新疆双峰驼乳对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠肝脏的保护作用

本实验以链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的1型糖尿病小鼠为模型,探讨了全驼乳、驼脱脂乳、驼酪蛋白、驼乳清和驼乳清蛋白对糖尿病小鼠的影响,研究驼乳不同组分对1型糖尿病小鼠糖脂代谢、抗氧化能力、肝细胞形态以及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPAR-γ)、固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP1c)m RNA表达的影响。结果表明,除驼酪蛋白以外的其余组分均能增加糖尿病小鼠体质量、降低血糖浓度、升高血清胰岛素水平、恢复血脂水平、提高肝脏抗氧化能力,并减少肝组织的损伤。其中各项指标中,驼乳清组与模型组的变化最大,且差异极显著(P<0.01)。经驼乳清组干预后的糖尿病小鼠肝PPAR-γmRNA表达增加,SREBP1c mRNA表达下降。总地来说,驼乳清可有效改善STZ诱导的糖尿病小鼠糖脂代谢及肝组织损伤,其作用可能与上调PPAR-γ、下调SREBP1c m RNA表达有关。     

牛磺酸对丙烯酰胺致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

用丙烯酰胺诱导SH-SY5Y神经细胞损伤建立细胞损伤模型,研究牛磺酸对SH-SY5Y细胞的保护作用。MTT法和LDH法测定结果显示:用100⁷00μg/m L丙烯酰胺对SH-SY5Y细胞孵育8 h,细胞存活率下降至52%⁸1%,表明丙烯酰胺对SH-SY5Y细胞有一定的损伤作用,导致细胞膜受损,LDH释放到细胞膜外。经牛磺酸（50、100、200μg/m L）预先孵育1 h后,再用300μg/m L丙烯酰胺对细胞孵育8 h,SH-SY5Y细胞的存活率分别升高至81.6%、92.7%、89.7%,显著高于丙烯酰胺损伤组的细胞存活率（67.6%）;且LDH释放程度呈现出下降趋势,LDH释放率分别为:150.7%、138.8%、113.3%,和丙烯酰胺损伤组的LDH释放率（188.5%）相比均显著降低。该研究结果表明牛磺酸对丙烯酰胺诱导的SHSY5Y细胞损伤具有保护作用。      

软枣猕猴桃黄酮对过氧化氢诱导HaCaT细胞损伤的保护作用

研究软枣猕猴桃中黄酮类化合物对过氧化氢（H2O2）损伤人永生化表皮细胞（HaCaT细胞）的保护作用。 以湖南省浏阳市大围山软枣猕猴桃为实验材料,以体外培养的HaCaT细胞为实验对象。实验分为空白对照组、H2O2 模型组、阳性对照组（VC组）和黄酮处理组（软枣猕猴桃黄酮0.1～1.0 mg/mL预处理）,以细胞内超氧化物歧化酶 （superoxide dismutase,SOD）活力、活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）水平为综合评价指标,并以VC作 为阳性对照评价其抗氧化活性。实验结果表明：当H2O2浓度为30 μmol/L时,细胞相对存活率为40%左右,较好地 诱导了HaCaT细胞氧化损伤模型。当加入黄酮类化合物对细胞进行预保护后,质量浓度0.3、0.6 mg/mL的黄酮处理 组细胞相对存活率为60%左右,较模型组均提高了20%左右。0.3 mg/mL黄酮处理组细胞内SOD活力（6.33 U/mg） 较模型组升高了约1 倍,且存在明显差异（P＜0.05）;ROS水平显著下降,与模型组（677.80）相比下降了13%左 右。说明软枣猕猴桃中黄酮类化合物对H2O2造成的氧化损伤具有一定的预保护作用,可进一步将其开发成相应的天 然抗氧化剂产品投入市场。     

草苁蓉提取物对HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用

目的：研究草苁蓉乙醇提取物（Boschniakia rossica ethanol extract,BREE）对H2O2诱导的HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用。方法：用H2O2诱导HepG2细胞氧化应激损伤,采用噻唑蓝（methylthiazolyldiphenyltetrazoliumbromide,MTT）比色法检测BREE对HepG2细胞氧化损伤的保护作用;比色法测定培养液中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）、谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartateaminotransferase,AST）的释放率,以及细胞中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、还原型谷胱甘肽（reduced glutathione,GSH）及丙二醛（malondialdelyde,MDA）水平;蛋白印迹法测定细胞外信号调节蛋白激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK）、c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK）总蛋白及其磷酸化形式的表达水平以及核转录因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB）的核内转移。结果：BREE单独处理时,在所测质量浓度范围内对HepG2细胞增殖无显著影响。与模型组相比,BREE能显著提高氧化损伤细胞的存活率;降低氧化损伤细胞培养液中LDH、ALT和AST的释放;降低细胞MDA水平,增高细胞SOD活性和GSH含量。氧化损伤发生的不同时期,ERK、JNK、p38 MAPK和NF-κB蛋白均有激活,而BREE在氧化损伤发生1 h时减少ERK激活和NF-κB核转移,氧化损伤发生12 h时减少JNK蛋白激活。结论：BREE对H2O2所致HepG2细胞氧化应激损伤具有保护作用,此作用可能与其抑制ERK、JNK的活化和NF-κB的核内转移有关。     

玉米谷蛋白水解物对乙醇诱导损伤LO2细胞的保护作用

采用复合蛋白酶(protamex)和碱性蛋白酶(alcalase)协同水解玉米谷蛋白,制备玉米谷蛋白水解物(corn gluten hydrolysate,CGH),研究了玉米谷蛋白水解物的体外抗氧化活性,利用乙醇诱导LO2细胞氧化损伤模型对玉米谷蛋白水解物的抗氧化应激作用进行研究.结果表明,玉米谷蛋白水解物具有良好的...     

笛鲷鱼鳞源功能多肽对Caco-2细胞氧化应激损伤的保护作用

本实验利用650μmol/L H₂O₂构建Caco-2细胞氧化应激损伤模型,探究笛鲷鱼鳞源功能多肽(crimson snapper scale peptides,CSSPs)对Caco-2细胞氧化应激损伤的保护作用。通过测定细胞上清液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力和白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)质量浓度、胞内抗氧化酶活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)相对含量、相关凋亡基因(Caspase-3、Caspase-9、Bax和Bcl-2)的相对表达量,从细胞氧化还原状态和细胞凋亡两方面阐明CSSPs对损伤Caco-2细胞的抗氧化作用。结果显示,CSSPs能够通过抗氧化防御系统来减轻H₂O₂对Caco-2细胞的损伤,主要包括增加胞内抗氧化酶活性以抑制LDH释放、胞内ROS积累、MDA及IL-8的生成。此外,CSSPs抑制氧化应激损伤诱导的细胞凋亡与线粒体...     

鞣花酸的抗氧化性及其对PC-12细胞氧化损伤的保护作用研究

通过鞣花酸清除自由基、抑制亚油酸自氧化、还原铁离子(Fe³⁺)能力实验研究其抗氧化活性;以过氧化氢(H₂O₂)诱导PC-12细胞建立氧化损伤模型,探索鞣花酸对PC-12细胞氧化应激损伤的保护作用,建立鞣花酸抗氧化活性与对细胞氧化应激损伤之间的联系。结果表明,鞣花酸对羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(·O₂^-)、ABTS⁺·自由基清除的半抑制浓度分别为92.14、36.70、47.91μg/mL;对亚油酸自氧化的抑制率高达90%;对铁离子具有很强的还原能力。鞣花酸对H₂O₂诱导的PC-12细胞氧化损伤具有良好的保护作用,且与抗氧化活性之间具有良好的相关系。鞣花酸对细胞氧化损伤的保护作用可能与提高细胞的抗氧化能力有关。     

吡嗪化合物对氧化应激损伤血管内皮细胞的保护作用

目的:研究吡嗪化合物单用或联用对体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护作用。方法:将HUVEC分为:(1)正常对照组;(2)H_2O_2损伤对照组;(3)吡嗪类化合物单用低、中、高浓度组;(4)2,3,5,6-四甲基吡嗪与2-甲基吡嗪联用组。收集细胞,测定各组细胞活力(OD)、抑制率。结果:与H_2O_2氧化损伤组相比,50μmol/L 2,3,5,6-四甲基吡嗪和50、100μmol/L 2-甲基吡嗪对细胞氧化损伤具有明显保护作用(P0.05),且保护作用会随着作用时间的延长而加强结论;50μmol/L 2,3,5,6-四甲基吡嗪和50μmol/L 2-甲基吡嗪联合作用要比其单用对细胞氧化损伤具有更明显保护作用(P0.05)。结论:吡嗪化合物对氧化应激损伤血管内皮细胞的保护作用,并且其联用要比单用保护作用更强。     

安石榴苷对UVB诱导HaCaT细胞光损伤的保护作用

利用Caco-2细胞和HaCaT细胞建立肠-皮肤共培养体系,采用免疫荧光法评价安石榴苷对中波紫外线(UVB)诱导的光损伤产物环丁烷嘧啶二聚体(CPD)的抑制效果,通过实时荧光定量PCR、免疫沉淀、蛋白免疫印迹法探究安石榴苷对核苷酸切除修复(NER)途径相关基因转录和产物表达的影响。结果表明,安石榴苷能降低HaCaT细胞中的CPD水平,上调着色性干皮病基因组C(XPC)的mRNA转录水平,并以SIRT1基因依赖的方式降低XPA蛋白的乙酰化水平。这表明在Caco-2细胞与HaCaT细胞的肠-皮肤共培养体系中,安石榴苷可能通过激活NER途径相关的XPC/XPA蛋白促进UVB诱导的光损伤的修复,其作用依赖于SIRT1蛋白的去乙酰化活性。     

槟榔多糖对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用

采用CCK-8法测定细胞的存活率、Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率,利用蛋白质免疫印迹检测人结直肠腺癌细胞(Caco-2细胞)中抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax及细胞间紧密连接蛋白的表达情况,研究槟榔多糖对DMNQ诱发Caco-2细胞氧化损伤的保护作用。结果表明：槟榔多糖能显著抑制促凋亡蛋白Bax的表达并同时促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,抑制DMNQ引起的细胞凋亡并减轻内质网应激,显著上调Caco-2细胞紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin 1的表达,维持细胞紧密连接的完整性,即槟榔多糖能显著改善DMNQ诱导的Caco-2细胞氧化损伤。     

小黑豆乳清蛋白和水解多肽对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的：研究小黑豆乳清蛋白(SBWP)和水解多肽(SBWPE)对四氯化碳(CCl4)引起的小鼠肝脏损伤的保护作用。方法：分别将SBWP和SBWPE按照6g/(kg·d)和2g/(kg·d)加入到饲料中,饲喂小鼠30d。实验第30天,CCl4经胃给药(5mL/kg)建成急性肝损伤模型;实验结束后,处死动物,检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(AST)和肝脏丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)、谷胱甘肽(GSH)。结果：与模型组相比,SBWP和SBWPE组动物的血清ALT活性和肝脏MDA、TG含量显著降低(P＜0.01),肝中GSH含量显著升高(P＜0.05),其中以SBWPE组效果最明显。结论：SBWP和SBWPE对CCl4引起的小鼠急性肝损伤有保护作用。     

骆驼乳对小鼠酒精性肝损伤的保护作用

目的:研究骆驼乳对Lieber-DeCarli液体饲料诱导的小鼠酒精性肝损伤的保护作用.方法:将40只雄性C57BL/6NCr小鼠随机分为对照组(Con)、模型组(Et)、骆驼乳高剂量组(EtCM_H,3 g/kg)、骆驼乳低剂量组(EtCM_L,1.5 g/kg)和阳性对照组(美他多辛,300 mg/kg).试验8周...     

罗汉果粗提物抑制H2O2诱导MIN6细胞的ROS生成及凋亡

探讨罗汉果粗提物（Momordica grosvenorii extract,MGE）对H2O2诱导MIN6细胞凋亡及氧化损伤的保护作用及机制。以不同浓度的H2O2诱导MIN6细胞建立氧化损伤模型,根据细胞活力选择最适的诱导浓度。采用MTT法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞活性氧ROS水平和细胞凋亡率;Western blot方法对凋亡相关因子进行检测。结果表明,罗汉果粗提物（0~200 μg/mL）对MIN6细胞活性几乎无影响,因此选取200 μg/mL罗汉果粗提物进行后续实验。200 μg/mL罗汉果粗提物能显著逆转过氧化氢导致的细胞活力降低（p<0.05）。流式细胞术结果显示,与单用H2O2相比,罗汉果粗提物可以显著下调H2O2导致的ROS水平升高（p<0.05）,且抑制H2O2诱导的MIN6细胞的凋亡。Western blot结果也表明罗汉果粗提物能部分逆转H2O2引起的PCNA表达降低,Bax表达增高（p<0.05）。综上所述,罗汉果粗提物可以抑制H2O2诱导MIN6细胞的ROS生成及细胞凋亡,该研究结果可为将罗汉果开发为防治糖尿病功能食品提供实验依据。     

葡萄糖酸-δ-内酯诱导乳清蛋白冷凝胶对双歧杆菌的保护

目的：探讨葡萄糖酸-δ-内酯(glucono-δ-lactone,GDL)诱导乳清分离蛋白(whey protein isolate,WPI)所形成的包含双歧杆菌的乳清蛋白冷凝胶(cold-set gels of whey protein containing bifidobacteria,CGWPCB)对双歧杆菌的保护作用。方法：通过酸耐受性实验评价CGWPCB对菌体的保护作用,借助扫描电子显微镜、物性仪和激光粒度仪观察凝胶结构,并考察CGWPCB在液态制品中的储藏稳定性。结果：0.30%GDL诱导5%WPI和6%WPI形成的颗粒状冷凝胶,在pH1.5的酸环境下对双歧杆菌的保护性最好,作用120min后菌落数下降两个数量级,菌体存活率分别达到1.7%和2.1%;而其在果汁中同样对菌体有很好的保护作用,在4℃条件下储藏56d后菌体存活率可达到43.9%。结论：制备出对双歧杆菌具有良好保护性且适用于液态产品的CGWPCB。     

乳清分离蛋白凝胶VC释放过程的动力学

本研究以VC作为食品功能性成分模型,利用热诱导使其封装于乳清分离蛋白(whey protein isolate,WPI)凝胶内,通过静态释放实验和动力学分析,探讨释放介质pH值、温度、载药量、释放液离子浓度对WPI凝胶中VC释放特性的影响,并建立VC在WPI凝胶中释放过程的动力学模型。实验结果表明,VC在WPI凝胶中累计释放分数的变化与蔗糖的动力学模型不同,不遵循已有的Korsmeyer-Peppas模型X=Kt~n,而遵循本研究建立的修正模型:X=Kt~ne~(-k’t),且相关系数R2在0.95~0.99之间。VC的释放速率,随pH值、温度以及释放液离子浓度的增加不断增大,随载药量的增加而不断减小。研究表明,WPI凝胶具有环境应答性,以其为载体的VC释放过程受环境的pH值、温度、释放液离子浓度等因素影响。因此,通过调节释放体系的pH值、温度、载药量、释放液离子浓度可以达到控制VC释放的目的。     

柠檬酸处理对乳清分离蛋白凝胶特性的影响

探究柠檬酸处理对提高乳清分离蛋白凝胶特性的作用,并通过响应面法对其工艺进行优化。通过单因素试验,研究乳清分离蛋白浓度及柠檬酸浓度对其凝胶特性的影响。在单因素试验基础上,以乳清分离蛋白浓度、柠檬酸浓度两个因素为响应因素,以凝胶硬度和保水性为响应值进行中心复合试验设计(central composite design,CCD),进一步对其凝胶条件进行研究与优化。结果表明,当乳清分离蛋白浓度为12%,柠檬酸浓度为0.3%时,乳清分离蛋白的凝胶特性得到显著改善,其凝胶硬度和保水性分别达到1813.82g和88.56%,与模型预测值1847.14g和89.0219%无显著差异。     

酶解乳清浓缩蛋白WPC80制备乳清肽的研究

用乳清浓缩蛋白WPC80 为原料,在复合酶A 的作用下,研究乳清肽的制备工艺。复合酶A 的反应条件为[S]12g/100mL、温度50℃、[E]/[S]3%、pH9.0。选用截留分子质量10kD 的磺化聚砜膜,常温并在工作压差0.25MPa 下对水解液进行超滤处理后,选用树脂HZ00x 对水解液进行脱苦,得到的处理液无明显的苦涩味,只有轻微的蛋腥味,最后肽得率36.54%。产品中肽的分子质量分布以二、三和四肽为主,分别占峰面积的27.45%、34.88% 和26.65%。     

自然发酵驼乳对乙醇诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用

研究自然发酵驼乳对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。将24只雄性ICR小鼠随机分为正常组、模型组和自然发酵驼乳组。连续灌胃两周后,给小鼠灌胃50%乙醇溶液(7.3 g/kg)建立肝损伤模型。测定各组小鼠体质量、肝脏指数以及血清和肝脏的相关生化指标;将肝脏组织进行HE染色,观察肝组织病理学变化。结果显示:与对照组比较,模型组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性以及促炎细胞因子的含量显著增加(p<0.05或p<0.01),肝组织病理切片显示出明显的损伤和大量炎性细胞浸润。与模型组相比,自然发酵驼乳组ALT活性显著下降(p<0.05),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-1β(IL-1β)含量极显著降低(p<0.01)。HE染色的结果显示小鼠肝组织中炎性细胞浸润明显减少,脂肪变性程度减轻。肝脏丙二醛(MDA)含量显著下降(p<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著升高(p<0.05),肝脏甘油三酯(TG)含量极显著降低(p<0.01)。结果表明,自然发酵驼乳对小鼠急性酒精性肝损伤有较好的保护作用,这可能与降低小鼠体内炎症应答水平和改善肝脏氧化应激程度有关。