嗜酸乳杆菌产细菌素的提取及其生物特性研究

以嗜酸乳杆菌为研究对象,通过响应面实验和生物学方法,对该菌细菌素产生条件、细菌素定位和稳定性进行研究。结果表明:该菌产生细菌素的最适培养条件为:培养温度38℃、初始p H7.0、培养时间18 h;在嗜酸乳杆菌发酵液中提取的细菌素具有抑制大肠杆菌生长的作用,主要存在于细胞外;该菌产生的细菌素在40~70℃保持较高的活性;在蛋白酶K、胃蛋白酶和胰蛋白酶处理后,抑菌活性显著下降;在p H3.0~10.0之间具有抑菌活性;在紫外照射时间0.25~1 h之间,活性较稳定。此研究结果对该菌产细菌素的分离鉴定及应用提供了重要参考。      

藏灵菇中乳酸菌的鉴定及细菌素生物特性研究

从藏灵菇中筛选出一株具有抑菌活性的菌株,采用生理生化鉴定、16S rDNA序列分析确定菌种属性,采用硫酸铵沉淀法对该菌所产生的细菌素进行粗提取并对其抑菌活性和稳定性进行研究。结果显示,该菌为植物乳杆菌,除去有机酸和过氧化氢的影响,该菌产生的细菌素具有较好的抑菌活性。该菌所产的细菌素热稳定性较好,在100℃处理30 min抑菌活性降至54%,且对酸碱不敏感,在p H3~9的范围内都具有抑菌活性,在p H为3.82时抑菌活性最佳,对胃蛋白酶、α-凝乳酶有较强的耐受性,对蛋白酶K较敏感,在37℃下处理2 h抑菌活性为处理前活性的47.36%。对植物乳杆菌产细菌素的分析证明该菌产的细菌素在食品加工防腐中具有潜在的使用价值。     

乳酸乳球菌KLDS4.0325产细菌素最佳培养条件的研究

以分离自新疆牧民家庭自制酸马奶中的乳酸乳球菌KLDS4.0325为研究对象,以大肠杆菌为指示菌,以抑菌圈直径为考察指标,考察了不同温度、p H、转速及培养时间等培养条件对该菌株细菌素产量的影响,经单因素实验优化得出乳酸乳球菌KLDS4.0325在培养温度33℃,培养基初始p H7.0,120 r/min摇床培养20 h的条件下,无细胞发酵上清液对大肠杆菌的抑菌圈直径最大,抑菌活性最强,细菌素产量最高。在此条件下,抑菌圈直径为25.26 mm,细菌素效价可达5383.07 IU/m L。      

枯草芽孢杆菌SH-1发酵条件优化及抑菌活性物质稳定性研究

为开发应用于生物防治的生物农药,应用于食品防腐的新型高效的食品防腐剂,对一株能够抑制多种食品腐败菌和植物致病菌生长的芽孢杆菌菌株进行生理生化和16S分子生物学鉴定,初步确定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为SH-1。用蜡样芽孢作为指示菌对SH-1菌株发酵条件进行优化,并研究活性物质稳定性。结果表明,SH-1菌株发酵条件在接种量2%、初始p H7.0、发酵时间为24 h、转速为180 r/min、温度37℃时抑菌活性最强,抑菌直径高达22 mm;SH-1菌株发酵液在p H(3.0~9.0)之间抑菌活性较稳定,p H9.0以上抑菌活性逐渐降低,p H达到11后活性丧失;发酵液经100℃内处理具有较高活性,121℃活性丧失;经不同时间段紫外线照射后,其发酵液抑菌活性缓慢降低并趋于稳定。     

面包乳杆菌(Lactobacillus panis)C-M_2细菌素的分离纯化及特性分析

本实验对面包乳杆菌C-M2所产的新型细菌素进行分离纯化和特性研究。通过乙酸乙酯萃取、阳离子交换层析和半制备液相三步分离纯化该细菌素。最终细菌素的比活力达到5 044.96 AU/mg,纯化倍数为79.8倍,但回收率仅为0.35%。通过液相色谱-串联质谱法分析,该细菌素的分子质量为863.52 D,氨基酸序列为MVKKTSAV,它是一种新型的Ⅱ类细菌素。该细菌素具有广泛的抑菌谱,可以抑制革兰氏阳性和阴性的食品腐败菌。该细菌素对热和p H值稳定,即使在121℃灭菌15 min,仍保留82.1%的抑菌活性,在p H 6条件下保留85.6%的抑菌活性。它能被多种蛋白酶失活,不能被脂肪酶和淀粉酶失活,这些结果表明该细菌素具有作为食品生物防腐剂的潜在应用价值。     

食品加工环境因素对双歧杆菌细菌素BB04抑菌作用的影响

为预测双歧杆菌细菌素BB04在食品工业中的实际应用效果,本研究分别从抑菌效果和吸附特性两个角度探讨了食品加工过程中常涉及到的温度、p H和盐等因素对细菌素作用于敏感菌单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)的影响。结果表明:细菌素对单核细胞增生李斯特菌作用方式为杀菌;37℃、p H6.0时,抑菌效果最佳;实验所选取的Na Cl、KCl、Mg Cl_2、Ca Cl_2四种盐对细菌素的抑菌作用都有一定协同效应,各盐之间及同种盐内不同浓度间差异显著(p0.05)。吸附特性实验结果发现,p H对该细菌素吸附单核细胞增生李斯特菌细胞有一定影响,在p H6.0吸附效果最佳,吸附率可达91.40%;所选取的四种盐对细菌素的吸附作用都有一定拮抗效应,各盐之间及同种盐内不同浓度间差异显著(p0.05);温度对其吸附作用影响不显著(p0.05)。研究结果为该细菌素在食品防腐保鲜中合理应用提供一定的科学依据和理论参考。     

一株海洋源菌细菌素CAMT2生物学特性研究

本文以解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZJHD3-06发酵产生的细菌素CAMT2为研究对象,以金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、大肠杆菌、副溶血性弧菌及芽孢杆菌作为指示菌,利用牛津杯扩散法测定不同温度、p H、蛋白酶、有机溶剂对CAMT2抗菌活性的影响,并对CAMT2的乳化特性进行了研究。结果表明:CAMT2具有很好的热稳定性,在100℃处理20 min抑菌活性仍保留60%以上。p H在6¹0时抑菌活性具有很强的稳定性,但p H在2、4时抗菌活性有一定的降低,活性降低率在9.4%⁵1.9%。CAMT2对4种蛋白酶有不同程度的敏感性,对二甲基甲酰胺和二氯甲烷两种有机溶剂有较高的耐受力。细菌素CAMT2对供试菌均有抑菌作用,表现出一定的抗菌谱,CAMT2所具有的这些特性为其进一步开发与应用奠定了一定的理论基础。      

植物乳杆菌KF1对奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的抑菌机制

从开菲尔奶中筛选出一株具有强抑菌活性的乳酸菌KF1,经16S rDNA测序鉴定为植物乳杆菌。排除有机酸、过氧化氢的干扰试验,通过蛋白酶K和胰蛋白酶水解试验,证明该菌株产生的抑菌活性物质具有蛋白质性质,是一种细菌素。该细菌素在pH值2~4范围内抑菌效果稳定,当pH值达到8时,抑菌活性完全丧失;在121℃处理60 min后,仍保留约68%的活性,稳定性较好。抑菌谱试验表明,KF1细菌素对13株奶牛乳房炎病原菌都有不同程度的抑制作用,其中,对无乳链球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌等革兰氏阳性菌的抑菌作用最强,抑菌直径大于18 mm,抑制效果优于G―菌。通过研究KF1细菌素对菌体细胞壁、细胞膜通透性的影响,揭示其抑菌机制为膜孔道渗漏机制。另外,本文还发现KF1细菌素对多重耐药金黄色葡萄球菌生物被膜的形成―主要的毒力因子具有明显的抑制作用,显示其在奶牛乳房炎预防、治疗方面的应用前景。     

食品加工环境因素对双歧杆菌细菌素BB04抑菌作用的影响

为预测双歧杆菌细菌素BB04在食品工业中的实际应用效果,本研究分别从抑菌效果和吸附特性两个角度探讨了食品加工过程中常涉及到的温度、p H和盐等因素对细菌素作用于敏感菌单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）的影响。结果表明:细菌素对单核细胞增生李斯特菌作用方式为杀菌;37℃、p H6.0时,抑菌效果最佳;实验所选取的Na Cl、KCl、Mg Cl₂、Ca Cl₂四种盐对细菌素的抑菌作用都有一定协同效应,各盐之间及同种盐内不同浓度间差异显著（p<0.05）。吸附特性实验结果发现,p H对该细菌素吸附单核细胞增生李斯特菌细胞有一定影响,在p H6.0吸附效果最佳,吸附率可达91.40%;所选取的四种盐对细菌素的吸附作用都有一定拮抗效应,各盐之间及同种盐内不同浓度间差异显著（p<0.05）;温度对其吸附作用影响不显著（p>0.05）。研究结果为该细菌素在食品防腐保鲜中合理应用提供一定的科学依据和理论参考。      

抑制牛乳房炎嗜酸乳杆菌的筛选和抑菌物质的研究

牛乳房炎是造成重大经济损失的疾病之一,通过6株嗜酸乳杆菌对4株导致牛乳房炎的致病菌进行细菌素、H₂O₂等各种因素的抑菌实验,阐述了各个乳酸菌的抑菌能力以及影响其抑菌能力的主要抑菌物质,结果发现:6株乳酸菌普遍对金黄色葡萄球菌抑菌效果显著,其中嗜酸乳杆菌NCFM（H7）上清液对4株致病菌抑菌效果最好,KLDSAD3（H6）细菌素对无乳链球菌抑制效果最好,KLDSL6（H3）细菌素对乳房链球菌、大肠杆菌抑菌能力最强,且其H₂O₂对乳房链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌抑菌活性较强,KLDSAD2（H5）细菌素对金黄色葡萄球菌抑制效果最好,其中L6（H3）抑菌活性物质耐热能力较强,AD2（H5）抑菌活性物质热敏性很强,而且这些抑菌活性物质只有在酸性条件下才具有更强的抑菌活力。