碱性淀粉酶产生菌的诱变选育

本文以现行工业生产α－淀粉酶菌株－枯草芽孢杆菌ＢＦ７６５８为出了菌株，通过复合诱变，反复筛选获得一株能在高碱性条件下生产碱性淀粉酶的菌株Ｍ－１０４。     

一种耐高温α-淀粉酶高产菌株的选育方法

以一株产耐高温α-淀粉酶菌株（地衣芽孢杆菌）为出发菌株,经过原生质体制备后由NTG（亚硝基胍）药物诱变,从大量突变株中筛选获得一株高产、稳定的耐高温α-淀粉酶产生菌.摇瓶发酵酶活由选育前的2800u/ml提高到了4100u/m左右,提高了近45%.     

α—淀粉酶的超滤研究

对用超滤法浓缩分离α－淀粉酶过程进行了研究，讨论了料液浓度，膜面液体流速，操作压力等因素对超滤过程的影响。实验结果表明，用醋酸纤维素超滤浓缩α－淀粉酶的过程可用扩散模型来描述，超滤时宜控制压力在０．３－０．４ＭＰａ范围内。用超滤法能有效地浓缩α－淀粉酶，酶的总回收率大于９０％。此外，通过实验建立了分离过程的传质醋酸为超滤法浓缩α－淀粉酶的工业设计提供了依据。     

提高耐高温α—淀粉酶发酵液酶活力的方法

提出了提高耐高温α—淀粉酶发酵水平的方法，并在容积为30L的机械搅拌式生物反应器上进行了较系统的研究。结果表明：发酵过程中向发酵罐内流加一定量的谷氨酸水溶液，有利于对数生长期菌体的增殖，提高了发酵液中菌体的浓度数，同时也满足了菌体在酶的合成期对α—氨基氮代谢的需求，进而明显地提高发酵液的酶活力。     

L—组氨酸产生菌的选育

以谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum)ATCC-13761为出发菌株，经硫酸二乙酯（DES）和亚硝基胍（NTG）诱变处理，D-组氨酸（D-His)、6-氮鸟嘧啶（6-AU）等结构类似物平板和以L-组氨酸（L-His)为惟一氮源平板定向筛选，获得一株L-组氨酸产生菌H-24（D-His^r6-AU^r Hisase^-）。在加有150g/l葡萄糖、35g/L硫酸铵以及10mL/L玉米浆的发酵培养基中发酵72h，产L-组氨酸1.6g/L。     

黄曲霉“苏—16”1的紫外线诱变及淀粉酶高产菌株的筛选

用紫外线诱变“苏－１６”的孢子，采用透明圈初筛和麸曲复筛的方法，得到一高产突变株。和原始菌株相比，淀粉液化酶活力提高了８５．２％，淀粉糖化酶活力提高了２４．４％。     

从皂苷糖基水解酶产生菌sp.48g提取基因组DNA

采用试剂盒法、饱和酚抽提法、高盐沉淀法和氯化苄法从皂苷糖基水解酶产生菌sp．48g提取基因组DNA。经比色法和琼脂糖凝胶电泳分析检测。结果用氯化苄法提取的基因组DNA在质量上和得率上优于其他方法。A260／A280为1.7，DNA产量为0.11mg／g湿菌体。达到下部实验要求。     

从皂苷糖基水解酶产生菌sp.48g提取基因组DNA

采用试剂盒法、饱和酚抽提法、高盐沉淀法和氯化苄法从皂苷糖基水解酶产生菌sp.48g提取基因组DNA。经比色法和琼脂糖凝胶电泳分析检测。结果用氯化苄法提取的基因组DNA在质量上和得率上优于其他方法。A260/A280为1.7,DNA产量为0.11mg/g湿菌体。达到下部实验要求。     

α—淀粉酶产生菌的平板筛选法的研究与改进

用平板水解圈法筛选到若干株α－淀粉酶产生菌,它们的平板水解圈直径大小与摇瓶酶活不相关,进一步研究了３０℃平板淀粉的质量分数对水解圈直径的影响以及淀粉的质量分数、温度、琼脂等多种因素对离体α－淀粉酶水解圈直径的影响,并在此基础上建立了一种快速筛选高产菌株的简便方法。     

L—缬氨酸生产菌的选育及基于遗传算法的发酵培养基优化

采用以黄色短杆菌TV10为出发菌株，经紫外线、硫酸二乙酯逐级诱变处理，在含磺胺胍（SG）、α－氨基丁酸（α-AB）、2－噻唑丙氨酸（2－TA）结构类似物平板上定向筛选，获得L－缬氨酸高产菌株TV230。运用遗传算法，对L－缬氨酸发酵培养基的优化进行了研究，用10组实验完成了8因素20水平的优化任务。实验结果表明，采用优化后的发酵培养基能使缬氨酸的产量提高19.4%。     

D—核糖生产菌的原生质体诱变育种及其发酵条件的研究

以短小芽孢杆菌为出发菌株,经过硫酸二乙酯和原生质体紫外诱变,定向选育出一株稳定的核糖生产菌ＴＪ３,该菌株具有莽草酸营养缺陷,耐高糖,以核糖为唯一碳源不生长等遗传标记。在发酵条件试验中,采用均匀设计理论,利用微机对试验数据进行统计处理,确定出以葡萄糖为原料直接发酵生产核糖的优化配比。在最适培养条件下,摇瓶发酵平均产核糖３０．１２ｍｇ／ｍＬ。     

铜绿假单胞菌M4菌株降解黄曲霉毒素B1的条件优化研究

为了提高筛选菌株对黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)的降解效率,以铜绿假单胞菌M4(Pseudo-monas aeruginosa)为研究对象,对其发酵和降解条件进行优化.结果表明:初始pH值、发酵温度和发酵时间对菌株生长及AFB1降解率具有显著影响.进一步通过Box-Behnken设计进行响应面优化...     

α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸乙酯水解酶产生菌发酵培养基的响应面优化

对耐酪氨酸冢村氏菌(Tsukamurellatyrosinosolvens)E105菌株生物拆分外消旋体α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸乙酯制备左乙拉西坦关键手性中间体(S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸的发酵培养基进行优化,以提高其产酶活力.首先考察了碳源和氮源对菌种产酶活力的影响,并通过PlackettBurman实验得出影响该菌株产水解酶的最主要因素为酵母粉质量浓度和初始pH值.继而采用中心组合实验并结合响应面分析优化发酵培养基组成,确定了最佳的酵母粉质量浓度为12.1 g/L,最佳的初始pH值为7.06.在优化的条件下酶活力可达1 024.6 U/mL,较优化前提高了67％,表明采用响应面法优化发酵培养基组成是提高该菌株产酶活力的有效途径之一.