乌鸡肽对环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫调节作用

研究乌鸡肽对环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫调节作用。将60只ICR雌性小鼠按体重随机分成对照组、环磷酰胺模型组、乌鸡肽低、中、高剂量组。对照组连续腹腔注射3 d,80 mg/(kg·d)生理盐水,其余各组腹腔注射等量环磷酰胺建立免疫力低下模型,同时对照组、环磷酰胺模型组以2 g/(kg·bw)酪蛋白灌胃,乌鸡肽低、中、高剂量组分别以0.5、1、2 g/(kg·bw)乌鸡肽灌胃15 d。在实验结束后测量小鼠体重、免疫脏器指数、胸腺、脾脏形态学变化、骨髓有核细胞数、白细胞计数、T淋巴细胞亚群、细胞因子等。造模后,模型组小鼠骨髓有核细胞数、DNA含量、白细胞数、CD3+、CD8+均低于对照组,差异有统计学意义。乌鸡肽组比模型组小鼠显著增加骨髓有核细胞数、白细胞计数、CD3+、CD8+等,差异有统计学意义。乌鸡肽可改善环磷酰胺所致免疫低下小鼠的免疫功能。     

乌鸡肽对小鼠免疫调节作用影响的实验研究

目的:观察并探讨乌鸡肽对小鼠免疫功能的影响。方法:以成年ICR雌性小鼠为动物模型,观察不同剂量(0.5、1.0、2.0 g/kg BW)乌鸡肽对小鼠体重、免疫器官相对重量、细胞免疫功能、体液免疫功能的影响,并从组织形态上观察胸腺的微观结构变化。结果:1.0、2.0 g/kg BW乌鸡肽干预组的足趾肿胀度、2.0 g/kg BW乌鸡肽干预组的溶血空斑数的对数转换值显著高于对照组(p<0.05)。与对照组相比,1.0、2.0 g/kg BW乌鸡肽干预组小鼠胸腺皮质的淋巴细胞数量显著增多(p<0.05)。各乌鸡肽剂量组对小鼠体重增长、免疫器官指数以及血清半数溶血值均无显著影响(p>0.05)。结论:乌鸡肽对小鼠的免疫功能有一定的促进作用。      

菠萝蜜低聚肽的免疫调节作用研究

目的:探究菠萝蜜低聚肽(jackfruit oligopeptides,JOPs)免疫调节功能。方法:采用SPF级雌性BALB/c小鼠为实验对象,进行8项免疫实验测定,系统评价不同干预剂量(0.20、0.40、0.80 g/kg·bw)JOPs对小鼠免疫器官相对重量、细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能、自然杀伤细胞(nature killer cell,NK细胞)活性以及T淋巴细胞亚群的影响。结果:与空白对照组相比,JOPs 0.40、0.80 g/kg·bw剂量组脾脏指数显著提高(P<0.05),且JOPs 0.40 g/kg·bw剂量组脾脏指数显著高于乳清蛋白组(P<0.05);与空白对照组及乳清蛋白组相比,JOPs 0.40、0.80 g/kg·bw剂量组ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力、足跖增厚度、溶血空斑数、碳廓清吞噬指数a、巨噬细胞吞噬率与吞噬指数及NK细胞活性显著提高(P<0.05),JOPs 0.80 g/kg·bw剂量组血清溶血素含量、CD3⁺T细胞数量、CD4⁺T细胞百分比及CD4⁺CD25⁺/CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺比值显著提高(P<0.05);各JOPs剂量组对小鼠体重增长、胸腺指数均无显著性影响(P>0.05)。结论:JOPs可提高机体适应性免疫及固有免疫功能,起到免疫增强作用。     

鹿胎肽对巨噬细胞RAW264.7的免疫调节作用

本实验从鹿胎中提取鹿胎肽（DFP）,通过体外实验研究其对巨噬细胞RAW264.7的免疫调节作用。采用噻唑蓝（MTT）实验检测超滤组分各肽段的增殖活性,筛选增殖活性高的组分。选用中性红吞噬实验、酶联免疫吸附检测法测定DFP对RAW264.7细胞吞噬指数、一氧化氮（NO）浓度及细胞因子如白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、IL-6和肿瘤坏死因子子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的分泌能力,同时还研究了DFP对巨噬细胞各周期分布的影响。结果表明,分子质量小于1 kDa的DFP-5对巨噬细胞RAW264.7作用后,可显著（P<0.05）提高巨噬细胞的增殖活性、吞噬活性、NO释放量以及细胞因子的分泌水平,并且在DFP-5质量浓度为25 μg/mL时效果最好。细胞周期结果表明,DFP-5能够促进RAW264.7细胞的生长,且主要作用在G0/G1期。以上结果表明,鹿胎肽具有增强免疫能力的潜在作用。     

大豆肽免疫调节作用的研究

目的:研究大豆肽对正常及免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法:腹腔注射环磷酰胺以引起小鼠免疫功能低下,观察大豆肽对正常及免疫功能低下小鼠胸腺指数、脾脏指数、脾淋巴细胞对ConA的刺激指数(SI)、抗体生成细胞含量(PFC)和血清溶血素(HC50)等指标的影响。结果:大豆肽不仅能增强正常小鼠免疫功能,而且能显著提高环磷酰胺致免疫功能低下小鼠的胸腺指数、脾脏指数、脾淋巴细胞对ConA的刺激指数、抗体生成细胞含量和血清溶血素的含量。结论:大豆肽对机体的免疫功能有一定的增强作用。     

海鲈鱼免疫肽的制备及对RAW264.7细胞双向免疫调节作用研究

为探究海鲈鱼免疫调节肽(Lateolabrax maculatus immunomodulatory peptides,LIP)的免疫和抗炎活性,以小鼠脾淋巴细胞刺激指数为指标,通过单因素和响应面优化实验确定LIP的最佳制备条件。利用RAW264.7巨噬细胞模型,探究LIP的免疫调节活性。并构建脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症模型,探讨LIP的抗炎活性。研究结果表明,LIP的优化制备条件为料液比1.0∶3.8(g/mL)、酶质量分数2.14%、木瓜蛋白酶酶解时间56min,此条件下的LIP对小鼠脾淋巴细胞刺激指数为2.57。巨噬细胞免疫活性研究结果表明,LIP具有良好的免疫调节作用。当LIP质量浓度为400μg/mL时,LIP主要是通过促进了RAW264.7细胞的增殖活性、吞噬能力、一氧化氮和胞内活性氧的生成、一氧化氮合酶表达以及促炎因子分泌。研究结果表明:LIP具有免疫调节作用;400μg/mL的LIP还可抑制一氧化氮合酶和环氧化酶-2的mRNA过度表达,降低一氧化氮、前列腺素E₂和促炎因子的过度分泌,展现出良好的抗炎作用。研究结果表明,LIP可以发挥“提高免疫应答”和“抑制过度免疫应答”的双向调节作用。研究旨在为开展双向免疫调节功能性食品的研究提供理论基础。     

学龄儿童奶粉中添加食源性生物活性肽对免疫调节作用的影响

应用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞,检测其中性红吞噬能力和NO释放量,应用刀豆蛋白A(Concanavalin A,Con A)和LPS诱导小鼠T/B淋巴细胞检测其增殖能力,通过与4种常见市售学龄儿童奶粉的免疫调节能力作比较,评价学龄儿童奶粉中添加食源性生物活性肽对的免疫调节能力。结果表明:学龄儿童奶粉中添加食源性生物活性肽对能够提高腹腔巨噬细胞的吞噬能力、NO释放量和淋巴细胞的增殖能力,说明添加食源性生物活性肽的学龄儿童奶粉具有较好的增强免疫的功能。     

黄牛骨肽对巨噬细胞及免疫低下小鼠的免疫调节作用

为研究黄牛骨肽（cattle bone peptide,CBP）的免疫调节活性,采用巨噬细胞RAW264.7和氢化可的松诱导的免疫低下小鼠进行考察。基于细胞水平,考察不同浓度CBP对RAW264.7细胞增殖及吞噬功能的影响。通过各组小鼠的体质量变化、免疫器官指数,外周血白细胞计数、单核/巨噬细胞吞噬能力考察CBP的非特异性免疫活性。利用迟发型免疫反应和血清溶血素水平测定CBP的特异性免疫活性。体外细胞实验结果显示,CBP可以促进RAW264.7细胞的增殖且增强其吞噬中性红能力。与免疫低下组小鼠相比,CBP饲喂组小鼠的体质量、相对脾脏指数、相对胸腺指数、白细胞相对数量、碳廓清能力、吞噬荧光微球能力、血清溶血素水平均有不同程度改善,且免疫调节活性与剂量呈正相关性。研究结果表明,CBP可以增强机体非特异性免疫和特异性免疫活性,为CBP在食品及医药领域的进一步应用提供理论依据。     

不同剂量牛初乳粉对小鼠免疫调节作用的研究

本研究用牛初乳粉对小鼠进行喂养实验,20d后测定NK细胞杀伤活性、T淋巴细胞增殖活性、巨噬细胞的吞噬功能,研究了不同剂量的牛初乳粉对小鼠免疫调节作用效果。结果表明:剂量在36.46～1250mg/kg·d之间的牛初乳粉都能极显著地增强巨噬细胞的吞噬功能,NK细胞的杀伤活性和T淋巴细胞的增殖活性,其中78.13～156.25mg/kg·d之间对小鼠细胞免疫调节作用和巨噬细胞吞噬功能增强作用效果优于其他剂量。     

乌鸡肽的营养成分及其功能特性研究

探讨乌鸡肽的营养成分及功能,为其深度开发打下基础。利用木瓜蛋白酶和风味蛋白酶水解乌骨鸡肌肉、活性炭脱色法制备乌鸡肽,高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法检测乌鸡肽的总氨基酸及游离氨基酸含量及相对分子质量分布区间、纳升级液相色谱串联质谱(Nano liquid chromatography tandem mass spectrometry,Nano LC-MS/MS)技术鉴定其组成成分。结果表明,游离氨基酸占总氨基酸的比例为1.74%,总氨基酸含量较高者为Leu、Ala、His、Pro、Met和Phe,游离氨基酸含量较高者为Glu、Pro、Asp、Arg、Gly和Ala;相对分子质量分布范围为0至6 918 Da,其中1 084 Da以下的比例达到88.91%;Nano LC-MS/MS鉴定出源于107种蛋白质的2 287种肽段序列,其中种类最为丰富的蛋白为参与骨骼肌修复的蛋白及酶类。该研究较为全面的分析乌鸡肽的营养成分,并表征了其功能,为乌鸡肽的潜在应用价值研究打下基础。     

小分子阿胶肽的免疫调节作用

目的:研究小分子阿胶肽(LMWPC)对小鼠免疫功能的调节作用。方法:采用凯氏定氮及高效凝胶色谱法分析LMWPC的蛋白质含量及分子量分布情况,利用小鼠血清溶血素滴度测定和小鼠脾细胞抗体生成实验,观察0.18、0.35和1.05 g/kg·bw剂量的LMWPC对小鼠体液免疫的影响,采用小鼠迟发型变态反应实验和ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验,考察LMWPC对小鼠细胞免疫的影响。结果:LMWPC的分子量主要集中在1000 Da以下,蛋白质含量丰富,高达(88.84±1.77) g/100 g。与对照组相比,高剂量组小鼠的半数溶血值(HC₅₀)为(76.8±4.2)(P<0.05),足趾肿胀为(0.35±0.03) mm (P<0.05),小鼠脾淋巴细胞转化实验OD值为(0.344±0.052)(P<0.05)。与低、中剂量相比,高剂量组具有最佳的增加小鼠血清溶血素水平、增强小鼠迟发型变态反应和促进小鼠脾淋巴细胞转化增殖的能力;而中剂量组LMWPC能明显增加小鼠脾细胞抗体生成的效果。结论:本研究条件下,LMWPC能够提高小鼠的体液免疫及细胞免疫功能,对小鼠的免疫功能有正向调节作用。     

乳酪蛋白源免疫调节肽

酪蛋白是乳中最主要的蛋白质 ,除了提供氨基酸和能量的营养功能外 ,酪蛋白还是生物活性肽的重要来源。这些生物活性肽本身以非活性状态存在于蛋白质氨基酸序列之中 ,当用适当的蛋白酶进行体外水解或在胃肠道消化过程中以及食品加工过程中 ,它们的活性就被释放出来 ,并可作为生理功能的重要调节剂。大量证据表明乳酪蛋白中存在大量的免疫调节肽。本文对乳酪蛋白来源的免疫调节肽的序列结构及其对免疫系统的调节机能做一综述。     

乌鸡低聚肽的制备及其稳定性研究

以乌鸡为原料,利用两步酶解法制备乌鸡低聚肽,以分子量分布为指标,研究了热处理、pH和体外胃肠道模拟消化对乌鸡低聚肽稳定性的影响。结果表明,乌鸡低聚肽分别于20、40、60、80、100℃下水浴2 h后,各个分子量区间的比例变化不超过2%;pH值分别为2、4、6、8、10,37℃水浴2 h后,各个分子量区间的比例变化不超过2%;分别经过胃蛋白酶单独消化、胰蛋白酶单独消化、先胃蛋白酶消化再胰蛋白酶消化,各个分子量区间的比例变化不超过4%。这表明乌鸡低聚肽具有较好的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性,为其在食品工业中的应用提供了一定的理论依据。     

乌鸡低聚肽铁配合物的稳定性研究

以乌鸡为原料制备乌鸡低聚肽铁配合物,以分子量分布和铁含量为指标,对乌鸡低聚肽铁配合物的热稳定性、酸碱稳定性和消化稳定性进行了考察。结果表明:在温度为20⁸0℃时,乌鸡低聚肽铁配合物各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的铁含量无显著性差异;在pH为380℃时,乌鸡低聚肽铁配合物各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的铁含量无显著性差异;在pH为3⁹时,分子质量小于1 000 u的总含量略有升高,但升高不到6%,铁含量有所降低,但在广泛的pH范围内仍然有58.4%以上的铁含量;乌鸡低聚肽铁配合物经过蛋白酶消化后,分子质量小于1 000 u的总含量略有升高,但升高不到8%,经过胃蛋白酶消化和胰蛋白酶共同消化后,仍然有37.6%的铁含量。这说明乌鸡低聚肽铁配合物具有一定的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性。     

乌鸡低聚肽铁的分离纯化及结构鉴定

为了考察乌鸡低聚肽铁中肽段的结构,以乌鸡为原料,以氯化亚铁为铁源制备乌鸡低聚肽铁,对其总蛋白质质量分数、螯合率、得率进行测定,结果表明乌鸡低聚肽铁总蛋白质质量分数为(56.79±0.18)%,螯合率为(83.53±0.15)%,得率为(40.86±0.14)%。然后利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)对其进行分离纯化,收集4个组分峰,利用四极杆飞行时间串联质谱仪(QTOF质谱仪)测定肽序列,分析出1个肽段,氨基酸序列为Thr-Ser-Gly-Met-Pro,相对分子质量为491.56。     

低分子量透明质酸对小鼠巨噬细胞和T细胞的免疫调节作用

低分子量透明质酸（LMWHA）由自由基氧化降解方法制备,通过体内动物实验和体外细胞实验研究了LMWHA对小鼠巨噬细胞和T细胞的免疫调节活性。在体内免疫抑制鼠实验中,察看了LMWHA对2,4-二硝基氟苯（DNFB）诱导的迟发型超敏反应（DTH）的影响,测定了血清溶菌酶含量、脾脏以及胸腺指数。结果表明:LMWHA（20¹20 mg/kg·d）能够促进免疫抑制小鼠的DTH反应,改变血清溶菌酶含量、提高脾脏和胸腺指数,并呈作用剂量依赖关系。在体外细胞实验中,LMWHA（25²00μg/m L）加强了小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性以及一氧化氮合酶（i NOS）活性,提高了一氧化氮（NO）的生成量,促进了脾脏T淋巴细胞的增殖。由此可见LMWHA能够调节小鼠的细胞免疫和非特异性免疫功能。      

乌鸡精、乌鸡肽和乌鸡汤蛋白质含量及相对分子质量分布的比较

文中对乌鸡精、乌鸡肽和乌鸡汤蛋白质含量及蛋白质相对分子质量分布区间进行了比较。结果表明:乌鸡肽总蛋白质含量为84.18%,酸溶蛋白质含量为83.10%,明显高于乌鸡精和乌鸡汤;乌鸡肽的小分子蛋白质含量更高,相对分子质量140-1 000的占92.59%,更利于人体的吸收。     

乌鸡低聚肽的成分分析及抗氧化活性研究

在对乌鸡低聚肽氨基酸组成及相对分子质量分布分析的基础上,对其保护过氧化氢(H2O2)所致人肝癌细胞(Hep G2)氧化损伤的作用进行了研究。采用不同浓度乌鸡低聚肽作用Hep G2细胞4 h,然后用150μmol/L H2O2对细胞进行氧化损伤,4 h后以细胞存活率、细胞内活性氧(ROS)水平、一氧化氮(NO)及乳酸脱氢酶(LDH)释放量评价乌鸡低聚肽对H2O2所致Hep G2细胞氧化损伤的保护作用。研究结果表明,乌鸡低聚肽中谷氨酸含量最高(17.26%),其次是天冬氨酸(9.52%);相对分子质量小于1000 u的组分高达92.33%;乌鸡低聚肽具有提高细胞存活率、抑制细胞内ROS生成、减少NO及LDH释放的功能,对降低Hep G2细胞的氧化应激水平及提高细胞抗氧化能力具有较好的作用效果。从细胞水平上揭示了乌鸡低聚肽对过氧化所致的氧化损伤具有一定的预防保护作用。     

乌鸡低聚肽亚铁螯合物的分离纯化与结构鉴定

从乌鸡中酶解得到乌鸡低聚肽,然后与亚铁螯合制备乌鸡低聚肽亚铁螯合物,螯合率为84.76±0.12%。乌鸡低聚肽亚铁螯合物具有较高的蛋白质含量,高达54.64±1.03%。并且分子量较低,其中分子量小于1000 u的占85.50%。通过扫描电镜、红外光谱对乌鸡低聚肽亚铁螯合物的结构进行分析,结果表明乌鸡低聚肽亚铁螯合物是一种新型的铁螯合物。体外稳定性研究表明乌鸡低聚肽亚铁螯合物具有一定的热稳定性、酸碱稳定性和体外消化稳定性。通过反相高效液相色谱对乌鸡低聚肽亚铁螯合物进行分离纯化,选择一个主要的组分进行收集,然后利用质谱仪进行质谱分析。从乌鸡低聚肽亚铁螯合物的主要组分中鉴定出一个五肽,氨基酸序列为Thr-Ser-Gly-Met-Pro。乌鸡低聚肽亚铁螯合物可作为一种铁补充剂用于食品添加剂、营养物及医药制品中。     

食物蛋白源免疫调节肽研究进展

免疫系统在维持人类健康方面发挥重要作用,免疫系统功能失调或受损会引发疾病。目前常用的调节免疫功能的化学药物存在价格昂贵、毒副作用大等缺点,因此开发高效、安全的免疫调节制剂成为研究热点。食物蛋白源免疫调节肽是利用食源性蛋白获得的具有调节免疫功能的多肽,其免疫调节活性与氨基酸组成、序列及肽链长度有关。文章综述了近年来食物蛋白源免疫调节活性肽的类型、获取途径、功效评价方法及作用机制,旨在为免疫调节相关的功能性食品或药物的研究及开发提供参考。