高浓和低浓啤酒酿造中蛋白酶A对泡沫活性多肽的影响

啤酒产生丰富泡沫的能力受泡沫活性多肽水平的影响,含有疏水区域的特定多肽,如脂质转移蛋白(LTPl)是啤酒泡沫的重要组成成分。尽管高浓啤酒酿造在商业上是一项可行的技术,但同低浓酿造相比,其产品具有更低的泡沫稳定性。人们认为这主要是由于蛋白酶A对上述的疏水性多肽所起的降解作用造成的,本论文的研究目标是比较和确定在高浓(20°P)和低浓(12°P)麦汁发酵过程中疏水性多肽,尤其是泡沫-LTPl损失的数量,来评估蛋白酶A对这些多肽的影响,疏水性多肽和泡沫-LTPl,在高浓酿造中的损失更大,更进一步来说,已获得的结果表明蛋白酶A改变的是多肽的疏水性,而不是它们的分子量大小。大约有20％的疏水性多肽和57％的泡沫-LTPl表现出蛋白酶A抗性,这些疏水性多肽和泡沫-LTPl损失程度的差异直接影响到最终产品的泡沫稳定性。     

啤酒生产过程中影响泡沫性能的因素分析

泡沫性能是反映啤酒质量的重要指标。虽然影响啤酒泡沫性能的因素很多。最重要的因素是疏水多肽的存在。酵母在发酵过程中会产生蛋白酶A，死亡酵母也会分泌蛋白酶A，蛋白酶A能降低疏水多肽的含量从而对啤酒泡沫不利。这种影响随着啤酒保存时间的延长会更加明显。高浓度的麦汁发酵对啤酒泡沫不利，巴氏杀菌对蛋白酶A的活力以及啤酒泡沫稳定性有影响。本研究中进行了两套类似全麦芽酿造的实验，其中一种经过隧道式杀菌机杀茼，另一种则经过膜过滤不进行巴氏杀菌，检测三个月保存期内两种啤酒的泡沫性能、蛋白酶A活力及疏水多肽含量。结果发现巴氏杀菌的啤酒中蛋白酶A活力下降，未进行巴氏杀菌的啤酒此酶活力很高，后者中疏水多肽含量下降是由于受蛋白酶分解所致；经过巴氏杀菌的啤酒即使保存一段时间后其泡持性依然很好，而未经巴氏杀菌的啤酒泡持性下降。离心会影响蛋白酶A的活力，因为在离心过程中产生的剪切力和热量会破坏酵母细胞的完整性。剪切力增加了死亡酵母的数量，导致更多的细胞内容物释放，其中包括蛋白酶A。     

高浓麦汁影响泡沫稳定性的因素探讨

本文论证了高浓麦汁在发酵过程中疏水多肽、酵母蛋白酶活性对啤酒泡沫稳定性的影响。在低浓(10°P)发酵过程中,疏水多肽呈稳定下降趋势;蛋白酶A的含量则呈增加趋势,到发酵结束时其增加量达最高水平。而在高浓(20°P)发酵过程中,疏水多肽只是在发酵的前8天里迅速下降,之后就几乎没有什么变化;蛋白酶A的含量比低浓时要高出很多,在发酵的前3～11天里即可达到低浓发酵时的两倍。FERMCAP~(TM)是一种抗沫剂,它可减少发酵过程的起泡,又不影响疏水多肽的含量及啤酒的稳定性,通过添加FERMCAP~(TM)的试验证明:高浓酿制的啤酒泡沫不稳定的主要因素是蛋白酶A,而不是发酵罐内的起泡。本文还通过试验证明高浓、低浓酿制啤酒装瓶存放5个月后其泡沫稳定性都呈平稳下降趋势,而经过巴氏杀菌的高浓、低浓配制啤酒其泡沫均未出现下降现象。     

高浓和低度麦汁发酵中酵母蛋白质水解活性及其对啤酒泡持性的影响

本论文主要是阐述在发酵过程中高浓酿造对酵母蛋白酶活力的影响,对来自麦汁的疏水多肽损失的影响以及对贮藏啤酒泡沫稳定性的影响。在整个发酵期间低度麦汁(10°P)中疏水多肽的含量显示出平稳下降,但对于20°P 麦汁在发酵的前8天显示出快速的下降,剩下的时间变化不明显。高浓酿造疏水多肽下降程度较大,发酵过程中蛋白酶 A 增长,发酵结束时达到最高水平。从发酵的第3天到第11天高浓发酵酵母蛋白酶水平至少是低度发酵的两倍。高浓酿造的啤酒中所含的蛋白酶 A 活力比低度酿造的啤酒中高出很多。FERMCAP~(TM)包含物,一种消泡物质,在高浓麦汁中既不影响疏水多肽的水平也不影响最终啤酒的泡沫稳定性。这表明蛋白酶 A 必定是高浓酿造啤酒泡沫稳定性差的主要因素,而不是由于发酵罐中的起泡造成的。对瓶装的高浓及低度酿造的啤酒进行泡持性的测量,周期为五个月,结果表明两种啤酒的泡沫稳定性都平稳下降。灭菌后的高浓和低度啤酒不会出现泡持力下降的趋势。     

蛋白酶A与啤酒蛋白的相互作用

蛋白酶A是影响纯生啤酒泡沫稳定性的重要原因。本文利用相关蛋白质分析技术,SDS—PAGE电泳、HPLC技术和疏水色谱技术,研究蛋白酶A与啤酒蛋白质的相互作用。结果表明,蛋白酶A破坏的并不是某个分子量的啤酒泡沫蛋白,而是通过分解啤酒中疏水蛋白,从而降低了啤酒的泡沫稳定性。     

蛋白酶A与啤洒蛋白的相互作用

蛋白酶A是影响纯生啤酒泡沫稳定性的重要原因。本文利用相关蛋白质分析技术,SDS—PAGE电泳、HPLC技术和疏水色谱技术,研究蛋白酶A与啤酒蛋白质的相互作用。结果表明,蛋白酶A破坏的并不是某个分子量的啤酒泡沫蛋白,而是通过分解啤酒中疏水蛋白,从而降低了啤酒的泡沫稳定性。     

啤酒中疏水性蛋白质提取鉴定及其对于泡沫性能的影响的研究

利用蛋白疏水层析色谱法(HIC)从啤酒泡沫中分离疏水性蛋白,研究发现,HIC依次分离的蛋白组分表面疏水性增强的同时,泡沫稳定性随之增强,说明HIC分离得到强疏水性多肽对于啤酒泡沫稳定性具有较明显的积极作用,而弱疏水性多肽的影响效果不明湿.此外通过质谱(Mass Spectrometry)鉴定结果显示所得到的疏水性蛋白质为蛋白质乙,通过对啤酒酿造过程中的关键控制点的跟踪,确定了啤酒酿造过程中,发酵阶段疏水性蛋白质的损失最为严重,对啤酒泡沫质量的影响最大.     

纯生啤酒泡沫稳定性的衰减规律研究

目前,市售的纯生啤酒在泡沫稳定性方面普遍存在明显的缺陷,即泡沫稳定性差,并随着货架时间的延长而逐渐下降。有的纯生啤酒存放一个月以后,其泡持性几乎衰竭。纯生啤酒泡持性的衰减主要是由成品啤酒中残留的活性蛋白酶A造成的。真正的纯生啤酒常常会因未经巴氏灭菌而残留一些酶类,其中蛋白酶A会破坏啤酒泡沫蛋白,从而使纯生啤酒的泡沫稳定性降低。本研究旨在寻找货架期间纯生啤酒泡沫稳定性衰减的一般规律,探究引起纯生啤酒泡沫稳定性衰减的根本原因,并提出相应的控制措施。     

啤酒泡沫稳定性与蛋白酶的关系

大量的文献资料证实 ,未经巴氏灭菌的纯生啤酒会有一定量的蛋白酶活力残留 ,继而破坏了泡持性蛋白质Z(PrZ) ,使啤酒的泡沫稳定性变差。目前研究者发现主要是蛋白酶A(PrA)在起作用 ,许多人已建立了测定微量PrA和PrZ的方法。人们设想寻找一种抑制剂 ,能够添加到蛋白酶A活性偏高的纯生啤酒中 ,抑制PrA对泡沫蛋白的降解 ,但这一工作仍有待进一步研究。文中介绍了国内外在此方面的研究概况     

蛋白酶抑制剂对纯生啤酒泡沫稳定性影响

纯生啤酒因未经巴氏灭菌而残留一些酶类,其中具有活性的蛋白酶A及非活性的蛋白酶A前驱物的存在会直接或间接地破坏纯生啤酒的泡沫蛋白,从而使纯生啤酒的泡沫稳定性降低。通常情况下,纯生啤酒中PrA的含量为10^-3TU～10^-5TU。纯生啤酒中蛋白酶A的含量与泡沫稳定性之间有着直接的关系,蛋白酶A及其前驱物的总量决定着降解成品啤酒中泡沫蛋白的综合能力。当蛋白酶A的含量大于10^-4TU时,纯生啤酒的泡沫稳定性就会受到较大的影响。本实验采用热水抽提、乙醇分级沉淀等步骤从灵芝真菌中分离提取一种特异性的蛋白酶抑制剂,用于抑制纯生啤酒中PTA的活性。实验表明,一定条件下,抑制率达75％。在成品纯生啤酒中添加适量的蛋白酶A抑制剂可使纯生啤酒的泡沫稳定性明显提高。     

纯生啤酒存放过程中泡沫稳定性与酵母蛋白酶A以及蛋白含量与组成变化的研究

酵母蛋白酶A已经被证实对啤酒泡沫稳定性有负面作用。通过测定纯生啤酒存放过程中酵母蛋白酶A活性变化、泡持性衰减及蛋白含量的变化,进一步说明酵母蛋白酶A以及蛋白种类与含量对纯生啤酒泡沫稳定性的影响及其相互关系。对不同存放时期纯生啤酒样品中蛋白质进行电泳鉴定的结果显示,存放3月后的纯生啤酒中脂肪转运蛋白1(LTP1)完全消失,这一结果表明LTP1是影响啤酒泡沫稳定性的主要蛋白,该蛋白降解可能是酵母蛋白酶A作用的结果。     

脯氨酸特效内切蛋白酶应用试验

啤酒的混浊来源于多酚和特殊多肽的丰富脯氨酸片段之间氢键结合的结果。添加脯氨酸特效内切蛋白酶可将氢键结合区域的敏感多肽分解，延缓啤酒的沉淀混浊。本文主要就使用脯氨酸特效内切蛋白酶对啤酒非生物稳定性及泡沫的影响进行探讨。     

酿酒酵母蛋白酶A作用机理及影响因素研究综述

蛋白酶A是酿酒酵母体内一种重要的蛋白酶,参与液泡中多种酶的加工和成熟.它分泌到细胞外,会破坏纯生啤酒的泡沫蛋白,是影响纯生啤酒泡沫稳定性的主要因素之一.本文从蛋白酶A的基本特性、形成及作用机制、活性的检测以及改变或降低纯生啤酒中蛋白酶A活性的途径等方面叙述了蛋白酶A的研究进展,为纯生啤酒泡沫稳定性的改善提供理论支持,为解决目前啤酒行业普遍存在的纯生啤酒泡沫衰减问题提供参考.     

啤酒中蛋白酶A的研究进展

蛋白酶A(EC 3.4.23.6)来源于啤酒酵母,由于其能破坏啤酒中的泡沫蛋白,从而大幅度降低啤酒泡沫稳定性,因而引起酿造者的研究兴趣。在中国,随着“纯生热”的不断升温,纯生啤酒的泡沫稳定性问题越来越受到生产厂家和研究者的关注。本文从酿造过程中蛋白酶的来源、蛋白酶A的生化特性、蛋白酶A的检测、蛋白酶A在发酵过程中的变化、蛋白酶A与泡沫稳定性关系以及降低蛋白酶A活性等六方面对国外蛋白酶A研究进展做一综述。     

蛋白酶 A 与纯生啤酒泡沫稳定性的关系研究

纯生啤酒的泡沫稳定性衰减问题已成为其质量保证的难题,同时也是国际啤酒业的研究重点。然而国内外没有直接的文献证明残留在成品啤酒中的蛋白酶 A 是影响纯生啤酒泡沫质量的关键因素。本研究首次系统地通过一系列试验,包括外加蛋白酶 A、温度梯度的热处理后检测残留蛋白酶 A 酶活和一定储存期后啤酒泡沫稳定性的相关性分析;蛋白酶 A专一抑制剂梯度处理后蛋白酶 A 残留酶活与对应啤酒泡沫稳定性的相关性分析。试验结果证实了纯生啤酒的蛋白酶 A 酶活高低直接决定纯生啤酒的泡沫稳定性。同时通过不同温度梯度处理对啤酒蛋白酶 A 及蔗糖转化酶活力的影响研究结果表明,蔗糖转化酶对温度升高的抵抗力比蛋白酶 A 稍强,在蛋白酶 A 的活力降低到某种限度时,蔗糖转化酶仍保留部分的酶活。     

高浓稀释啤酒的泡沫质量控制

啤酒区别于其他饮料的最大特征是具有诱人的泡沫,很多研究报告已经指出构成泡沫的主要成分来自麦芽的中分子蛋白质（疏水多肽）和酒花中的异葎草酮,造成泡沫下降的主要是蛋白酶A。高浓稀释工艺生产的啤酒,其泡持时间会出现下降。     

采用复合诱变选育低分泌蛋白酶A啤酒酵母菌株的研究

啤酒酵母在发酵过程中分泌胞外的蛋白酶A是影响纯生啤酒泡沫稳定性的关键因素，本研究通过采用亚硝基胍（TNG）和甲基黄酸乙酯（EMS）复合诱变选育满足食品安全性的低蛋白酶A、发酵性能正常的优良啤酒酵母菌株，为解决纯生啤酒泡沫稳定性奠定基础。     

酿酒酵母蛋白酶A的生化特性及生物学功能

酿酒酵母蛋白酶A是影响纯生啤酒泡沫稳定性的关键因素。由于纯生啤酒的广阔市场前景,对酵母蛋白酶A的研究越来越受到国内外研究者的关注。本文从蛋白酶A的结构、分泌、成熟、激活机制、催化机制、对啤酒泡沫的破坏作用以及酿造过程中蛋白酶A活性的变化等方面综述了蛋白酶A的研究进展,希望能为解决纯生啤酒泡沫稳定性问题提供理论参考。     

啤酒中疏水性蛋白研究现状与影响啤酒中疏水性蛋白的因素

表面疏水性(Surface hydrophobicity)是蛋白质三级结构中最重要的一种特性,它影响分子间的相互作用,如蛋白质与蛋白质、蛋白质与脂类等小配位体间的缔合作用或其他大分子间的相互作用.研究发现,啤酒中构成啤酒泡沫最重要的物质为泡沫活性蛋白,它是一类表面疏水性很强的高分子蛋白质.弄清泡沫活性蛋白质具有的泡沫功能及其疏水性大小的原因和本质,对于泡沫蛋白的研制开发、国内啤酒泡沫的普遍匮乏现象的解决等方面具有重要的理论和现实意义.介绍了国内外啤酒中疏水性蛋白方面的研究现状及其发展趋势,对影响啤酒中疏水性蛋白的因素也做了一定概述.     

啤酒泡沫活性蛋白特性及其稳定性的影响因素

泡沫是啤酒的重要特征之一。啤酒泡沫的质量被定义为其稳定性、起泡性、挂杯力、色泽、细腻度和强度等一系列性质集合的总体评价。具有一定分子量、疏水性和糖基化的蛋白质或多肽在维持泡沫稳定性方面起主要作用。异葎草酮、非淀粉多糖、酵母物质、适度的酒精、CO_2和金属阳离子等对泡沫稳定性有积极的影响,而高浓度的酒精、脂类、脂肪酸和一些外界因素等可降低泡沫稳定性。