乳源β-酪啡肽-7对老年小鼠肾功能的影响

本文研究了β-酪啡肽-7对老年小鼠肾功能可能的影响。50只雄性昆明小鼠,按组分别灌胃0.90%的生理盐水和低、中、高剂量的β-酪啡肽-7。连续灌胃30d后,收集所有小鼠的血清及组织样本进行检测。组织病理学研究显示β-酪啡肽-7对老年小鼠的肾脏组织老化有一定改善作用,但高剂量组小鼠的肾小体肿胀似乎没有减轻,并且上皮细胞有坏死脱落现象。与模型组相比,中剂量组小鼠的血清肌酐(CRE)水平、肾脏组织中总抗氧化能力(T-AOC),超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性分别增加了22.16%、69.02%、71.26%(p0.05)和24.41%,而高剂量组分别增加了13.12%、64.88%、67.33%(p0.05)和17.90%。提示β-酪啡肽-7可以调节老年小鼠的肾功能,增加其抗氧化能力,但不是剂量依赖式作用。此外,干预低中剂量β-酪啡肽-7小鼠的MDA含量都比模型组低(分别降低了15.40%、3.17%),但高剂量组反而提升了16.08%,说明高剂量组小鼠肾脏的氧化有所加重。上述结果表明,β-酪啡肽-7有改善老年小鼠肾功能异常的可能,可能通过提高抗氧化能力来改善衰老引起的老化损伤,但摄入过多β-酪啡肽-7似乎会加重肾脏负担。     

酪蛋白酶解液中β-酪啡肽-7的液相色谱检测

研究活性多肽β-酪啡肽-7的检测.采用高效液相色谱法对胃蛋白酶解样品中活性肽(β-酪啡肽-7)进行测定.结果表明,对比标准品的保留时间发现水解0.5,1.5,2.5h的1,3,5号样品含有β-酪啡肽-7.经过重复进样,结果仍然一致.     

胃蛋白酶水解酪蛋白生成β-酪啡肽-7的研究

研究酪啡肽生成最佳水解条件的确立。首先通过单因素试验研究了底物浓度、酶浓度、温度和pH值对水解的影响,并依据水解度的差异,选取了单因素最佳条件,而后选取4因素3水平正交试验设计对最佳酶解条件进一步探讨,确定最佳酶解条件为酪蛋白底物浓度10mg/mL,酶浓度1%,pH1.6,55℃水浴。     

体外消化模型中酸乳β-酪啡肽-7和β-酪啡肽-5的释放及阿片活性

酸乳经过人体消化可在胃肠中产生具有舒缓紧张情绪的β-酪啡肽（β-casomorphin,β-CM）,为探究其在胃肠道中的释放量及其生物活性,本实验采用体外消化模型,模拟酸乳在体内的消化过程,采用高效液相色谱法检测β-CM-7、β-CM-5的释放;并用NG108-15神经杂交瘤细胞体外实验和小鼠体内实验测定其阿片活性。结果：在模拟胃消化液、胰消化液中,酸乳经消化释放的β-CM-7质量浓度分别是40.24、47.81 μg/mL,β-CM-5质量浓度分别是88.00、82.04 μg/mL。两种酸乳消化液均能降低NG108-15细胞内腺苷酸环化酶活力,且此作用可被纳洛酮逆转,体现了β-CM的阿片活性。小鼠在注射酸乳胃消化液30 min后达到最强的镇痛活性,痛阈提高率达到59.80%;注射纯化后的高剂量酸乳胃消化液使小鼠的平均游泳时间延长了18.94 min,表明酸乳胃消化液具有较好的抗疲劳作用。结论：人类在饮用酸乳后体内产生了β-CM,且酸乳β-CM具有阿片活性,能够对人体起到镇静舒缓、抗疲劳等功效。     

β-酪啡肽-7对大鼠血糖及脂质过氧化的影响

目的:观察β-酪啡肽-7(β-casomorphin-7,β-CM-7)对糖尿病大鼠的降血糖作用并初步阐明其作用机制。方法:2月龄SD雄性大鼠40只,用链脲佐菌素(STZ)致大鼠糖尿病,造模成功后将大鼠分为4个组:空白对照组、糖尿病对照组、胰岛素治疗组(优泌林3.7×10-8mol/(只.d))、实验组(β-CM-7 7.5×10-8mol/(只.d))。实验周期30d。测定血清中血糖含量、脂质过氧化物丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)的活性、胰岛素和胰高血糖素的含量以及腿肌糖原、肝脏糖原的含量。结果:β-CM-7组与胰岛素治疗组大鼠血糖明显下降;同时血清中MDA水平降低,SOD活性升高,与糖尿病对照组相比,具有显著性差异(P<0.05);β-CM-7组胰岛素含量较糖尿病组有所增加,肌糖原含量较空白组显著升高(P<0.05)。结论:β-CM-7具有减轻链脲佐菌素性糖尿病大鼠氧自由基损伤、促进胰岛素分泌、加速肌糖原的合成、降低血糖的作用。     

乳源酪啡肽的研究进展

80年代以来，国外一些学者相继从酪蛋白的酶解产物中发现生物活性肽，证明乳除了具有营养作用外，还具有重要的生理作用。酪啡肽就是其中重要的乳源阿片肽，自从1979年Brantl等人首先从酪蛋白的水解产物中分离到β-酪啡肽-7，对于酪啡肽的制备、分离、纯化等各个方面均有广泛的研究。随着具各种生物活性的短肽的不断发现，其研究和开发日益受到各国学者的关注。     

高效液相色谱法测定β-酪啡肽

以SinoChrom 300A C8柱为分离柱,对高效液相色谱法测β-酪啡肽进行了研究.结果表明,以水(内含体积分数为0.1%TFA)和体积分数95%乙腈(内含体积分数为0.1%TFA)分别为流动A相和B相,在梯度洗脱流速1.0 mL/min,检测波长215 nm条件下,β-酪啡肽-5和β-酪啡肽-7被有效分离且具有较大的响应值,峰面积和保留时间具有良好的稳定性.同时在β-酪啡肽-5和β-酪啡肽-7质量浓度分别为1.0 g/L和1.2 g/L时,进样体积与峰面积呈良好的线性关系(回归系数r分别为0.9950和0.9955).该法可快速准确分离分β-酪啡肽.     

乳源β-酪啡肽-5对C2C12细胞的抗氧化损伤作用

通过建立过氧化氢(H2O2)对C2C12细胞的氧化损伤模型,从细胞水平探讨β-酪啡肽-5(β-casomorphin5,β-CM5)对H2O2致氧化应激损伤的保护作用及其可能机制。方法：1) MTT法测定72h内β-CM5对C2C12细胞活力的影响,筛选安全剂量;2)测定不同浓度H2O2对C2C12细胞活力的影响,筛选H2O2的最佳剂量和作用时间;3)测定β-CM5对H2O2损伤后细胞活力的影响;4)检测培养液中超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的活性。结果：1)β-CM5各浓度组MTT值与对照组无差异;2)0.25mmol/L的H2O2作用于C2C12细胞 1h,MTT值显著低于对照组 (P＜0.01);3)与损伤组相比,β-CM5预保护组的MTT值显著升高(P＜0.05),治疗组MTT值无明显变化;4)与损伤组相比,β-CM5预保护组的SOD活性显著提高(P＜0.05),LDH活性显著下降(P＜0.05)。结论：β-CM5具有较强的抗氧化作用,对H2O2损伤的C2C12细胞有明显的保护作用,其机制可能与增强抗氧化酶活力和维持细胞完整性有关。     

β-酪啡肽-7生物活性肽的检测研究

研究了β-酪啡肽-7的分析检测方法。以β-酪啡肽-7标准品进行了色谱条件的探索,包括分离柱,流动相的选择以及柱温,柱压、流速、检测波长和灵敏度的选择,最后建立了简单有效的检测方法,并确定了β-酪啡肽-7高效液相色谱的检测条件。     

β—酪啡肽—7的多克隆抗体的制备

β-酪啡肽-7经戊二醛与牛血清白蛋白（BSA）交联后的复合物免疫伊莎蛋鸡5只。6个月后，对鸡血清、所产蛋的卵黄和卵黄氯仿抽提上清液进行琼扩效价分析，结果表明，血清抗体的最高效价达到1：8，后两者的效价为1：4。     

β-酪啡肽的生物活性的研究进展

酪蛋白(CN)约占牛乳蛋白的80%,主要由四种成分组成:α_s1-、α_s2-、β-和κ-。乳源中的主要生物活性多肽是由酪蛋白合成。酪啡肽通常是从β-酪蛋白得到,所以也称β-酪啡肽。β-酪啡肽(β-casomorphin,β-CM)作为来源于β-酪蛋白的小分子多肽,具有阿片肽活性,在过去几十年中,随着各种生物活性肽的研究发现,酪啡肽的研究受到了广泛关注,有关β-CM对健康的潜在影响的研究提供了更多结果。本文对这些研究进行了综述,强调了β-CM可以调整消化道的运动,影响胃肠内分泌,同时还能吸收进入血液,并且具有镇静止痛、诱导睡眠等作用,可以导致神经紊乱和神经元发育的改变。相反,β-CM的作用对其他非传染性疾病的发病或恶化的影响仍需要证据证明。总的来说,文献综述表明,“β-CM的生物活性”在人类营养中仍然是一个有趣的、但没有被详尽解释的话题。     

β-酪啡肽对早期断奶仔猪生长性能及小肠形态、菌群、吸收功能的影响

将26头21日龄早期断奶仔猪随机均分2组.在其日粮中添加β-酪啡呔,探讨β-酪啡呔对其生长性能及小肠形态、菌群、吸收功能的影响.经3周饲喂后发现①第1周至第3周的日增重分别提高33.33%(P<0.01)、16.13%(P<0.05)和2.5%(P>0.05),饲料转化率分别提高13.73%、6.11%和1.21%,腹泻率分别降低41.67%(P<0.05)、10%(P>0.05)和0%;②在第1周内能极显著(P<0.01)地改善小肠形态、菌群以及对D-木糖的吸收能力,而第2周后差异不再显著(P>0.05);③β-酪啡肽在仔猪早期断奶后1～2周内投喂,是缓解断奶应激最合理的一种经济方式.     

乳源肽的抗衰老功效研究

紫外照射是导致皮肤老化的主要外在因素。长期的紫外辐照会导致光老化现象,使皮肤弹性降低,胶原蛋白减少。本实验旨在探究预给予乳源肽对紫外照射后的人皮肤成纤维细胞的抗光老化效果。最终发现乳源肽能够抑制紫外照射导致的ROS升高,通过β-半乳糖苷酶活性（SA-β-gal）测定发现其能延缓细胞衰老,同时,能降低基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的m RNA的表达,抑制MMP-1的升高,从而促进I型胶原蛋白m RNA的表达,减少I型胶原蛋白的降解。研究表明,乳源肽在皮肤抗光老化方面有一定的功效,具有作为抗衰老功效原料的应用价值。     

南瓜籽蛋白肽对小鼠的抗衰老作用

为探究南瓜籽蛋白肽对D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠的抗衰老作用,该研究从不同分子量南瓜籽蛋白肽中筛选出抗氧化活性最强的组分进行动物实验。实验设正常对照组,模型对照组,南瓜籽蛋白肽低、中、高剂量[250、500、1 000 mg/（kg·d）]组。灌胃42 d后测定小鼠的体质量、脏器系数、代谢产物（肌酐、总胆固醇）含量及生化指标[总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性、单胺氧化酶（monoamine oxidase,MAO）活性、B淋巴细胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）含量和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)]活性。结果表明：分子量小于3 k Da的蛋白肽抗氧化活性最强。与模型对照组相比,南瓜籽蛋白肽中、高剂量组可改善衰老小鼠脏器系数,并使代谢产物（肌酐、总胆固醇）含量减少,同时南瓜籽蛋白肽高剂量组T-AOC、SOD活性和Bcl-2含量升高,MAO、Caspase-3的活性降低。说明南瓜籽蛋白肽可以有效改善衰老小鼠的脏器系数,抑制机体的氧化应...     

反相高效液相色谱法检测大豆蛋白外啡肽的研究

大豆蛋白序列中隐藏着外啡肽β-酪啡肽-3(β-CM-3)的片段,使得大豆肽食品中含有外啡肽β-CM-3成为可能,因此有必要对大豆肽食品进行外啡肽β-CM-3定性和定量的检测。采用反相液相色谱的方法,以β-酪啡肽-3标准品进行了包括分离柱、流动相的选择、柱温、柱压、流速、检测波长和灵敏度等色谱条件的探索,得出检测条件为波长220nm,柱温25℃,进样量10μL,采用等度洗脱,洗脱条件为:含0·1%TFA的14%乙腈溶液。流速0·9mL/min,洗脱时间为60min。该方法的相对标准偏差为4·07%,平均回收率为95·3%,最小检测浓度为0·4μg/mL。对照标准品保留时间和峰面积,得出酸性蛋白酶/Alcalase=4h/2h酶解液中含有目标外啡肽156·41μg/g。     

反相高效液相色谱法检测大豆蛋白外啡肽的研究

大豆蛋白序列中隐藏着外啡肽β-酪啡肽-3（β-CM-3）的片段,使得大豆肽食品中含有外啡肽β-CM-3成为可能,因此有必要对大豆肽食品进行外啡肽β-CM-3定性和定量的检测。采用反相液相色谱的方法,以β-酪啡肽-3标准品进行了包括分离柱、流动相的选择、柱温、柱压、流速、检测波长和灵敏度等色谱条件的探索,得出检测条件为波长220nm,柱温25℃,进样量10μL,采用等度洗脱,洗脱条件为:含0·1%TFA的14%乙腈溶液。流速0·9mL/min,洗脱时间为60min。该方法的相对标准偏差为4·07%,平均回收率为95·3%,最小检测浓度为0·4μg/mL。对照标准品保留时间和峰面积,得出酸性蛋白酶/Alcalase=4h/2h酶解液中含有目标外啡肽156·41μg/g。      

乳源β-酪啡肽-7对老年小鼠肝脏氧化应激的影响

观察乳源β-酪啡肽-7对老年小鼠肝脏氧化应激的影响。方法:32只老年雄性昆明小鼠随机分为四组(每组8只):模型对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,另设空白对照组,二月龄雄性昆明小鼠8只。对照组和模型组用0.9%的生理盐水连续灌胃30d,各剂量组分别灌胃β-酪啡肽-7溶液2×10-7mol/d、1×10-6mol/d、5×10-6mol/d。连续灌胃30 d后,小鼠颈椎脱臼处死,取肝脏等组织进行超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和单胺氧化酶(MAO)活性与丙二醛(MDA)含量测定。结果显示β-酪啡肽-7能显著提高老年小鼠肝脏超氧化物歧化酶活性(P0.05),谷胱甘肽过氧化物酶、单胺氧化酶活性变化无统计学差异,而低、高剂量组丙二醛含量显著增加(P0.05)。结论为β-酪啡肽-7有提高老年小鼠肝脏抗氧化应激的可能,其机制可能与提高老年小鼠肝脏的超氧化物歧化酶活性有关。     

β-甘露聚糖酶部分水解香豆胶对自然衰老小鼠的抗衰老作用

目的：研究部分水解香豆胶对自然衰老小鼠的抗衰老作用及其作用机理。方法：采用β-甘露聚糖酶水解香豆胶制备的部分水解香豆胶饮食干预自然衰老小鼠12 个月,观察小鼠大脑、肝脏、肾和结肠组织病理形态学变化并测定其血清中衰老标志物及总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）、过氧化氢酶（catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）水平和丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平,同时检测神经元数量、脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）及p53/p21/p16信号通路相关基因和蛋白的表达情况。结果：部分水解香豆胶能够有效提高衰老小鼠的存活率（约25.0%）,明显改善其反应性、脱毛程度;T-AOC、CAT活力和GSH-Px活力较自然衰老组小鼠分别增加78.1%（P＜0.05）、122.9%（P＜0.05）和2.7%,而MDA浓度降低40.3%（P＜0.01）;增加大脑海马CA1区中神经元和BDNF阳性细胞数量,抑制肝脏p53/p21/p16信号通路中p53、p21和p16基因和p53、p16蛋白的表达。结论：部分水解香豆胶具有显著抗小鼠衰老的作用,能够抑制由衰老诱发的氧化应激和脑损伤,具有作为抗衰老功能性食品配料的潜力。     

乳源β-酪啡肽-7对老年小鼠肠黏膜氧化应激的影响

探讨了乳源β-酪啡肽-7(β-Casomorphin-7,BCM-7)对老年小鼠肠黏膜氧化应激的影响。将36只老年雄性昆明小鼠随机分为4组,每组各9只;另有青年雄性昆明小鼠9只,设为空白对照组。低、中、高剂量组每只每天灌胃BCM-7溶液0.5 mL,浓度分别为2×10~(-7),1×10~(-6),5×10~(-6)mol/L;空白对照组和模型对照组按等体积的生理盐水连续灌胃30 d后,小鼠颈椎脱臼处死,取小肠黏膜组织进行超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及过氧化氢酶(CAT)含量测定。结果:低、中剂量组能显著提高小肠黏膜SOD活性;低剂量组能显著提高CAT活性,中、高剂量组可以提高CAT活性,但差异不具有统计学意义;低、中剂量组能降低MDA浓度,高剂量组能显著降低MDA浓度。结果表示:β-酪啡肽-7可以通过提高小肠黏膜SOD、CAT等抗氧化应激酶活性,缓解机体衰老引起的氧化应激产生的自由基对机体的损伤。     

含胶原蛋白肽饮品对衰老小鼠皮肤改善作用和抗氧化作用研究

目的 研究3款含胶原蛋白肽饮品对衰老小鼠的皮肤改善作用及抗氧化作用。方法 采取D-半乳糖诱导的衰老小鼠模型, 正常对照组每天腹腔注射生理盐水, 模型组和产品组每天对小鼠腹腔注射D-半乳糖120 mg/kg。各组小鼠每天按0.1 mL/10 g体积灌胃, 模型组及对照组灌胃生理盐水, 产品组灌胃相应体积样品, 连续8周, 各实验组剂量16.7 mL/(kg·d)。分别检测皮肤羟脯氨酸和透明质酸含量, 血清、肝脏、心脏中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量, 小肠和结肠的pH、短链脂肪酸含量。结果 相对于模型组, 3款胶原蛋白肽饮品均能提高衰老模型小鼠皮肤透明质酸和羟脯氨酸的含量、提升衰老小鼠的抗氧化能力(P<0.05), 表现为提高血清、肝脏、心脏的SOD和GSH-Px活性, 以及降低MDA浓度, 且3款饮品中以UKDNA胶原蛋白肽饮品的效果最好。对小肠、结肠内容物pH和短链脂肪酸(short chain fatty acids, SCFAs)含量检测显示, 3款饮品能提高结肠环境pH并对异丁酸、正戊酸以及总短链脂肪酸有显著影响(P<0.05)。结论 含胶原蛋白肽饮品可能通过提高机体抗氧化能力来改善衰老皮肤中透明质酸和羟脯氨酸含量。