基于UPLC-Q TOF-MS和HPLC-QQQ-MS技术的赤豆酚类化合物定性、定量分析及其抗氧化能力分析

为深入了解赤豆的营养价值,用80%甲醇溶液提取酚类物质,对提取物中不同存在形态的酚类化合物含量及其抗氧化活性进行测定,并对其80%甲醇提取物中酚类物质进行定性、定量分析。结果表明,赤豆80%甲醇提取物中酚酸含量为3.44 mg/g,黄酮含量为2.50 mg/g,其中3 种存在形式酚类萃取物含量及抗氧化能力不同,糖苷键合态酚酸含量最高,可达1.44 mg/g,游离态黄酮含量最高,可达0.85 mg/g;糖苷键合态亚铁离子还原能力最强,可达15.76 mmol/g,酯键合态1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、2,2′-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基清除能力最强;80%甲醇提取物通过超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱仪定性分析,初步鉴定出25 种化合物,包括3 种有机酸、6 种酚酸、16 种黄酮;高效液相色谱串联三重四极杆质谱联用仪定量分析可得,芦丁（327.40 μg/g）、儿茶素类（210.70 μg/g）含量丰富。     

青钱柳叶活性成分的抗氧化活性及UPLC-QTOF-MS/MS分析

利用96孔板法测定青钱柳叶不同溶剂(水、70%乙醇、乙酸乙酯和正己烷)提取物中总酚、总黄酮含量及抗氧化活性(DPPH自由基清除能力、还原能力、总抗氧化能力),考察酚类物质含量与抗氧化活性的相关性,并采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(ultra performance liquid chromatography coupled with quadrupole time-of-flight tandem mass spetrometry,UPLC-QTOF-MS/MS)分析提取物中主要活性成分。结果表明:不同提取物中总酚、总黄酮含量及抗氧化活性存在显著性差异且70%乙醇溶液提取物表现出最高的总酚(219.01 mg GAE/g)、总黄酮含量(7.23 mg CE/g)及最强的DPPH自由基清除能力(35.46 mg TE/g)和还原能力(1.89 mmol Fe SO_4/g);总酚、总黄酮含量与DPPH自由基清除能力、还原能力之间呈正相关,与总抗氧化能力呈显著负相关,表明多酚类物质是青钱柳中主要的抗氧化剂。UPLC-QTOF-MS/MS分析70%乙醇溶液提取物并初步鉴定出22种化合物,包括2种有机酸、4种酚酸、5种黄酮、8种三萜皂苷类和3种酯类,其中酚酸和黄酮类化合物是主要的抗氧化活性成分,有机酸、三萜皂苷及酯类化合物可能是潜在的抗氧化活性成分。     

4种柠檬不同组织的酚类物质分布及其抗氧化特性

采用分光光度计法评价4种柠檬(尤力克黄柠檬、小青柠、青柠檬、香水柠檬)中果皮与果肉的总酚含量与抗氧化活性(清除ABTS+自由基能力、铁离子还原能力和清除DPPH自由基能力),并用超高效液相色谱对其酚类物质进行定性和定量。结果表明:4种柠檬果皮中的总酚含量及抗氧化活性均显著高于果肉(P0.05),其中尤力克果皮与果肉的总酚、抗氧化活性均显著高于其余3个品种(P0.05),而香水柠檬果皮与果肉中总酚、清除ABTS+自由基能力均最低。不同品种柠檬中酚酸、类黄酮种类及含量差异较大。从4种柠檬中共检出21种酚类物质,其中酚酸6种,黄酮6种,黄烷酮6种,多甲氧基黄酮3种。柠檬中的酚类物质主要是黄烷酮,占类黄酮总量61.82%～91.61%,其中青柠檬果皮中酚酸总量最高(535.62 mg/100 g DW),尤力克果皮中类黄酮总量最高(1 506.33 mg/100 g DW),果肉规律与果皮基本一致,然而其含量显著低于果皮含量(P0.05)。从尤力克果皮与果肉中共检出15种酚类物质,其中圣草枸橼含量最高,而新绿原酸是含量最高的酚酸。从小青柠、青柠檬和香水柠檬的果皮与果肉中分别检测出19,16,15种酚类物质,其中橙皮苷含量均最高,而香草酸是含量最高的酚酸。不同品种柠檬的总酚和总类黄酮含量与ABTS+呈极显著的正相关性,同时总酚含量与DPPH呈显著性的正相关性。     

八种油茶蒲提取物中活性物质含量及其抗氧化能力的比较研究

采用分光光度法测定8种油茶蒲提取物中活性物质含量,结果表明8种油茶蒲提取物中活性物质含量都比较高,尤以普通油茶茶蒲含量最高(多糖含量>317 mg/g提取物,黄酮含量>35 mg/g提取物,皂苷含量>292 mg/g提取物,多酚含量>252 mg/g提取物)。油茶蒲提取物具有较强清除DPPH自由基能力(IC50<112μg/mL)及较高总抗氧化能力,通过相关性分析,发现油茶蒲提取物抗氧化能力与其多酚及多糖类物质含量具有显著相关性。采用高效液相色谱法分析测定8种油茶蒲提取物酚类物质组成,结果显示没食子酸、3-O-甲基鞣花酸-4’-O-β-D-吡喃葡萄糖(MEAG)、鞣花酸为主要特征化合物。活性物质含量及抗氧化能力测定结果表明,油茶蒲提取物有望作为一种天然抗氧化剂运用于食品、保健品及化妆品中。     

高粱米不同溶剂提取物的抗氧化活性研究

研究不同极性溶剂对高粱米提取物中活性物质含量及抗氧化活性的影响.结果表明,不同溶剂对高梁米中多酚、黄酮含量及抗氧化活性有明显的影响.80％丙酮提取物中的多酚、黄酮含量最高,分别为6.49 mg GA/g和61.2 mg/100 g,表现出较好的抗氧化能力.其次80％甲醇和80％乙醇提取物也表现出较好的抗氧化能力.与此相反,正己烷提取物中的多酚、黄酮含量最低,分别为1.30 mg GA/g和9.6 mg/100 g,抗氧化能力较差.相关性分析表明,提取物中的多酚、黄酮含量与其抗氧化能力有较高的相关性,说明高梁米不同提取物抗氧化能力的差异主要来源于提取物中抗氧化物质的量的差异.     

黑色小扁豆中不同结合态酚类含量、花青素组成及其抗氧化活性研究

黑色小扁豆因含有丰富的营养素、微量营养素和植物化学物成分而受到研究者的关注。为深入了解小扁豆的营养价值,对小扁豆中不同结合形态的酚类化合物含量及其抗氧化活性(亚铁离子还原能力、DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力)进行测定。结果表明,黑色小扁豆中不同存在形式的酚类提取物含量差异显著。酯键合态酚类提取物中含有较高的酚酸含量(1.61 mg/g),碱水解结合态酚类提取物具有较高的黄酮含量(1.07 mg/g)及抗氧化活性【亚铁离子还原能力(43.80 mmol/g)、DPPH自由基清除能力(2.13 mg/g)、ABTS清除能力(3.92 mg/g)】。对黑色小扁豆中存在的花青素进行提取和分析鉴定,其含有的花青素主要为飞燕草-3-O-(2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-α-L-吡喃阿拉伯糖苷)和矢车菊素衍生物。     

粟谷及全麦粉酚类物质含量及其抗氧化活性对比研究

对不同品种的粟谷全粉甲醇提取液的抗氧化活性及其中的抗氧化成分进行分析,并与全麦粉比较。选用5个代表性的粟谷品种,分析粟谷全粉甲醇提取液中的酚类物质、黄酮含量,采用高效液相色谱法分析其单体酚类的组成及含量,采用DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和铁离子还原能力3种方法评价其体外抗氧化能力差异。不同品种粟谷及全麦粉甲醇提取液清除DPPH能力的变幅范围为12.2~20.7 mg TE/(100 g DW),清除ABTS+能力的变幅范围为85.4~136.6 mg TE/(100 g DW),FRAP的变幅范围为32.8~52.8 mg TE/(100 g DW)。酚类物质含量的变幅为11.1~25.8 mg GAE/(100 g DW),平均值为19.8 mg GAE/(100 g DW)。黄酮含量的变幅为3.8~7.5 mg CE/(100 g DW),平均值为5.4 mg CE/(100 g DW)。在6种全谷物中,均未检测到单宁(缩合单宁)。北冀谷中结合态酚含量在78%以上,郑麦7698结合态酚占74%。粟谷全粉中含有较丰富的酚类物质,具有较强的抗氧化活性,其抗氧化能力与酚类物质、黄酮含量之间存在正相关关系,且有显著的品种间差异,可作为一种潜在的天然抗氧化剂资源进行开发利用。     

茵陈蒿不同溶剂提取物体外抗氧化活性分析

目的:探究茵陈蒿不同溶剂提取物的体外抗氧化活性,分析其与总黄酮、总酚含量的相关性及不同溶剂提取物中的黄酮成分,为茵陈蒿多元化应用提供理论依据。方法:以干燥后的茵陈蒿全株为研究对象,分别以70%乙醇、甲醇、乙酸乙酯、氯仿进行超声提取,检测提取物中的总黄酮、总多酚含量,分析提取物对DPPH~+·、ABTS~+·的清除能力和对铁离子的还原能力,以及总黄酮、总多酚含量与3种抗氧化活性之间的相关性,并采用HPLC法进一步分析提取物中黄酮成分。结果:不同溶剂提取物中的总黄酮、总多酚含量和抗氧化活性差异显著,其中70%乙醇提取物中总黄酮(151.02 mg芦丁/g)和总多酚(40.30 mg没食子酸/g)含量最高,且其铁离子还原能力(484.42 mg Trolox/g)明显高于其他溶剂提取物,其主要黄酮成分为金丝桃苷(2.503 mg/g)和槲皮素(0.043 mg/g)。结论:茵陈蒿70%乙醇提取物中总黄酮、总多酚含量最高,抗氧化活性最强,是天然抗氧化剂的良好来源。     

不同时期梨枣叶茶抗氧化成分组成及活性差异的分析

目的:探讨不同采收时期梨枣叶茶抗氧化成分的含量、组成及其活性的差异,揭示梨枣叶茶抗氧化功能品质随采收时期的变化规律。方法:以陕北地区5—8月份矮化密植枣园生长的梨枣嫩叶制成的梨枣叶茶为研究材料,比较总酚、黄酮和VC含量及酚类物质的组成及抗氧化能力(总还原力、DPPH自由基清除率和ABTS+.清除率)的差异性。结果:7月、8月加工的梨枣叶茶抗氧化物质含量及抗氧化能力高于5月和6月加工的梨枣叶茶。梨枣叶茶的酚类和黄酮类物质以及VC含量在不同时期呈现出显著性差异(P<0.05),其中总酚含量变化范围为(29.94±0.28)～(42.65±0.56)mg/g(以没食子酸计),黄酮含量变化范围为(16.61±0.39)～(25.21±1.53)mg/g(以芦丁计),VC含量变化范围为136.5～324.6mg/100g。梨枣叶茶检出的酚类物质主要为没食子酸、儿茶素、芦丁和槲皮素,它们的含量在不同时期也存在显著性差异(P<0.05),其中芦丁是含量最高的酚类物质,最高含量达到60.11mg/100g。梨枣叶茶抗氧化能力与总酚和黄酮含量分别呈现显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)相关性,与VC含量相关性不大。结论:夏季采收的梨枣叶茶抗氧化活性强,芦丁是构成梨枣叶茶酚类物质最主要的成分。     

滁菊的功能成分及其体外抗氧化活性

为明确滁菊中抗氧化活性物质的含量及其抗氧化能力,对其进行进一步的开发利用,对滁菊（Chrysanthemum morifolium Ramat）酚类、多糖、类胡萝卜素提取物抗氧化能力及含量进行研究。结果表明：滁菊总酚和黄酮含量较高,分别为53.67 mg/g和70.32 mg/g,高于大洋菊等菊花;多糖和类胡萝卜素含量较低。3 种提取物中,酚类抗氧化能力最强,对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）和2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS）阳离子自由基的清除能力分别为208.79 mmol/g和160.23 mmol/g,对Fe3＋的还原能力达到238.35 mmol/g,高于杭白菊等菊花。采用高效液相色谱法测定了滁菊酚类及类胡萝卜素单体组成,初步鉴定出滁菊含有绿原酸、儿茶素、咖啡酸、阿魏酸、金丝桃苷、槲皮素6 种单体酚,以及叶黄素和β-类胡萝卜素2 种类胡萝卜素单体。酚类物质中绿原酸含量最高,达到813.21 mg/g;金丝桃苷次之,达到408.17 mg/g;类胡萝卜素中叶黄素含量最高,为78.6 mg/g。在不考虑协同作用情况下,酚类物质中绿原酸对Fe3＋还原能力、DPPH及ABTS阳离子自由基清除能力的贡献均最大,类胡萝卜素中叶黄素对DPPH自由基的清除能力贡献最大。     

单花蜂蜜多酚类物质的抗氧化活性

以5种中国单花原蜜,不同产地的42个样本通过Amberlite XAD-2吸附树脂得到的多酚提取物为原料,采用分光光度法,测定总酚酸和总黄酮含量、还原能力、抗氧化活性(清除DPPH自由基、O2－ ·能力),评估蜂蜜多酚类物质抗氧化活性及蜂蜜品种、颜色和地域差异对清除自由基的影响。结果表明：样本总黄酮含量为(9.41±0.18)～(92.76±0.13)mg/kg;总酚酸含量为(9.10±0.05)～(149.57±0.14)mg/100g;深色枣花蜜抗氧化能力最强,对DPPH自由基、O2－ ·清除作用分别为EC50＝(0.042±0.014)g/mL和EC50＝(0.038±0.009)g/mL。提示蜂蜜的多酚类物质影响抗氧化活性,酚酸、黄酮含量与抗氧化能力呈现正相关系;色深原蜜的酚酸、黄酮含量高于色浅原蜜,抗氧化能力也强于浅色原蜜。     

发酵铁皮石斛花醇提物的抗氧化和美白活性研究

探究微生物发酵对铁皮石斛花功效活性的影响。分别将毕赤酵母、酿酒酵母、乳酸菌三株菌对铁皮石斛花进行纯种发酵,以80%乙醇为溶剂进行超声提取得到发酵铁皮石斛花乙醇提取物。测定其黄酮和总酚含量,通过DPPH、ABTS+自由基清除能力和总抗氧化能力测定,探究其发酵前后的抗氧化活性和抑制酪氨酸酶活性的美白功效。结果表明,经毕赤酵母发酵后的铁皮石斛花乙醇提取物中黄酮含量最高为13.17 mg/g,经酿酒酵母发酵铁皮石斛花乙醇提取物中总酚含量最高为1.04 mg/g。随着提取物浓度增大,提取物整体抗氧化能力逐渐增强,在1 mg/mL条件下,酿酒酵母发酵铁皮石斛花乙醇提取物的DPPH自由基清除率最高达81.5%,对ABTS+自由基清除率最高为66.9%,总抗氧化能力最强为1.03 mmol/g,乳酸菌发酵铁皮石斛花乙醇提取物的酪氨酸酶抑制率最高为37.8%。     

青海青稞、燕麦、藜麦营养品质及抗氧化活性比较研究

摘 要 以青海青稞、燕麦、藜麦3种杂粮为原料,比较分析其营养品质、多酚含量及抗氧化活性之间的差异。结果表明：青稞、燕麦、藜麦的营养品质差异显著（P<0.05）,其中青稞粗纤维（5.86%）及β-葡聚糖（3.61%）含量最高,燕麦抗性淀粉（18.39%）及直链淀粉（23.29%）含量最高,藜麦蛋白质（13.04%）及灰分（2.6%）含量最高。参试青稞、燕麦、藜麦均含有17种氨基酸,其中必需氨基酸有7种,燕麦的必需氨基酸含量最高,达529.3 mg/g,青稞达421.6 mg/g,藜麦达513.6 mg/g。酚类物质含量也存在较大差异（P<0.05）,青稞总酚含量最高,达414.55 mg/100g,藜麦次之（393.92 mg/100g）,燕麦最少（230.99 mg/100g）;总黄酮含量顺序依次是燕麦>青稞>藜麦,青稞中黄酮类物质以结合型为主,燕麦和藜麦中黄酮类物质以游离型为主;青稞游离型酚类提取物DPPH?自由基清除能力强于结合型酚类提取物,燕麦、藜麦结合型酚类提取物DPPH?自由基清除能力强于游离型,青稞、燕麦、藜麦游离型酚类提取物均具有较强的ABTS+?自由基清除能力和FRAP?铁还原能力。此结果为高抗氧化活性青稞、燕麦及藜麦的筛选、评价及开发利用提供了参考。     

‘鲁赫’刺蔷薇叶不同溶剂提取物的活性成分及抗氧化性比较

本研究以‘鲁赫’刺蔷薇叶为原料,采用超声波辅助提取法,用不同溶剂(蒸馏水、无水乙醇、20%乙醇,40%乙醇,60%乙醇,80%乙醇,正丁醇、丙酮和乙酸乙酯)对叶中总黄酮、总多酚和原花青素进行提取,测定提取液的抗氧化活性(DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力及总还原力),分析不同极性溶液对活性成分的提取效率,并评价抗氧化能力与活性成分的相关性。结果表明:不同极性溶剂提取效果不同,其中60%乙醇提取物具有最高的粗提物得率(23.76±0.04)%;60%乙醇提取物的总黄酮和总多酚含量均为最高,分别为74.29±0.01 mg/g和24.02±0.2 mg/g;80%乙醇提取物原花青素含量最高(12.92±0.46)mg/g。活性成分含量与抗氧化性之间呈正相关性。总多酚和总黄酮类化合物是‘鲁赫’刺蔷薇叶提取物抗氧化活性的主要贡献者。     

青柿蒂和成熟干柿蒂提取物的抗氧化和抑菌活性研究

比较新鲜青柿蒂和成熟干柿蒂提取物的抗氧化活性和抑菌活性,并分析其主要功能成分组成差异。2种不同柿蒂经粉碎后用65%的乙醇提取,再用正己烷、正丁醇和乙酸乙酯对乙醇提取物进行分离。对分离的各组分分析总酚含量、抗氧化活性和抑菌活性。对活性高的提取物进行多酚类化合物定性及定量分析。结果表明,青柿蒂提取物抗氧化、抗菌活性及总酚含量显著高于成熟干柿蒂提取物。在几种不同提取物中,青柿蒂的乙酸乙酯组分总酚含量最高、抗氧化和抗菌活性最强。对青柿蒂和干柿蒂的乙酸乙酯组分进行高效液相色谱分析,经与相关标准品对照,确定青柿蒂和熟柿蒂乙酸乙酯提取物的组分与含量分别为:儿茶素(57.67、11.86 mg/g),没食子酸(3.53、2.67 mg·g),槲皮素(32.4、18.33 mg/g)和芦丁(15.47、8.14 mg/g)。     

马铃薯抗氧化活性成分研究

分析了宁夏地区种植的8种马铃薯总酚、总黄酮含量,并采用高效液相色谱法测定马铃薯中酚酸种类及其含量;通过体外抗氧化评价模型比较8种马铃薯对超氧阴离子、羟基自由基、DPPH自由基、ABTS自由基清除能力及FRAP铁还原能力。结果表明:黑美人总酚含量最高,为400.38 mg/100 g,夏波蒂总酚含量最低,为233.93mg/100g;费乌瑞它黄酮含量最高,为107.39mg/100g,庄薯3号黄酮含量最低,为33.17mg/100g;所有品种马铃薯的主要酚酸物质均为绿原酸,其中黑美人含量最高(91.46%);绿原酸含量与酚酸、黄酮含量呈极显著正相关性(P0.01);酚酸含量与ABTS自由基清除能力相关性最大;黄酮含量与羟基自由基清除能力呈极显著负相关(P0.01);绿原酸含量与ABTS自由基清除能力相关性最大。     

干燥方式对柠檬片中游离态、结合态多酚及抗氧化特性的影响

采用冷冻干燥(FD)、热风干燥(AD)、红外干燥(IRD)及真空干燥(VD)对柠檬片进行干制,利用分光光度法测定游离态、结合态多酚含量及抗氧化能力(清除ABTS·+能力、铁离子还原能力和清除DPPH·能力),并采用超高效液相色谱对酚类物质进行定性和定量分析。结果表明,4种干制柠檬片结合态多酚含量、清除ABTS·+能力、铁还原能力均分别高于游离态多酚的相应含量及能力,而其游离态多酚清除DPPH·能力均低于结合态多酚。4种干制柠檬中主要酚类物质为类黄酮,其含量显著高于酚酸含量;柠檬中游离态多酚主要为橙皮苷、圣草枸橼苷和芦丁,三者含量占游离态多酚总量的91.18%～94.92%;结合态多酚主要为原儿茶酸、柚皮苷和橙皮苷,三者含量占结合态多酚总量的81.83%～83.64%。热处理对柠檬中酚类物质呈现不同影响。与FD处理相比,热处理导致柠檬中总酚、总酚酸与结合态多酚含量下降,游离态酚酸总量、生物利用多酚含量及其生物利用度上升;而结合态类黄酮总量上升,游离态类黄酮总量下降。其中3种热处理干燥方式中,AD处理组酚酸与类黄酮总量均为最高,分别为325.77 mg/100 g DW和2 317.57 mg/100 g DW。     

不同花中总黄酮的提取及其抗氧化强度的比较

以80%乙醇作提取剂对20种常见饮用花中的总黄酮类物质进行提取,然后采用流动注射化学发光法对总黄酮的抗氧化性与稳定性进行研究.实验结果表明:各种花的黄酮提取物都具有一定的抗氧化作用,且有较好的稳定性,其中芍药花、金莲花、玫瑰王黄酮含量明显高于其他17种花,三者的黄酮含量分别为8.15 mg/g、7.79 mg/g,7.78 mg/g(以干重计),抑制率分别为91.0%,82.6%,82.5%.     

四种谷物中多酚含量的测定及抗氧化特性研究

对玉米、燕麦、小麦、糙米四种全粒谷物中的多酚物质(可溶性多酚、不溶性多酚、阿魏酸、黄酮等)含量进行测定,并对提取物的抗氧化特性进行研究。结果表明:总酚含量最高的是玉米(49.13±3.39mg/100g),其次是糙米(23.49±3.37mg/100g)和小麦(18.60±3.52mg/100g),燕麦中总酚含量最少(13.92±4.56mg/100g);谷物中多酚主要以结合形式存在(玉米95.54%,糙米90.76%,小麦89.46%,燕麦86.85%);阿魏酸是主要的多酚物质,且可溶性和不溶性阿魏酸的比例为玉米1∶34、糙米1∶33、小麦1∶17、燕麦1∶5;玉米不溶性提取物清除O2-能力最高(95.01%±2.25%),该提取物抗油脂氧化能力也最高(POV=34.23±2.61mmol/kg)。     

苦荞麦黄酮提取最佳条件及抗氧化研究

研究从荞麦中提取黄酮类化合物的最佳方法及该提取物的抗氧化性.采用三水平四因素正交试验方案,研究水浴法和超声法提取黄酮类化合物的最佳条件,并对这两种方法进行了比较.通过DPPH体系法研究该提取物对DPPH的清除率及其抗氧化性能.试验结果表明:水浴法:在料液比1:15的条件下,用70%丙酮80℃浸提1h,类黄酮化合物得率最高,荞麦皮的黄酮得率1.178mg/g.超声法:用15倍于原料的55%丙酮超声提取30min,类黄酮化合物的提取率最高,荞麦皮的黄酮得率0.854 mg/g.抗氧化试验表明:黄酮具有较强的抗氧化能力,其抗氧化性随浓度的升高而增强.