卵黄高磷蛋白的纯化及其对RAW264.7生长形态的影响

阴离子交换层析纯化卵黄高磷蛋白,最佳条件为以NaAc/HAc缓冲液(20 mmol/L、pH 5.0并含0.3 mol/L NaCl)平衡,0.3 mol/L～0.6 mol/L NaCl缓冲液分步洗脱;产品纯度(以N/P比计)为2.78,回收率57.6％,蛋白质含量85.66％.经PVS刺激的RAW264.7细胞在考察剂量范围内不会向炎症巨噬细胞的形态转变.     

树脂柱色谱纯化甘油磷脂酰胆碱

研究了树脂柱色谱纯化甘油磷脂酰胆碱(L-α- GPC)的可行性,通过树脂筛选,确定D001大孔阳离子交换树脂为最佳纯化树脂,并对纯化工艺条件进行了优化.通过静态实验得到最优条件:上样质量浓度1.52 mg/mL,样品溶液pH为7,吸附时间300 min,解吸液为去离子水.在静态实验的基础上,进行了树脂柱色谱纯化L-α - GPC的动态实验,对吸附流速、解吸液和解吸流速进行优化.动态实验最优条件:吸附流速2 mL/min,解吸液为去离子水,解吸流速2 mL/min.依据动态实验最优条件,最终L -α- GPC的纯度为96％,回收率为54.1％,这表明树脂柱色谱纯化L-α - GPC的方法是经济、方便、可行的.     

离子交换树脂分离纯化谷胱甘肽的研究

研究001×7阳离子交换树脂分离纯化谷胱甘肽的工艺条件,考察了001×7阳离子交换树脂对GSH的静态吸附量,以及洗脱时,洗脱液,洗脱浓度,洗脱流速等对分离纯化产品GSH的影响。确定其工艺流程;最适上柱pH为2．5,洗脱液NaC1溶液最适洗脱浓度为1．2％,洗脱流速为2．0ml／min;收集洗脱液,用紫外分光光度法检测其GSH的浓度,回收率为75％,纯度相对提高60％。     

酪蛋白磷酸肽（CPPs）的纯化研究

研究了用大孔强碱性阴离子交换树脂提纯酪蛋白磷酸肽（CPPs)的方法,结果表明,树脂GM201对CPPs的分离提纯效果较好,最佳洗脱纯化工艺条件为：盐酸浓度0.2mol/L,NaCl浓度0.3mol/L,温度45℃。在上述最佳工艺条件下,CPPs回收率可达77.7%-80%,纯度提高到N：P=4.7:4.9。     

棉籽壳木聚糖提取液的脱色工艺研究

以伊犁产棉籽壳为原料,比较3种活性炭和3种阴离子交换树脂对棉籽壳木聚糖提取液的脱色效果,确定了最佳脱色条件.结果表明:LY-T-ac型活性炭和D392型阴离子交换树脂对棉籽壳木聚糖液有较好的脱色效果.D392型阴离子交换树脂最佳脱色条件为:脱色温度50℃、pH8.0、脱色时间180 min(150 r/min),在树脂添加量为75 g/L、糖液固形物含量为6％时,脱色率为93.66％.LY-T-ac型活性炭最佳脱色条件为:脱色温度80℃、pH5.0、脱色时间70 min(150 r/min),在活性炭添加量为3g/L、固形物含量为6％时,脱色率为93.51％.     

高N/P(摩尔比)酪蛋白磷酸肽生产工艺及初步分离纯化研究

研究高N/P(摩尔比)CPP的生产工艺并对CPP进行了初步的分离纯化。采用纳滤工艺生产所得CPP的N/P为24￣32,灰分含量在6%;N(氮)和P(磷)的得率分别为85.46%和100%。氨基酸分析、Sephadex-G15凝胶层析和HPLC分析结果表明纳滤能透过部分的氨基酸和短肽,从而改善CPP产品质量。     

生物活性肽——酪蛋白磷酸肽(CPP)的研制

摸索了 2 70 9碱性蛋白酶水解酪蛋白制备CPP的最佳工艺条件 :底物浓度 1 0 %、用酶量 1 50 0U/g底物、反应温度 45℃、pH1 0 5、反应时间 1 50min。采用选择淀淀法分离CPP ,在pH 4 .5添加 1 1 ?Cl2 (w/v)和50 % (v/v)乙醇 ,室温沉淀 4h,得到CPP产品的N/P、得率分别为 6 39和 1 3 94%。     

生物活性肽—酪蛋白磷酸肽（CPP）的研制

摸索了2709碱性蛋白酶水解酪蛋白制备CPP的最佳工艺条件：底物浓度10%、用酶量1500u/g反应温度45℃、pH10.5、反应时间150min。采用选择沉淀法分离CPP,在pH4.5添加1.1?Cl2(w/v)和50%（v/v)乙醇,室温沉淀4h ,得到CPP产品的N/P、得率分别为6.39%和13.94%。     

毛细管区带电泳测定酪蛋白磷酸肽方法的研究

用毛细管区带电泳(CZE)对酪蛋白磷酸肽(CPP)进行了分离和测定。研究出的适宜电泳操作条件为:工作电压30KV、柱温25℃、毛细管长度50cm、内径70μm、进样量5sec(气压进样)、紫外检测波长200nm、缓冲液pH值9.2测定不同N/P样品的CPP含量分别为42.2％、50.0％、51.0％。     

牦牛与奶牛酪蛋白制备CPPs的酶工艺优化及其离子交换纯化研究

优化了以牦牛酪蛋白与奶牛酪蛋白为原料酶法制备酪蛋白磷酸肽（CPPs）的工艺条件，并评估了离子交换对CPPs粗制品的纯化效果。结果表明，牦牛酪蛋白与奶牛酪蛋白的产率最优化条件以及氮磷比r（N／P）最优化的酶解工艺条件均基本一致，产率最大的胰蛋白酶酶解工艺条件为：底物浓度13．1％，酶解反应时间104min，酶底物浓度比0．9％；r（N／P）最优（小）的酶解工艺条件为：底物浓度7．6％，酶解反应时间155min，酶底物浓度比1．2％。牦牛及奶牛CPPs粗制品经过阴离子交换树脂纯化后，所获得的精制CPPs其，（N／P）均明显降低，对于CPPs的产率最优样品其，（N／P）由原来的12．2～12．4降低到6．3～6．9；对于r（N／P）最优样品，其r（N／P）由原来的9．90～0．95进一步降低至5．6～5．8。研究表明：无论以产率或制品质量为优化指标，牦牛与奶牛酪蛋白的酶解工艺优化条件基本一致。而且利用阴离子交换树脂处理可以有效地降低CPPs粗制品的r（N／P）、提高制品的质量。     

酪蛋白磷酸肽的体外功能试验

对不同级别的酪蛋白磷酸肽（Casein Phosphopeptide,以下简称CPP）促进钙吸收的体外功能性质进行了研究,测定了CPP的结合钙量、CPP阻止磷酸钙沉淀形成的效果及持钙能力.结果表明CPP对钙的结合量随温度的升高而减少,随pH值的升高而增加;CPP对阻止磷酸钙沉淀的作用随温度升高和溶液钙磷比增加而下降;随氮磷摩尔比降低,CPP阻止磷酸钙沉淀形成的最低有效浓度下降;对于不同的钙磷比,CPP的氮磷摩尔比越小,保持在溶液中的钙量越多,但每摩尔磷保持钙的摩尔数随氮磷摩尔比的降低而降低.     

Fe3O4@ZrO2磁纳米粒子在酪蛋白磷酸肽富集中的应用

本实验将制备好的Fe₃O₄@ZrO₂磁性纳米粒子作为载体,对经胰蛋白酶消化后的酪蛋白磷酸肽（Casein Phosphopeptides,CPP）进行高效地选择性富集。实验以CPP的N/P（摩尔比）以及磁纳米粒子吸附量为评价指标,进行单因素实验以便选取较优的实验因素,分析酪蛋白水解度、吸附pH、吸附时间、吸附温度及肽溶液初始浓度这五个因素对Fe₃O₄@ZrO₂磁性纳米粒子选择性吸附CPP的能力的影响,优化CPP富集的技术参数。结果表明,磁性材料最佳富集工艺系数为:酪蛋白的水解度为22%,反应pH=4.5,吸附温度为30 ℃,吸附时间为50 min,肽溶液初始浓度为50 mg/mL;在此条件下,可得到N/P（摩尔比）为4.87的CPP,磁纳米粒子的吸附量为94.37 mg/g,且用NaOH(pH13)溶液进行解析,CPP的洗脱率可达95%以上。综上,Fe₃O₄@ZrO₂磁性纳米粒子呈现出优异的选择性富集CPP的潜力,对高质量高纯度CPP 的生产具有重要的指导意义。     

树脂法分离纯化桑葚花色苷

分别对12种大孔吸附树脂和6种阳离子交换树脂对桑葚花色苷的吸附性能进行了比较,通过静态吸附和解吸实验筛选出最佳大孔吸附树脂为LX-68,最佳阳离子交换树脂为D001。分别对这2种树脂进行静态和动态条件优化,确定了LX-68树脂最佳纯化条件为:以吸光度值0.991,pH值为3的色素液,8BV/h上样,用pH值为2、体积分数为80%的酸性乙醇作洗脱剂,洗脱流速为1BV/h,纯化后色素色价为114,纯度为39.9%,花色苷收率为91.5%。D001树脂最佳纯化条件为:以吸光度1.411Abs,pH值为2的色素液,6BV/h上样,用pH值为1、60%的酸性乙醇以3BV/h的洗脱流速洗脱,得到色价为65的色素粉末产品,纯度为24.1%,花色苷收率为67.6%。LX-68树脂和D001树脂对桑葚花色苷均具有较好的吸附分离性能,且LX-68树脂的分离效果优于D001树脂。     

CPP(酷蛋白磷酸肽)新生产工艺研究

本文研究了高N／P(摩尔比)CPP的生产工艺。采用纳滤工艺生产所得CPP的N／P(摩尔比)为24-32，灰份含量在6％左右；N(氮)和P(磷)的得率分别为86．43％和99．60％。Sephadex—G15凝胶层析和HPLC分析结果表明纳滤能透过部分的氨基酸和短肽，从而改善CPP产品质量。     

一株食源性单增李斯特菌镉、砷耐受基因的测序分析

酪蛋白磷酸肽（casein phosphopeptides,CPP）是以牛乳酪蛋白为原料,含有成簇的磷酸丝氨酸的生物活性肽。本文通过比较两种不同氮磷摩尔比（N/P）的CPP样品抑制钙离子形成沉淀的功能以及pH值、温度和CPP浓度对其的影响,并与柠檬酸和木糖醇的协同作用进行比较研究。结果表明：CPP浓度是CPP作用效果的主要影响因素,pH值对CPP影响较大,其次是柠檬酸和木糖醇的添加。温度对CPP作用效果几乎没有影响;柠檬酸和木糖醇与两种CPP之间都有一定的协同作用并且两种CPP与柠檬酸的协同作用效果接近。且浓度越高,效果越好。在抑制金属离子沉淀,pH、CPP浓度和木糖醇协同作用上CPPⅡ的作用效果较好,但温度对其两者都没有影响。两种CPP样品都具有良好的功能性质,但氮磷摩尔比（N/P）低的CPPⅡ性质更优。本试验为我国研究开发富含CPP的功能性食品以及营养保健食品提供理论基础。     

食用菌中氨基酸与铜离子配合工艺优化

以香菇为原料,采用酸水解提取法提取出复合氨基酸,并用氨基酸树脂对提取液中复合氨基酸进行纯化。对复合氨基酸与铜离子配合反应及产物进行初步的探讨研究。确定最佳的反应条件为反应温度70℃、反应时间70min、pH11.0,在此条件下,铜离子:氨基酸配合比为1:2(摩尔数比)。采用红外光谱对产物进行表征,得到了配合物的稳定常数。     

花生短肽脱盐工艺研究

对花生短肽脱盐方法进行了系统研究,比较了阴阳离子交换树脂法、大孔树脂法和阴阳离子混合床法的脱盐效果,结果显示,阴阳离子混合床脱盐法效果最优。在此基础上,对花生短肽阴阳离子混合床脱盐工艺进行优化,确定了花生短肽脱盐较优参数组合为:水解液过柱速度为5~10倍柱体积/h、水解液初始pH值4.5、阴阳离子树脂比例为3:2,在此条件下花生短肽脱盐率和回收率均大于80%。成分测定结果表明,脱盐后花生肽纯度达到90.25%。     

732离子交换树脂和DEAE-23树脂纯化大蒜多糖比较

大蒜多糖是具有多种生物活性的杂果聚糖,为探讨其工业化制备的方法,对比了强酸性阳离子交换树脂（732）和DEAE-23树脂制备该多糖的流速、交换容量等操作参数,分析了其产品的蛋白质含量、大蒜多糖产量、红外光谱等质量指标.结果表明：732离子交换树脂和DEAE-23树脂制备的大蒜多糖红外光谱基本一致,产率分别为12.3%和10.37%,732DEAE-23树脂离子交换树脂的交换容量较大,制备过程简单、速度较快,成本较低,是较适宜工业化生产大蒜多糖的方法.     

市售两种酪蛋白磷酸肽产品持钙能力的比较

对市售两种酪蛋白磷酸肽(CPP)产品体外结合钙离子的能力(即持钙能力)进行了测定和比较，结果表明CPP产品在弱碱性溶液中能有效抑制和延缓Ca3(PO4)2沉淀的产生，且在相同条件下，纯度越高，N／P值越低的CPP产品持钙能力越强。本文还讨论了在产品研发过程中如何选用CPP产品。