樟芝多糖抑制肿瘤相关成纤维细胞生成的作用研究

目的: 研究樟芝多糖抑制肝癌细胞条件性培养基诱导骨髓间充质干细胞（MSC）向肿瘤相关成纤维细胞转化的作用。方法: 分离人肝癌细胞HepG2培养基（CM）,将骨髓间充质干细胞分为正常组、对照组和实验组,正常组为常规DMEM培养基+10%胎牛血清（FBS）,对照组为CM+10%FBS培养,实验组为CM+10%FBS培养+10 mg/L的樟芝多糖培养。应用CCK-8试剂盒检测MSC的细胞活性,BrdU标记-流式细胞术检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率,PI染色检测细胞周期变化,Western blot法检测α-平滑肌激动蛋白（α-SMA）、肌间线蛋白（Desmin）、成纤维细胞活化蛋白（FAP）、凝血酶敏感蛋白1（Tsp-1）、成纤维细胞特异蛋白（FSP）的表达以及转化生长因子β1（TGF-β1）、信号转导分子（Smad1、Smad2）的表达水平,免疫荧光染色法检测α-SMA、FAP和FSP的表达水平。结果: 对照组MSC的细胞活力显著高于正常组和实验组（P<0.05）,三组细胞的细胞凋亡率无统计学差异（P>0.05）,对照组MSC中G0/G1期比例降低,S期比例增高,相比正常组和实验组具有统计学差异（P<0.05）,对照组MSC中α-SMA、Desmin、FAP、Tsp-1、FSP的表达水平以及TGF-β1、Smad1、Smad2的表达水平显著高于正常组和实验组（P<0.05）,免疫荧光结果也显示对照组中α-SMA、FAP和FSP的水平显著高于正常组和实验组（P<0.05）。结论: 肝癌细胞条件性培养基可以促进MSC向肿瘤相关成纤维细胞转化,而樟芝多糖可以抑制该转化,这是樟芝多糖抗肿瘤作用的机制之一。     

成纤维细胞生长因子-1治疗糖尿病及相关疾病的研究进展

酸性成纤维细胞生长因子（又称FGF-1）作为较早发现的成纤维细胞生长因子家族的重要成员,其刺激血管生长、加速创伤愈合和促进神经损伤修复等作用已被广泛认可,近年来它在内分泌系统中潜在的生物学功能的研究也成为热点。本文就FGF-1的结构功能、受体信号转导通路及对糖尿病的治疗作一综述。     

青蒿琥酯对成纤维细胞和内皮细胞的选择性研究

目的: 探讨青蒿琥酯(Art) 是否对成纤维细胞增殖有特异的细胞选择作用。方法: 选用人胚肺成纤维细胞株(HLF) 、人皮肤瘢痕成纤维细胞(HSF) 和人脐静脉内皮细胞(HUVEC), 用免疫组化法鉴别细胞;MTT 法检测青蒿琥酯对上述3 种细胞存活与增殖的影响;光镜观察青蒿琥酯作用下细胞形态学的改变;琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA 的变化。结果: 青蒿琥酯在30 ~ 240 mg·L^-1浓度范围内作用细胞24 h 对两种来源的成纤维细胞的增殖都具有明显的抑制作用(P <0.05), 对血管内皮细胞增殖抑制作用不明显(P >0.05) 。药物作用24 h 后,HLF 、HSF 、HUVEC 细胞的IC₅₀ 分别为:64、60、600 mg·L^-1 。光镜下见两种成纤维细胞用药组细胞变圆, 突起变短变少, 胞浆颗粒增多;而内皮细胞在形态上无明显的变化。琼脂糖凝胶电泳结果显示在240 mg·L^-1浓度作用24 h, 两种成纤维细胞的DNA 出现梯带状的电泳图谱, 而内皮细胞的DNA 无梯状条带。结论: 青蒿琥酯对来源于肺和皮肤的成纤维细胞的增殖具有抑制作用, 而对血管内皮细胞生长增殖无明显的影响。该药还能诱导两种成纤维细胞凋亡, 而对脐静脉内皮细胞无明显诱导凋亡的作用。     

皖南蝮蛇毒抑瘤组分-I逆转原代胃癌相关成纤维细胞促癌作用

目的：探讨皖南蝮蛇毒抑瘤组分-I（agkistrodon halys venom antitumor component-I, AHVAC-I）抑制胃癌细胞迁移的生物学活性。方法：组织块培养法和胰酶消化法分离培养人原代胃癌相关成纤维细胞（GCAFs）;CCK8实验根据半数抑制浓度（IC50）确定AHVAC-I实验浓度;收集AHVAC-I作用GCAFs后的上清液（GCAFs-CMAHVAC-I）,划痕实验法和Transwell检测GCAFs-CMAHVAC-I抑制胃癌细胞株MKN-28迁移的能力;用ELISA、RT-PCR检测AHVAC-I作用后GCAFs分泌产生的趋化因子CXCL12。结果：AHVAC-I可显著抑制人原代GCAFs分泌的CXCL12（P<0.05）,AHVAC-I作用后生成的GCAFs-CMAHVAC-I明显抑制了胃癌细胞MKN-28的迁移能力（P<0.05）。 结论：AHVAC-I能够通过抑制GCAFs分泌生成的CXCL12抑制胃癌细胞MKN-28的迁移能力,逆转胃癌肿瘤微环境中的GCAFs的促进胃癌细胞转移的作用。     

肺纤维化的相关分子机制和治疗现状

肺纤维化（pulmonary fibrosisa, PF）是一种慢性进行性间质性肺疾病。PF的发病机制尚未明确,两种被批准用于PF治疗的抗纤维化药物,尼达尼布和吡非尼酮,已被证明可以减少PF的肺功能下降,但均具有副作用,至今尚无明显有效的治疗方法来阻止PF的进展。因此,在本综述中,我们重点关注肺纤维化所涉及的不同细胞,分子机制以及目前正对PF的治疗进展,从而为更好地在PF中理解这些细胞,分子机制及药物开发使用提供理论支持。     

芝麻素对自发性高血压大鼠海马nNOS和NADPH氧化酶亚单位p22phox、p47phox蛋白表达的调节作用

目的: 探讨芝麻素(sesamin,Ses)对自发性高血压大鼠(SHR)海马神经元型一氧化氮合酶(nNOS)及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亚单位p22phox、p47phox蛋白表达的影响。方法: 16周龄雄性SHR 40 只,随机分为SHR(0.5%羧甲基纤维素钠 5 mL•kg-1•d-1,n=10)模型组、Ses 高（160 mg•kg-1•d-1,n=10）和低（80 mg•kg-1•d-1,n=10）剂量组、卡托普利（30 mL•kg-1•d-1,n=10）阳性组。另设WKY（0.5%羧甲基纤维素钠5 mL•kg-1•d-1,n=10）正常对照组。各组于每日17时灌胃给药一次,连续12周。于末次给药后,禁食12 h,腹腔麻醉,取脑,尼氏染色观察海马锥体细胞病理变化并计数;比色法测定海马组织丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、超氧化物歧化酶(SOD)及总抗氧化能力(T-AOC)的含量;硝酸还原酶法测定海马组织NO含量;Western Blot法检测海马组织nNOS、p22phox及p47phox蛋白表达。结果: 芝麻素高、低剂量组对大鼠海马病理性损伤均有不同程度地改善,细胞数目增多(P<0.05或P<0.01),海马组织自由基（MDA、H2O2）减少,同时清除自由基和总抗氧化能力（SOD、T-AOC）明显升高(P<0.05或P<0.01);海马组织nNOS、p22phox和p47phox蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论: Ses具有改善SHR海马损伤的作用,其机制与抑制海马nNOS及p22phox、p47phox所介导的氧化应激损伤有关。     

抗肿瘤坏死因子单抗对脂多糖诱导的人牙周膜成纤维细胞TRAIL和TNF-α的影响

目的: 观察脂多糖对人牙周膜成纤维细胞(HPLFs )肿瘤坏死因子(TNF)受体相关凋亡诱导配体(TRAIL) 和TNF-α的诱导作用及抗肿瘤坏死因子单抗(抗TNF单抗)对其的影响,探讨TNF超家族参与牙周病的可能作用机制。方法: HPLFs培养至第6代, 加入不同浓度的脂多糖(0、0.1、1、10、100 μg/mL)培养 24 h,分为命名为Z₀组、Z_0.1组、Z₁组、Z₁₀组、Z₁₀₀组,并取Z₁组浓度的脂多糖,在加药的同时加抗TNF单抗 75 μg/mL( Z₁+75组)。分别采用实时荧光定量PCR法或Western blot法测定TRAIL 和TNF-α mRNA或蛋白的表达。结果: Z₁组、Z₁₀组HPLFs TRAIL mRNA的表达水平显著高于Z₀组或Z_0.1 组(均P<0.05),Z₁组与Z₁₀组之间差异无统计学意义(P>0.05); Z₁₀₀组显著高于Z₀组(P<0.05)且与Z_0.1组、Z₁组和Z₁₀组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。Z₁组或Z₁₀组TNF-α mRNA的表达水平显著高于Z₀组或Z₁₀₀组(均P<0.05);Z₁组与Z₁₀组之间,Z₀组、Z_0.1组和Z₁₀₀组之间差异无统计学意义(均P>0.05)。HPLFs TRAIL 蛋白的表达水平在Z₁₀₀组0组0.1组1组(均P<0.05 或<0.01);Z₁₀组显著高于Z₀组或Z₁₀₀组(均P<0.01),但与Z_0.1组或Z₁组之间差异无统计学意义(均P>0.05)。抗TNF单抗治疗后TRAIL mRNA及蛋白和TNF-α mRNA的表达水平显著低于Z₁组(P<0.05 和P<0.01)。TRAIL和TNF-α mRNA的表达水平呈显著直线正相关(r=0.819,n=30, P<0.01)。结论: HPLFs经脂多糖诱导后,其TRAIL和TNF-α的表达呈现先升高后下降,且随脂多糖的浓度变化而相应地变化,这种诱导作用能被抗TNF单抗所抑制。     

甘草提取物对TGF-β1诱导心肌成纤维细胞纤维化的影响

目的：考察甘草提取物对TGF-β1诱导心肌成纤维细胞（CFs）纤维化干预作用。方法：10 ng/mL TGF-β1诱导CFs建立心肌纤维化细胞模型。用甘草提取物处理纤维化细胞,MTT法检测不同浓度甘草提取物对细胞增殖的影响;CCK-8检测TGF-β1诱导后,甘草提取物对CFs细胞增殖的影响;免疫荧光检测平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达;Western blot检测TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白及p-Smad2、p-Smad3蛋白表达水平;RT-PCR检测Smad2、Smad3、Smad4 mRNA表达水平。结果：各浓度甘草提取物处理细胞后细胞活性与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。甘草提取物各浓度组细胞增殖率显著低于TGF-β1组（P<0.05）;100 μg/mL甘草提取物对α-SMA、TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白表达水平显著低于TGF-β1组（P<0.05）。 结论：甘草提取物对TGF-β1诱导的心肌纤维细胞纤维化的发生发展具有一定改善作用,其作用机制与抑制TGF-β1/Smad信号通路有关。     

雷公藤甲素抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的研究

目的:探讨雷公藤甲素对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ) 诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞(cardiacfibroblasts,CFb) 增殖及α₁(Ⅰ) 型前胶原合成的影响。方法:建立Ang Ⅱ诱导新生大鼠心肌纤维化细胞模型。采用四氮唑蓝(MTT) 比色法测定细胞增殖;分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot 印迹法检测大鼠心肌成纤维细胞α₁(Ⅰ) 型前胶原mRNA 及蛋白表达。结果:雷公藤甲素以剂量依赖性方式抑制心肌成纤维细胞增殖和α₁(Ⅰ) 型前胶原合成。结论:雷公藤甲素可以通过抑制Ang Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖和α₁(Ⅰ) 型前胶原合成从而抑制心肌纤维化。     

普罗布考通过调节肝癌细胞HepG2代谢重编程逆转Warburg效应抑制其转移和侵袭的机制研究

目的：研究普罗布考调节HepG2的代谢重编程逆转Warburg效应抑制其转移和侵袭的机制,为脂代谢调节药物的研究提供支持。方法：HepG2细胞体外培养后分为对照组（NC）、高剂量组（High）、中剂量组（Middle）和低剂量组（Low）,其中高、中、低剂量组的细胞分别使用100、50、10 μmol/L的普罗布考干预。CCK-8检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期的变化,细胞划痕实验检测细胞转移能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,Western blot法检测细胞中己糖激酶（HK）、丙酮酸激酶（PK）、乳酸脱氢酶（LDH）、磷酸果糖激酶（PFKP）、丙酮酸脱氢酶（PDH）以及柠檬酸合酶（CS）的表达变化,试剂盒检测培养基中乳酸的含量,ECAR检测细胞糖酵解的压力,929 oxygen system检测细胞对于氧气的吸收水平检测。结果：普罗布考可以抑制HepG2的增殖,且有剂量依赖,还可以阻滞细胞周期。普罗布考可以提高HK、PK、LDH、PFKP以及PDH和CS的表达,增加耗氧量减少乳酸的产生,促进细胞的三羧酸循环。普罗布考还可以抑制HepG2的侵袭和迁移能力。结论：普罗布考可以调节肝癌细胞HepG2的代谢重编程、逆转Warburg效应从而抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。     

板条状马氏体的亚结构及形成机制

研究马氏体亚结构及形成机制具有重要理论意义和应用价值.应用35CrMo等材料,淬火为马氏体组织,采用JEM-2100电镜观察马氏体形貌和亚结构,发现35CrMo钢马氏体为板条状,亚结构除了高密度缠结位错外,还有高密度层错.结合2Cr13、Fe-15 Ni-0.6C合金试样的浮凸试验,应用隧道扫描显微镜观察表面马氏体浮雕形貌,测定浮凸的微细尺寸.综合上述试验结果,分析位错、层错形成机制.发现浮凸效应中没有出现位错滑移迹象,认为切变模型不能解释高密度位错和层错的形成.最后应用马氏体相变新机制分析了高密度缠结位错、精细层错的形成.     

西红花酸对心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的: 探讨西红花酸(crocetin)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ, AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts, CFB)增殖和胶原合成的影响及其作用机制。方法: 体外培养新生SD大鼠CFB,建立AngⅡ诱导新生大鼠CFB纤维化模型;MTT法检测CFB的增殖;羟脯氨酸测定检测CFB胶原含量;流式细胞分析仪测定细胞周期;实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白、间质胶原酶(MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)、转化生长因子β₁(TGF-β₁)的基因表达;蛋白免疫印迹(Western Blot)检测细胞P27^kip1 (P27)蛋白的表达。结果: (1)在一定浓度范围里,crocetin能抑制AngⅡ引起的CFB增殖和胶原合成,并呈剂量依赖;(2)CFB G₀/G₁期百分率随crocetin浓度增加而增加,S期、G₂/M期百分率和增殖指数随crocetin浓度增加而减少,与AngⅡ组相比差异有统计学意义(P<0.05 或P<0.01);(3)Crocetin能明显降低Ⅰ型、Ⅲ型胶原、TIMP1、TGF-β₁的表达,提高MMP-2的表达;(4)Crocetin能增加P27蛋白表达。结论: Crocetin通过抑制AngⅡ诱导的CFB增殖和胶原合成起到抗心肌纤维化作用,其机制可能与细胞因子分泌和对基质金属蛋白酶的调节有关。     

诱导性支气管相关淋巴组织（iBALT）形成与相关肺疾病的研究

肺是人体的呼吸器官,肺的呼吸作用使机体和外界进行气体交换,以维持机体的生命活动。肺的生理特性会使肺黏膜表面接触外界的有害刺激物,包括病原体、过敏原、有害气体和烟雾颗粒,这些可能导致肺部损伤和感染。在肺部炎症的诱导下,肺中的免疫细胞（B淋巴细胞和T淋巴细胞）聚集在肺支气管的周围,形成诱导性支气管相关淋巴组织（iBALT）。研究发现iBALT参与哮喘、慢性阻塞性肺病、肺癌等多种肺部疾病的病理发展。iBALT受到多种细胞因子表达调控,但是形成过程以及对疾病的影响尚不明确。本文旨在综述iBALT的形成因素以及在肺中的病理状况,为肺部慢性炎症疾病提供新的治疗思路。     

结晶器四偏心式振动机构仿弧精度分析

运用型转化理论 [2 ] ,对结晶器四偏心式振动机构仿弧运动轨迹进行了研究。分析了该机构初始安装角误差、曲柄长度误差、连杆长度误差对结晶器外弧中心点及结晶器外弧线下口处仿弧精度的影响 ,并编制了相应的计算机分析软件     

靶向抑制CDK4/6的肿瘤治疗基础研究与临床应用进展

周期蛋白依赖性激酶4/6(cyclin-dependent kinase 4/6,CDK4/6) 是一类丝氨酸/苏氨酸激酶,通过与细胞周期蛋白D（cyclin D）结合,调节视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)的磷酸化状态,Rb磷酸化后与E2F转录因子分离,释放的E2F可以自由激活一系列基因表达,参与DNA复制和细胞分裂,从而介导细胞G1/S期转换,影响细胞周期的进程。近年研究发现CDK4/6在多种肿瘤发生和发展过程中起着核心作用,已成为临床多种肿瘤治疗的重要分子靶点。本文将对CDK4/6与肿瘤的关系以及CDK4/6抑制剂临床应用的最新研究进展做一综述。     

Study on the processes and mechanism of the formation of Fe3O4 at low temperature

The removal of iron and various heavy-metal ions by their incorporation into stable ferrite-type precipitates at low temperature is a promising alternative to clean up large volumes of polluted effluents. As a first step, the present work investigated the formation of Fe₃O₄ by oxidation of Fe(OH)₂ suspension at different conditions, including the initial Fe(OH)₂ suspension concentration, pH value, and temperature. The various mechanisms of the formation of Fe₃O₄ at different conditions were given based on analysis of the curve in terms of disappearance of Fe(II) phase and the formation of Fe₃O₄ and the end products during the course of air oxidation. The effect of aging was also discussed.     

Microstructure and formation mechanism of titanium matrix composites coating on Ti-6Al-4V by laser cladding

Laser cladding experiments were done on a 5-kW continuous wave CO2 laser to synthesize TiC and TiB rein- fowed titanium matrix composite coatings on Ti-6AI-4V alloy with a mixture of Ti and B4C precursor powder. The ther- modynamics of the reactions were calculated and analyzed. The microstructure and phase evolution of TiB and TiC com- posites were investigated. The results showed that the chemical reaction between Ti and B4C would release much heat, and these compounds, TiC, TiB, and small amount of TiB2, can be formed on the surface of Ti-6AI-4V alloy if the supplied en- ergy is sufficient to excite the reaction among the initial products. A good metallurgical bond between the coating and the substrate can be achieved. The microhardness of coating was irregular and the maximum value was approximately HV600.     

SLM过程中飞溅形成机制和控制方法综述

由于激光选区熔化(SLM)技术加工周期较短、易于成形结构复杂的零件,现已广泛应用于生物医疗、航空航天、汽车和军工制造业等领域。但是由于在成型过程中激光与粉末间复杂地相互作用,激光选区熔化制件的缺陷呈现出多样化的特点,且控制难度加大,这在一定程度上限制了该技术的发展和应用。对于飞溅缺陷的形成机制和控制方法的研究,是近年来研究的热点之一。总结了近年来的相关研究成果,将粉末、熔池及成形层作为线索,从飞溅物对成形件的影响、飞溅物形成原因、监测和控制方法以及未来研究方向四部分阐述SLM过程中飞溅形成机制和控制方法,并展望了未来的发展方向。     

再论钢和β铜基合金中贝氏体相变形核机制

在试验用钢和β铜基合金固溶后等温或时效时,贝氏体孕育期是母相中溶质原子向晶体缺陷处和<001>晶向上扩散偏聚(形成贫、富溶质原子小区)的过程,即渐变(量变)阶段,为贝氏体形核做准备.当贫溶质小区贫化到以等温或时效温度作为Ms点的成分时,该小区即能进行马氏体样贝氏体切变形核,为突变(质变)阶段.孕育期也是一个受溶质原子扩散控制的过程.贝氏体形核是由过饱和的贝氏体和原始母相间溶质原子浓度差而产生的驱动力驱动.初期贝氏体有马氏体性质,是过饱和的.