化妆品中致病菌检测规范方法和微生物富集方法的评价

为考察《化妆品安全技术规范》（2015年版）的方法（以下简称规范方法）中培养基质量对试验结果的影响，以及微生物富集方法（microbial enrichment general，以下简称ENR方法）和规范方法的适用性和一致性，以20株大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌及其染菌样品进行试验，比较了4种不同品牌培养基对规范方法试验结果的影响。结果显示，4种品牌培养基对金黄色葡萄球菌检测结果和化妆品染菌样品的检出率存在显著差异，ENR方法的适用性检测结果显著优于规范方法。基于试验结果，本研究发现市售培养基质量良莠不齐；对于化妆品染菌样品，ENR方法的检出率显著优于规范方法。     

一项微生物能力验证的多种方法检测结果分析

为确保微生物能力验证结果的准确报出,本实验室采用了多种方法进行CNAS T 0710的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的能力验证比对检验,结果表明:以上多种检测方法的测试结果相吻合,均显示5份样品中有2份检出铜绿假单胞菌,2份检出金黄色葡萄球菌。最终5份样品测试均取得满意结果,在分析比较中也总结出各种检验方法的优缺点。     

聚合酶链式反应技术检测化妆品中的铜绿假单胞菌

利用聚合酶链式反应(PCR)技术建立了一种快速检测化妆品中铜绿假单胞菌的方法。根据已报道的铜绿假单胞菌特异性基因ETA设计引物,确定引物的特异性和灵敏度;对染菌化妆品样品进行增菌检测。琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物结果显示,仅在含有铜绿假单胞菌基因组的样品中得到条带;对染菌样品的扩增结果显示,可以在原样品的活菌浓度为6 cfu.mL-1时通过增菌12 h后检出。     

菌落PCR技术检测化妆品中金黄色葡萄球菌

利用菌落PCR技术,以金黄色葡萄球菌的特有基因femA为靶基因,选择特异引物．进行扩增,鉴定化妆品中金黄色葡萄球菌。琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物结果显示,仅在含有金黄色葡萄球菌基因组的样品中得到条带。     

滤膜法和Pseudalert酶底物法检测饮用水中铜绿假单胞菌的比较

本文用滤膜法和Pseudalert酶底物法,检测定量质控、实际水样及水样中加标铜绿假单胞菌,对检测结果进行了分析比较.结果表明,两种方法结果具有一致性,酶底物法检测时间短,无需确认实验,操作简单,结果真实可靠.     

ATP生物荧光增幅法在化妆品微生物检测中的适用性研究

收集了不同功能宣称、作用部位、产品剂型、使用人群的普通化妆品和特殊化妆品,共计17个品牌34种市售产品,开展了ATP生物荧光增幅法的方法适用性研究.通过样品影响测试选择本底荧光信号值符合方法要求的产品进行接菌试验,将大肠埃希氏菌(Escherichia coli)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aerugino...     

建筑供水系统典型条件致病菌存在水平及影响因素

建筑供水系统的功能是对市政供水管网水进行存储、加压并输送至水龙头处,其具有余氯量低、水温较稳定、水流停留时间长等特点,为微生物提供了适宜的生长环境。相较于出厂水与市政管网水,龙头水中的菌落总数及条件致病菌浓度均呈上升趋势,其中,典型的条件致病菌(如军团菌和铜绿假单胞菌)因具有耐热、耐含氯消毒剂等特性,易在建筑供水系统中再生长与繁殖,致使龙头水微生物污染风险加剧,威胁人类健康。基于国内外研究成果,文中阐述建筑供水系统中的微生物污染状况,探讨军团菌、铜绿假单胞菌的存在水平与主要影响因素,提出通过定期清洗与加强维护来降低建筑供水系统微生物污染风险,保障龙头水水质安全。     

酶底物法检测包装饮用水中铜绿假单胞菌方法比对

滤膜法为现行包装饮用水中铜绿假单胞菌测定的国家标准方法，酶底物法测定包装饮用水中铜绿假单胞菌已通过国内外多个标准认证。采用酶底物法与滤膜法对包装饮用水中铜绿假单胞菌进行检测。通过标准菌株加标试验，酶底物法检测包装饮用水中铜绿假单胞菌的方法精密度相对标准偏差为0.8%～9.0%,定量质控样品测定的所有结果均在真值范围内，且方法的相对误差为0.8%。对两种方法检测结果进行统计学分析发现：两种方法在统计学上无显著性差异。与滤膜法相比，酶底物法具有操作简单、结果准确性高、稳定性好等特点，酶底物法可作为评价包装饮用水中铜绿假单胞菌污染的补充方法。     

基于混菌体系生物滴滤系统净化甲苯废气的研究

以纳米活性陶瓷球为生物滴滤塔填料,利用基因工程改造大肠杆菌和铜绿假单胞菌为底盘菌进行挂膜,结合物理吸附开展生物滴滤系统净化甲苯废气的研究。结果表明,混菌体系在含甲苯培养基中生长良好,且大肠杆菌与铜绿假单胞菌不形成竞争,二者相互利用、相互促进;当生物滴滤系统运行96 h时,生物滴滤塔去除率可达96.7%,总去除率可达97.2%。     

荧光增白剂在洗涤剂和化妆品中的应用和检测

荧光增白剂属于染料工业的一个重要组成部分,它具有特殊的化学结构,这种化学结构能够将紫外线转化为蓝光,可以很大程度上弥补微黄色白色物体反射光中蓝色光的缺失。主要论述了荧光增白剂在洗涤剂和化妆品中的应用以及检测,对荧光增白剂的发展进行了展望。     

厄贝沙坦荧光猝灭法测定化妆品中痕量汞

依据汞对厄贝沙坦的荧光具有猝灭的特性,建立了一种测定痕量汞的新方法。该方法的最大激发波长为280nm,最大发射波长为377nm,线性范围为0.04～0.60mg/L,相关性系数为0.9980,检出限为0.0139 mg/L,对于0.13 mg/L汞标准溶液测定10次的相对标准偏差为0.415%。该方法用于化妆品中痕量汞的测定,结果令人满意。     

化妆品中动物源性成分多重实时荧光PCR检测方法的研究

使用优化的Chelex-100结合玻璃奶法提取膏状、液态和固态化妆品中的动物源性DNA;根据驴、马和牛线粒体16S rRNA基因序列设计通用引物和特异性探针,建立了一次性检测化妆品中驴、马和牛3种动物源性成分的多重实时荧光PCR体系,检出限均为0.001 ng。并对市售的面霜、洗面奶和面膜进行盲样检测,验证了体系的可靠性和准确性。     

铜绿假单胞菌注射液体外抗肿瘤生物活性检测方法的建立

目的建立铜绿假单胞菌注射液(Pseudomonas aeruginosa,PA-MSHA)体外抗肿瘤生物活性检测方法。方法将系列稀释的PA-MSHA在体外直接作用于人肝癌细胞BEL-7402,光学显微镜下观察细胞的生长状态;MTT比色法检测其对细胞增殖水平的影响;对10批PA-MSHA成品分别检测3次,以半数抑制浓度(IC50)为指标,计算批内和批间变异系数(CV),验证方法的精密性。结果随着PA-MSHA稀释度的降低,光镜下贴壁的BEL-7402细胞数量逐渐减少,细胞皱缩并破碎;MTT比色结果显示,随着PA-MSHA稀释度的降低,孔内颜色逐渐变浅,BEL-7402细胞增殖抑制率逐渐升高,呈一定的剂量-效应关系;10批PA-MSHA成品3次检测的IC50值范围为(3.584～7.778)×108个/ml,批内变异系数为4.58%～24.17%,批间变异系数15.08%～16.95%,总变异系数为15.81%,均符合细胞实验变异系数应小于30%的标准;PA-MSHA成品经该方法检测后,得到的IC50值在(3.109～7.383)×108个/ml范围内时,表明成品的生物活性合格。结论建立了PA-MSHA体外抗肿瘤生物活性检测方法,该方法稳定性好、精密性高,而且具有操作简便、节约成本和时间等优点,可用于对PA-MSHA以及其他类似细菌类生物制品的体外生物活性研究。     

26株铜绿假单胞菌对常用抗菌药物敏感性的体外研究

目的了解院内感染铜绿假单胞茵的耐药性变化情况,为临床诊治提供参考。方法收集2005年至2007年我院各科临床标本,分离培养铜绿假单胞茵并做药敏鉴定,分析其耐药性的变化。结果共检出26株铜绿假单胞茵。进行抗生素的耐药性检测,亚胺培南和哌拉西林、环丙沙星等抗生素的具有较强的抗菌作用,氨苄西林和头孢曲松为甚,其耐药率高达96.15%和84.62%。结论要加强对铜绿假单胞茵的耐药性检测并合理使用抗生素以延缓耐药菌株增加。     

铜绿假单胞菌外毒素A在生物制药中应用的研究进展

铜绿假单胞菌外毒素A(Pseudomonas aeruginosa exotoxin A,PEA)是该菌分泌的外毒素之一,通过催化细胞延伸因子2(elongation factor-2,EF-2)的ADP核糖基化,抑制蛋白合成,从而导致细胞死亡,在铜绿假单胞菌导致的感染性疾病中发挥重要作用。PEA强烈的细胞毒性特点使得该毒素成为免疫毒素的重要成分之一,已广泛应用于肿瘤的靶向治疗中。此外,由于PEA可与抗原提呈细胞表面的α₂巨球蛋白受体结合,通过胞饮作用进入胞内,辅助抗原的处理和提呈,可作为分子佐剂应用于各种疫苗的研发。本文对PEA在免疫毒素及疫苗佐剂方面应用的研究进展作一综述。     

重组铜绿假单胞菌外毒素A含量SDS-PAGE检测方法的建立及验证

目的建立测定重组铜绿假单胞菌外毒素A(recombinant exotoxin of Pseudomonas aeruginosa,r EPA)含量的SDSPAGE法,并进行验证。方法采用SDS-PAGE,经考马斯亮蓝R-250染色后,利用Image Lab软件分析获得目标蛋白条带光密度值,计算目标蛋白在待测样品中的含量。对建立的方法进行专属性、准确性和重复性验证,确定检测范围,并用建立的方法检测r EPA宿主湿菌体中r EPA发酵产量及r EPA宿主菌休克液柱层析纯化样品中r EPA含量。结果 r EPA含量在100~600μg/ml范围内与其对应条带的光密度值具有良好的相关性,决定系数在0.97以上。大肠埃希菌固有组分及纯化过程中常用的添加物对r EPA含量检测均未产生明显影响,专属性较好;用建立的方法检测500、300、150μg/ml r EPA样品10次的回收率分别为(102.32±4.18)%、(102.77±4.94)%和(95.04±16.41)%,CV值分别为4.08%、4.81%和17.27%。各批r EPA发酵产量为250~500 mg/L,三步柱层析纯化后,r EPA总回收率约为50%。结论建立了测定r EPA含量的SDS-PAGE法,该方法专属性、准确性和重复性良好,为r EPA生产工艺的优化奠定了基础。     

微生物法提取桂叶精油的组分研究

从土壤中筛选到的微生物菌株XJ26,具有提取肉桂叶中的肉桂精油的能力,该菌株被鉴定为铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa,并命名为Pseudomonas aeruginosa XJ26。以肉桂醛、香豆素、邻甲氧基肉桂醛的提取率为指标,考察发酵培养基碳源、氮源、反应体系初始p H值和提取温度对Pseudomonas aeruginosa XJ26发酵液提取肉桂精油的影响。结果表明,微生物法提取肉桂有效成分的工艺条件:葡萄糖质量浓度为30 g/L,蛋白胨质量浓度为20 g/L,初始p H值为6,28℃下提取60 h。在该条件下,肉桂醛、香豆素和邻甲氧基肉桂醛的提取率分别为1.40%,0.729%和0.918%。     

便携式X射线荧光光谱法快速检测化妆品中汞

建立便携式X射线荧光光谱仪分析技术快速检测化妆品中汞含量的方法.通过配制不同含量汞的化妆品标准物质,优化便携式X射线荧光光谱仪仪器参数:土壤分析模式,主范围时间150 s,低范围时间5 s,轻范围时间5 s,标准偏差1σ,厚度不修正.经过方法验证,以固体、膏状、乳液3种空白化妆品考察基质,结果显示,方法检出限为1.0 ...     

铜绿假单胞菌分泌鼠李糖脂能力对原油降解影响的研究

研究了铜绿假单胞菌分泌鼠李糖脂能力对原油生物降解的作用.将保存在原油中的铜绿假单胞菌转接至甘油培养基进行继代培养,观察到各继代培养下鼠李糖脂分泌量越高则该发酵液对原油的乳化降解能力就越强,推测该菌产鼠李糖脂能力决定了该培养液对原油的乳化与降解程度.鉴于此,分别将鼠李糖脂提取液、发酵液加入到原油培养基中,观察其各自的原油乳化程度的变化趋势,发现鼠李糖脂本身可以乳化原油但不能降解原油,且其乳化能力不如去菌体的发酵液.去菌体发酵液能很快地乳化原油而同样不能降解原油.只有含菌体的发酵液既能乳化又能降解原油.因此,可以认为鼠李糖脂本身具有乳化原油的能力,但是由铜绿假单胞菌同时分泌的其它表面活性物质可能协同鼠李糖脂更好地乳化原油以促进微生物对原油的利用与降解.