胃癌差异表达蛋白的蛋白质组学分析

目的筛选与鉴定胃癌差异表达蛋白质分子。方法采用定量蛋白组学方法,通过同位素i TRAQ标记胃癌与正常胃黏膜组织总蛋白,然后用强阳离子交换/反相液相色谱(SCX/nano HPLC)进行电喷雾串联质谱分析(ESI-MS/MS),获得两组样本的多肽及相对丰度信息,通过数据库搜索与比对,鉴定差异表达蛋白质。结果共鉴定出319个蛋白质,其中表达差异在2倍以上的88个,在胃癌中呈高表达的12个、呈低表达的76个。按蛋白质功能分为七大类:细胞骨架蛋白、分子伴侣、信号传导、生物代谢、凋亡,蛋白质合成与代谢类及其他蛋白质。结论成功筛选了胃癌差异表达蛋白质分子,这些蛋白质的表达改变,可能参与了胃癌的发生和发展。     

Ku70与hTERT在胃癌组织中的表达及其意义

目的探讨Ku70和人端粒酶逆转录酶(h TERT)蛋白表达与胃癌发生发展的关系及两者之间的联系。方法应用免疫组织化学方法检测Ku70和h TERT蛋白在10例正常胃黏膜、15例胃癌前病变黏膜和20例胃癌组织中的表达。结果 Ku70蛋白阳性表达定位于正常胃黏膜和胃癌组织的细胞核,胃癌前病变黏膜的细胞浆,其阳性表达率分别为90%、100%和80%;h TERT蛋白在正常胃黏膜几乎不表达,在胃癌前病变黏膜和胃癌组织中均定位于细胞浆,其阳性表达率分别为30%、100%和100%。胃癌组织中Ku70和h TERT蛋白的表达强度明显高于正常胃黏膜和胃癌前病变黏膜。Ku70和h TERT蛋白的表达显著相关。结论 Ku70和h TERT蛋白可能与胃癌的发生发展过程相关。     

HSP90α/β蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义

目的观察热休克蛋白90α/β(heat shock protein 90α/β,HSP90α/β)在胃癌组织中的表达及临床意义,为胃癌的早期诊断与分子病理分型提供有价值的实验资料。方法采用免疫组织化学染色结合组织芯片,观察HSP90α/β蛋白质在正常胃黏膜组织、癌旁组织及胃癌组织中的表达;然后分析HSP90α/β蛋白质在胃癌组织中表达的临床意义。结果免疫组织化学染色结果显示,胃癌组织中HSP90α/β蛋白质表达的阳性率高于正常胃黏膜组织和癌旁组织(P<0.05);癌旁组织中表达的阳性率高于正常胃黏膜组织(P<0.05);淋巴结转移患者组织中表达的阳性率高于无淋巴结转移者(P<0.05);Ⅲ~Ⅳ期患者组织中表达的阳性率高于Ⅰ~Ⅱ期(P<0.05)。结论 HSP90α/β蛋白质的表达与胃癌组织的发生、分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关,即随着胃癌组织分化程度的降低、淋巴结转移的发生及TNM分期的增加而表达升高。     

胃癌中葡萄糖调节蛋白78的表达及其临床病理学意义

目的检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在胃癌组织中的表达,分析其临床病理学意义,探讨GRP78在胃癌发生发展中的作用。方法收集48例不同临床分期及不同分化程度胃腺癌及28例癌旁正常胃黏膜组织标本,分别应用RT-PCR、Western Blotting和免疫组化检测GRP78 mRNA和蛋白质的表达。结果与正常胃黏膜组织相比,胃癌组织中GRP78 mRNA及蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。免疫组化检测GRP78阳性表达定位于胞浆,在正常胃粘膜组织中GRP78阳性表达率为10.7%(3/28),高、中分化与低分化胃癌组织阳性表达率分别为59.4%(19/32)和93.8%(15/16);直径≥5 cm的胃癌组织中GRP78阳性表达率(88.9%,16/18)高于直径<5 cm的胃癌组织(60%,18/30),Ⅲ、Ⅳ期(TNM分期)病例胃癌组织中GRP78阳性表达率(90.5%,19/21)高于Ⅰ、Ⅱ期病例(55.6%,15/27);5年内病情复发或者死亡病例胃癌组织中GRP78阳性表达率(82.8%,24/29)高于5年内病情无复发病例(52.6%,10/19);淋巴结转移胃癌组织中GRP78阳性表达率(96.2%,25/26)明显高于非淋巴结转移胃癌组织(40.9%,9/22),各组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 GRP78在胃癌组织中高表达,其表达水平与胃癌肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、临床分期及预后密切相关。     

胃癌组织COMP蛋白表达的临床病理意义

目的观察软骨寡聚基质蛋白(COMP)在胃癌组织中的表达意义。方法采用免疫组化观察COMP蛋白组织芯片(包括正常胃黏膜、癌旁及胃癌组织)中的表达,并分析其表达的意义。结果免疫组化结果显示COMP蛋白在胃癌组织中阳性表达率高于正常胃黏膜和癌旁组织(P<0.05);癌旁组织高于正常胃黏膜组织(P<0.05);有淋巴结转移组织高于无淋巴结转移者(P<0.05);Ⅲ~Ⅳ期患者组织高于Ⅰ~Ⅱ期(P<0.05)。结论COMP蛋白表达随着胃癌组织分化程度降低、淋巴结转移及TNM分期增加表达升高。     

PTEN蛋白在胃癌中的表达及临床病理意义

目的研究10号染色体缺失的张力蛋白同源磷酸酶基因(PTEN)蛋白在胃癌中的表达与临床病理的关系,为寻找胃癌肿瘤标记物提供一定的实验依据。方法应用组织芯片及免疫组化方法检测140例胃癌组织、54例癌旁胃黏膜组织与64例正常胃黏膜组织中PTEN的表达情况,研究PTEN与胃癌发生发展的关系。结果PTEN蛋白在正常组织表达85.94%(55/64)明显高于癌前病变51.85%(28/54)与胃癌20.71%(29/140)(P<0.05),而癌前病变表达显著高于胃癌(P<0.05)。PTEN在高分化、中分化、低分化腺癌、黏液癌与印戒细胞癌分别表达44.83%(13/29)、26.08%(6/23)、14.58%(7/48)、7.40%(2/27)与7.69%(1/13),各组间差异具有显著性(P<0.05)。PTEN在淋巴结转移组表达11.53%(12/104)明显低于无淋巴结转移组47.22%(17/36)(P<0.05)。在Ⅰ+Ⅱ期表达38.30%(18/47)明显高于Ⅲ+Ⅳ期11.83%(11/93)(P<0.05)。结论 PTEN蛋白下调与胃癌的发生、分化程度、淋巴结转移和临床分期有关。     

组织芯片分析PRSS2蛋白在胃癌组织中的表达与意义

目的采用组织芯片分析PRSS2蛋白在胃癌组织中表达与意义,为获取胃癌诊断相关的蛋白分子提供实验资料。方法首先收集8例胃癌手术切除标本,包括正常胃粘膜、癌旁组织与胃癌组织,选用Westernblotting方法检测PRSS2蛋白在正常胃粘膜、癌旁组织与胃癌组织中的表达;其次运用免疫组织化学染色方法观察组织芯片(包括正常胃粘膜、癌旁和胃癌组织)中PRSS2蛋白在胃癌组织中的表达,分析其临床意义。结果胃癌组织中PRSS2蛋白表达较正常胃粘膜和癌旁组织明显升高,癌旁组织中的表达较正常胃粘膜组织升高;正常胃粘膜、癌旁和胃癌组织中PRSS2蛋白的阳性表达率分别为14.29%(5/34)、26.92%(7/26)和77.78%(63/81),在胃癌组织中高分化、中分化和低分化腺癌的阳性表达率分别为60.00%(3/5)、70.59%(12/17)和81.36%(48/59);PRSS2蛋白的阳性表达与胃癌组织的分化程度也呈现负相关。结论 PRSS2蛋白在胃癌组织中表达较正常胃粘膜和癌旁组织高,癌旁组织中的表达较正常胃粘膜组织高,该蛋白表达与胃癌组织的发生和分化程度有关。     

加味七方胃痛颗粒对胃癌癌前病变大鼠CDK2/4的干预效应

目的:探讨加味七方胃痛颗粒对胃癌癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)大鼠CDK2/4基因的干预效应。方法:采用化学致癌物N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N-nitro-N-nitroso-guanidine,MNNG)建立胃癌癌前病变动物模型,采用免疫组化检测CDK2/4基因表达,Western blot法检测各组大鼠PLGC胃黏膜组织CDK2/4的表达水平。结果:与模型组比较,加味七方胃痛颗粒组和胃复春组的胃黏膜萎缩程度、胃黏膜肠化生程度明显减轻;加味七方胃痛颗粒组、胃复春组CDK2/4基因蛋白表达显著降低(P<0.01);相对于胃复春组,加味七方胃痛颗粒CDK2/4蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:加味七方胃痛颗粒可能是通过下调CDK2/4基因蛋白的表达,改善胃黏膜病理变化,抑制细胞分裂与增殖,从而干预PLGC进展。     

乳腺癌组织冰冻与否对其常用免疫组织化学结果的影响

目的:探讨乳腺癌组织冰冻与否对其常用免疫组织化学结果的影响。方法:收集近年来60例乳腺浸润性导管癌根治手术的病理组织蜡块(必须有术中冰冻病理检查),时间为2016年1月—2017年12月,将标本分别对应分类为冰冻组织与冰剩组织,分别制作成冰冻芯片与冰剩芯片,采用免疫组织化学S-P法检测ER、PR、cerbB-2、Ki-67、P53阳性表达情况,并对比术中冰冻病理结果与术后石蜡病理的符合率。结果:冰冻芯片与冰剩芯片的cerbB-2蛋白、Ki-67、P53、ER、PR阳性结果比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。冰剩组织与术后石蜡病理对比,组织学大小≤3 cm符合率93.75%,组织学大小>3 cm符合率100%,两者比较差异有统计学意义(χ~2=6.398,P=0.011<0.05),整体符合率为95.00%(57/60)。组织学级别上,整体符合率为91.67%(55/60),与冰冻切片相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:乳腺癌组织冰冻会影响乳腺癌标记物的阳性表达,建议病理医师选择冰剩组织进行免疫组织化学染色,从而为患者提供更精准的结果。     

HP感染与胃癌发生部位、分类及分期分析

目的近年来研究证实幽门螺杆菌(HP)感染参与了胃癌的发生发展。本研究分析HP感染与胃癌发生部位和分类及分期的关系。方法采用回顾性分析183例确诊为胃癌、并施行胃癌根治术患者的胃癌样本,根据Lauren及Lauren分型;病理组织切片,经HE和Giemsa染色,观察HP感染。结果 183例胃恶性肿瘤中,胃腺癌168例(91.8%),淋巴瘤11例(6%),平滑肌肉瘤2例(1.0%),胃肠间质瘤(GIST)1例(0.5%)和卡波西肉瘤1例(0.5%)。胃癌患者中,病变55.4%发生在胃窦,21.4%发生在胃体,14.3%在胃底(P值=0.018);肠型胃癌占65%,弥漫型胃癌占24.8%,混合型10.2%;69.6%有HP感染(肠型64%,弥漫型33%,混合型10%,P值=0.327)。结论胃窦癌、胃体癌及胃底癌组间HP感染率存在差异,提示HP感染可能与胃癌发生部位有关。