大孔吸附树脂分离纯化海蜇ACE抑制肽的工艺研究

本文主要从分子极性角度研究了大孔吸附树脂对具有血管紧张素转化酶(Angiotensin-I converting enzyme,ACE)抑制活性的海蜇多肽的分离纯化作用.取海蜇酶解产物作为研究对象,选用HP20SS、SP20SS、SP207三种不同型号的大孔吸附树脂分离纯化海蜇ACE抑制肽,以ACE抑制率为评价指标,对...     

苋籽ACE抑制肽降血压的体外评价

利用循证医学,依据血管紧张素转换酶(ACE)对血压的调节机理,以呋喃丙烯酰三肽(FAPGG)为血管紧张素Ⅰ模拟物,建立了胰蛋白酶模拟体外消化体系和大鼠肝脏混合功能氧化酶(MFO)模拟肝脏代谢体系,测得了未经处理的苋籽水解肽IC50值为1mg/mL,经过体外模拟消化和孵育处理后的苋籽水解肽IC50值为10mg/mL。      

苋籽ACE抑制肽降血压的体外评价

利用循证医学,依据血管紧张素转换酶(ACE)对血压的调节机理,以呋喃丙烯酰三肽(FAPGG)为血管紧张素Ⅰ模拟物,建立了胰蛋白酶模拟体外消化体系和大鼠肝脏混合功能氧化酶(MFO)模拟肝脏代谢体系,测得了未经处理的苋籽水解肽IC50值为1mg/mL,经过体外模拟消化和孵育处理后的苋籽水解肽IC50值为10mg/mL。     

大孔树脂吸附分离蚕蛹ACE抑制肽的研究

为了找出大孔树脂纯化蚕蛹ACE抑制肽的方法。比较了5种大孔树脂在纯化蚕蛹ACE抑制肽时的吸附率和解吸率,得出DA201-C分离蚕蛹ACE抑制肽的效果最好。再进一步考察上样流速、上样浓度、分级洗脱等对DA201-C大孔树脂吸附及分离效果的影响。最终结果为75%乙醇洗脱下的多肽的ACE抑制率最高,其IC50为0.632mg/mL,并且发现疏水性与ACE抑制率呈正相关。     

DA201-C大孔吸附树脂静态吸附ACE抑制肽的研究

本实验通过静态吸附量和吸附率的测定确定血管紧张素转移酶(ACE)抑制肽分离富集的最适操作条件,考察了pH 值、盐浓度和乙醇浓度对ACE 抑制肽吸附性能的影响。结果表明,上样pH2.0 对ACE 抑制肽的脱盐效果最佳,70% 乙醇作为洗脱剂时效果最好,并且原样液的盐浓度保持不变。因此DA201-C 大孔吸附树脂综合性能较好,适合于ACE 抑制肽的分离纯化。     

大孔吸附树脂分离魔芋飞粉中ACE抑制肽工艺研究

采用大孔吸附树脂对魔芋ACE抑制肽进行分离,比较3种大孔吸附树脂对魔芋飞粉中ACE抑制肽的静态吸附和解吸效果,从中筛选出适合该魔芋ACE抑制肽分离纯化的树脂。结果表明,DA201-C型树脂最适合魔芋飞粉中ACE抑制肽的纯化。通过对影响树脂吸附解吸的各种因素进行系统地研究,确定工艺参数。最佳工艺参数为上样浓度8 mg/mL、pH 2.0、上样量8 mL、洗脱液乙醇体积分数80%、洗脱流速1.0 mL/min、洗脱时间2 h,在此条件下,分离得到的魔芋ACE抑制肽的抑制率为95.19%。     

燕麦ACE 抑制肽的分离纯化及其活性研究

通过对3 种大孔吸附树脂的比较,选择DA201-C 树脂对燕麦ACE 抑制肽进行纯化。纯化后的燕麦肽产物的ACE 抑制率达到92.86%,利用HPLC 测得纯化后燕麦ACE 抑制肽的分子质量分布在240.10～1292.11D 之间,这部分物质在整个纯化产物中占99.82%。采用SephadexG-15 凝胶分离燕麦ACE 抑制肽得到D峰,其IC50 为0.103mg/mL,分子质量545D。采用大孔吸附树脂及凝胶层析法能够较好地分离纯化燕麦ACE 抑制肽。     

大孔吸附树脂分离纯化茶叶籽饼粕中的茶皂素研究

目的对采用大孔吸附树脂法分离纯化茶叶籽饼粕中茶皂素的工艺进行优化,为进一步开发利用茶叶籽资源提供依据。方法以茶皂素吸附率与解吸率为指标,通过静态吸附与解吸实验筛选最优树脂。通过单因素实验、正交实验及验证性实验,优化最优树脂动态吸附与解吸茶皂素的工艺参数。结果D101树脂的静态吸附量与解吸率分别为142.974 mg/g和98.02%,为分离纯化料液中茶皂素的最优树脂;当主要考虑茶皂素得率时,其最优动态吸附与解吸工艺参数为上样质量浓度10 mg/m L、上样流速3 BV/h、上样体积6 BV、乙醇洗脱体积浓度80%、洗脱流速3 BV/h、洗脱剂体积5 BV,在该工艺参数条件下,茶皂素得率为74.25%,纯度为84.30%;当主要考虑茶皂素纯度时,最优动态吸附与解吸工艺参数为上样质量浓度10 mg/m L、上样流速4 BV/h、上样体积7 BV、乙醇洗脱体积浓度70%、洗脱流速3 BV/h、洗脱体积5 BV,在该工艺参数条件下,茶皂素纯度为97.7%,得率为72.04%。结论 D101大孔吸附树脂是一种可应用于茶叶籽饼粕中茶皂素分离纯化的较好树脂。     

魔芋ACE抑制肽的分离纯化及活性检测

利用碱溶酸沉法从魔芋飞粉中提取魔芋蛋白,以魔芋蛋白为原料,利用碱性蛋白酶酶解制备魔芋ACE抑制肽粗品;其粗品通过超滤法除去大分子杂质,再经过Sephadex G-15柱层析分离,最后经过RP-HPLC纯化后得到纯度较高的魔芋ACE抑制肽,并且对超滤膜进行选择、Sephadex G-15柱层析分离进行条件优化;以马尿酸含量为指标,紫外分光光度法测其活性。实验结果表明:选择规格为1 kDa超滤膜;Sephadex G-15最佳分离条件为浓度为120 mg/mL、流速为0.8 mL/min、上样量为1.0 mL;经过RP-HPLC纯化后得到魔芋ACE抑制肽抑制率可达到92.85%。空白液中Hip含量为22.50 mg,反应液中Hip含量为9.22 mg,说明魔芋ACE抑制肽抑制活性较好。     

大孔吸附树脂分离纯化桃花多酚的研究

目的:研究大孔吸附树脂分离纯化桃花多酚的最佳工艺条件。方法:比较了6种大孔吸附树脂对桃花多酚的静态吸附与解吸性能,筛选出最佳树脂并对其进行动态吸附、解吸实验,确定最佳纯化桃花多酚工艺条件。结果:D-101树脂具有较好的吸附解吸效果。最佳工艺为:上样浓度约为0.744mg/mL,上样流速1BV/h,上样体积4.5BV,先用去离子水洗至洗脱液无色,再用80%乙醇以1BV/h的流速进行洗脱,洗脱液用量约3BV。该条件下桃花多酚的质量分数可从6.17%提高到29.30%±3.04%,桃花多酚的总收率达79.01%±3.39%。结论:该方法简单可行,效果较好,可满足工业生产要求。      

Macroporous resin purification of grass carp fish (Ctenopharyngodonidella) scale peptides with in vitro angiotensin-I converting enzyme (ACE) inhibitory ability

The adsorption dynamics and thermodynamics of grass carp fish scale peptides (FSPs) onto non-polar macroporous resins (MARs), DA201-C, have been investigated. The adsorption of FSPs was affected by time, pH and peptide concentration. The adsorption process followed the Langmuir adsorption isotherm, and was endothermic (ΔH < 43 kJ/mol). The predominant force in adsorption of FSPs onto DA201-C was hydrophobic. Depending on this force, the dynamic adsorption and gradient desorption results showed that DA201-C resins were good at desalting and enriching peptides with higher contents of hydrophobic amino acids, and these peptides had higher ACE inhibitory capabilities in vitro. The lowest concentration at which the eluted fraction possessed half of its original ACE activity (IC₅₀) was 0.13 mg/ml. The results indicated that fish scale peptides produced showed good ACE-inhibitory effect in vitro and fish scales are a good source of peptides with in vitro ACE inhibitory activity.     

利用鲫鱼加工下脚料酶解制备ACE抑制肽的工艺优化

以鲫鱼加工下脚料为原料,用酶解法制备ACE抑制肽,并以血管紧张素转化酶(angiotension converting enzyme,ACE)抑制率为指标,从碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶中筛选出最佳酶解蛋白酶为胃蛋白酶;以单因素试验为基础,应用Box-Benhnken中心组合设计原理和响应面分析法,探讨各自变量及其交互作用对ACE抑制率的影响,通过模拟得到的二次多元式方程预测模型,确定最佳酶解条件为:料液比14.4(mV)、加酶量[E]/[S]=521U/g、酶解时间5.3h。以优化条件制备的酶解产物ACE实际抑制率可达75.79%,与理论预测值76.17%相差不大。     

海洋蛋白源ACE抑制肽研究进展

血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽在血压调节中起着重要作用,食源性ACE抑制肽具有较强降血压效果,是调节血压的潜在活性成分。海洋蛋白源ACE抑制肽是食源性活性肽的重要组成部分,是未来研究的热点。本文综述了海洋蛋白源ACE抑制肽的制备、纯化、结构鉴定、体外和体内活性研究及构效关系等研究进展,同时对海洋蛋白源ACE抑制肽的研究和应用前景进行展望。      

鱼鳞血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的制备工艺研究

采用酶法酶解鱼鳞制备血管紧张素转化酶（angiotensin-I converting enzyme,ACE）抑制肽。以鱼鳞水解度、相对分子质量分布、游离氨基酸含量以及ACE抑制活性为指标,从五种蛋白酶中选取来源于枯草芽孢杆菌的中性蛋白酶作为水解鱼鳞制备ACE抑制肽的最适酶种。经Box-Behnken响应面分析法得到其最佳酶解工艺条件为:pH6.4,温度50℃,加酶量（[E]/[S]）5%,底物浓度（[S]）5%（w/v）,水解3h。在此条件下得到的水解度为19.26%。酶解产物富含脯氨酸和甘氨酸,其次是丙氨酸,缺乏色氨酸。疏水性氨基酸约占总氨基酸的28%,相对分子质量主要分布在80⁸00之间,约为2⁶个氨基酸的寡肽。      

大孔树脂纯化血管紧张素酶抑制肽VLPVPR的工艺优化

考察大孔树脂(AB8,D101,DM130,HPD100B,HPD826)对血管紧张素酶抑制肽VLPVPR的吸附性能及纯化效果,确立纯化VLPVPR的较优工艺。结果表明,HPD100B最适于VLPVPR的纯化。最优纯化工艺为:温度20℃,pH9.8,上样流速为3mL/(cm2·min),上样量达到180mL,洗脱液乙醇溶液浓度为60%,洗脱流速为0.25mL/(cm2·min),洗脱体积为45mL。此条件下,VLPVPR的解吸率达93.1%,纯度为28.8%,血管紧张素酶抑制率IC50为4.1μmol/L。      

Grass carp peptides hydrolysed by the combination of Alcalase and Neutrase: Angiotensin‐I converting enzyme (ACE) inhibitory activity,antioxidant activities and physicochemical profiles

In this study, grass carp peptides were prepared by enzymatic hydrolysis of grass carp protein using the combination of Alcalase and Neutrase, and angiotensin‐I converting enzyme (ACE) inhibitory activity in vitro, antihypertensive activity in vivo, antioxidant activities, and physicochemical properties of peptides achieved from grass carp protein were characterised after ultrafiltration and desalted processes using mixed ion exchange resins. The purified peptides exhibited strong ACE inhibitory activity (IC₅₀ = 105 μg mL^?1), antihypertensive activity with the maximal drop for systolic blood pressure (SBP) of 43 mmHg at a dosage of 100 mg per kg body weight in spontaneously hypertensive rat (SHR), and antioxidant activities indicated by thiobarbituric acid‐reactive substance values in a liposome‐oxidising system, radical‐scavenging activity and chelation of metal ions (Fe²⁺). The molecular weight of peptides was <1000 Da. Compared to grass carp protein, the peptides separated from enzymatic hydrolysates possessed similar amino acid compositions, but contained higher concentrations of essential amino acids. Moreover, the peptides exhibited excellent solubility at a wide range of pH values from 2 to 10, and lower apparent viscosity than the protein. The peptides separated from enzymatic hydrolysates might be used as a promising ingredient in antihypertensive functional foods and nutraceuticals.     

鱼降压肽的大孔吸附树脂分离及其活性稳定性

采用大孔吸附树脂对碱性蛋白酶水解、水解度为34.52% 的鱼降压肽进行分离。结果表明,DA201-C 型大孔吸附树脂对鱼降压肽吸附性最好,乙醇体积分数为75% 时洗脱下来的组分具有最高的ACE 抑制活性,其IC50为1.52mg/ml。鱼降压肽中灰分由分离前的9.47% 减少到分离后的2.34%,肽和蛋白质含量分别由分离前的72.81%和81.26% 增加到分离后的80.24% 和92.42%。活性稳定性分析显示,胃蛋白酶和胰酶、中性和低酸性pH 值、55℃以下温度以及1000mmol/L 以内的NaCl 浓度对鱼降压肽的ACE 抑制活性影响较小。     

血管紧张素转化酶抑制肽稳定性研究

高血压是心血管疾病最重要的且可治疗的危险因素之一,控制高血压是降低心脑血管疾病的发病率、致残率和死亡率的有效措施。血管紧张素转化酶通过影响肾素-血管紧张素系统和激肽释放酶-激肽系统实现对人体血压调节。文章综述了血管紧张素转化酶抑制肽的总体研究趋势、物理化学及酶稳定性的研究现状,并对其值得进一步研究内容进行展望,旨在为血管紧张素转化酶抑制肽的研究与开发提供思路。     

菲律宾蛤仔血管紧张素转化酶抑制肽大孔 树脂脱腥工艺研究

目的确定菲律宾蛤仔血管紧张素转化酶(angiotensin I-converting enzyme,ACE)抑制肽最佳脱腥工艺。方法采用大孔树脂脱腥法,选取7种大孔树脂,以感官评定作为指标,利用静态吸附和动态吸附2种方法分别对菲律宾蛤仔酶解液进行脱腥效果的研究,从中选取最佳脱腥工艺,并对脱腥前后酶解液ACE抑制率进行测定。结果最佳脱腥工艺为:AB-8型号大孔树脂,静态吸附,大孔树脂:酶解液=1:10(V:V),35℃,吸附脱腥时间2 h;动态吸附,大孔树脂:酶解液=1:10(V:V),流速3 m L/min。在该优化条件下,静态吸附和动态吸附的抑制率分别为46.09%、52.1%。结论此工艺可为大规模工业化生产及产品开发提供技术参考。