Fe3 、NaClO和聚合硫酸铁等因子对嗜盐菌生长的研究,以及在自然海水与浓海水的不同配比下嗜盐菌的生长状况研究,发现嗜盐菌能在浓海水中生存.并且通过在海水中增殖卤虫对其生长的影响研究,发现了浓海水条件下卤虫密度的大小和嗜盐菌的生长发育有关.     

一种适用于地衣总DNA提取的改进方法

目的：针对地衣初生、次生代谢产物丰富的特点,提出了一种适于地衣总DNA的提取方法。方法：应用改良的CTAB法,对3种常见地衣进行了总DNA提取,经过琼脂糖电泳、紫外吸收分析DNA质量。结果：3个样本DNA的A260/A280值均在1.8～2.0之间,琼脂糖电泳图像清晰。结论：改良的CTAB法简便、省时、价廉,适合于地衣总DNA的提取,获得的DNA含量高,纯度好。     

一种高效安全提取质粒DNA方法的建立

在碱裂解法提取质粒DNA的基础上做了改进,将NaOH浓度从0.20mol/L降低为0.10mol/L,使得超螺旋DNA的得率进一步提高.采用silica法纯化质粒DNA,避免了使用有毒性和挥发性气味的饱和酚和氯仿,使得操作更安全简单.电泳结果表明,提取的质粒DNA质量好,得率高,并且可以直接进行下一步的酶切、连接及转化等实验.同时,该方法中使用的硅胶可以回收再生进行重复利用,节省了实验费用.     

细菌质粒DNA的快速提取及检测

介绍一种质粒DNA的快速提取方法,所分离出的DNA纯度较好,全部操作仅在两只Eppendorf管中进行,含质粒DNA的上清液可直接点样走琼脂糖凝胶电泳。整个提取过程在较短时间内完成。该方法简便、快捷、效果好。     

巯基自组装修饰恒电位共价键合法固定基因电化学传感器的制备与表征

以金电极为基体电极,采用巯基乙醇自组装法制备了巯基乙醇自组装膜修饰电极,再以碳二亚胺为交联剂用控制电位共价键合法将DNA固定在巯基乙醇单分子层上形成了基因修饰电极。以亚甲蓝为电化学杂交指示剂,采用循环伏安法、微分脉冲伏安法等电化学方法对基因电化学传感器进行了表征。结果表明,该方法能够将DNA稳定地固定于电极表面,可用于制备自组装修饰基因电化学传感器。     

基于SVM-OVA方法的多类别基因表达数据分类

本研究针对多类别的癌症分类问题,首先运用似然比检验筛选出表达水平发生显著性变化的特征基因,然后把支持向量机(SVM)和One-Versus-All(OVA)方法结合,提出了SVM-OVA多类别分类判别模型,通过对多类别的乳腺癌DNA微阵列数据进行计算,达到了77.3%的分类准确度。     

层次聚类在进化树构建中的应用

提出一种新的基于层次聚类算法的基于距离生物进化树构建方法。与以往其他基于距离的生物进化树方法相比,此方法可以得到相同的结果。与真实的生物进化树相比,在序列长度较短的情况下此方法可以给出理想的进化树。     

绿色木霉DNA提取方法研究

利用CTAB法、简化CTAB法、氯化苄法和快速提取法等4种方法提取了绿色木霉DNA,并采用琼脂糖凝胶电泳和PCR对DNA进行了评价.凝胶电泳检测结果表明4种方法均可提取到绿色木霉DNA,但PCR检测结果表明只有CTAB法和简化CTAB法提取的DNA可用作CBHII基因的PCR模板.     

茯苓菌核多糖分离技术研究

采用单因素试验、正交试验对热水浸提法、微波法、酶法分离茯苓菌核多糖的工艺进行探讨.结果表明：热水浸提法的最佳工艺条件为：料水比1：30（g/mL）,浸提温度70℃,浸提时间2 h,浸提2次;微波法最佳提取工艺条件为：料水比1：30（g/mL）,功率296 W,时间4 min;酶法最佳提取工艺条件为：木瓜蛋白酶0.5%,初始pH 6,温度60℃,时间2 h.酶法的多糖提取率最高.采用集成提取工艺的茯苓多糖提取率大幅度提高,酶法与微波组合法的多糖提取率最高.考虑到多糖得率、提取时间、提取成本等因素的影响,最优的集成提取方式为酶法与微波组合法.     

硬X射线梯度渐变多层膜设计

讨论了硬X射线梯度渐变多层膜的膜对材料的选择 ,介绍了分析方法、数值解析方法和分堆栈法三种用于膜系理论设计的方法,并且就这三种方法的优缺点进行了比较和分析.