吸附交联法和包埋法固定化混合酶研究

对从自然界分离得到的Microbacterium sp．OU01进行发酵,制得粗酶液（壳聚糖酶和伊肛氨基葡萄糖苷酶混合液）,采用吸附交联法及包埋法对其进行固定,研究其固定化的最优条件和固定化酶的酶学性质。结果表明,游离混合酶液的最佳PH为5．6,最适反应温度为50℃。吸附交联法固定化酶的最佳条件为：戊二醛体积分数5．0％,加酶量15mL（49．51U／mL）,固定化时间6h。该条件下制得的固定化酶的最适pH为4．5,最适反应温度为60℃。包埋法固定化酶的最佳条件为：海藻酸钠质量浓度10g／L,CaCl。质量浓度15g／L,加酶量为1mL（50．35U／mL）／5mL质量浓度10g／L海藻酸钠,固定化时间20min。该条件下制得的固定化酶的最适PH为5．0,最适反应温度为50℃。固定化酶酶解壳聚糖所得产物中含D-氨基葡萄糖,说明粗酶液中的壳聚糖酶和外切-β-D-氨基葡萄糖苷酶被同时固定。通过对游离酶和固定化酶稳定性的研究,表明吸附交联固定化酶更适于工业化应用生产D-氨基葡萄糖。     

节杆菌10137产β-呋喃果糖苷酶条件及酶学性质

研究表明，节杆茵10137产β-呋喃果糖苷酶的最佳条件为：温度为30℃，pH值7．5，接种体积分数为2％，装液体积为40mL．该条件下β-呋喃果糖苷酶的转移酶活为177．78U／mL，酶作用最适pH值为6．5，最适温度为30℃，在pH值为6．0～8．0和45℃以下稳定．Ag^ 和Cu^2 对该酶有较强烈的抑制作用，EDTA和Mg^2 对酶活也有一定影响。     

黑曲霉液体发酵生产β-葡聚糖酶的工艺条件研究

探讨了黑曲霉-(Aspergillus niger)液体发酵的最适工艺条件，在250mL三角瓶中装液量50mL，摇瓶转数为200r／min，发酵培养基起始pH为5．0，发酵温度为32℃，发酵周期为50h，酶活达到86U／mL。     

GS0202菌产人参皂苷-β-葡萄糖苷酶条件及其酶的反应条件

为提高Arthrobacter chlorophenolicus GS0202菌所产人参皂苷-β-葡萄糖苷酶水解人参皂苷Rb1生成人参皂苷Rg3的能力,采用单因素研究方法,对菌体发酵条件,及其所产酶的酶反应条件进行了研究。结果表明,菌体发酵的最适培养基组成为胰蛋白胨10 g,酵母粉5 g,氯化钠10 g,水1 L;诱导物为人参总皂苷,其加入量为3.2 mg/mL,培养温度为28℃;酶反应的最适条件为25℃,pH 4,底物质量浓度为3 mg/mL。     

GS0202菌产人参皂苷-β-葡萄糖苷酶条件及其酶的反应条件

为提高Arthrobacter chlorophenolicus GS0202菌所产人参皂苷-β-葡萄糖苷酶水解人参皂苷Rb1生成人参皂苷Rg3的能力,采用单因素研究方法,对菌体发酵条件,及其所产酶的酶反应条件进行了研究.结果表明,菌体发酵的最适培养基组成为胰蛋白胨10 g,酵母粉 5 g,氯化钠10 g,水1 L;诱导物为人参总皂苷,其加入量为3.2 mg/mL,培养温度为28 ℃;酶反应的最适条件为25 ℃,pH 4,底物质量浓度为3 mg/mL.     

高温厌氧菌产纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶的活性

高温厌氧菌Clostridium thermocoprius sp.nov．JT3-3具有较高的纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶活性。实验研究表明，纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶均为胞外酶，相对分子质量分别为52000和48000。纤维素内切酶的最适反应温度是80℃，β-葡萄糖苷酶的最适反应温度是40℃，两者的最适pH为6．5。低浓度的Ca^2 和Mg^2 对纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶的酶活力没有影响，高浓度的Ca^2 和Mg^2 对纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶的酶活力有较弱的抑制作用，Hg^2 对纤维素内切酶和β-葡萄糖苷酶的酶活力都有很强的抑制作用。     

海参肠道β-1，3-葡聚糖酶的提取条件及其酶学性质

对海参肠道β-1，3-葡聚糖酶的提取条件及酶学性质进行了研究．结果表明，最佳提取条件为：pH6．0的磷酸盐浸提液0．05mol／L，NaCl浓度为0．05mol／L，缓冲液体积与海参肠质量之比为4：1，硫酸铵饱和度为80％；该酶最适反应条件为：温度40℃，pH6．0；该酶在10-40℃，pH5．O～6．5酶活力稳定．Mn^2＋对酶具有一定的激活作用，Cu^2＋、Cd^2＋、Mg^2＋、Fe^2＋、Zn^2＋、Bd^2＋、K^＋、Ag^＋对酶存在不同程度的抑制，其中Cu^2＋对酶的抑制作用最强．     

腈水合酶耐底物突变株的筛选及产酶条件优化

采用紫外诱变和梯度平板法筛选出耐底物的突变株,通过单因素实验考察发酵液起始pH值、装液量、发酵周期、接种量对产酶的影响,确定最佳的发酵条件;采用均匀设计实验优化发酵培养基。筛选出．株能耐受4％丙烯腈的腈水合酶产生菌,在最佳产酶条件下,耐底物突变株的腈水合酶酶活达到11．5MU／mL,与优化前相比,酶活提高了49．35％。腈水合酶耐底物突变株的最佳发酵条件为：初始pH7．0、装液量16％、发酵周期58h、接种量10％。最佳发酵培养基配方为：ρ（葡萄糖）=26g／L,ρ（酵母膏）=2g／L,ρ（尿素）=4g／L,ρ（谷氨酸钠）=0．5g／L,ρ（K2HP04）=0．2g／L,ρ（KH2P04）=0．2g,／L,ρ（MgS04）=0．05g／L,φ（DXL）=0．5mL／L。     

热纤梭菌纤维素酶的研究

本文对热纤梭菌ATCC27405和NCIB10682发酵所产生的纤维素酶的酶系比例，酶作用的最适温度和pH值以及产酶条件进行了研究。结果表明，在热纤梭菌的纤维素酶系中，C1酶、Cx酶和β-葡萄糖苷酶在这二菌株中的比值分别为1．0：8．4：27．9和1．0：6．4：14．7。酶作用的最适温度为55～60℃，pH值为6．1～7．7。同时发现这二菌株中的Cx酶具有较高的热稳定性。     

活性炭固定化α-转移葡萄糖苷酶的研究

以活性炭为载体,进行了固定化α-转移葡萄糖苷酶最佳条件研究,并探讨了固定化α-转移葡萄糖苷酶的酶学性质.固定化酶的最适pH值为4.0,最适作用温度为65℃,固定化酶的酶活较高,稳定性较好.     

从一种新筛选的菌中找出人参皂苷酶

从新筛选的Absida sp F7菌中找出了人参皂苷酶。该皂苷酶能水解人参皂苷Rb1 C-20位末端的一个β-葡萄糖基生成人参皂苷Rd的β-葡萄糖苷酶。酶的最佳反应条件：时间，4h；底物浓度，5mg/mL；温度，40℃；pH，5．0。     

微杆菌Z4产几丁质酶的发酵条件研究

为提高微杆菌Z4发酵的几丁质酶得率,利用摇瓶研究了发酵温度、初始pH、装液量等对于发酵产酶的影响.在这些实验的基础上,运用正交试验对Z4产几丁质酶的摇瓶发酵条件进行了进一步优化.结果的极差分析和方差分析表明温度对产酶的影响最大,具有显著性.最佳摇瓶发酵工艺条件为:培养温度28℃,培养基初始pH7,接种量6%,三角瓶装液量60mL培养基/250 mL三角瓶.在该条件下发酵液酶产量达到4.13 U/mL,比优化前提高了79.6%.     

重组大肠杆菌生产hEGF发酵条件的研究

在摇瓶条件下,研究了发酵条件对重组大肠杆菌JLU菌株hEGF表达的影响．研究表明,最适的发酵条件是温度在32℃、pH6．6～7．3、初始葡萄浓度5g／L、装液量30mL／250mL三角瓶,并发现在发酵培养基中用0．5g／L甘油代替5g／L葡萄糖作为发酵碳源会进一步提高hEGF的表达水平,提高幅度可达15．5％．     

麦冬多糖水解酶的微生物筛选及其产酶条件

为了提高生物酶法水解麦冬粗多糖的能力,采用单因素研究方法,对菌株及菌体发酵条件,菌株产酶的酶反应条件进行了研究。结果表明,产酶微生物为Absidiasp.O84s菌株;诱导物为麦冬浸出液,麦冬浸出液在培养基中的体积分数为20%,发酵温度30℃,培养时间为6 d:酶反应的最适条件为40℃,6 h,pH 5,底物质量浓度为10 mg/mL。黏度法测定得到麦冬粗多糖的平均分子质量为67 000 u,其水解产物的平均分子质量为39 000 u。     

康氏木霉发酵液提取木聚糖酶的酶学性质研究

对康氏木霉（Trichoderma Koningii）发酵产木聚糖酶的酶学性质进行了研究。结果表明；该木聚糖酶的最适反应温度为65℃，酶反应最适pH为6．0；该酶在20～60℃范围内能保持87％以上的酶活，在pH3．0-9．0范围内能保持85％以上的酶活；金属离子K^＋、Ba^2＋、Pb^2＋、Fe^2＋、Fe^3＋、Al^3＋和12mmol／L的Cu^2＋对木聚糖酶的活性有抑制作用，而Ca^2＋，Zn^2＋和4mmol／L Cu^2＋等金属离子对该酶有激活作用。     

麦冬多糖水解酶的微生物筛选及其产酶条件

为了提高生物酶法水解麦冬粗多糖的能力,采用单因素研究方法,对菌株及菌体发酵条件,菌株产酶的酶反应条件进行了研究。结果表明,产酶微生物为Absidiasp.O84s菌株;诱导物为麦冬浸出液,麦冬浸出液在培养基中的体积分数为20%,发酵温度30℃,培养时间为6 d:酶反应的最适条件为40℃,6 h,pH 5,底物质量浓度为10 mg/mL。黏度法测定得到麦冬粗多糖的平均分子质量为67 000 u,其水解产物的平均分子质量为39 000 u。     

菌株N235产海藻糖合酶工艺条件的优化

通过对筛选得到的海藻糖产生菌N235（Pseudomonas sp）的培养温度、初始pH、溶氧量、接种量、渗透压、培养时间等参数对菌体生物量和单位菌体海藻糖合酶酶活力的影响的研究,得到了最佳酶活培养条件为：培养温度35℃、培养基初始pH5-6、装液量100mL／500mL三角瓶、渗透压浓度为5％NaCl、培养时间为64h,在此条件下,酶活达到252U／g干菌体。     

木薯醇腈酶部分酶学性质研究

对利用基因重组技术获得的木薯醇腈酶（HNL）的酶学特异性进行研究，确定了其部分酶学性质。重组木薯HNL的最适温度为50℃，最适pH值为5．5。重组木薯HNL在60℃条件下，保温30min后仍具有90％的酶活力，说明温度稳定性较好；在pH4．0～6．0的条件下，获得的相对酶活仍大于80％。     

黑曲霉液体发酵产纤维素酶酶系均衡性研究

采用pH值和温度两因素用正交实验法分析出黑曲霉710712纤维素酶系各组分最适酶解条件，其组合分别为：C1酶(pH5．0,45℃)，Cx酶(pH4．0，60℃)，βG(pH5．0，65℃)。在液体发酵条件下，探讨缓冲系统以及CaCl2及吐温-80对产酶的影响；分析了不同碳源以及碳源与碳源的配比对黑曲霉产纤维素酶系均衡性的相关性。结果表明碳源的种类和配比对最大酶活及其形成时间、比酶活和分泌变化规律均有不同影响效应。纤维素粉和麦麸浓度配比为1．09，6和2．0％时可明显改善所产纤维素酶系的均衡性；用0．1M柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液和添加适量CaCl2(0．3％)和吐温-80(0．3％)对产酶有正向影响。     

漆酶对直接耐晒蓝B2RL脱色性能的研究

利用灵芝粗漆酶对直接耐晒蓝B2RL染液脱色,采用单因素逐一优化法确定其最适反应条件。结果表明：在pH值7．0、温度50℃、漆酶用量2u／mL、染料质量浓度150mg／L条件下,漆酶对直接耐晒蓝B2RL脱色反应4h后脱色率达到71．72％,反应24h后脱色率达到86．4％,脱色效果明显．研究为漆酶处理偶氮类染料废水提供了理论依据．