绿色木霉固态发酵生产纤维素酶的研究

以酒糟为原料,采用实验室分离的绿色木霉固态发酵生产纤维素酶,对发酵培养条件进行了优化.试验结果表明,在250mL三角瓶中加入酒糟与麸皮(7:3)5g,料水比(发酵料:营养盐液)为1:1,其中营养盐溶液pH值自然,黄豆面1.0%,接种1mL孢子悬液,30%培养3d,CMCase和FPA分别达到7105.92U/g和1463.97U/g.     

绿色木霉95106固态发酵生产纤维素酶条件优化研究

以稻草粉与麦麸为主料,对影响绿色木霉固态发酵生产纤维素酶的因素,如秸秆粉和麦麸的用量比、固液比、初始pH值、氮源及其浓度、发酵温度和时间等进行了研究.结果显示,稻草粉:友麸比为15∶5、料水比为1∶5、初始pH值为6.0、以0.25％尿素液为氮源、28℃培养72h的产酶活力最高,滤纸酶活和内切酶活分别比基础发酵条件下增加了1.21倍和0.726倍.该研究结果为高效率、低成本、工业化生产纤维素酶提供科学依据.     

绿色木霉JD-1固态发酵玉米芯产纤维素酶条件优化

以玉米芯与麸皮为主要原料,对影响绿色木霉（Trichoderma viride）JD-1固态发酵的因素如玉米芯与麸皮的比例、氮源浓度、发酵温度、时间、料水比等进行研究。在单因素试验的基础上,采取正交试验设计进行优化。结果表明,最佳固体发酵条件为即玉米芯与麸皮质量比为7∶3,培养温度30 ℃,料液比1∶2.0（g∶mL）,培养时间96 h,接种量为10%。在此优化条件下,羧甲基纤维素酶活力达8.95 IU/g,滤纸酶酶活力达2.00 IU/g。     

绿色木霉固态发酵纤维素酶生物量的测定及发酵培养基的初步优化

为了测定绿色木霉固态发酵纤维素酶的生物量，采用紫外分光检测固态发酵过程中麦角固醇的量．确定了其最佳提取工艺：在75℃恒温水浴中反应0．5h，用乙醚萃取，乙醇定容，紫外282nm检测．在此基础上对绿色木霉固态发酵的培养基进行了初步的优化，并得到了最佳的培养基组合：碳源为蔗糖，无机氮源为(NH4)2SO4，水料质量比为2．2，pH为5．5．用该培养基，CMC酶活和滤纸酶活分别比优化前提高了21．0％和44．1％．     

稻壳对绿色木霉产纤维素酶的影响

对实验室分离筛选的绿色木霉所产的纤维素酶进行研究，采用稻壳作为诱导物，研究其对酶活的影响。研究和分析了CMC酶活测定法的最优酶解条件为：在60℃，pH4．5下，酶解5min，酶与底物量比为1：8，绿色木霉的最优产酶条件为培养基pH6．5，含水量为250％，接种量为5％，温度28％，时间96h。用酸洗经碱处理过的稻壳为诱导物，其最大添加量为4g／100mL，其酶活可高迭17．698U／mL，比诱导前酶活提高了74．2％。，证明酸洗经碱处理过的稻壳是一种有效的诱导物。     

箱式固态发酵生产纤维素酶的研究

利用里氏木霉进行箱式固态发酵生产纤维素酶，在发酵前期（24h）品温控制在28－33℃,发酵中期（24－60h）控制在40℃以下，发酵后期控制在35℃以下，其最高酶活（FPA）达到430U/g干曲。第一次翻曲时间在40－48h，整个过程翻曲次数不宜过多。采取液体种子，大接种量，可以有效的防止发酵前期染菌，中后期染菌后，将固体曲的pH长时间的控制在4.5以下将可以尽量减小梁菌带来的危害，虽然产酶高峰时间延长了约14h，但产酶水平仅下降了17.1%，从工业化的角度看是可行的。     

黑曲霉固态发酵啤酒糟生产纤维素酶的研究

以啤酒糟为主要原料,采用黑曲霉(Aspergillus niger sp.)固态发酵生产纤维素酶,对培养基的组成和培养条件进行了优化。实验结果表明,适宜的培养基组分为:500 mL三角瓶中装入啤酒糟和棉粕20g,配料比8:2,料水比1:1.5,于30℃发酵66 h,滤纸酶活和羧甲基纤维素酶活分别达到(759.9±51.7)u/g和(14187.8±579.1)u/g(干物质);而在含氮量相等的条件下,试验所用的几种无机氮对酶活影响不显著;KH_2PO_4和CaCl_2在所研究的添加范围内对产酶影响也不显著。     

绿色木霉WL 0422高产纤维素酶的研究

250 mL三角瓶装8.0 g基料(麸皮稻草粉=4.0 g4.0g),(NH4)3PO42.0%,KH2PO4 0.3%,CaCl2 0.1%,MgSO4·7H2O 0.1%,CMC-Na 3.0%(均相对于基料),料水比11.3～1.4,自然pH;于32℃培养108h,期间翻曲2次,CMC酶活力2 488 IU/g干曲.曲盘发酵的料水比改为11.6,其余组分同锥形瓶优化发酵培养基;于32℃培养96 h,期间翻曲2次,CMC酶活力可达2 215 IU/g干曲.     

绿色木霉与黑曲霉固态混菌发酵生产纤维素酶、木聚糖酶和纤维二糖酶复合酶方法的研究

以绿色木霉（Trichoderma viride）和黑曲霉（Aspergillus niger）诱变菌株为生产菌种,先用绿色木霉菌株在玉米芯等农林废弃物上进行培养,一段时间后再接入黑曲霉进行混菌培养生产纤维素酶、木聚糖酶和纤维二糖酶复合酶。结果表明其复合酶各酶最大活性条件为：绿色木霉液体种子接种量为80%,黑曲霉麸曲种子的孢子自绿色木霉接种后第6天接入。纤维素酶、木聚糖酶和纤维二糖酶第10天酶活分别为211IU/g、8038IU/g、355IU/g。     

利用绿色木霉固态发酵生产纤维素酶的探讨

对纤维素酶生产菌的培养方法、三角瓶固体培养基配方和培养条件及小型曲盘培养的发酵条件进行了较系统的研究,实验结果表明:按最好的培养基配方和发酵工艺条件,采用该菌固体发酵5天,酶的发酵单位可达150U/g(FPA酶活,下同)以上,风干后其酶活可达450U/g以上,为其工业化生产提供了有力的科学依据。     

绿色木霉复合木聚糖酶的固态发酵条件优化

目的研究不同发酵条件对绿色木霉产复合木聚糖酶性能的影响。方法采用固体发酵培养方式,通过改变发酵条件,包括碳源、氮源的种类、浓度及接种量,测定相应条件下发酵产物的酶活性来确定发酵工艺。结果绿色木霉产酶的最佳碳源为玉米芯和麸皮(4∶6);氮源为硫酸铵(4%);接种量为1×107个孢子/g培养基。30℃固体培养70h,发酵后用无菌水(pH5.0)28℃浸提3h测定酶活性。结论在优化的培养条件下,木聚糖酶的最高酶活性达到267U/g。     

纤维素酶产酶菌株的选育与固态发酵

从高产纤维素酶菌株绿色木霉D-2出发,经微波诱变和紫外线辐射2种诱变方法对该菌株进行改良,经筛选获得一高产纤维素酶突变株WLZ-2,所产酶活力从207×10-7 kat/g(以干曲计)增加到296×10-7 kat/g(以干曲计);固态发酵中研究了不同麸皮稻草比例、培养基含水量、氮源种类、无机盐、表面活性剂、起始pH等因素对菌株产酶活力的影响。通过以上单因素试验和正交试验,得到优化的培养基配方为:麸皮3 g,稻草5 g,(NH4)2SO4 0.24 g,水12.8 mL。     

绿色木霉HY-07液体发酵产纤维素酶的研究

以玉米芯为主要原料,通过单因素和正交试验对绿色木霉HY-7液体发酵产纤维素酶的最佳工艺条件进行优化.结果表明,最佳产酶条件为:250mL三角瓶添加Mandels无机营养液75mL,添加玉米芯2.0%,蛋白胨0.05%,吐温80 0.1%,调整pH值为5.0;茵龄78h.接种量4.0%,转速150 r/min,28℃恒温振荡培养102h,该条件下,其酶活为401.7u/mL,比优化前提高了44.6%.     

绿色木霉液体发酵产纤维素酶的培养基优化

研究液体摇瓶发酵产纤维素酶的最佳培养基组成。通过单因素实验确定了培养基中氮源、碳源和诱导碳源的种类,采用正交试验确定了培养基中4种主要营养成分的组成。结果表明,摇瓶液体发酵产纤维素酶的最佳产酶培养基的种类和组成为：有机氮源蛋白胨和无机氮源硫酸铵的含量分别为11g／L和13g／L,葡萄糖6g/L,磷酸二氢钾10．5g/L,爆破的稻草为13．4g/L;纤维素酶的滤纸酶活为19．22U／mL。     

碳源对绿色木霉ZC产中性纤维素酶的影响

筛选得到一株高产中性纤维素酶的绿色木霉ZC,对其培养基中的碳源进行了优化,探讨了碳源的种类、混合碳源以及碳源与麸皮的比例对其产酶的影响,确定了以4 g/dL玉米秸秆粉、1g/dL麸皮为主的发酵培养基,此培养基中纤维素酶滤纸酶活可达321.12 U/mL.     

里氏木霉与黑曲霉混合发酵产纤维素酶的条件优化

为提高纤维素酶酶解秸秆产糖效果,以碱性双氧水处理过的玉米秸秆为发酵基质,进行里氏木霉与黑曲霉混合发酵的研究。通过单因素试验确定黑曲霉延迟接种时间、里氏木霉与黑曲霉接种比例 、发酵时间和固液比4个因素的最优水平。在此基础上,采用Box-Behnken响应面设计对混合发酵产酶条件进行优化,获得最佳产酶条件：黑曲霉延迟接种时间 36h,里氏木霉与黑曲霉接种比例 5:1、发酵时间7d、固液比2:50(m/V)、吐温-80体积分数0.4%、pH 5.0和装液量50mL/250mL。此时,滤纸酶力(FPA)可达1.224 IU/mL,β-葡萄糖苷酶活力(β-GA)可达0.315 IU/mL。采用高效液相色谱法,对最佳条件下的纤维素酶酶解秸秆的水解液进行检测。结果表明,两菌株混合发酵较单菌株发酵的纤维素酶系更加完整,且降解木质纤维素类原料产可发酵性糖的能力增强。     

里氏木霉利用麦糟生产纤维素酶

利用里氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｓｅｉ）,以啤酒厂的废糟为原料,添加适量麸皮和稻草粉为培养基进行固态发酵,采用固体种曲混合接种,在４８ｈ翻曲,经１４４ｈ发酵后ＦＰＡ酶活达到３５７Ｕ／ｇ。以补加３％麸皮的酒糟水为培养基,调起始ｐＨ６．５培养９２ｈ的液体种子接种,ＦＰＡ酶活为１７８Ｕ／ｇ。