蛋白C系统的放射免疫分析

蛋白C系统是机体重要的凝血反应调节系统,该文组合生化和免疫化学技术分别从人尿中提纯了血栓调节素和从利凡诺去白蛋白人血浆中纯化了蛋白C、蛋白S和蛋白C抑制物。免疫家兔产生抗血清。用氯胺T法制备了~(125)Ⅰ-蛋白C和~(125)Ⅰ-蛋白S,Iodogen法制备了~(125)Ⅰ-蛋白C抑制物,Bolton-Hunter法制备了~(125)Ⅰ-血栓调节素。采用平衡法分别建立了上述四种化合物的放射免疫分析。蛋白C、蛋白S、蛋白C抑制物和血栓调节素的分析灵敏度分别为3.94μg/L、9.87μg/L、2.58μg/L和6.16μg/L;批内和批间CV为4.40％和9.68％、4.99％和13.14％、2.73％和8.62％、5.10％和10.94％;平均回收率为104.28％、94.30％、101.89％和105.22％;工作范围为6.25～1024μg/L、21～700μg/L、4.8～1024μg/L和8.1～560μg/L。四种方法与其检测的相似化合物均无交叉。初步应用效果满意,该方法可为血栓栓塞性疾病的诊疗提供有效手段。     

蛋白C系统的放射免疫分析

蛋白C系统是机体重要的凝血反应调节系统,该文组合生化和免疫化学技术分别从人尿中提纯了血栓调节素和从利凡诺去白蛋白人血浆中纯化了蛋白C、蛋白S和蛋白C抑制物。免疫家兔产生抗血清。用氯胺T法制备了~(125)I-蛋白C和~(125)I-蛋白S,Iodogen法制备了~(125)I-蛋白C抑制物,Bolton-Hunter法制备了~(125)I-血栓调节素。采用平衡法分别建立了上述四种化合物的放射免疫分析。蛋白C、蛋白S、蛋白C抑制物和血栓调节素的分析灵敏度分别     

99mTc-C50的生物性能和安全限度实验研究

为评价2－亚氨基噻吩盐酸盐（2－IT）法标记的抗结肠癌（CEA）单克隆抗体^99mTc-C50的生物学性能及标记化合物应用的安全性，采用2－IT法对C50化学修饰，以^99mTc-GH转络合法标记C50。对标记抗体进行免疫活性、稳定性和安全限度的试验，并对荷人结肠癌裸鼠进行放射免疫显显像。结果表明，标记抗体免疫活性为40．2％－73．2％，纸层析法测定最佳标记率为94．1％，胶体含量为3．8％，标记后12h内放化纯度均在90％以上。标记化合物无热源，无毒性，荷人结肠癌裸鼠尾静脉注入^99mTc-C50后放射免疫显像显示，6h肿瘤区有放射性浓集，24hT/NT值为3．46－4．68％。表明以2－IT法预处理抗CEA单抗能有效进行^99mTc标记，对蛋白活性损伤较少，标记方法简单，安全有效。     

经Avidin—Biotin系统^99mTc标记单抗及其在荷瘤裸鼠体内分布研究

采用Ａｖｉｄｉｎ－Ｂｉｔｉｎ系统进行了抗人黑色素瘤单抗Ｎｇ７３的＾９９ｍＴｃ标记、研究了标记条件，方法和标记抗体在荷裸鼠活体内的生物学分布１。结果表明，ｐＨ＝８和ＳｎＣｌ２适量时标记效果最好；两步法Ｂ的Ｔ／ＮＴ和ＩＤ％／ｇ值均明显优于两步法Ａ。经Ａｖｉｄｉｎ－Ｂｉｏｔｉｎ系统＾９９ｍＴｃ标记单抗可用于放射免疫显像。     

人心肌酸性铁蛋白与肝癌关系的研究

从人心肌组织中提纯了酸性铁蛋白,免疫家兔产生抗血清,氯胺-T法制备了~(125)I-酸性铁蛋白和~(125)I-抗酸性铁蛋白H亚基单抗。分别采用平衡法和顺序饱和法建立了酸性铁蛋白放射免疫分析和酸性铁蛋白H亚基免疫放射测量分析。它们的批内CV分别为1.65％和2.44％,批间CV为9.71％和10.16％,回收率为102％和92.29％,ED_(50)为27.50μg/L和23.05μg/L。前者的可测范围为7.0～369.6μg/L,后者的灵敏度为0.736μg/L。两方法     

低能N+注入诱导大肠杆菌的16S rRNA遗传进化

为了探究低能N⁺注入对大肠杆菌16S rRNA遗传进化与耐药表征的作用,本研究利用低能N⁺注入诱变筛选耐药大肠杆菌,通过基因组de novo测序获得其16S rRNA基因序列,通过K-B法检测诱变菌株的耐药特征。结果共诱变获得了25株耐药菌株,其中5株诱变菌16S rRNA基因分别出现片段缺失,点突变(A257C),GC%含量增高,二级结构变异,并获得多药耐药特性。结果提示：低能N⁺注入可以驱动大肠杆菌16S rRNA基因的随机突变和进化,进而调节耐药基因从头合成或变异,使大肠杆菌耐药性改变。     

MEK特异性抑制剂U0126对A549细胞的放射增敏作用及机制研究

采用克隆形成实验检测U0126对A549细胞的放射增敏作用;MTT法检测U0126联合X-射线对A549细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测U0126联合X-射线对A549细胞周期的影响;蛋白免疫印迹杂交法检测p-erk蛋白在A549细胞中的表达;衰老相关β-半乳糖苷酶染色检测A549细胞衰老的变化。结果显示,U0126使p-erk蛋白表达下降,能够增加A549细胞的放射敏感性,放射增敏比为1.18。单纯使用U0126能明显抑制A549细胞的增殖,诱导G1期细胞阻滞并具有时间依赖性和剂量依赖性。U0126联合X-射线也能抑制A549细胞的增殖,增强G1期细胞阻滞现象和细胞衰老现象。以上结果表明,U0126能增加A549细胞的放射敏感性,其作用机制可能与细胞周期阻滞及细胞衰老增强有关。     

血管内皮细胞表面血栓调节蛋白放射免疫法的建立及其应用

用~(125)I标记抗人血栓调节蛋白单克隆抗体SZ-53,建立了人血管内皮细胞膜表面血栓调节蛋白的放射免疫测定法。用本法测得每个人脐静脉内皮细胞膜表面有436000～52400个血栓凋节蛋白分子。新灯盏花素和~(60)Co辐照可促进内皮细胞膜血栓调节蛋白的表达,而凝血酶则可降低TM的表达。本法为深入研究内皮细胞血栓调节蛋白的结构和功能以及研究血管内皮细胞的抗血栓作用提供了有用的工具。     

血管内皮细胞表面血栓调节蛋白放射免疫法的建立及其应用(英文)

用~(125)I标记抗人血栓调节蛋白单克隆抗体SZ-53,建立了人血管内皮细胞膜表面血栓调节蛋白的放射免疫测定法。用本法测得每个人脐静脉内皮细胞膜表面有43600～52400个血栓调节蛋白分子。新灯盏花素和~(60)Co辐照可促进内皮细胞膜血栓调节蛋白的表达,而凝血酶则可降低TM的表达。本法为深入研究内皮细胞血栓调节蛋白的结构和功能以及研究血管内皮细胞的抗血栓作用提供了有用的工具。     

单次化疗后肿瘤内99Tcm-Annexin Ⅴ的分布与bcl-2、bax

目的 评价应用99Tcm-rh-AnnexinⅤ显像检测单次化疗后肿瘤细胞凋亡的可行性，并探讨其在肿瘤组织内的分布与凋亡调控蛋白bcl-2、bax表达的相关性。方法 采用直接标记法标记rh-AnnexinⅤ作为核素凋亡显像示踪剂。将小鼠肝癌细胞（Hca-F25）接种于小鼠右腋下部位；随机分为A（n=9，对照组）、B（n=10，化疗组）两组，8d后肿瘤生长至直径约1cm时，B组一次性接受环磷酰胺（cyclophosphamide）腹腔内注射，剂量为150mg/kg；20h后两组同时由鼠尾静脉注入99Tcm-rh-AnnexinⅤ；4h后行SPECT显像并处死、取材，应用井型闪烁探测器检测荷瘤小鼠肿瘤组织内示踪剂分布，以%ID/g（每克组织百分注射剂量率）表示。采用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡；采用采用免疫组化SP法检测标本中bcl-2、bax蛋白表达。结果 单次化疗后B组肿瘤组织的%ID/g、TUNEL检测阳性细胞数及bax蛋白表达均明显多于A组（P<0.01）；bcl-2蛋白表达A、B两组间差异无显著性（P＝0.220）；A组bcl-2/bax明显高于B组（P<0.01）。相关性研究表明，在A、B组中肿瘤组织的%ID/g与TUNEL阳性细胞数均呈明显正相关（r=0.801，r=0.769），而bcl-2蛋白表达与bax蛋白表达间无明确相关性；A组肿瘤组织内bcl-2、bax蛋白表达与肿瘤组织的%ID/g及TUNEL阳性细胞数均无明确相关性；B组肿瘤组织内，bcl-2蛋白表达与%ID/g及TUNEL阳性细胞数均无明确相关性，bax蛋白表达与%ID/g及TUNEL阳性细胞数均呈明显正相关（r＝0.849、0.652），而bcl-2／bax比值与%ID/g及TUNEL阳性细胞数均呈明显负相关（r＝－0.820、－0.694）。结论 肿瘤组织内99Tcm-rh-AnnexinⅤ的分布可以反映化疗后早期肿瘤组织细胞凋亡的状况以及凋亡调控蛋白bax表达水平的变化。     

D-T中子照射下含硼聚乙烯球泄漏γ能谱测量

为了更清楚地了解含硼聚乙烯的屏蔽性能,用反冲电子法测量了D T中子照射下的不同B4C含量的聚乙烯球的泄漏γ能谱,并用MCNP/4A程序和ENDF/BⅤ库数据进行模拟计算。实验测量值和计算值在误差范围内符合得较好。     

时间分辨荧光免疫分析和放射免疫分析测量精度的比较

采用时间分辨荧光免疫分析和放射免疫分析法对血清样品进行分析，对其加样精度，测定精度和系统精度进行了比较。结果表明：（1）血清加样时，手动加样CV＞3．4％，自动加样CV＜0．7％，P＜0．001，试剂加样时，手动加样CV＞1．3％，自动加样CV＜0．3，P＜0．001。（2）测量精度，放免法CV＝2．4％，时间分辨法CV＝0．8％，P＜0．001。（3）系统精度，放法CV＝3．6％，时间分辨法CV＝1．3％，P＜0．001。以上结果提示：时间分辨荧光免疫分析在加样精度，测定精度和系统精度上都显著优于放射免疫分析。     

乳铁蛋白的分离及其放射免疫测定的临床应用

报道了乳铁蛋白(LF)的一种新的分离、纯化方法,LF的放射免疫测定(LF-RIA)及其在临床肺癌诊断上的应用。结果表明:此LF分离、纯化方法产率高,省时、经济,优于以往报道的LF分离、纯化方法;所建立的LF-RIA效果良好,其批内和批间的CV分别为4.77％和13.59％,回收率达97.99％,与人血清转铁蛋白无交叉反应;对36例肺癌、21     

Calyculin A诱导早熟染色体凝聚的电离辐射剂量效应曲线

以Calyculin A诱导早熟染色体凝聚(PCC)方法,探索G2/M-PCC细胞中PCC环用于分析电离辐射损伤程度的可行性,用0—20 Gy(剂量率为1 Gy/min)的60Coγ射线照射外周血,培养48 h并用Calyculin A诱导PCC。分析各剂量点G2/M-PCC指数、判断观察到的PCC环是否符合泊松分布,建立PCC环率与剂量之间的剂量效应曲线。结果发现,用Calyculin A可成功诱导人外周血淋巴细胞产生PCC,且G2/M-PCC指数随着剂量水平的增高而降低。除20 Gy剂量外,0—16 Gy各剂量点样品中PCC环的分布符合泊松分布。PCC环率随着剂量增加而增加,剂量-效应曲线可以拟合成y=0.0128x+0.0104直线方程,测得R2=0.9898(y为PCC-R率,x为剂量);二次多项式方程为y=0.00002x2+0.0085x+0.0011 R2=0.9996。由此可见,Calyculin A诱导淋巴细胞G2/M-PCC中的PCC环率可用于生物体电离辐射损伤程度测定。     

一种综合性高精度放射免疫分析数据处理系统

介绍一种新的放射免疫分析数据处理系统，该系统以世界卫生组织推荐的最新数学模型四参数ｌｏｇｉｓｔｉｃ方程和四参数单位点质量作用模型以及五参数ｌｏｇｉｓｔｉｃ方程为依据。首次提出了将最优化算法的直接搜索法和传统的非线性回归相结合的新的拟合方法，成功地实现了五参数ｌｏｇｉｓｔｉｃ模型的高精度自动拟合，该系统还具有完善的质量控制和数据管理功能。     

G(E)函数在高能γ射线剂量测量中的应用

利用蒙特卡罗方法模拟了一个Φ7.62 cm×7.62 cm的Na I(Tl)探测器的响应特性,计算了测量系统的脉冲幅度加权函数G(E),由此改善了探测器的能量响应;利用238Pu+13C源的验证实验表明,探测器对高能γ射线探测效率的实测值和计算值的相对偏差在±10%以内。在核电厂功率运行期间,测量了反应堆厂房内的γ能谱,并基于G(E)函数计算了高能γ射线的剂量。G(E)函数法与解谱方法的计算结果对比说明,将G(E)函数法应用于高能γ剂量测量是可行的。     

135°伴随粒子法D-T中子产额测量研究

研究了伴随粒子法D-T中子产额测量的各向异性修正因子的计算方法,计算给出了D束流能量20 ～ 600 keV范围135°随粒子法中子产额测量的各向异性修正因子数据,数据的不确定度约为1.4％.在兰州大学Z -300强流中子发生器上建立了135°伴随粒子测量法中子产额测量系统,并进行了实验测试,结果显示,在较长的测量距离下,α粒子多道幅度谱清晰,快中子与Si探测器反应产生的带电粒子的影响可忽略,D-T中子产额测量的不确定度不大于2％.     

基于小型单极加速器质谱测量~(14)C的样品制备技术研究

为满足新研发的200kV单极静电加速器质谱仪测量14 C的需要,开展了14 C样品制备技术研究。在自主设计的14C制样装置上优化了H2-Fe法、Zn-Fe法、Zn-H-Fe法制备石墨样品的实验条件,制备的样品经离子源引出12C-的束流均可达15~40μA,稳定性好于0.2%。在加速器质谱仪的调试中发现压低制备样品12CH+13C和12C的粒子个数比更有利于实现14 C-SE-AMS小型化及高灵敏测量。~(14)C-SE-AMS的测试样品中碳含量小于1mg时,采用Zn-Fe法有利于压低~(12)CH+~(13)C和~(12)C的粒子个数比;样品碳含量为1~5mg时,采用Zn-Fe法和Zn-H-Fe法效果相当。建立的制样方法对含碳量为100μg~5mg的样品,其产率均能达到95%以上,且空白样品测试结果表明此系统能有效避免样品制备中的交叉污染。     

MCNP4C在HTR-PM设备γ射线屏蔽设计中的应用及与QAD-CGA对比研究

本文基于球床模块式高温气冷堆核电站(HTR-PM)反应堆设备间γ射线辐射屏蔽设计工程实例,建立了乏燃料中间贮存系统的蒙特卡罗模型,给出了蒙特卡罗方法计算程序MCNP4C和点核积分方法计算程序QAD-CGA的计算剂量值,并通过对二者进行分析和对比,得知点核积分程序QAD-CGA的计算结果较蒙特卡罗程序MCNP4C的计算结果偏大.     

MCNP4C在HTR-PM设备γ射线屏蔽设计申的应用及与QAD-CGA对比研究

本文基于球床模块式高温气冷堆核电站（HTR-PM）反应堆设备间γ射线辐射屏蔽设计工程实例，建立了乏燃料中间贮存系统的蒙特卡罗模型，给出了蒙特卡罗方法计算程序MCNP4C和点核积分方法计算程序QAD-CGA的计算剂量值，并通过对二者进行分析和对比，得知点核积分程序QAD-CGA的计算结果较蒙特卡罗程序MCNP4C的计算结果偏大。