微生物发酵技术同步提取青钱柳多糖和黄酮

为得到一种经济有效、同步快速提取青钱柳多糖和黄酮的方法,最大程度提高多糖和黄酮的提取率及原料的利用率,采用微生物发酵技术对青钱柳多糖和黄酮进行同步提取,并通过单因素及正交试验对多糖和黄酮的同步提取工艺进行优化。结果表明,将青钱柳叶与水以1∶20(g∶m L)的料液比混匀,添加质量分数为0. 4%的纤维素酶-半纤维素酶复合酶进行酶解,再按照5. 0%接种量接入菌种比为1∶2的黑曲霉与枯草芽孢杆菌混合种子液,于160 r/min、30℃发酵2 d,最终青钱柳多糖的提取率达7. 57%,较优化前(提取率为5. 03%)提高了50. 50%,黄酮的提取率达6. 98%,较优化前(提取率为4. 67%)提高了49. 46%。故采用微生物发酵技术可大大提高青钱柳多糖和黄酮的提取率及原料的利用率,为后续开发青钱柳功能性产品提供理论基础。     

微波法提取银杏黄酮甙的新工艺

以水为介质的条件下,对银杏叶进行微波处理,提取效果与传统水煮法及熔剂萃取法提取银杏黄酮作对照,结果表明此方法提取率高,省溶剂,大大提高了提取效率。     

HPLC法同时测定植物油中维生素A和不同构型维生素E含量

以石油醚为溶剂,用索氏提取法提取了黑芝麻、白花生、黑花生、葵花籽、大豆、棉花籽的油脂。油样品先用正己烷溶解,然后用甲醇定容,其中正己烷含量为20%（v/v）,用Hypersil ODS2 5μm色谱柱,甲醇为流动相,对所提油脂中维生素A、α-维生素E、γ-（β）维生素E、δ-维生素E含量进行检测。实验结果表明,在204nm波长下,维生素A、α-维生素E、γ-（β）维生素E、δ-维生素E在0²00μg/m L范围内与峰面积有良好的线性关系,标准曲线相关系数r均大于0.9978。维生素A、α-维生素E、γ-（β）维生素E、δ-维生素E加标平均回收率分别为97.83%、98.58%、98.75%、99.93%。      

HPLC法同时测定植物油中维生素A和不同构型维生素E含量

以石油醚为溶剂,用索氏提取法提取了黑芝麻、白花生、黑花生、葵花籽、大豆、棉花籽的油脂。油样品先用正己烷溶解,然后用甲醇定容,其中正己烷含量为20%(v/v),用Hypersil ODS2 5μm色谱柱,甲醇为流动相,对所提油脂中维生素A、α-维生素E、γ-(β)维生素E、δ-维生素E含量进行检测。实验结果表明,在204nm波长下,维生素A、α-维生素E、γ-(β)维生素E、δ-维生素E在0~200μg/m L范围内与峰面积有良好的线性关系,标准曲线相关系数r均大于0.9978。维生素A、α-维生素E、γ-(β)维生素E、δ-维生素E加标平均回收率分别为97.83%、98.58%、98.75%、99.93%。     

高效液相色谱法(HPLC)测定银杏黄酮含量

用高效液相色谱法测定银杏制品经酸水解后3种黄酮甙元槲皮素、山奈素、异鼠李素的含量,计算得出总黄酮含量,并对6个样品进行了测定。方法采用C18色谱柱,流动相为甲醇∶水∶磷酸,检测波长370nm,槲皮素、山奈素和异鼠李素的平均回收率分别是95.80%、98.42%和94.39%,RSD≤4.2%,相关系数γ=0.9999,本法准确、快速、重现性好,为银杏制品提供质量控制依据。      

黄酮及维生素C的抗羟基自由基的比较研究

以大豆甙和芦丁作为黄酮化合物的代表，并与维生素C比较，研究其对羟基自由基的抑制能力，并以大豆、橙皮、柑皮和青椒提取物作羟基自由基清除剂，研究这些提取物对羟基自由基的清除作用。结果表明，大豆甙对羟基自由基的清除率最高，其次是芦丁，再次是维生素C；含黄酮化合物的提取物比含维生素C的提取物对羟基自由基的清除率大，其中以大豆撮以物最优。     

高效液相色谱法(HPLC)测定银杏黄酮含量

用高效液相色谱法测定银杏制品经酸水解后3种黄酮甙元槲皮素、山奈素、异鼠李素的含量,计算得出总黄酮含量,并对6个样品进行了测定。方法采用C18色谱柱,流动相为甲醇∶水∶磷酸,检测波长370nm,槲皮素、山奈素和异鼠李素的平均回收率分别是95.80%、98.42%和94.39%,RSD≤4.2%,相关系数γ=0.9999,本法准确、快速、重现性好,为银杏制品提供质量控制依据。     

HPLC测定纺织品中维生素E含量

通过确定维生素E的3种主要异构体α-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚的液相色谱分析条件,以特征保留时间确定各异构体相应的液相色谱指纹图谱。建立了纺织品中维生素E含量的测定方法：以相同液相色谱分析条件对纺织样品提取液进样分析,根据各异构体指纹图谱以外标法定量求得纺织品中异构体含量,最终获得纺织品中维生素E的含量。测定方法的精密度和回收率均满足相关标准要求,可用于纺织品中维生素E含量的检测。     

高效液相色谱法测定油菜籽中维生素E含量

建立了油菜籽中VE的高效液相色谱测定方法,比较了样品处理方法对测定油菜籽中Ⅶ的影响.采用硅胶柱色谱柱,流动相为正己烷:乙醚=93:7(v/v),流速为1.2mL/min,荧光检测器激发波为290 nm、发射波长为330nm.线性范围为10～60μg/mL,平均回收率为107%,变异系数为1.1%,正己烷溶剂浸提法比皂化方法好.     

用MAP-ICP-MS测定保健食品青钱柳及其浸提物中多种矿质营养素的研究

将微波辅助溶样／萃取（ＭＡＰ）和电感耦合等离子体质谱（ＩＣＰ－ＭＳ）联用,建立了对青钱柳叶干制品及其浸提物中多种矿质营养素进行同时测定的方法,背景干扰采用减去空白信号和选择合适的同位素等方法进行消除。     

青钱柳多糖提取工艺的研究

以江西修水青钱柳粉末为原料,采用热水浸提法提取青钱柳多糖,研究了提取温度、提取次数、提取时间和料液比对青钱柳多糖得率的影响,并以提取次数、提取时间和料液比为考察因素,在90℃下,采用L9(33)正交试验确定了热水浸提法提取青钱柳多糖的最佳工艺参数,即提取次数为三次,提取时间为150min,液料比为1:8。在上述提取条件下,热水浸提法提取青钱柳多糖得率可达到6.54%。     

响应面法优化青钱柳速溶茶的酶解工艺条件

以青钱柳降糖活性成分黄酮和多糖含量为主,辅以浸膏得率为指标,采用综合评分法进行数据分析,通过响应面实验优化青钱柳速溶茶的酶解工艺。结果表明,经过优化后的工艺条件为:纤维素酶浓度为0.84%、酶解温度49℃、酶解时间29 min、液料比为22∶1(mL/g),其黄酮和多糖含量分别为15.14、11.88 mg/g,浸膏得率为23.03%,综合评分为99.99。      

青钱柳多糖对人宫颈癌HeLa细胞和人脐带内皮细胞生长的影响

目的:研究青钱柳多糖(polysaccharides isolated from Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinskjk,PCP)对人宫颈癌HeLa细胞和人脐带内皮细胞(HUVEC)生长的影响。方法:采用噻唑蓝(MTT)法,观察不同浓度、不同提取方法获得的PCP对HeLa细胞和HUVEC细胞生长的影响。结果:PCP I、II在50、100、200、400μg/ml浓度条件下,均可极显著性抑制HeLa细胞生长(p<0.01)。PCP I、II对HUVEC细胞生长有一定影响,但增殖抑制率不高;在PCP抑癌作用最高的浓度处(200μg/ml),PCP对HUVEC细胞的生长没有影响。结论:PCP极显著性抑制HeLa细胞的生长;在P C P抑癌作用最高的浓度处,P C P对H U V E C细胞的生长没有影响。     

青钱柳多糖抗氧化活性的研究

目的:研究青钱柳多糖的抗氧化活性.方法:采用水提醇沉方法,Sevage法除蛋白,用D301R型大孔树脂纯化制备多糖;通过Fenton体系,DPPH·两种分析方法测定体外清除自由基能力;用青钱柳多糖对高脂小鼠进行干预后,测定肝脏SOD、MDA、GSH-Px、NEFA的含量,以此评定其体内抗氧化功能.结果:青钱柳多糖对羟基自由基、DPPH自由基清除效果显著,并且清除DPPH的效果优于羟基自由基;体内实验显示:青钱柳多糖能显著提高肝脏SOD和GSH-Px的活性,降低肝脏MDA及NEFA的含量.结论:体内及体外实验都显示青钱柳多糖具有显著的抗氧化活性.     

青钱柳提取物体外抗氧化活性研究

研究青钱柳不同溶剂提取物的体外抗氧化活性。测定了青钱柳不同溶剂提取物对DPPH自由基的清除作用,用化学发光法测定对超氧阴离子自由基(O·2)和羟自由基(·OH)的清除能力,并用烘箱储藏法测定对油脂的抗氧化活性。实验结果表明,醇提物具有较强的清除自由基能力和抗油脂氧化活性。     

青钱柳多糖的乙酰化修饰及抗氧化活性

以青钱柳多糖为原料,使用乙酸酐法制备得到乙酰化青钱柳多糖样品。以乙酰化多糖取代度为评价指标,采用正交试验考察乙酸酐-多糖比例、反应时间、反应温度对乙酰化修饰的影响。在此基础上,选择取代度为0.681的乙酰化多糖样品进行1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除实验。结果表明,青钱柳多糖乙酰化最优反应条件为：m（多糖）∶V（乙酸酐）＝1∶60、反应时间2 h、反应温度40 ℃,同时,乙酰化修饰可以显著提高青钱柳多糖的DPPH自由基清除活性,乙酰化修饰可作为青钱柳多糖改性的方法之一,为青钱柳资源的进一步开发利用提供新的方向。     

青钱柳多糖对高脂血症大鼠血脂及抗脂质过氧化作用的影响

为研究青钱柳多糖(Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinskaja polysaccharide,CPP)对高脂血症大鼠脂类代谢及抗脂质过氧化作用的影响,将高脂血症大鼠分为高脂血症模型组、辛伐他汀组、青钱柳多糖高、中、低剂量组,每组16只,连续喂养8周。实验结束后测定血清TG、TC、LDL-C和HDL-C,同时测定血清及肝脏组织中T-SOD、GSH-Px、CAT、T-AOC及MDA含量。结果表明,与高脂模型组相比,CPP低、中、高剂量组可显著降低高脂血症大鼠的血清TC、TG、LDL-C,MDA含量(P0.01),其最大降幅分别为29.17%、50.00%、57.25%和25.72%;低、中、高剂量多糖均可显著提高血清HDL-C含量和T-SOD、GSH-Px、T-AOC活性(p0.01),其最大增幅分别为72.22%、16.27%、16.38%和59.43%。结果提示青钱柳多糖对实验性高脂血症模型大鼠具有降血脂、抗脂质过氧化作用,以高剂量(800 mg/kg)效果为最佳。     

富硒青钱柳多糖对糖尿病模型小鼠血糖、血脂和免疫力的影响

研究富硒青钱柳多糖(selenium polysaccharide from Cyclocarya paliurus(Batal)Ijinskaja,Se-CPP)对糖尿病模型小鼠血糖、血脂和免疫力的影响。高脂饮食加腹腔注射链脲佐菌霉素建立小鼠糖尿病模型,以生理盐水、青钱柳多糖(Cyclocarya paliurus(Batal)Ijinskaja polysaccharide,CPP)、CPP+亚硒酸钠、亚硒酸钠、Se-CPP低、中、高剂量(0.2、0.6、1.8 g/(kg·d))、消渴丸连续灌胃给药42 d。末次给药后检测小鼠葡萄糖耐量、血清总胆固醇(total cholesterol,TC)含量、甘油三酯(triglyceride,TG)含量、抗氧化酶活力、免疫器官指数及小鼠脾淋巴细胞转化指数。结果表明:连续给药42 d后,Se-CPP低、中剂量组小鼠血糖、血清TC和TG水平均低于CPP组和CPP+亚硒酸钠组,Se-CPP较CPP具有更好的抗氧化活力和提高糖尿病小鼠免疫力的功效。     

Isolation,chemical composition and antioxidant activities of a water-soluble polysaccharide from Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinskaja

A water-soluble polysaccharide was isolated from the water extract of Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinskaja, which is a well-known native health tea in China. This polysaccharide was named as CPP-1. The molecular weight of CPP-1 was determined by high-performance gel permeation chromatography, with an average molecular weight of about 1167 kDa. The analysis of monosaccharide composition in the polysaccharide by gas chromatography revealed that it was a heteropolysaccharide and consisted of d-xylose, l-arabinose, d-glucose, d-galactose, l-rhamnose and d-mannose in a molar ratio of 1.00:9.67:9.65:4.96:3.29:2.70. Furthermore, CPP-1 contains 8.44% of protein and 17 general amino acids, and it is rich in glutamic acid, asparagic acid, leucine, glycine, arginine, tyrosine and alanine. The antioxidant activity of CPP-1 was also evaluated. It was found that CPP-1 exerted significant scavenging effects on DPPH radicals with a value of around 91.4%, compared to the reference controls of BHT (91.2%) and ascorbic acid (98.9%) at a concentration of 400 μg/ml, and with EC₅₀ values of 52.3 μg/ml.