氯吡格雷对基于分型的健康人血浆eNOS和NO水平影响的研究

目的: 临床研究显示氯吡格雷可以改善不同CYP2C19基因型健康受试者以及冠心病患者的血管内皮功能,故本研究探讨氯吡格雷的内皮功能保护机制。方法: 6名基因型为CYP2C19*1/*1和6名基因型为CYP2C19*2/*2 or *2/*3的健康受试者纳入本实验。所有健康受试者均于空腹 12 h 后单次服用负荷剂量氯吡格雷 300 mg。服药前（0 h）及服药后 4 h、24 h 静脉采血,检测受试者血浆eNOS、NO、ADMA浓度和血清hsCRP浓度。结果: 口服负荷剂量氯吡格雷 300 mg 4 h及 24 h后,CYP2C19*1/*1组及CYP2C19*2/*2 or *2/*3组血浆eNOS浓度均显著上升,且两组间eNOS浓度差异无统计学意义。同时,CYP2C19*1/*1和CYP2C19*2/*2 or *2/*3组血浆NO水平在口服氯吡格雷4 h、24 h后均显著降低,且两组间NO水平差异无统计学意义。氯吡格雷对两组CYP2C19基因健康受试者血浆（清）ADMA、hsCRP浓度无显著影响。结论: 本研究首次证实单负荷剂量氯吡格雷（300 mg）提高中国健康受试者血浆eNOS浓度并伴随血浆NO水平降低,包括基因型是CYP2C19*1/*1和CYP2C19*2/*2 or *2/*3。     

以CYP2C19基因多态性指导经皮冠状动脉介入治疗术后抗凝临床疗效观察

目的: 对进行经皮冠状动脉介入治疗术（PCI）的患者体内CYP2C19的基因多态性进行分析,并根据基因分型对术后患者进行不同的抗凝治疗,以观察临床疗效。方法: 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测技术对进行PCI手术患者体内CYP2C19的基因型进行分析并分组,分为快、中、慢三种代谢型组,快代谢型组和中间代谢型组在术前24 h内给予负荷剂量氯吡格雷300 mg,之后分别服用氯吡格雷75 mg/d和150 mg/d;对于慢代谢型组起始单次负荷剂量替格瑞洛180 mg,维持量90 mg,bid;上述三组患者术后均联合服用阿司匹林100 mg/d,均连用12个月;观察术后一年内患者主要不良心血管事件的发生率。结果: 178例患者中共检测出5种CYP2C19的基因分型,分别为*1/*1型、*1/*2型、*1/*3型、*2/*2型和*2/*3型;其中快代谢型（*1/*1型）67例,占37.6%,中间代谢型（*1/*2型和*1/*3型）99例,占55.6%,慢代谢型（*2/*2型和*2/*3）12例,占6.8%;术后一年主要不良心血管事件的发生率在三组之间相近（P>0.05)。 结论: CYP2C19基因分型可以用于PCI术后患者的用药指导,对于快代谢型的患者可以给予常规剂量的氯吡格雷,对于发生突变的患者可以考虑增加氯吡格雷的剂量或更换其他抗凝药物。     

高血压合并急性冠脉综合征患者P4502C19基因多态性与氯吡格雷抵抗及冠状动脉介入术后近期预后关系探讨

目的: 探讨高血压合并急性冠脉综合征(ACS)患者血浆细胞色素P₄₅₀ 2C19（cytochrome P₄₅₀2C19,CYP2C19）基因多态性及与氯吡格雷抵抗（clopidogrel resistance,CR）的关系,并观察其对接受经皮冠状动脉介入治疗（percutaneous coronary intervention,PCI）患者近期预后的影响。方法: 入选本科同时接受氯吡格雷和阿司匹林双联抗血小板治疗的高血压合并ACS患者及不伴有高血压的ACS患者。检测所有患者氯吡格雷服用前和服用后5~7 d的血小板聚集率（platelet aggregation ratio,PAR）,采用基因芯片技术和荧光定量PCR检测所有患者CYP2C19基因的多态性,对患者住院期间严密观察,出院后通过门诊或电话随访3月,每月1~2次。结果: 高血压合并ACS患者中氯吡格雷中、慢代谢组出现频率高于非高血压的ACS 组。根据CYP2C19基因的多态性分组比较观察对象CR,发现慢代谢型组及中等代谢型组均较快代谢型组发生CR的比例增高;根据高血压合并ACS组与ACS组两组观察对象CR比较,高血压合并ACS组CR的发生率高于ACS组。所有ACS患者多因素Logistic回归分析显示,高血压、PAR及携带CYP2C19突变基因是CR发生的独立预测因子;高血压合并ACS组Logistic多元线性回归分析结果显示携带CYP2C19突变基因是CR发生的独立预测因子。观察对象随访3个月,其中慢代谢型组和中等代谢型组较快代谢型组有更高的心血管事件发生率;高血压合并ACS组较ACS组有更高的心血管事件发生。结论:高血压合并ACS患者血浆CYP2C19中等代谢与慢代谢组出现频率高于非高血压的ACS组,且血浆CYP2C19基因多态性与CR的发生存在相关性,同时基因突变增加了患者PCI术后心血管事件发生的风险。     

缺血性脑卒中患者CYP2C19基因多态性与个体化用药的相关性

目的：探讨根据CYP2C19代谢分型进行的个体化用药调整对于氯吡格雷治疗缺血性脑卒中的指导作用,为临床个体化用药提供参考。方法：纳入80例脑梗死患者,根据是否行CYP2C19基因检测分为经基因检测的个体化用药指导组40例和非基因检测的对照组40例。个体化用药指导组根据CYP2C19代谢分为：慢代谢型、中间代谢型、快代谢型及超快代谢型。快代谢型及超快代谢型按照常规使用氯吡格雷75 mg,每天1次。中间代谢型采用双倍氯吡格雷剂量150 mg,每天1次。慢代谢型患者氯吡格雷更换为替格瑞洛90 mg,每天2次或停用氯吡格雷,改用阿司匹林肠溶片100 mg每天1次;对照组按照常规使用氯吡格雷75 mg,每天1次。对所有入组患者出院后进行为期3个月的门诊或电话随访。比较两组血管事件发生率和改良Rankin量表（mRS）（0-1）发生率。结果：个体化用药指导组血管事件发生率明显低于对照组,mRS评分（0-1）发生率明显高于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：经CYP2C19基因检测对缺血性脑卒中患者进行的个体化用药,能显著降低血管不良事件发生率,同时对于患者预后生活能力改善也有显著提高。     

氯吡格雷药物基因检测在支架辅助治疗颅内动脉瘤中的初步应用

目的: 探讨氯吡格雷药物基因检测在支架辅助弹簧圈栓塞治疗颅内动脉瘤中应用的意义及前景。方法: 选取我院行支架辅助弹簧圈栓塞术治疗颅内动脉瘤病人64例,行氯吡格雷药物基因检测,通过对CYP2C19*2、CYP2C19*3、CYP2C19*17和ABCB1-3435C四个基因位点的检测,分析其CYP2C19酶的代谢类型和ABCB1基因的表达类型。其中45例病人于住院期间行颅内动脉瘤支架辅助弹簧圈栓塞术,并行氯吡格雷药物基因检测,根据检测结果制定双抗用药方案;19例随访病人系颅内动脉瘤支架辅助治疗术后来院复查脑血管造影期间予行氯吡格雷药物基因检测,采用常规剂量双抗用药。结果: 45例住院患者中20例患者基因型异常,常规剂量双抗用药血栓形成风险增加,均根据检测结果更改用药方案,4例患者出现有血栓类并发症表现;19例随访患者中共检测出3例基因型异常患者,其中2例患者曾出现有血栓栓塞并发症表现,通过积极溶栓治疗后症状消失,余患者在住院期间及随访中均未出现任何疑似血栓类并发症表现。结论: CYP2C19基因和ABCB1基因均有较高的人群变异率,基因变异发生氯吡格雷低反应性,影响支架术后双抗效果;氯吡格雷药物基因检测可作为支架辅助弹簧圈栓塞治疗颅内动脉瘤的一项常规检查,提供个体化的用药建议,对支架术后的双抗治疗具有指导意义。基因检测为导向的个体化治疗是今后发展的方向。     

CYP2C19基因多态性对老年急性脑梗死患者应用氯吡格雷临床预后的影响

目的：探讨CYP2C19基因多态性对老年急性脑梗死患者应用氯吡格雷临床预后的影响。方法：前瞻性纳入接受阿司匹林联合氯吡格雷治疗的226例老年急性脑梗死患者，采用DNA微阵列芯片法检测CYP2C19基因型并据此将患者分为快代谢组、中等代谢组和慢代谢组，记录患者治疗前后美国国立卫生研究院卒中量表（National Institute of Health Stroke Scale, NIHSS）评分，重复测量资料方差分析研究三组NIHSS评分变化，以治疗前后NIHSS评分的下降幅度为标准评价患者预后，比较三组预后良好率的差异，二元Logistic回归分析探讨急性脑梗死预后的影响因素，观察三组药品不良反应（adverse drug reaction, ADR）发生情况。结果：快代谢组、中等代谢组、慢代谢组分别有81例（35.8%）、108例（47.8%）和37例（16.4%）患者，预后良好率分别为86.4%，73.1%和64.9%，三组预后良好率差异有统计学意义（P<0.05），且快代谢组显著高于慢代谢组（P<0.05）。重复测量资料方差分析显示，三组NIHSS评分随时间的变化趋势不同，且治疗后快代谢组NIHSS评分显著低于中等代谢组和慢代谢组（P<0.05）；二元Logistic回归分析显示，快代谢组患者应用氯吡格雷临床预后良好的概率是慢代谢组患者的3.447倍（OR=3.447, 95%CI: 1.364-8.712, P=0.009），有糖尿病患者应用氯吡格雷临床预后良好的概率是无糖尿病患者的62.7%（OR=0.627, 95%CI: 0.268-1.331, P=0.001）。三组ADR总发生率相近（P>0.05）。结论：CYP2C19基因多态性对老年急性脑梗死患者应用氯吡格雷临床预后有影响，且快代谢型患者治疗效果优于慢代谢型。     

影响氯吡格雷反应个体差异的非遗传与遗传因素研究进展

氯吡格雷在急性冠脉综合征患者中应用广泛,然而超过30%的患者出现氯吡格雷抵抗,影响其临床应用。本文拟综述合并疾病、药物相互作用等非遗传因素和ABCB1、对氧磷酶-1（PON-1）与CYP2C19基因多态性等遗传因素对氯吡格雷反应个体差异影响的最新研究进展,以期使临床上能合理有效使用氯吡格雷。     

临床药师基于CYP2C19基因检测指导氯吡格雷个体化用药及其疗效评价

目的:探讨临床药师利用CYP2C19基因多态性检测指导患者氯吡格雷个体化用药的意义,并进一步讨论中慢代谢型患者不同治疗方案之间疗效差异。方法:选取本院2016年11月至2017年12月,根据入排标准进行CYP2C19基因检测的患者,临床药师根据基因类型为患者制订个体化用药建议。对于快代谢型患者,建议继续使用氯吡格雷治疗;对于中慢代谢型患者,建议换用其他抗血小板药物治疗。出院12个月后对其进行随访,对比接受临床药师建议换用其他抗血小板药物组和未接受临床药师建议维持原方案使用氯吡格雷组,两组之间疗效是否有差异。结果:在符合纳入和排除标准的200例患者中,基因检测结果显示,快代谢型患者83例,占41.50%;中代谢型患者74例,占37.00%;慢代谢型患者43例,占21.50%。临床药师根据基因检测结果,对患者制订个体化抗血小板治疗用药建议,200例患者中有124例患者采纳临床药师建议,总体采纳率为62.00%。其中,快代谢型患者临床药师意见均被采纳,而中慢代谢型患者临床药师意见采纳率仅为35.04%。12个月之后对117例中慢代谢型患者进行随访,失访23例,最终随访的接受临床药师建议换用其他抗血小板药物组（n=32）与维持原方案使用氯吡格雷组（n=62）,两组之间不良心脑血管事件复发率无统计学差异（P＞0.05）。结论:临床药师基于CYP2C19基因检测可以指导氯吡格雷个体化用药;对于中慢代谢型患者,替换其他抗血小板药物治疗并未降低不良心脑血管事件复发风险。     

安徽地区汉族人群CYP2C9*3和VKORC1-1639G>A基因多态性分布及对华法林稳定剂量的影响

目的：研究CYP2C9*3及VKORC1-1639G>A基因多态性在安徽地区汉族人群中的分布情况及对患者华法林稳定剂量的影响。方法：选取安徽省5个地区6家三级综合型医院2020年1月至2021年12月1 169例患者血液样本,采用原位杂交荧光染色分析技术检测患者CYP2C9*3及VKORC1-1639G>A基因型。结果：1 169例患者CYP2C9*3基因型分布情况：AA型、AC型、CC型基因频率分别为90.16%、9.24%、0.60%;VKORC1基因型分布情况：AA型、AG型、GG型基因频率分别为84.26%、14.71%、1.03%;两基因型在患者性别、年龄及地区分布上差异无统计学意义（P>0.05）;755例达到华法林稳定剂量患者CYP2C9*3 AA基因型华法林日平均剂量（3.02±0.59）mg/d,显著高于AC与CC基因型患者（P<0.05）;VKORC1-1639AA基因型患者华法林日平均剂量（2.72±0.40）mg/d,显著低于AG与GG基因型患者（P<0.05）;达到华法林稳定剂量与未达稳定剂量患者在性别、年龄以及临床诊断上存在统计学差异（P<0.05）。结论：CYP2C9和VKORC1基因型与华法林稳定剂量有关联,以CYP2C9和VKORC1基因型为导向实施临床抗凝治疗,可为华法林个体化用药提供指导。     

基因多态性、药物联用和临床因素对氯吡格雷疗效的影响及相关的基因型分布

目的: 研究可能影响氯吡格雷疗效的遗传和临床因素,提高氯吡格雷疗效, 降低不良心血管事件。方法: 从影响氯吡格雷药代动力学和药效学的基因多态性及其基因型分布、药物联用等方面进行研究, 以半月和一年发生终点事件为观察指标。结果: 此次纳入研究的药物代谢酶CYP450s、转运体、受体的基因多态性均与氯吡格雷的疗效无关。而rs7916649等位点的基因型发生终点事件的频率分布有差异,突变型个体比野生型个体发生终点事件的概率高。结论: 氯吡格雷、阿司匹林、他汀类药物、β-受体阻滞剂、利尿药、质子泵抑制剂、肾素-血管紧张素系统抑制剂都对患者的愈后有影响,联合用药能提高疗效。本研究为氯吡格雷临床个体化给药提供一定的参考依据。     

CYP2D6*10和CYP2C19*2基因型多态性与接受他莫昔芬治疗乳腺癌患者生存率的相关性研究

目的: 研究CYP2D6^*10和CYP2C19^*2基因型多态性与接受他莫昔芬(tamoxifen, TAM)治疗乳腺癌患者生存率的相关性研究。方法: 选择2009至2004年本院甲乳外科和肿瘤内科收治的171名术后服用TAM治疗的雌激素阳性乳腺癌患者,调查TAM使用情况和生存状态等相关资料;收集相关的石蜡组织切片用于DNA提取;用PCR技术检测CYP2D6^*10和CYP2C19^*2基因型多态性;查明CYP2D6^*10和CYP2C19^*2基因型多态性与患者生存率的相关性。结果: 本次研究中,CYP2D6Wt/Wt、CYP2D6Wt/^*10和CYP2D6^*10/^*10基因型的总生存率(overall survival,OS)类似,差异无统计学意义(P>0.05)。CYP2C19^*2/^*2基因型的5年OS明显优于CYP2C19 Wt/Wt,差异具有统计学意义(P<0.05);CYP2C19^*2/^*2基因型的10年OS明显优于CYP2C19 Wt/Wt和CYP2C19 Wt/^*2,差异具有统计学意义(P<0.05);但是CYP2C19Wt/Wt与CYP2C19 Wt/^*2的5、10年OS差异无统计学意义(P>0.05)。结论: 研究结果显示,CYP2D6^*10基因型多态性与服用TAM治疗乳腺癌患者的生存率之间不存在相关性;CYP2C19^*2基因型多态性与接受TAM治疗乳腺癌患者的生存率之间存在相关性,CYP2C19^*2/^*2接受TAM治疗乳腺癌患者的生存率最高,CYP2C19 Wt/^*2生存率较高,CYP2C19 Wt/Wt较低。     

CYP2D6 PCR 基因型与DXT表型和基因芯片检测的比较1

目的: 为了评价 CYP2D6 的基因型和表型的联系以及基因芯片在 CYP2D6 多基因分析中的应用。方法: 242 健康志愿者, 口服 dextromethorphan 后收集尿液测定其代谢率, 收集 20 ml 血提取DNA, 并通过基 因 特 异性 PCR 和/(或) 基 因芯 片 分 析CYP2D6 *2———*11, *17 和多拷贝 CYP2D6 基因, 其中 5 个基因(*3、*4、*6、*7 和 *9) 用 PCR和CYD450 基因芯片同时分析。 结果: CYP2D6 基因型比表型更富有信息和更能反映 CYP2D6 酶的表达。 CYP2D6 *3、*4、*6、*7 和*9 的基因检测在CYP450基因芯片和基因特异性 PCR 中显示高度的一致性。结论: 基因芯片在检测基因多位点的多基因中是一个有发展前途和可靠的方法。     

CYP2C19基因多态性真核表达载体的构建及稳定转染细胞系的建立

目的: 构建细胞色素P450 CYP2C19^*1、^*2、^*3真核表达载体,并分别转染人肝癌细胞(HepG2),建立高表达目的基因的稳定转染细胞系。方法: 应用化学合成法合成CYP2C19^*1(野生型)序列,再以此为模板,体外定点突变PCR法构建^*2、^*3(突变型)。DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.l(-),经菌落PCR、酶切以及测序鉴定后,脂质体转染法转染HepG2细胞,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞系,RT-PCR、Western Blot 分别检测CYP2C19^*1、^*2、^*3 mRNA以及蛋白的表达。结果: 成功构建了pcDNA3.1(-)-CYP2C19^*1、^*2、^*3表达质粒,并建立了相应稳定转染细胞系。进一步的RT-PCR和Western Blot检测结果表明,目的基因均得到了稳定的表达。结论: 人CYP2C19^*1、^*2、^*3稳定表达细胞系为研究创新药物或新药先导化合物临床前代谢性质的筛选和预测以及为临床潜在药物相互作用提供了有效实验平台。     

氯沙坦钾片的生物等效性及CYP2C9*3基因多态性对氯沙坦药代动力学的影响

目的: 评价试验制剂氯沙坦钾片(杭州民生药业)与参比制剂氯沙坦钾片(杭州默沙东制药)的生物等效性及CYP2C9^*3基因多态性对氯沙坦药代动力学的影响。方法: 采用PCR测序法对健康中国汉族受试者CYP2C9^*3(rs1057910 A>C)位点进行基因分型,筛选36名受试者入组本试验,其中CYP2C9^*1/^*1(AA)基因型个体32例,CYP2C9^*1/^*3(AC)基因型个体4例。本研究为两制剂、两周期交叉设计,单次、开放口服给药的单中心试验,给药剂量为氯沙坦钾片(50 mg/片)1片。通过液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中氯沙坦钾及其代谢产物E-3174的浓度,采用DAS3.2.2非房室模型药动学参数计算的方法求算药动学参数。结果: 受试试剂对参比制剂的相对生物利用度分别为氯沙坦(101.5±20.2)%、E-3174(100.0±13.8)%;同CYP2C9^*3为AA基因型受试者相比,AC基因型受试者中氯沙坦的药代动力学参数AUC_0-12、AUC_inf以及C_max升高,其中AUC_0-12、AUC_inf差异有统计学意义;E-3174的药代动力学参数AUC_0-48和AUC_inf降低,不同基因型间差异无统计学意义。结论: 两种制剂生物等效; CYP2C9基因1075A>C突变可导致氯沙坦代谢减慢,但氯沙坦临床剂量可能不需要根据CYP2C9基因型进行调整。     

POR*28基因多态性与中国肾移植患者他克莫司稳定剂量的相关性研究

目的：探讨POR*28单核苷酸多态性（SNP）与中国肾移植患者他克莫司稳定剂量的相关性,为制定该人群个体化剂量调整方案提供参考。方法：共纳入350例中国肾移植患者,CYP3A5*3和POR*28基因检测由生工生物工程（上海）股份有限公司采用Mass ARRAY Analyzer Compac质谱检测。酶放大免疫测定法（EMIT）测定他克莫司血药谷浓度。分析上述基因型与他克莫司稳定剂量的相关性。结果：CYP3A5*3、POR*28等位基因频率均符合Hardy-Weinberg遗传平衡。CYP3A5*3 GG基因型肾移植患者稳定剂量比AG和AA基因型患者显著降低。基于CYP3A5分层分析,在CYP3A5表达与不表达组中,POR不同基因型均与他克莫司稳定剂量有显著相关性。至少携带一个T等位基因的POR*28患者的他克莫司的平均稳定剂量与携带CC野生型的患者之间差异均具有统计学意义（P=0.003 7和P=0.003 1）。多重线性回归分析显示,CYP3A5*3与POR*28基因分别可以解释36.6%与1.7%他克莫司稳定剂量个体化差异。结论：中国肾移植受者CYP3A5*3和POR*28基因型与他克莫司稳定剂量显著相关,移植前进行检测将有助于他克莫司的临床个体化用药。