HPLC法快速测定婴幼儿配方奶粉中维生素B_1

建立了快速测定婴幼儿配方奶粉中维生素B_1的高效液相色谱法。样品经水提取,饱和乙酸铅溶液沉淀蛋白,碱性铁氰化钾衍生,采用C_(18)色谱柱分离,以乙酸钠-甲醇(65∶35,V/V)为流动相,荧光检测器检测。该方法检出限为0.2 mg/kg,线性范围为0.01~1.0μg/m L,样品加标回收率在86.0%~88.8%之间。该方法样品前处理简便快速、测定结果符合定性定量要求,适用于婴幼儿配方奶粉中维生素B_1的测定。     

酶联免疫法检测婴幼儿配方奶粉中的维生素B_(12)

建立酶联免疫法检测婴幼儿配方奶粉中维生素B_(12)的分析方法,该方法线性相关系数大于0.996,范围在3~243μg/kg。奶粉样本经60%甲醇-水提取,再做1︰4稀释,通过酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定样本中维生素B_(12)。加标浓度为20μg/kg,奶粉中维生素B_(12)的回收率在95%~118%;加标浓度0,3,6,20和50μg/kg,样本的加标回收率在87%~102%;方法检出限为3μg/kg;与高效液相色谱法检测结果的相对标准偏差小于10%。方法操作简便,准确度和灵敏度高,可适用于婴幼儿配方奶粉中维生素B_(12)的检测。     

同位素内标-高效液相色谱质谱法测定婴幼儿配方乳粉中维生素B6和生物素

目的建立同位素内标和高效液相色谱串联质谱法(highperformanceliquidchromatographytandem mass spectrometry, HPLC-MS/MS)同时测定婴幼儿配方乳粉中维生素B_6含量(吡哆醛、吡哆醇和吡哆胺)和B_7(生物素)的分析方法。方法样品加入同位素内标后,使用温水溶解,并用高氯酸沉淀蛋白质,上清液过滤后经HSS T3色谱柱分离,三重四极杆质谱仪检测,内标法定量。结果在最优化条件下,维生素B_6和生物素分别在1.0～100μg/L和0.10～10.0μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.998;定量限分别为10.0μg/100 g和1.0μg/100g。4种化合物的回收率为86.5%～97.9%,相对标准偏差为3.0%～6.6%。质控样品检测结果表明该方法准确可靠。结论该方法灵敏度高、净化效果好、定量准确,适用于婴幼儿配方乳粉中维生素B_6和维生素B_7的检测。     

高效液相色谱法测定婴幼儿配方米粉和乳粉中 烟酸和烟酰胺含量

目的建立高效液相色谱法测定婴幼儿配方米粉和乳粉中烟酸和烟酰胺的提取分析方法。方法婴幼儿配方米粉和乳粉以10%甲醇+0.1%磷酸水溶液为提取液,超声提取,离心去除杂质,取上清液并用微孔滤膜(0.2μm)过滤,以十二烷基硫酸钠(SDS)缓冲液-乙腈(74:26,V:V)为流动相,利用高效液相色谱分析,外标法定量。结果该方法经过验证在0.20~30 mg/L质量浓度范围内,线性关系良好,烟酸、烟酰胺相关系数大于0.999,回收率在99.07%~110.33%之间,RSD小于5%。结论与现行标准方法相比,本方法前处理方法简单、基质干扰小,测定结果准确度高、重现性好,尤其对米粉中烟酸及烟酰胺的提取效率更高,可用于婴幼儿配方米粉和乳粉中烟酸及烟酰胺含量测定的快速、批量分析。     

婴幼儿乳粉中维生素B_(12)检测的实验室间比对结果分析

通过婴幼儿乳粉中维生素B_(12)检测的实验室间比对,提高实验室对婴幼儿食品和乳粉中维生素B_(12)的检测能力。利用莱士曼氏乳杆菌对维生素B_(12)的特异性和灵敏性,定量测定试样C00076中维生素B_(12)的含量,并通过多种质量控制措施对测定结果进行分析评价。结果表明,本实验室检测结果为1.7μg/100 g,广州市食品检验所检测结果为1.7μg/100 g,再现性标准差为0。实验室间比对实验结果为满意,表明本实验室婴幼儿食品和乳粉中维生素B_(12)的测定能力良好,并对微生物方法提出改进建议,为今后维生素B_(12)的测定提供一定的参考。     

同时测定婴幼儿乳粉中维生素B_2、维生素B_3、维生素B_6的方法

本文建立了一种同时测定婴幼儿乳粉中维生素B_2、B_3和B_6的高效液相色谱法。前处理中运用等电点法去除蛋白质干扰,在流动相中添加辛烷磺酸钠离子对试剂,并对其pH进行优化,采用二极管阵列检测器(DAD),通过梯度洗脱程序,实现了多组分的分离。结果表明,目标物在各自浓度范围内线性良好,线性相关系数均大于0.999,加标回收率在92.48%~104.12%范围内,相对标准偏差为0.45%~2.16%。用于实际样品的检测,结果满意。     

快速测定婴幼儿配方乳粉中的维生素B1及B2

建立高效液相色谱-荧光法快速测定婴幼儿配方乳粉中维生素B₁及维生素B₂。方法优化了前处理条件,采用高压酸提法提取目标化合物,样品沉淀蛋白后直接测定维生素B₂,取部分清液用碱性铁氰化钾衍生后测定维生素B₁。目标物在对应的浓度范围内呈现良好的线性关系（R²≥0.9998）,样品加标回收率在92.4%～102%之间。该方法快速,准确,适用于婴幼儿配方乳粉中维生素B₁、B₂的测定。     

免疫亲和-HPLC法测定婴幼儿配方乳粉中维生素B_(12)

目的:建立免疫亲和-高效液相色谱法测定婴幼儿乳粉中维生素B12的方法。方法:样品经缓冲溶液提取、过滤,滤液过维生素B12免疫亲和柱净化后,洗脱液在60℃下氮吹定容上机。采用C18色谱柱,柱温为30℃,流动相为乙腈和水(15∶85),梯度洗脱,流速为0.25m L/min,紫外检测器波长为361nm,外标法定量。结果:维生素B12在0.01~1μg/m L范围内呈良好线性关系,相关系数(r)为0.999 9。本方法的检出限为5μg/kg。在样品中添加不同添加量水平的标准物质,加标回收率为80%~89%;选择不同含量的样品,重复测定相对标准偏差(RSD)为0.3%~1.6%。结论:该方法较现行国标GB 5413.14—2010的微生物法操作简便,易于掌握,可提高工作效率。     

高效液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿乳粉中维生素D_2和D_3

建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定婴幼儿乳粉中维生素D2和D3含量的分析方法。婴幼儿配方乳粉中的维生素D2和D3经过皂化,以石油醚作为萃取溶剂,采用JADE-PAK CB-C18色谱柱分离,以0.1%甲酸甲醇为流动相进行等度洗脱,流速为200μL/min,进样体积为10μL,柱温25℃,电喷雾质谱检测,正离子选择反应监测模式进行定性和定量分析。结果表明:维生素D2和D3在0.05~0.5 mg/L范围内与维生素D2和D3峰面积的线性关系良好(R20.98);以20,40和100μg/kg 3个添加水平进行添加回收试验,维生素D2和D3的平均回收率为85%~90%之间,相对标准偏差不高于5.3%;维生素D2、维生素D3的检出限均为2μg/kg。该方法简单、快速、重复性好,可以为婴幼儿配方乳粉中维生素D2和D3含量的分析测定提供依据。     

高效液相色谱法测定婴幼儿配方乳粉中的维生素B1、维生素B2

目的建立高效液相色谱法快速测定婴幼儿配方乳粉中的维生素B1、B2的含量。方法样品进行前处理后,采用Waters Xbridge C18色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5μm)进行分离。以0.05 mol/L乙酸钠溶液-甲醇为流动相等度洗脱,柱温为30℃,流速为1 mL/min,荧光检测器进行检测,外标法定量。结果在优化的实验条件下,维生素B1、维生素B2可以有效分离,线性范围为0.05～1.00μg/mL,相关系数均大于0.999。维生素B1的加标回收率为87.4%～99.1%,相对标准偏差为1.2%～3.06%,检出限为0.03 mg/100 g;维生素B2的加标回收率为90.6%～97.8%,相对标准偏差为0.97%～3.44%,检出限为0.02 mg/100 g。结论此方法简单、快捷、高效,适用于婴幼儿配方乳粉中维生素B1、维生素B2的测定。     

反相高效液相色谱法快速测定婴儿配方乳粉中的维生素A酯类化合物

目的：开发一种快速测定婴儿配方乳粉中维生素A 酯类含量的反相高效液相色谱法。方法：直接使用二氯甲烷和甲醇体积比为2.5:1 的混合溶剂对样品进行提取,在30℃的条件下采用等度洗脱,流动相采用体积比为80:20 的甲醇- 三氯甲烷溶剂,流动相流速1.0mL/min;色谱柱温度30℃,检测波长325nm。结果：维生素A 醋酸酯和维生素A 棕榈酸酯的回收率分别为100.1% 和102.8%,多次测定结果的相对偏差分别为1.18% 和0.96%,检出限分别为3.1ng 和4.3ng。结论：本方法操作简单、精密度、回收率和灵敏度高,适用于婴幼儿配方乳粉中的维生素A 酯类的检测。     

UPLC-MS/MS测定婴幼儿配方乳粉中双酚A和壬基酚

建立一种测定婴幼儿配方乳粉中双酚A和壬基酚的超高效液相色谱串联质谱准确定性定量方法。向配方乳粉样品中加水溶解,乙腈提取,使用在线捕集技术消除流动相中的本底影响,以甲醇-0.1%氨水溶液作为流动相在C₁₈色谱柱上进行梯度洗脱,用超高效液相色谱仪进行分离后,通过电喷雾负离子模式电离,多反应检测模式进行检测分析,内标法准确定量。结果表明:在1~2000 ng/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数大于0.999。本方法BPA和NP检出限均低至0.1 μg/kg,在不同婴幼儿配方乳粉中添加1、10、100 μg/kg三水平加标,测定结果平均回收率在89.5%~102.8%之间,相对标准偏差为1.3%~4.8%,该方法具有较高的灵敏度和准确度。对市售200份婴幼儿配方乳粉进行测定,检出BPA含量为0.1~30.0 μg/kg,检出NP含量为1.1~105 μg/kg,适合婴幼儿配方乳粉中双酚A和壬基酚的定量测定。     

婴幼儿配方乳粉中三聚氰胺检测中前处理方法的优化

目的改进婴幼儿配方乳粉中三聚氰胺的检测方法。方法样品经高浓度三氯乙酸溶液-乙腈提取过滤,后经阳离子交换固相萃取柱净化,用高效液相色谱法测定,采用外标法定量。结果改进方法的检测时间缩短4 h,在0.5~10μg/m L范围内检测结果线性关系良好,方法检出限为0.5 mg/kg,定量限为1.5 mg/kg,回收率提高到99.3%~102%,精密度为0.47%,稳定性相对标准偏差为0.96%,能力验证结果表明可靠性好。结论改进方法能快速有效对婴幼儿配方乳粉产品进行检测,结果可靠,具有实践应用价值。     

高效液相检测婴儿配方乳粉中的维雏生素B12

目的:建立婴儿配方乳粉中维生素B12的高效液相测定方法.方法:采用BDS HYPERSIL C18柱(150mm×4.6mm,5μm),以水-乙腈为流动相;流速0.25mL/min,检测波长361am.结果:维生素B12的检出限为20ng/mL,线性范围在0.0506～3.23841μg/mL,回收率在92.23%～96.68%,相对标准偏差(RSD)为2.04%.结论:本方法快捷准确,适用于婴儿配方乳粉中添加的维生素B.2的测定.     

柱前衍生液相色谱荧光检测法测定婴幼儿配方乳粉中的低聚半乳糖

目的建立一种柱前衍生高效液相色谱荧光检测法测定婴幼儿配方乳粉中的低聚半乳糖含量的分析方法。方法样品用2-氨基苯甲酰胺衍生后,经色谱柱分离,用高效液相色谱-荧光检测器检测,外标峰加和分段法定量。结果建立的方法可以测定婴幼儿配方乳粉中的低聚半乳糖含量。采用麦芽糖、麦芽三糖、麦芽四糖、麦芽五糖、麦芽六糖和麦芽七糖建立标准曲线,在1～250μg/mL线性范围内相关系数(r~2)大于0.999。回收率为85.9%～103.5%,相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)小于5%,检出限为1.0 g/kg,定量限为3.0 g/kg。结论本方法方法重现性好,精密度高,解决了婴幼儿配方乳粉中高含量乳糖对低聚半乳糖测定的干扰问题,可以为食品中低聚半乳糖的定量提供良好的解决方案。     

高效液相色谱法同时测定乳粉中烟酸、烟酰胺和维生素B_6

介绍了高效液相色谱法同时测定配方乳粉中烟酸、烟酰胺和维生素B6的方法。方法采用C18柱(5μm,250mm×4.6mm),以甲醇、辛烷磺酸钠、三乙胺配制的流动相,流速1.0m L/min进行等度洗脱,16min内可以实现对待测组分的基线分离。结果表明,待测组分在各自浓度范围内线性良好,线性相关系数均大于0.999,平均加标回收率为88.6%~109.8%,相对标准偏差为0.33%~2.25%。该方法准确、快速、灵敏度高,适合配方乳粉中烟酸、烟酰胺和维生素B6含量的同时测定。     

反相高效液相色谱法检测婴幼儿配方乳粉中叶酸的含量

目的:建立了快速、灵敏地检测婴幼儿配方乳粉中叶酸含量的方法.方法:在配方乳粉中加入60%的高氯酸溶液去蛋白,取一定量的滤液经过舍有C18填料的固相萃取小柱进行除杂,再经过高锰酸钾衍生后利用反相高效液相色谱测定叶酸的含量.流动相选用pH5.0的浓度为0.1mol/L的磷酸二氢钠溶液,流动相流速为1.0mL/min,经BDS C18色谱柱进行分离(柱温为30℃).结果:方法在0.005～1.5μg/mL范围内线性良好,方法的回收率为91.7%-98.3%,RSD为2.5%.结论:应用本方法检测婴幼儿配方乳粉中的叶酸,具有操作简单、精密度高、重现性好、容易推广等优点.     

免疫亲和柱-液相色谱法快速测定面粉中黄曲霉毒素B_1的条件优化

建立了免疫亲和柱-液相色谱法快速测定面粉中黄曲霉毒素B_1的方法。样品经甲醇-水(80:20,v/v)提取,经过滤、沉淀(乙酸锌和亚铁氰化钾),通过免疫亲和柱净化,三氟乙酸和正己烷为衍生剂进行衍生,采用C_(18)柱为分离柱,乙腈:水(50:50,v/v)为流动相进行高效液相色谱分离分析。实验结果表明,黄曲霉毒素B_1线性范围(1~10)ng/m L,R2=0.9991,RSD=3.4%,检出限为0.1μg/kg,实际样品的黄曲霉毒素B_1回收率为81%~95%。该方法具有灵敏度高、回收率高、重现性好等优点,可用于面粉中黄曲霉毒素B_1的快速测定。     

超高效液相色谱法测定婴幼儿乳粉中维生素D3质量分数

针对婴幼儿配方乳粉中维生素D3的测定,开发出一种快速、准确、高效的超高效液相色谱方法.耍幼儿配方乳粉经脂肪酶、抗坏血酸-乙醇溶液和KOH溶液低温皂化后石油醚萃取,萃取液经旋转蒸发,最终用甲醇定容后,用超高效液相色谱仪检测.以甲醇+水为流动相等度洗脱,流速0.1 mL/min,柱温30 ℃,DAD扫描波长范围190～400 nm,检测波长为264 nm,维生素D3外标法定量.结果表明:维生素D3加标回收率为93.4％,95.3％和96.5％,RSD为1.45％,最低检出限为0.2 μg/100 g.本法操作步骤简单、回收率及精密度较高,适用于婴幼儿配方乳粉及同类产品中维生素D3的快速测定.     

免疫亲和柱—超高效液相色谱法测定维生素饮料中维生素B_(12)

采用免疫亲和柱—超高效色谱法建立维生素饮料中维生素B_(12)的测定方法,样品经免疫亲和柱富集、净化后,用3mL甲醇以流速为1滴/秒的速度洗脱,氮气吹干后溶解再经超高效液相色谱法测定。色谱柱为HSS T3,柱温35℃,流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液梯度洗脱,流速为0.6mL/min,波长为360nm测定。结果表明,维生素B_(12)在浓度为0.4~10μg/L内线性关系良好,回归方程为Y=4 040X-364,相关系数为0.997 00,回收率为94.68%,检出限为0.1μg/L。本方法具有操作简单、灵敏度高、结果准确、检测效率高等优点,满足于成分复杂、维生素含量低的维生素饮料中B_(12)的测定要求。