黄酒酿酒酵母对醇类物质的代谢调控研究进展

醇类物质是酿酒酵母在酒酿造过程中产生的主要代谢产物之一,酒精发酵过程中酿酒酵母代谢是产生醇类物质的主要来源,深入研究黄酒酿酒酵母醇类物质的代谢调控机制,对于高级醇的含量控制以及定向培育产乙醇及芳香醇的黄酒酿酒酵母工业菌株具有重要的指导意义。本文系统综述了黄酒中主要醇类物质的代谢途径及基因敲除方法、诱变育种技术以及发酵环境变化在酿酒酵母对醇类物质代谢调控中的应用,对黄酒酿酒酵母对醇类物质代谢调控系统的建立有重要的理论意义,为实现黄酒中醇类物质含量的精准调控提供了参考。     

大豆蛋白水解物对酿酒酵母生长和发酵性能的影响

研究了大豆蛋白复合蛋白酶水解物对酿酒酵母生长和发酵性能的影响。研究结果表明:不同水解度及不同分子量肽段的大豆蛋白酶解物对酿酒酵母的促生长效果不同,其中水解度为19.98%的酶解物SP9具有最强的促生长活性,且具有显著促生长活性的肽段主要集中在3 ku以下;该部分肽段可使菌体增长量提高27%,稳定期活性达到90.3%,并且能够加快酵母代谢糖的速率,使发酵度和乙醇产量分别提高15.3%和25.8%。     

酿酒酵母相关营养功能成分的研究及应用进展

酿酒酵母在酒类的发酵中起到重要作用,是发酵工业的重要微生物,不仅影响到发酵酒的酒精度,还对发酵酒的挥发性风味物质有重大影响。酿酒酵母中富含蛋白质、核酸、维生素、多糖等营养功能成分,本文综述了酿酒酵母中的营养功能物质相关的研究及在饲料,食品与医药中的应用,为酿酒酵母更好地应用提供思路。     

铜对葡萄酒酿酒酵母生长活性的影响

以模拟葡萄汁为培养基,添加CuSO4设置0、0.05 mM、0.10 mM、0.20 mM、0.50 mM和1.00 mM 6个不同的Cu2+浓度,研究铜胁迫对葡萄酒酿酒酵母生长活性的影响.结果表明,铜胁迫能够延缓酿酒酵母的生长,降低酿酒酵母的存活率,导致细胞呼吸缺陷型形成频率的增加.0.05 mM Cu2+对酿酒酵母的生长活性基本没有影响.但是1.00 mM Cu2+对3株酿酒酵母的生长活性均产生了显著影响.通过试验比较发现,铜对酵母生长活性的影响可能与菌株对铜离子的吸附能力有关.     

低频静电场辐射对酿酒酵母生长代谢的影响

为了探究低频静电场辐射对酿酒酵母生长代谢的影响和作用机理。本实验运用60 Hz低频静电场对酿酒酵母进行辐射处理,通过扫描电子显微镜、流式细胞仪、酶标仪和紫外分光光度计等仪器对酿酒酵母的生长趋势、形态特征、葡萄糖代谢、胞内蛋白总量和胞内乙醇脱氢酶的活性进行测定分析。结果表明:低频静电场辐射条件下生长的酿酒酵母缩短了生长迟滞期,加快了其对数生长期,且其生长速率相比自然生长提高了14.5%。辐射条件下生长的酿酒酵母对葡萄糖的消耗量在时间为16 h时比自然生长提高了15.64%,其胞内乙醇脱氢酶(ADH)的比活力比自然生长提高了7.25%,但胞内蛋白的总量无显著变化。因此,低频静电场辐射可影响酿酒酵母原有的代谢机制,对其生长代谢过程具有明显的促进效应。     

3 株葡萄酒非酿酒酵母的生长与发酵特性

本实验对筛选自我国特色酿酒葡萄产区的东方伊萨酵母YF-12、发酵毕赤酵母YF-19和季也蒙有孢汉逊酵母YF-28这3 株非酿酒酵母的生长特性和发酵特性进行了研究。结果表明：东方伊萨酵母YF-12和发酵毕赤酵母YF-19具有较好的生长特性;在发酵环境耐受性方面,3 株非酿酒酵母对高质量浓度葡萄糖和SO2都有较好的耐受性,在酒精耐受性上季也蒙有孢汉逊酵母YF-28表现较差;对3 株非酿酒酵母进行纯种发酵实验后测定挥发性物质发现,东方伊萨酵母YF-12和季也蒙有孢汉逊酵母YF-28产生的挥发性物质较多,而发酵毕赤酵母YF-19产生挥发性物质种类很少。上述结果表明,东方伊萨酵母YF-12显示出较好的生长和发酵特性,适合做进一步产业化开发。     

优选非酿酒酵母与酿酒酵母在模拟葡萄汁发酵中生长动力学及酯酶活性分析

目的:探究非酿酒酵母与酿酒酵母混合发酵过程中酵母的生长状况及酯酶活性的变化规律。方法:通过测定川南白酒窖池中分离的非酿酒酵母在液体发酵培养基中的酯酶活性,从中优选1株高产酯酶的酵母,经26S r DNA D1/D2区域序列分析鉴定种属。随后利用模拟葡萄汁进行优选酵母和酿酒酵母的混合发酵,设立同时接种、提前48 h接种和提前96 h接种优选酵母3个实验处理,以两株酵母的纯发酵为对照,研究发酵过程中的酵母生长动力学及不同碳链长度底物(C_2~C_8)对应的酯酶活性变化。结果:优选的非酿酒酵母为发酵毕赤酵母。酵母生长动力学研究发现,单一酿酒酵母的发酵速率最快,但混合发酵中的酵母数量更多,尤其是提前96 h接种。模拟发酵处理中,同时接种处理的酯酶活性累积量最大(574 m U/mL),酯酶活性在C_2~C_8有底物特异性,其中C8酯酶活性累积量最高(178~227 m U/mL),C_2酯酶活性累积量最低(46~66 m U/mL)。结合发酵动力学与发酵中酯酶活性变化,发现酯酶活性与酵母的生长状况有关,当酵母生长达到稳定期,酯酶活性达到最大值。结论:优选酵母与酿酒酵母的同时接种发酵具有较高的C4~C8酯酶活性累积量,有增香酿造的应用潜力。     

酿酒酵母工业菌株胁迫条件耐受性分析

对酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）工业菌株胁迫条件，包括高浓度酒精、高渗透压、高温、营养饥饿、氧化胁迫、糠醛毒性的耐受性进行了分析，同时测定了抗生素G418对这些菌株的最低抑菌浓度。结果表明，所测定的酵母菌株对这些逆境条件的耐受性有明显差别，表现出良好耐受性的是6508和安琪酵母菌株，同时多倍性的酿酒酵母工业菌株的耐受性均比单倍性实验室菌株高。     

肉桂醛诱导酿酒酵母Persisters细胞的形成

本文研究了肉桂醛对酿酒酵母persister细胞形成的影响。通过96孔板微量法测定肉桂醛对酿酒酵母生长的最小抑制浓度(MIC)为0.4 m M;采用流式细胞仪以及梯度稀释滴平板计数法研究了肉桂醛处理后酿酒酵母persister细胞的形成情况。结果表明,肉桂醛可以抑制酿酒酵母生长,且能够诱导酿酒酵母细胞形成persister状态,该状态下的细胞对两性霉素B产生耐药性。进一步研究发现肉桂醛处理后可以使酿酒酵母细胞停滞在细胞周期的任何阶段,而雷帕霉素诱导的细胞自噬只能停留在G1期,所以酿酒酵母perisister与自噬状态存在区别。目前,对于Persister的研究集中在原核微生物,对真核生物persister的研究非常有限。由于persister群体通常占总群体极小一部分,这就给基因水平上研究persister的形成机制带来很大的挑战。本研究发现肉桂醛处理酿酒酵母细胞后,可以促使其大部分细胞形成persister。这就为从基因水平上认识真核生物persister的形成机制提供了方法,实验结果表明YGL基因也与酿酒酵母persister的形成有很大关系。     

LEU2基因敲除对工业啤酒酵母高级醇生成量的影响

通过敲除啤酒酵母中β-丙基苹果酸脱氢酶基因(LEU2),研究该基因对工业啤酒酵母高级醇特别是异戊醇生成量的影响.通过醋酸锂一步转化法,将一段两端具有LEU2摹因序列同源区,中间为遗传霉素(G418)抗性基因的DNA片段转入酵母细胞中,与LEU2基因的ORF(open reading flames)进行同源重组,利用遗传霉素抗性进行筛选.将突变株与出发菌株进行发酵实验,测定其发酵性能和高级醇的生成量.筛选获得了LEU2摹因突变的工业啤酒酵母.在支链氨基酸含量较低的培养基中进行发酵测定,突变株发酵液中高级醇含量比出发菌株降低了9.97%,其中异戊醇的含量降低了11.82%,而酒精度、发酵速度等发酵性能没有明显变化.LEU2基因敲除可降低工业啤酒酵母在支链氨基酸含量较低的培养基中高级醇特别是异戊醇的生成量.     

Diacetyl reduction by commercial Saccharomyces cerevisiae strains during vinification

Microbially derived diacetyl accumulation during vinification imparts a buttery wine aroma, which has stylistic implications. However, at higher concentrations diacetyl induces an aromatic off‐flavour. Saccharomyces cerevisiae is able to reduce diacetyl to below the sensory threshold. Therefore, characterization of the diacetyl reduction in commercial wine yeasts creates new opportunities to manage the risk of wine associated off‐flavours. Diacetyl reduction by two commercial S. cerevisiae strains was characterized in Pinot blanc grape must of the vintage 2012 with different initial diacetyl concentrations (0–50 mg/L). Highest diacetyl reduction was found in the first two days after wine yeasts were inoculated. No further decrease in diacetyl content was observed after the fourth day. All assays in which diacetyl was added showed the same final diacetyl concentration of approximately 2 mg/L. However, a significantly lower amount of diacetyl was found in grape must without adding diacetyl. The present results indicate that commercial wine yeasts are able to reduce much higher amounts of diacetyl than normally expected during the vinification procedure. However, the constant final diacetyl concentration indicates that diacetyl accumulation may be the result of wine matrix binding effects, which prevent a complete reduction by active wine yeasts. Copyright © 2013 The Institute of Brewing & Distilling.     

Detection method for polygalacturonase-producing strains of Saccharomyces cerevisiae

In the presence of glycerol or ethanol, SCPP (a strain of Saccharomyces cerevisiae that expresses pectinolytic activity) is capable of utilizing galacturonic acid or pectins for growth purposes. We now establish a relationship between the pectinolytic power of various strains of S. cerevisiae and their ability to grow on a pectin/glycerol-based medium. This property is further exploited for the detection of polygalacturonase-producing strains of S. cerevisiae.     

丙烯酰胺诱导酿酒酵母的抗氧化降解动力学研究

目的 研究丙烯酰胺处理酿酒酵母的抗氧化降解动力学.方法 以酿酒酵母为模型,测定丙烯酰胺对酿酒酵母的生长影响及抗氧化指标.结果 丙烯酰胺对酿酒酵母的生长有抑制作用,且呈剂量依赖性.与对照组相比,大部分丙烯酰胺处理组的丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、总超...     

低双乙酰酿酒酵母的DNA标记研究

对15株酿酒酵母菌株的外观发酵度、双乙酰生成和还原能力进行了比较,通过随机扩增多态性DNA(RAPD)和HSP150编码基因的长度多态性对不同酿酒酵母菌株的基因组DNA分子差异进行了分析。结果显示,菌株YZU-APK和SS-05的外观发酵度分别为77.2%和76.8%,双乙酰峰值分别为0.26mg/L和0.25mg/L,并在发酵第8d均降至0.09 mg/L。在46条随机引物中筛选出的2条引物P07和P42能够扩增出具有较好多态性的RAPD指纹图谱,可以将15个酵母菌株分成9个遗传型;对细胞壁热休克蛋白HSP150编码基因的PCR扩增,并根据扩增条带长度的不同可以将15株酵母分成6个遗传型。综合2种分析结果,并对低双乙酰酿酒酵母菌株YZU-APK和SS-05进行DNA分子标记,确定了其基因型分别是(P07:1,P42:1,hsp150:1)和(P07:1,P42:5,hsp150:2)。     

酿酒酵母产乙醇脱氢酶发酵条件的研究

选择了一株酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)As2.399,通过单因素和正交实验得到酿酒酵母产乙醇脱氢酶(Alcohol Dehydrogenase,ADH)的最优发酵条件。结果表明:产ADH的最优培养条件是温度为25℃、pH为5、通气量为250mL、接种量为7%,液体发酵培养中pH对ADH活性的影响最大。      

葡萄酒高级醇检测方法的优化及其在本土酿酒酵母筛选中的应用

该研究在国标GB/T 5009.48—2003《蒸馏酒与配制酒卫生标准的分析方法》的基础上,建立起一种显色稳定、准确性更高的高级醇检测法。结果表明,当葡萄酒酒样在梯度稀释20倍,加样静置1 min,80 ℃水浴30 min且以50%硫酸溶液作为稀释剂的条件下进行检测,精密度试验结果相对标准偏差（RSD）为1.665%,加标回收率为99.11%,均优于国标法;采用气质联用（GC-MS）法对6株本土酵母产高级醇含量进行对比检测,结果显示所测总量无显著差异（P＞0.05）,证明优化法较为准确、可靠。该研究筛选获得了两株低产高级醇菌株LFP529和LFP525,其发酵酒的高级醇含量较对照分别降低了55.44%、58.31%,为解决我国部分产区葡萄酒高级醇含量较高提供了解决方案。     

不同酿酒酵母发酵特性及抗氧化特性的比较

该文比较了不同来源的5株葡萄酒酿酒酵母(2株野生酿酒酵母CC17、SC5,2株实验室常用工程菌株BY4743、INVSC1,以及1株工业酿酒酵母菌株CICC1450)的生长曲线、泡沫产生能力、H2S产生能力、CO2产生能力,结果表明该实验室分离得到的野生酿酒酵母CC17具有良好的发酵特性.经不同浓度的氧化性物质H2O2和甲萘醌分别处理后得知,CC17在抗氧化性能上具有明显优势,说明该菌株在实际生产中具有开发利用的潜力.     

航天诱变啤酒酵母菌株的复壮与筛选

对经航天诱变的啤酒酵母菌进行复壮,并对复壮后的酵母菌株从细胞大小、菌落形态、发酵力、增殖情况以及死灭温度等几方面进行了筛选。试验结果表明,诱变后菌株的发酵力、生长速度均优于出发菌株,死灭温度基本相同。并依此筛选出了1株各种生理性状都较好的诱变菌株,其适宜的生长培养基为麦芽汁培养基,适宜的培养时间为24h。