HPLC法测定大豆磷脂及其保健品中PC、PI、PE

建立了高效液相色谱紫外检测器测定大豆保健品中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定方法。采用NH2色谱柱(3.0 mm×150 mm×5μm),流动相为乙醇∶乙腈∶水=50∶40∶10(体积比),流速0.4 m L/min下,紫外检测器波长为206 nm处进行测定。样品经正己烷∶异丙醇=1∶1(体积比)混合液溶解并使用流动相稀释后直接进样分析。在线性范围内相关性良好,相关系数R2≥0.999,各添加水平回收率为91.12%~105.61%,RSD为4.85%,日内和日间精密度均小于4%,磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇定量限分别为1.5 mg/L、1.2 mg/L和0.9 mg/L。本方操作简单、准确、成本低,适合于分析大豆磷脂及其保健品中三种主要磷脂的含量。     

高效液相色谱法测定大豆磷脂类保健食品中的磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇

目的建立高效液相色谱检测法测定大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱(phosphatidylcholines,PC)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine, PE)、磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol, PI)含量的方法。方法大豆磷脂类保健食品试样经正己烷:异丙醇(1:1, V:V)提取,经氨基柱(250 mm×4.6 mm, 5μm)分离,以流动相为无水乙醇-乙腈-水(50:40:10, V:V:V)为流动相等度洗脱,流速为0.4 mL/min,检测波长为205 nm,外标法定量。结果磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇在一定浓度范围内线性关系良好,相关系数大于0.999;检出限分别为1.3、5.0、1.0 mg/g,加标回收率分别为95.5%、99.5%、94.9%,精密度均为0.3%。结论本方法准确度高、重复性好,适用于保健食品中磷酯类物质含量的测定。     

高效液相色谱法测定磷脂软胶囊中磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰乙醇胺的含量

目的建立高效液相色谱法同时检测磷脂软胶囊中磷脂酰胆碱(phosphatidyl cholines, PC),磷脂酰乙醇胺(phosphatidyl ethanolamine, PE),磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol, PI)3种组分的含量。方法样品用甲醇超声提取后,经Bridge?HILIC色谱柱(4.6 mm×150 mm, 5μm)分离,以0.9 mmol/L甲酸铵溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长为205 nm,外标法定量。结果磷脂酰胆碱,磷脂酰乙醇胺,磷脂酰肌醇在浓度0.025～0.250mg/mL范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,检出限分为0.300～1.386 mg/g,定量限为1.002～4.624 mg/g,加标回收率分别为90%～105%,相对标准偏差为1.0%～4.0%。结论该方法高效,便捷,准确度高,适用于磷脂软胶囊中3种磷脂成分的同时检测。     

卵磷脂类保健食品中PE、PC的高效液相色谱测定

为准确快速地对卵磷脂保健食品中有效成分进行定量分析 ,我们建立了卵磷脂保健食品中磷脂主要组分磷脂酰胆碱 (PC)、磷脂酰乙醇胺 (PE)的高效液相色谱测定方法。方法的日间精密度为 5 4 %～ 9 0 %;PE、PC的加标回收率分别为 83 0 %～ 10 5 6 %和 81 3%～ 86 0 %,均可满足卫生分析的要求。对 5种卵磷脂保健食品中的PC、PE的含量进行了测定 ,PC、PE的含量分别为15 2 %～ 2 4 2 %和 3 1%～ 6 1%。方法的样品前处理方法简单 ,且检测灵敏度高 ,分析速度快 ,适于在国内推广使用     

蜂王浆中链霉素残留的提取、净化及液相色谱测定方法研究

本实验对蜂王浆中链霉素残留的提取净化及液相色谱检测方法进行研究。蜂王浆样品用含有蛋白沉淀剂的磷酸提取液(pH2.0)溶解,超声波辅助提取蜂王浆中的链霉素残留。样液经离心后,分别用阳离子交换柱和反相固相萃取柱净化。采用柱后衍生-高效液相色谱梯度洗脱与荧光检测分析蜂王浆中的链霉素残留。以Atlantis HILIC Silica(2.1mm×150mm,3.0μm)为色谱柱,以酸性水溶液和乙腈为流动相,链霉素在25min内实现较好的分离,方法快速准确,灵敏度高,是一种较好的定性和定量方法。所研究的提取净化方法及色谱分离条件能有效排除蜂王浆中的杂质干扰,添加回收率在71.7%～77.4%之间,方法检出限为10μg/kg。     

大豆糖蜜中磷脂的分离纯化研究

以大豆糖蜜酸沉沉淀物为原料,通过乙醇-正己烷萃取,丙酮萃取制备粉末磷脂,并从粉末磷脂中纯化出磷脂酰胆碱组分。结果表明,制取粉末磷脂的最适条件为：乙醇与正己烷体积比为1：1,丙酮萃取的最适溶料比为8：1,搅拌萃取时间30min,萃取次数3次。采用氧化铝柱分离纯化,用95％乙醇和不同梯度的氯仿-甲醇作为洗脱剂得到的磷脂酰胆碱产品纯度分别为98．59％和74．40％,磷脂酰胆碱的回收率分别为78．74％和98．97％。     

刺参多糖中糖醛酸、氨基糖和中性单糖的同步测定方法研究

建立柱前1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生高效液相色谱法(HPLC)测定刺参多糖中糖醛酸、氨基糖和中性单糖的方法。刺参多糖用2mol/L三氟乙酸水解、PMP衍生化后,用反相HPLC检测,实现了糖醛酸,氨基糖和中性单糖的良好分离和测定。测定结果表明,刺参多糖含有甘露糖、半乳糖、岩藻糖、氨基葡萄糖、氨基半乳糖和葡萄糖醛酸6种单糖。该方法简便快捷,灵敏度高,重现性良好。     

粮谷中苄嘧磺隆残留量检验方法研究

粮谷中残留的苄嘧磺隆用二氯甲烷溶液提取,提取液经浓缩正己烷净化后,用C18固相萃取柱及氟罗里硅土柱净化,用配有紫外检测器的液相色谱仪测定,Agilent C1B色谱柱;谱温30℃;UV波长238 nm;流动相:乙腈:水=4:6;流速1 mL/min;进样量10μL;外标法定量,方法简单、准确,精密度和重现性良好,回收率为84.8%～89.8%,RSD在6.6%范围内.     

乳制品中游离甘氨酸的测定

建立了高效液相色谱法测定乳制品中甘氨酸质量浓度的方法。采用色谱柱为waters氨基酸色谱柱,流动相缓冲液A和缓冲液B,流速为0．4mL／min,激发波长338nm,发射波长425nm。结果表明,甘氨酸的最低检出限为0．03mg／L,回收率为99．88％,变异系数（CV％）为0．42。     

HPLC法测定刺嫩芽皂甙中齐墩果酸的含量

建立刺嫩芽皂甙中齐墩果酸的含量测定方法.方法:采用HPLC,选用C18色谱柱,以乙腈-水(85:15)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长215 nm.此方法在浓度为0.012 5 mg/mL～1.0000mg/mL范围内线性关系良好(R2=0.999 5),平均回收率为101.7%,RSD=0.868%(n=6).该色谱条件下齐墩果酸测定方法的专属性好,可用于刺嫩芽皂甙中齐墩果酸含量测定的方法学研究.     

柱层析法分离大豆磷脂

通过实验探讨了使用低压制备色谱柱在等度洗脱方式下分离大豆磷脂中的磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰胆碱(PC)等成分.结果表明,在使用100cm×26 mm规格的色谱柱、氯仿-甲醇(2∶1)作为流动相、流速控制在3.0 mL/min,负载量为0.25 g/150 g硅胶(100～200目)的条件下可以分离得到PI纯度在90%以上、PE纯度在80%以上、PC纯度在95%以上的各种产品.     

HPLC-ELSD法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱含量

该研究探讨采用HPLC–ELSD(蒸发光散射检测器)法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱含量。结果表明,选用硅胶色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),磷脂酰胆碱(PC)和溶血磷脂酰胆碱(LPC)分别在0.5 mg/mL~8.0 mg/mL和0.4 mg/mL~6.0 mg/mL范围呈良好线性关系;PC和LPC平均回收率为99.42%和99.83%,相对标准偏差(RSD)分别为1.44%和1.21%。该法对大豆磷脂PC和LPC分析均具有良好精密度和重复性。     

柱色谱法制备高纯大豆卵磷脂和脑磷脂研究

以大豆油脚为原料,采用溶剂萃取法和柱色谱法相结合的工艺制备高纯卵磷脂和脑磷脂,研究了不同洗脱剂及不同洗脱模式对卵磷脂和脑磷脂柱色谱分离效果的影响.实验结果表明:大豆油脚先经脱水、脱油,再经95%乙醇浸提后粗分为粗卵磷脂和粗脑磷脂,以硅胶为吸附介质,分别进行柱色谱分离.粗卵磷脂为原料用无水甲醇作为洗脱剂等度淋洗,可获得大量相对含量为91.9%的卵磷脂和少量含量为74.2%的脑磷脂产品;粗脑磷脂为原料用氯仿-甲醇(2:1,V/V)、无水甲醇的梯度淋洗模式,可获得少量含量96.7%的高纯卵磷脂和大量含量82.1%的脑磷脂产品.     

脂肪酶催化棕榈酸和大豆磷脂的酸解反应研究

以大豆磷脂为原料,LipozymeTLIM为酶试剂,正己烷为溶剂,棕榈酸为酰基供体,对大豆磷脂和棕榈酸进行酶法酸解研究。通过实验得出较优的反应条件:液料比(正己烷/磷脂)5∶1,底物摩尔比(棕榈酸/磷脂)5∶1,加酶量(以底物总量为准)20%,反应温度65℃,反应时间60h,水分添加量(以酶量为准)2%,该条件下验证得磷脂中棕榈酸的含量可达到34.45%。     

正相色谱法测定大豆磷脂中的磷脂酰胆碱

目的建立正相色谱法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱含量,用于大豆磷脂类保健食品生产过程中该物质含量的测定和质量控制。方法采用硅胶柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm)进行分离;色谱条件为流动相:异丙醇:正己烷:蒸馏水=70:16:14(V:V:V),等度洗脱,流速:1.0 m L/min;柱温:40℃;进样量:10μL;检测波长:205nm;并进行方法学验证,考察方法检测限、精密度、回收率等指标。结果磷脂酰胆碱峰面积与其浓度呈良好的线性关系,线性范围为0.1~0.8 mg/m L(r=0.9999),检出浓度0.04μg/m L,检出限为20μg/g,定量限为66.666μg/g,精密度(RSD)为0.6%,平均回收率99.37%(n=9)。结论本文建立的方法灵敏度高,重复性好,且具有很好的专属性,能够应用于大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱含量的检测。     

超临界CO2从大豆粗磷脂中萃取分离磷脂

以大豆粗磷脂为原料,通过超临界CO2萃取进行了提纯磷脂的研究。考察了萃取温度、萃取压力、萃取时间对萃取效果的影响,并通过正交实验对萃取磷脂工艺条件进行了优化。实验结果表明,最佳工艺参数为:萃取压力35 MPa,萃取温度50℃,萃取时间5.5 h。在最佳条件下,提纯磷脂中丙酮不溶物达98.2%。     

大豆磷脂中卵磷脂检测方法的研究

采用高效液相色谱法对大豆磷脂中的磷脂酰胆碱进行检测,详细介绍了样品的预处理、检测设备和检测条件。试验确定了最佳检测条件:流动相为正己烷-异丙醇-醋酸(1%,V/V)(8∶8∶1,V/V/V);色谱柱Lichroisorb Si-60(4.6mm×250mm×5μm);检测波长203nm;流速1mL/min;柱温30℃。     

大豆磷脂软胶囊中铅、铬、镉、砷4种微量重金属的检测方法研究

为了方便、快速、准确地检测大豆磷脂软胶囊中铅、铬、镉、砷4种微量重金属元素的含量,建立了一种冷冻快速粉碎-微波消解的前处理方式,采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)进行测定。试验结果表明:经冷冻快速粉碎后的软胶囊壳颗粒均一;微波消解耗时短、操作简便、耗费试剂少,ICP-MS测定结果显示铅、铬、镉、砷4种重金属的平均回收率在82. 6%～92. 9%之间。试验结果满意,可为日常工作中测定软胶囊类产品中重金属前处理作参考。     

贫水相磷脂改性及改性产品性能的研究

以大豆浓缩磷脂为底物,探讨了贫水相中磷脂酶A1改性大豆浓缩磷脂的可行性。利用单因素实验确定了最佳反应条件,同时对产品的乳化性能进行了研究。实验获得的最佳反应条件为:反应温度50℃,加酶量500μg/g,初始pH 6,反应时间12 h,底物大豆浓缩磷脂质量分数75%。在此条件下所得改性产品的HLB值为10。     

大豆混合油中磷脂反相胶束分子量分布的测定

用截留分子量为1、2、10、20万的无机陶瓷膜超滤浓度为24.7%(W/W)的大豆混合油,测定了不同膜管截留分子量在不同超滤温度的磷脂截留率.超滤温度为50℃时,截留分子量1万的膜对磷脂的截留率为98.3%.分析了大豆混合油中磷脂反相胶束的分子量分布和温度的关系.温度越高,磷脂反相胶束的分子量越大,越有利于超滤脱胶的进行.