高效液相色谱法测定液态乳中乳果糖方法的优化

为了对液态乳中乳果糖含量进行简便准确地定量,改进高效液相色谱法测定乳果糖含量的方法。采用化学稳定的改性酰胺基色谱柱进行分离,并以乙腈-水流动相梯度洗脱40 min,结果表明,样品进样体积为3 μL时乳糖与乳果糖的分离度为1.5,满足色谱分离检测。优化后的方法经验证,乳果糖在50~2500 mg/kg范围内线性关系良好,（R²=0.9997）,乳果糖检出限和定量限分别为15和50 mg/kg,3个加标水平（n=6）乳果糖平均回收率在90.3%~105.6%之间,相对标准偏差为3.4%~3.9%。利用该法对市场中的27种实际乳样进行分析,结果均在合理范围之内。该方法经济、准确适用于液态乳中乳果糖含量的日常检测。     

离子色谱法测定奶粉中的葡萄糖、蔗糖和乳糖

建立高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法测定奶粉中葡萄糖、蔗糖和乳糖的方法。以METROSEP CARB 1(150mm×4.0mm)阴离子交换柱为分离柱,脉冲安培检测,37mmol/L NaOH溶液为淋洗液,以柠檬酸作为蛋白质沉淀剂。葡萄糖、蔗糖和乳糖的线性范围分别为1～40、1～50、1～50mg/L,相关系数分别0.9966、0.9968、0.9985,检出限分别为0.014、0.091、0.083mg/L,精密度为1.10%～4.96%,回收率为90.13%～104.83%。该方法分析时间短,前处理简单,适用于快速测定奶粉中的葡萄糖、蔗糖和乳糖。     

离子色谱法测定中草药成分的研究

建立并优化了高效、简便的阴离子交换色谱分析中草药中的无机阴离子、有机酸和糖类化合物的方法。采用METROSEP A Supp4-250分离柱,1·8mmol/LNa2CO3+1·7mmol/LNaHCO3+2%丙酮淋洗液,电导抑制检测,分离测定F-、Cl-、Br-、NO-2、NO-3、PO3-4、SO2-4和草酸、苹果酸和富马酸等无机阴离子和有机酸。采用METROSEP CARB1（150×4·0mm）分离柱,10·0mmol/LNaOH淋洗液,脉冲安培检测,分离测定阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和果糖等糖类化合物。方法快速、有效地分析了中草药的成分,结果令人满意。      

重组果聚糖蔗糖酶的发酵优化及应用

为了研究不同条件下重组短小芽孢杆菌产果聚糖蔗糖酶的最适条件以及利用重组酶转化蔗糖-乳糖制备低聚乳果糖的最适转化条件。以前期构建的产果聚糖蔗糖酶重组短小芽孢杆菌Brevibacillus brevis/pNCMO2-lsc作为菌种,通过单因素试验以及正交试验确定其最适产酶的发酵培养基为:葡萄糖20 g/L、氮源(工业酵母粉∶棉籽粉=2∶1,质量比)为40 g/L、CaCl_20.5 mmol/L,最适产酶温度30℃。在最优条件下发酵培养,果聚糖蔗糖酶的酶活可达62.1 U/mL,是优化前的3.69倍。利用该重组果聚糖蔗糖酶转化蔗糖-乳糖制备低聚乳果糖,在蔗糖和乳糖质量浓度均为200 g/L情况下,确定其最适转化条件:反应温度35℃,pH 6.0,加酶量为2 U/g底物,反应8 h后低聚乳果糖转化率可达39.1%。     

β-呋喃果糖苷酶合成低聚乳果糖的工艺研究

以蔗糖和乳糖为底物,利用节杆菌β-呋喃果糖苷酶合成低聚乳果糖,通过单因素和正交实验获得酶反应的最佳工艺条件为:酶反应体系的pH为6.5,反应温度37℃,酶用量1500U/g蔗糖,酶反应时间12h,反应体系的固形物含量为40%,蔗糖和乳糖的比例为1∶1,该条件下低聚乳果糖的最大转化率为160.83mg/mL。      

毛细管区带电泳非衍生化直接测定蜂蜜中糖含量

建立了一种新的测定蜂蜜中糖含量的方法,并探讨了检测机理。以弹性石英毛细管柱（有效长度/总长度=52/62 cm）为分离柱,130 mmol/L的Na OH+30 mmol/L的Na2HPO4溶液（p H=12.8）为运行缓冲液,温度20℃,分离电压在1 min内升至16 k V,测定波长为270 nm,以20 psi的压力进样,内标峰面积法计算含量。经测定:蜂蜜样品中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖含量分别为42.8%、36.1%、4.67%和2.16%,检测机理可能是糖在强碱溶液中发生光化学反应,检测在非平衡态进行;果糖、葡萄糖在0.04⁰.8 mg/m L,蔗糖、麦芽糖在0.005⁰.1 mg/m L范围内线性关系良好;最低检测限果糖和葡萄糖为9μg/m L,蔗糖和麦芽糖为18μg/m L,明显低于高效液相色谱示差检测法;果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖回收率分别为99.4%、97.9%、97.1%、102.7%,方法回收率良好。此方法准确、简便,可用于蜂蜜中糖的测定。      

高效阴离子交换分离-脉冲安培检测茶叶多糖中的半乳糖、葡萄糖、甘露糖和果糖

建立了高效阴离子交换分离- 脉冲安培检测(HPAE-PAD)同时分离测定茶叶多糖中的半乳糖、葡萄糖、甘露糖和果糖的分析方法。以Metrosep Carb 1(150 × 4.0mm)阴离子交换柱为分离柱,以6.0mmol/L NaOH 溶液将4种单糖从分离柱上洗脱,淋洗液流速为1.0ml/min,总分析时间为45min。在优化的分离条件下4 种单糖的检出限为0.125～2.0mg/L(进样体积20μl,峰高定量)。20mg/L 的半乳糖、葡萄糖、甘露糖和30mg/L 的果糖混标溶液连续7 次进样,峰高的相对标准偏差为5.82%～14.19%,保留时间的相对标准偏差为2.03%～2.26%,样品测定的回收率为91.8%～99.3%。用所建立的方法快速、有效分析了4 种茶叶多糖中的4 种单糖,并得到了满意的检测结果。     

柱前衍生—高效液相色谱荧光检测法测定乳制品中6种母乳寡糖

目的：建立一种普及性强、灵敏度高,并能同时测定乳制品中6种母乳寡糖的高效液相色谱—荧光检测分析方法。方法：样品经冰醋酸沉淀,滤纸过滤后,经2-氨基苯甲酰胺溶液衍生,离心后经有机滤膜过滤,用AdvanceBio Glycan Map色谱柱分离,以乙腈-50 mmol/L甲酸铵溶液（pH 4.4）为流动相,梯度洗脱分离,并使用荧光检测器检测。结果：6种母乳寡糖在1.00～400.0 mg/L质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均＞0.999,方法检出限为4.1～10.9 mg/kg,回收率为71.3%～90.2%,日内相对标准偏差（RSD）为1.0%～6.3%,日间相对标准偏差＜10.0%。结论：该方法简单、快捷,可有效降低衍生峰的干扰,适用于乳制品中3′-岩藻糖基乳糖、2′-岩藻糖基乳糖、乳糖-N-四糖、乳糖-N-新四糖、3′-唾液乳糖和6′-唾液乳糖6种母乳寡糖的日常检测。     

离子色谱法测定奶糖中的蔗糖、葡萄糖和乳糖

建立离子色谱法分离检测奶糖中蔗糖、葡萄糖和乳糖的分析方法。采用METROSEPCARB1（150mm×4.0mm）阴离子交换分离柱和脉冲安培检测器,对淋洗分离条件进行优化。确定柱温为32℃、淋洗液为37.0mmol/L NaOH溶液,淋洗液流速为1.0mL/min,总分析时间20min。在1.0～60.0mg/L范围内蔗糖、葡萄糖和乳糖分别呈良好线性,相关系数分别为0.9996、0.9998和0.9996,检出限分别为0.091、0.014和0.083mg/L,RSD为1.42%～5.17%,回收率为91.27%～101.31%。测定结果为大白兔奶糖中含葡萄糖1.56%、蔗糖21.40%、果糖3.75%;旺仔牛奶糖中含葡萄糖1.17%、蔗糖30.29%、果糖3.30%;金丝猴奶糖中含葡萄糖1.08%、蔗糖20.86%、果糖3.31%。用该方法检测了奶糖中的三种糖,效果良好,同时具有操作简单,结果准确,快速有效等优点,可为奶糖的检测提供一个简单有效的方法。     

β-呋喃果糖苷酶法合成低聚乳果糖工艺优化

目的：确定β-呋喃果糖苷酶合成低聚乳果糖的最佳工艺条件。方法：以蔗糖和乳糖为底物,利用β-呋喃果糖苷酶粗酶液合成低聚乳果糖,通过单因素和Box-Behnken试验,对酶法合成工艺进行响应面分析,得到酶法合成低聚乳果糖的最佳工艺参数。结果：最佳工艺条件为反应时间22.77h、pH7.0、反应温度35.0℃、底物质量浓度20.0g/100mL、底物与酶的体积比1:1,低聚乳果糖含量为22.70%。结论：Box-Behnken结合响应面优化果糖苷酶法合成低聚乳果糖工艺,模型可靠,方法可行。     

低聚半乳糖含量的测定方法

研究了离子色谱法测定糖浆中低聚半乳糖含量的方法。用水、250 nmol/L NaOH溶液和1 mol/L乙酸钠溶液梯度淋洗,选用CarboPac PA10(2 mm×250 mm)色谱柱和安培检测器,测定了糖浆中各组分(乳糖、半乳糖、葡萄糖和低聚半乳糖)的含量。3种糖在测定条件下线性相关系数为0.999 0~0.999 7,相对标准偏差为1.54%~3.42%,样品的加标回收率为91.7%~95.7%。     

高效阴离子交换色谱-脉冲积分安培法检测海带中的单糖、双糖和糖醛酸

建立海带多糖水解液中岩藻糖、葡萄糖、氨基半乳糖、氨基葡萄糖、半乳糖、甘露糖、果糖、核糖、乳糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸11 种糖类化合物的高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法的定性定量分析方法。采用CarboPac PA10（250?mm×4?mm）作为糖分析柱，CarboPac?PA10（50?mm×4?mm）作为糖保护柱，柱温为25?℃，流速为1.0?mL/min，水-NaOH-NaAc组成三元淋洗液进行多级梯度淋洗。结果表明，11?种糖在各自线性范围内R2不小于0.998?6，方法的检出限（RSN=3）在1.27～47.49?mg/kg之间，精密度相对标准偏差均小于1.78%，样品加标回收率在89.35%～115.67%之间。结果表明，该方法操作简便，线性关系良好，灵敏度和精密度高，重复性好。     

离子色谱法测定人乳中乳糖

目的建立人乳中乳糖的离子色谱检测方法。方法采用阴离子交换柱CarboPac PA20(3 mm×150 mm)进行分离,对淋洗液梯度进行优化分离乳糖标准,建立了人乳中乳糖糖含量的自动分析方法并采用外标法进行定量分析。结果在最佳实验条件下,乳糖方法的线性范围为0.2~20 mg/L,相关系数大于0.999;方法检出限(信噪比为3)为10 mg/kg,定量限(信噪比为10)为30 mg/kg;人乳中乳糖含量日内精密度的RSD为0.72%~1.53%。结论方法优化后,排除了杂质干扰,使乳糖定量更为准确。本方法操作简单、精确、快速,可用于人乳中乳糖的定量。     

Determination of sucralose in foods by anion-exchange chromatography and reverse-phase chromatography

Simple and rapid methods for the determination of sucralose in foods were developed using anion-exchange chromatography (AEC) with pulsed amperometric detection and reverse-phase HPLC with refractive index detection. Sucralose was extracted with water or methanol, and the extracted solution was cleaned up on a Sep-Pak C18 cartridge and a Sep-Pak Alumina N cartridge. The AEC separation was performed on a CarboPac PA1 column (4.0 mm i.d x 250 mm) using 100 mmol/L sodium hydroxide-50 mmol/L sodium acetate solution as the mobile phase at a flow rate of 1.0 mL/min. The recoveries of sucralose from foods were 80.6-102.0%, and quantitation limits from foods except chewing gum were 0.5 microgram/g (2 micrograms/g from chewing gum). The reverse-phase HPLC separation was performed on an Inertsil ODS-3V column (4.6 mm i.d x 150 mm) using methanol-water (25:75) as the mobile phase at a flow rate of 1.0 mL/min. The recoveries of sucralose from foods were 80.2-121.2%, and quantitation limits from foods except chewing gum were 5 micrograms/g (20 micrograms/g from chewing gum).     

离子色谱法测定海带中甘露醇的含量

目的 建立测定海带中甘露醇含量的离子色谱法.方法 通过对色谱柱、流动相等色谱条件优化,考察对海带中甘露醇及其他组分的分离效果.结果 采用DIONEX CarboPac PA10(4 mm×250 mm)色谱柱,以H2O:NaOH溶液(c=250 mmol/L)(90:10,V:V)为流动相,流速为0.80 mL/min...     

高效阴离子交换色谱法分析杜氏盐藻多糖的单糖组成

选用CarboPacPA20分析柱(3mmi.d.×150mm),以H2O-250mmol/LNaOH-1mol/LNaAc为流动相,建立了三元梯度洗脱分离、积分脉冲安培检测多糖中常见的8种中性单糖和2种糖醛酸的高效阴离子交换色谱分析方法;利用离子交换色谱柱(DEAESepharoseCL6Bfastflow,3.5cm×30cm)和凝胶过滤色谱柱(SepharoseCL6B,2.6cm×100cm)从提取出β-胡萝卜素的杜氏盐藻残渣中分离出PD1、PD2、PD3、PD4a和PD4b共5个多糖级分,选用适当的条件水解后,利用高效阴离子交换色谱法测定了各多糖级分的单糖组成。其中具有显著生物活性的多糖级分PD4a中主要含有半乳糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、盐藻糖及鼠李糖6种中性糖,还含有少量糖醛酸;PD4b中主要含有核糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖及木糖5种中性糖,不含糖醛酸。该结果与PMP柱前衍生化反相高效液相色谱法测定的单糖摩尔比基本一致。10种单糖的离子色谱法的检出限为0.76～2.92nmol/L(以3倍信噪比计),峰面积相对标淮偏差RSD为0.72%～3.25%。     

离子色谱-脉冲安培法同时测定食品中9种糖和糖醇的含量

建立一种同时测定葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、赤藓糖醇、木糖醇、山梨糖醇和麦芽糖醇的离子色谱检测技术。对样品的前处理及色谱柱的选择进行优化,最终选择采用调节pH沉淀蛋白,CarboPac PA1色谱柱分离,以氢氧化钠-乙酸钠为淋洗液梯度洗脱,使用脉冲安培检测器进行检测。结果表明,9种糖及糖醇在方法条件下能够完全分离,在0.1~10 μg/mL范围内线性关系良好,方法重复性RSD小于3%,回收率在96.54%~103.71%之间。对市售7款无糖或低糖产品按方法进行检测,无糖样品的含糖量均低于0.5%,低糖样品的含糖量均低于5%。该方法操作简便,灵敏度高,分离度好,能够快速、准确地测定低糖、无糖食品中糖和糖醇的含量。     

阀切换离子色谱技术同时检测饮料中的糖类、甜味剂和防腐剂

建立阀切换离子色谱技术同时检测饮料中的糖类、甜味剂和防腐剂的方法。样品经简单前处理进样于IonPac? AS11-HC（4?mm×250?mm）阴离子分离柱,通过设置合适的阀切换时间,在AS11-HC柱上保留较弱的糖类物质先被碱性淋洗液洗出,收集在定量环中。而强保留的防腐剂随着淋洗液逐渐洗出,紫外检测器检测。收集在定量环中的糖类物质再经NaOH淋洗液冲洗进入CarboPac? PA10（4?mm×250?mm）柱中分离,进行电化学检测。实验结果表明,在0.5～2.5?mg/L的线性范围内,方法的回归系数r2不小于0.999?0,重现性相对标准偏差不大于6.72%,回收率为80.0%～120.0%。该方法可广泛应用于饮料行业中的生产工艺质量控制或最终成品的成分检测。     

反相高效液相色谱法测定蛹虫草中腺苷和虫草素的含量

建立一种新的反相高效液相色谱方法,用于蛹虫草中腺苷和虫草素的定性定量分析。样品经水超声提取,以终浓度20mmol/L柠檬酸、40mmol/L醋酸、20mmol/L三乙胺的混合溶液- 乙腈(体积比98:2)为流动相,流速1.0mL/min,色谱柱Capcellpak C18(150mm × 4.6mm,5μm)分离,柱温40℃,进样量10μL,紫外检测波长260nm。在此条件下,腺苷在1～1000μg/mL 范围内有良好的线性关系(Y=33574X+54.526,R2=0.9999),检测限0.2μg/mL,回收率93.75%～96.90%,RSD 为0.116%;虫草素在2～1000μg/mL 范围内有良好的线性关系(Y=34385X+23.103,R2=1.0000),检测限0.2μg/mL,回收率92.03%～97.35%,RSD 为0.104%。该方法样品处理简便、分离度高、杂质干扰小、回收率高、重复性好,能够对蛹虫草中腺苷和虫草素进行准确的定性定量分析。