泰乐菌素结晶工艺研究

结晶过程是影响晶体质量的关键步骤。本实验采用溶析结晶工艺对泰乐菌素结晶过程进行研究,以收率、粒度和粒度分布为目标,考察了水和丙酮质量比、晶种加入量(质量分数)、结晶温度、初始浓度、搅拌转速、陈化时间和流加速率等操作因素对结晶过程的影响。结果表明:所有参数在考察的条件范围内都明显地影响产品的收率;除了温度和搅拌转速外,其他参数都对产品粒度有较明显的影响;对产品粒度分布影响较大的是晶种加入量,温度和搅拌强度。通过分析各种因素影响得到泰乐菌素较佳结晶工艺条件:水和丙酮质量比4∶1,晶种加入量0.5%,结晶温度40℃,初始质量分数1.08 g/g,搅拌转速250 r/min,陈化时间12 h,流加速率先0.3 m L/min,后0.89 m L/min。     

泰乐菌素高产菌株的筛选

以弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)TP-116菌株作为出发菌株,采用紫外线、氯化锂和微波三重复合诱变,通过泰乐菌素抗性定向筛选,获得一株高产菌株YBT-06,并对其进行了遗传稳定性试验,结果表明突变株YBT-06生产代谢旺盛,遗传稳定性好,发酵效价比出发菌株提高了25%,达到11066μg/m L。     

纳米二氧化钛/腐植酸对泰乐菌素的吸附特性

为了研究不同来源的腐植酸(HA)/纳米二氧化钛(nmTiO2)复合物对典型抗生素环境行为的影响,采用批量平衡振荡法,分别考察了吸附等温线、离子强度以及pH值对纳米二氧化钛/HA吸附泰乐菌素(TYL)的影响。结果表明:TYL在TiO2/不同来源的HA复合物上的吸附容量不同,顺序为,BZ/TiO2DC/TiO2NT/TiO2DN/TiO2,添加腐植酸后,吸附容量明显增加,离子交换可能是泰乐菌素在HA/TiO2复合物上吸附的主要机理;随着pH值的升高,吸附容量逐渐增大;而随着离子强度的增加,吸附容容量显示减小。这意味着纳米二氧化钛进入环境后,随着环境条件的改变,其对抗生素的吸附能力也将发生改变,进而对抗生素在水环境中的迁移造成影响。     

泰乐菌素单克隆抗体的制备及竞争ELISA检测方法的建立

目的制备泰乐菌素(Tylosin)单克隆抗体,并建立泰乐菌素竞争ELISA检测方法。方法用羰基二咪唑将半抗原泰乐菌素分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,制备泰乐菌素免疫抗原Tylosin-BSA和检测抗原Tylosin-OVA,用紫外光谱扫描检测Tylosin-BSA偶联物,辣根过氧化物酶标记Tylosin-OVA偶联物。采用杂交瘤技术,制备特异性抗泰乐菌素单克隆抗体,建立泰乐菌素竞争ELISA检测方法。结果筛选出2株稳定分泌抗泰乐菌素单抗的杂交瘤细胞株3E4和2G10,2G10分泌的单抗腹水效价为6×10-4,抗体类型为IgG1型,轻链为κ链,在酸、碱及热条件下均较稳定。选择该单抗建立了泰乐菌素竞争ELISA检测方法。该方法灵敏度达50ng/ml,标准曲线线性关系良好(r=0.9827),且特异性、稳定性较好,准确性、精密性较高。结论已成功制备了泰乐菌素单克隆抗体,并建立了竞争ELISA检测方法,可用于动物源性食品中残留泰乐菌素含量的检测。     

臭氧氧化去除水中泰乐菌素的研究

探究了臭氧预氧化方法对水环境中普遍存在的泰乐菌素的去除效率,研究了泰乐菌素初始浓度、溶液p H值、臭氧投量和腐殖酸对臭氧氧化去除泰乐菌素效率的影响。结果表明,氧化反应20 min后,泰乐菌素的去除率基本稳定。随泰乐菌素初始浓度的增加,其去除率呈降低趋势;溶液p H值对泰乐菌素的去除率存在一定影响,泰乐菌素的去除率随溶液p H的增加而降低;随臭氧投量的增加,泰乐菌素去除率也随之升高;腐殖酸对泰乐菌素的氧化去除有一定的抑制作用,且浓度越高,抑制作用越强烈。     

臭氧氧化去除水中泰乐菌素的研究

探究了臭氧预氧化方法对水环境中普遍存在的泰乐菌素的去除效率,研究了泰乐菌素初始浓度、溶液p H值、臭氧投量和腐殖酸对臭氧氧化去除泰乐菌素效率的影响。结果表明,氧化反应20 min后,泰乐菌素的去除率基本稳定。随泰乐菌素初始浓度的增加,其去除率呈降低趋势;溶液p H值对泰乐菌素的去除率存在一定影响,泰乐菌素的去除率随溶液p H的增加而降低;随臭氧投量的增加,泰乐菌素去除率也随之升高;腐殖酸对泰乐菌素的氧化去除有一定的抑制作用,且浓度越高,抑制作用越强烈。     

膜分离技术分离纯化泰乐菌素的研究

简要介绍膜分离技术,采用超滤膜、纳滤膜对泰乐菌素发酵液进行脱色除蛋白试验。通过考查该体系膜通量、发酵液浓缩情况及滤液质量等,发现采用膜系统处理泰乐菌素发酵液在工艺、技术上是可行的,比传统过滤方式具备很多优越性。     

薄层色谱法分离泰乐菌素微生物降解产物的研究

研究了越南伯克霍尔德氏菌(Burkholderia vietnamiensis)对泰乐菌素的降解效能,并通过薄层色谱法初步分离其降解产物。结果表明:用B.vietnamiensis处理初始浓度为100 mg·L~(-1)泰乐菌素药渣5 d,降解率为97.70%。用薄层色谱法初步分离的泰乐菌素降解产物,以甲醇/乙酸乙酯为展开剂,当比例调至1∶6时,可将产物初步分离为两种,降解产物A的Rf A为0.43,降解产物的Rf B为0.28;降解产物经展开后在紫外灯下可显色,说明泰乐菌素分子结构中共轭体系依然存在。     

高效液相色谱法检测泰乐菌素残留

建立了酵母培养物和饲用酶制剂中残留泰乐菌素的高效液相色谱检测方法。采用Diamonsil(钻石)C18(5μm,150mm×4.6mm)反相色谱柱,利用正己烷在索氏提取器中脱脂,以甲醇为提取液,流动相为0.04mol·L-1磷酸盐缓冲溶液(pH=2.4)∶乙腈,采用等度洗脱,流速为1mL·min-1,用紫外检测器检测,检测波长为285nm,进样量20μL。泰乐菌素的检出限为0.31mg·mL-1,在0.75～50mg·mL-1范围内线性相关系数R2=0.9993;在10mg·mL-1、50mg·mL-1、100mg·mL-1添加水平的回收率为47.25%～75.92%,相对标准偏差为2.45%～8.53%。     

高效液相色谱法测定废水中泰乐菌素残留量

对废水中残留的泰乐菌素进行了检测。废水水样经ODS-SPE固相萃取柱分离净化后,采用高效液相色谱进行测定。以乙腈和0.5%磷酸溶液为流动相,在282 nm处对泰乐菌素进行紫外检测。该方法在0.2～5.0 g/L之间有良好的线性相关性,相关系数R2=0.999 3,回收率为95.4%～101%,相对标准偏差为3.4%～4.2%,方法检出限为0.088 7 mg/L。     

橙皮苷的提取及其稳定性分析

为充分开发丰富的柑桔果皮资源,增加其经济附加值,采用碱溶酸析法提取椪柑果皮中橙皮苷,经D-101大孔树脂纯化,再运用紫外-可见光谱扫描法分析了温度、时间、氧气、光照、pH值、金属离子等对橙皮苷的稳定性影响。结果表明:该方法提取、纯化的橙皮苷,经HPLC法检测,纯度达到96.7%,得率1.92%。提纯的橙皮苷水溶液在75℃以下加热30 min之内,以及无氧、无光、酸性及中性条件下可保持其性能稳定;Fe³⁺、Cu²⁺对橙皮苷氧化起诱导加速作用,且在充分的氧气和光照下,特别是强光下,会引起其结构变化。     

次氯酸钠溶液稳定性研究

研究了次氯酸钠水溶液的稳定性,考察了温度、pH值、金属离子种类和浓度、表面活性剂等对次氯酸钠溶液稳定性的影响。结果表明,在温度低于25℃、pH大于12．6时,次氯酸钠溶液稳定性较好,溶液中Ca^2 、Mg^2 离子的存在对次氯酸钠溶液稳定性影响不大;而Fe^2 、Mn^2 离子的存在会促进其分解;表面活性剂硅酸钠可作为次氯酸钠消毒液的良好添加剂。     

花石榴红色素的提取及其稳定性研究

从花石榴中提取一种桔红色色素,并对该色素的稳定性进行了研究。通过小鼠急性毒性试验表明,该色素安全无毒,具有开发利用价值。     

车前草色素提取及稳定性研究

研究了车前草色素的提取条件和稳定性。以水为提取剂提取车前草色素,比较了pH值、温度、食品添加剂、氧化剂和还原剂、金属离子以及光照对车前草色素稳定性的影响。结果表明：最佳提取工艺条件是以水为提取剂,料液比为1：80,在室温下浸提24h;食品添加剂（淀粉）、还原剂（抗坏血酸）、金属离子（Co^2＋、Fe^3＋）、光照对长春花红色素稳定性有较大影响。     

表面活性剂对磺化酞菁钴苛性碱液的稳定化作用研究

针对磺化酞菁钴在氢氧化钠碱液中易聚沉的问题,考察了四乙基氢氧化铵(TEAH)和复合表面活性剂XZHA的添加对磺化酞菁钴氢氧化钠溶液(剂碱液)稳定性能的影响,结果表明,TEAH的添加对剂碱液的稳定性作用不大,XZHA的添加可以大大提高剂碱液的稳定性。无氢氧化钠存在时,在磺化酞菁钴的水溶液中添加TEAH或TEAH和XZHA的复配液都会使磺化酞菁钴的稳定性得到较大的提高,在静置17 d后,紫外-可见光谱仍能保持原来新鲜剂碱液的吸光度值。考察了4种剂碱液脱除辛硫醇的效率,结果表明,添加w(XZHA)=0.25%的磺化酞菁钴氢氧化钠溶液的脱硫醇效率远远高于磺化酞菁钴氢氧化钠溶液的脱硫醇效率,反应时间6m in时的脱硫醇率分别为97.14%和75.13%。     

二元双水相体系萃取磷酸泰乐菌素工艺的研究

建立了一种新型的小分子醇二元双水相体系,并将其应用于磷酸泰乐菌素的提取。通过考察磷酸泰乐菌素分配行为的变化,确定体系组成物质的种类和比例、分相盐的种类和浓度、pH值、温度等。相比单溶剂萃取,双水相萃取成相好,速度快,不存在乳化现象,大量杂质可被除去,样品纯度可达到98%以上,而且小分子醇价格低廉,降低了成本;后续可通过蒸馏法进行回收,循环利用,降低了能耗。     

纤维素氨基甲酸酯溶液的制备及稳定性研究

研究了制备纤维素纤维的新型原料——纤维素氨基甲酸酯(CC)溶液的制备工艺及其稳定性。结果表明:在-5~10℃条件下,用聚合度为350~612的纤维素浆粕(棉浆粕、木浆粕)合成的氮含量(酯化度)为2.34%~3.56%的CC能很好地溶解在质量百分比浓度为8%~11%的NaOH溶液中,形成淡黄色透明溶液,该溶液稳定性良好,可用于纺丝。另外,尿素、AlCl3及ZnCl2在一定范围内对CC有助溶作用。     

脂溶性茶色素的提取及其稳定性的研究

以乙醇为溶剂从茶叶中提取脂溶性茶色素,研究了温度、pH值、金属离子、氧化剂、还原剂、暗处存放和自然光下存放对脂溶性茶色素稳定性的影响。结果表明：温度对脂溶性茶色素的稳定性影响不大;弱酸性条件（pH=4．8～6．6）下,脂溶性茶色素的稳定性较好;K＋、Cu2＋、Zn2＋、Mg2＋、Al3＋对脂溶性茶色素的稳定性影响较小,Fe3＋、sn2＋对脂溶性茶色素的稳定性影响明显;氧化剂对脂溶性茶色素的稳定性有影响;还原剂对脂溶性茶色素的稳定性影响不大;暗处存放对脂溶性茶色素的稳定性影响不大;自然光下存放对脂溶性茶色素的稳定性影响很大。