艾叶总黄酮提取物体内外抗氧化活性研究

本文探究了艾叶总黄酮提取物（total flavonoids extract from folium of Artemisia argyi,TFEFAA）主要成分含量及其体内外抗氧化活性。本文采用高效液相色谱（HPLC）法同时检测TFEFAA中异泽兰黄素和棕矢车菊素的含量;以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（ABTS）和羟自由基三种自由基的清除率和总还原力为指标,考察TFEFAA的体外抗氧化活性;将秀丽隐杆线虫（线虫）同期化后分别培养在含有0、50、100 μg/mL的TFEFAA的线虫生长培养基中,研究TFEFAA对线虫热应激和H₂O₂氧化应激的影响,同时检测线虫体内相关抗氧化酶活力和丙二醛（MDA）的含量。结果表明,异泽兰黄素和棕矢车菊素的含量分别为0.2%和0.06%;TFEFAA对DPPH自由基、ABTS+自由基和羟自由基均具有显著的清除作用（P<0.05）,其半数清除浓度（IC₅₀）分别为96.51、67.73和279.38 μg/mL,清除能力与TFEFAA均呈剂量-效应关系,同时还具有较强的总还原力;100 μg/mL TFEFAA能极显著延长线虫在热应激和H₂O₂氧化应激条件下的存活时间（P<0.01）,同时极显著提高线虫体内超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活力（P<0.01）,并且显著降低线虫体内MDA含量（P<0.05）。TFEFAA在体内外均具有较好的抗氧化活性,其机制可能与提高体内抗氧化酶活性有关。因此,TFEFAA有望被开发成新型天然绿色食品抗氧化剂。     

红毛藻多糖对H2O2诱导的Caco-2细胞氧化损伤的保护作用

目的：研究红毛藻多糖（Bangia fusco-purpurea polysaccharide,BFP）对H2O2诱导的人结肠腺癌（Caco-2）细胞氧化应激损伤的保护作用。方法：构建过氧化氢（H2O2）诱导的Caco-2细胞氧化损伤模型,通过形态学观察和测定细胞裂解液中的抗氧化物水平及相关酶活力,评价BFP对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用。结果：BFP可明显提高H2O2诱导氧化损伤的Caco-2细胞活力,降低细胞内活性氧生成水平,提高细胞内超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力以及还原型谷胱甘肽水平,减少丙二醛生成,并通过抑制Caspase-3和Caspase-9活性来改善氧化应激损伤引起的细胞凋亡。结论：BFP对H2O2诱导氧化应激损伤的Caco-2细胞具有保护作用,可通过增强细胞内源性抗氧化酶活力、提高非酶类抗氧化物水平和抑制细胞凋亡明显缓解H2O2诱导的Caco-2细胞氧化应激损伤。     

基于体外化学与细胞模型评价鲍内脏肽粉的抗氧化活性

本文考察了鲍内脏肽粉对二苯基苦基苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2-·)的清除能力,结果发现,鲍内脏肽粉对DPPH·、·OH和O_2-·自由基具有一定的清除能力,其IC50值分别为0.87 mg/m L、7.53 mg/m L和19.41 mg/m L。采用H_2O_2建立体外培养人肝癌细胞(HepG2)氧化应激损伤模型,将细胞分为正常对照组,模型组、H_2O_2加低(1.6 mg/m L)、中(3.2mg/m L)、高(6.4 mg/m L)剂量组,检测各组细胞存活率、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量。结果发现,1.6 mg/m L、3.2 mg/m L和6.4 mg/m L 3个剂量水平的鲍内脏肽粉能显著提高HepG2细胞的存活率、T-AOC和SOD活力,显著抑制细胞的MDA含量,且剂量-效应关系明显,对H_2O_2氧化损伤HepG2细胞均具有一定的修复作用。结果表明,鲍内脏肽粉具有较好的抗氧化活性。     

圣草次苷的合成及其对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用

以橙皮苷为原料,经三氯化铝-吡啶去甲基反应合成药用天然产物圣草次苷,产物通过1H核磁共振（nuclear magnetic resonance,NMR）和13C NMR进行结构确证,并探究其对过氧化氢（H2O2）诱导氧化应激损伤的人脐静脉内皮细胞系（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）细胞的保护作用机制。结果表明：圣草次苷对HUVEC细胞无毒性作用,能显著提高氧化损伤HUVEC细胞的存活率（P＜0.05）,但无显著剂量效应;显著降低细胞中活性氧水平和丙二醛含量（P＜0.05）,显著提高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶等抗氧化酶的活力（P＜0.05）;显著上调Bcl-2/Bax蛋白比值和下调p53蛋白表达（P＜0.05）。结论：圣草次苷能有效阻止H2O2所致HUVEC细胞损伤,该作用与圣草次苷的抗氧化活性和抑制细胞死亡有关。     

γ-萜品烯的体内外抗氧化性研究

本文通过细胞荧光强度、3种抗氧化酶活性(超氧化物岐化酶,SOD;谷胱甘肽过氧化物酶,GSH-Px;过氧化氢酶,CAT)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量的测定,在细胞模型和动物实验中研究γ-萜品烯的体内外抗氧化能力。结果表明,Hep-G2细胞内的荧光强度随着γ-萜品烯质量浓度的增加而下降,二者呈现良好的剂量-作用关系,说明γ-萜品烯可以有效结合细胞膜内外的自由基或活性氧,从而减少细胞内带有荧光的氧化产物的积累;过氧化氢诱导建立的氧化应激细胞模型和动物实验结果表明,γ-萜品烯可以显著提高超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的活性及谷胱甘肽的含量(p<0.05),并显著降低丙二醛的含量(p<0.05)。以上研究结果表明,γ-萜品烯在体内外均表现出一定的抗氧化作用。     

红平菇胞外多糖体外抗氧化及对高血脂小鼠体内抗氧化能力探究

目的:探究红平菇胞外多糖（Extracellular polysaccharides,EPS）体外抗氧化能力及抵抗高血脂小鼠体内肝脏组织氧化损伤的功效。方法:通过EPS对O₂-·、DPPH自由基和·OH的清除力,测定其体外抗氧化能力;构建高血脂小鼠模型,分为空白对照组（NC）、高血脂模型组（MC）、阳性对照组（PC）、EPS高、低剂量组;NC组随机分配10只正常小鼠,剩余组每组随机分配高血脂模型小鼠10只,干预14 d后,测定EPS对高血脂小鼠肝脏组织内谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）、过氧化脂质（LPO）活性的影响,衡量其体内抗氧化能力。同时,观察小鼠的肝脏部位病理学切片,探究EPS对受到氧化应激损伤的肝脏细胞的修复能力。结果:EPS对O₂-·、DPPH自由基和·OH的饱和清除率分别达到55.05%、64.09%和28.91%。EPS可以显著提高（P<0.05）高血脂小鼠肝脏组织抗氧化酶系含量,显著降低（P<0.05）脂质过氧化物活性,同时对肝脏氧化应激损伤具有较好的修复作用。结论:EPS具有较强的体外抗氧化作用,并对高血脂小鼠肝脏组织表现出较好的抗氧化能力及氧化损伤修复能力。     

Role of antioxidant enzymatic defences against oxidative stress H(2)O(2) and the acquisition of oxidative tolerance in Candida albicans

In Candida albicans, trehalose plays an essential role as a protector of cell integrity against oxidative challenge. A double homozygous mutant, tps1/tps1, deficient in trehalose synthesis, displayed severe cell mortality when exposed to high H(2)O(2) concentrations, compared with its congenic parental (CAI-4) strain (Alvarez-Peral et al., 2002). We have examined the putative role of a set of well-known antioxidant enzymes as components of the defence mechanism against oxidative challenges. When exposed to mild non-lethal oxidative treatment (0.5 mM H(2)O(2)), a significant induction of catalase, glutathione reductase (GR), and Cu,Zn-superoxide dismutase (SOD) was recorded in tps1/tps1 exponential cultures. However, in CAI-4 cells, subjected to the same conditions, there was only a clear activation of catalase, Mn-SOD and Cu,Zn-SOD activities. The degree of activation was always much more pronounced in the trehalose-deficient mutant than in its wild-type counterpart, except for Mn-SOD activity. After exposure to severe oxidative stress (50 mM H(2)O(2)) only GR and catalase activities increased in tps1/tps1 cultures, whereas in CAI-4 cells GR but not catalase was induced. In both cell strains, 50 mM H(2)O(2) caused inhibition of the Mn- and Cu,Zn-SOD isozymes, this inhibition being more pronounced in tps1/tps1 cells. C. albicans is able to acquire adaptive oxidative tolerance by pretreatment with a low non-stressing concentration of H(2)O(2) before exposure to a drastic oxidative challenge. When these antioxidant activities were measured during the adaptive response, a greater degree of enzymatic antioxidant induction was consistently observed in the tps1/tps1 mutant with respect to the CAI-4 strain. Together with a higher intrinsic sensitivity of tps1/tps1 cells, we suggest that this unexpected increase might be explained in terms of a compensatory mechanism to overcome the lack of endogenous trehalose upon drastic oxidative exposure, although this induction was not sufficient to improve the percentage of cell viability.     

南极磷虾蛋白水解产物超滤组分的抗氧化活性评价

目的 对南极磷虾(Euphausia superba)蛋白水解产物超滤组分进行系统的抗氧化活性评价。方法 利用胃蛋白酶和胰蛋白酶制备南极磷虾蛋白水解物(antioxidant hydrolysate of Euphausia superba protein, EPAH), 利用超滤技术制备抗氧化组分。以自由基清除实验、脂质过氧化抑制实验、体外DNA氧化损伤保护实验以及氧化损伤张氏肝细胞(Chang liver)模型进行抗氧化组分的活性研究。结果 利用超滤技术将EPAH按照分子量(molecular weight, MW)分为三个肽组分EPAH-I(MW<3.5 KDa)、EPAH-II(3.5 KDa5 KDa)。其中, EPAH-I显示出强的DPPH自由基和羟基自由基清除活性、脂质过氧化抑制作用和质粒DNA的氧化损伤保护作用以及对H2O2氧化损伤的张氏肝细胞显示出较强的保护作用。在5.0 mg/mL浓度下, EPAH-I可将氧化损伤张氏肝细胞(Chang liver)的活力由模型组的(49.51±4.18 )%显著提升至(70.58±4.52)% (P<0.05); 超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力分别提高至(176.34±10.92) U/mg prot和(35.83±2.55) U/mg prot, 活性氧自由基含量降至2.76±0.18%, 膜脂质氧化产物丙二醛的含量降至(5.75±0.16) nmol/mg prot。结论 本实验制备的南极磷虾抗氧化组分(EPAH-I)具有显著的生物活性, 可用于抗氧化相关功能产品的研发。     

紫苏油在乙醇诱导氧化损伤模型小鼠体内的抗氧化作用

探索紫苏油作为抗氧化功能性食品的潜力,研究紫苏油在小鼠体内的抗氧化作用。给昆明小鼠每日灌胃不同剂量的紫苏油,饲养30 d后,除空白对照组外,其他实验组灌胃乙醇造成小鼠氧化损伤模型,并对小鼠肝脏丙二醛（malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）、蛋白质羰基（protein carbonyl,PC）含量和血清超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力进行测定。结果表明：与模型组比较,空白对照组,100、200、400 mg/（kg•d）紫苏油剂量组小鼠肝脏的MDA含量分别降低了46.08%（P＜0.01）、17.28%（P＜0.05）、25.12%（P＜0.05）、48.16%（P＜0.01）;100 mg/（kg•d）紫苏油剂量组小鼠血清的SOD活力极显著增强（P＜0.01）;100、200 mg/（ k g • d）紫苏油剂量组小鼠肝脏的GSH含量极显著升高（P＜0.01）;100 mg/（kg•d）紫苏油剂量组小鼠肝脏的PC含量显著降低（P＜0.05）。因此,紫苏油在乙醇诱导氧化损伤模型小鼠的体内具有抗氧化作用,其通过降低小鼠肝脏内MDA、PC含量,提高GSH含量,升高血清SOD活力发挥作用,其中100 mg/（kg•d）为紫苏油推荐剂量,应进一步对其进行研究。     

笛鲷鱼鳞源功能多肽对Caco-2细胞氧化应激损伤的保护作用

本实验利用650μmol/L H₂O₂构建Caco-2细胞氧化应激损伤模型,探究笛鲷鱼鳞源功能多肽(crimson snapper scale peptides,CSSPs)对Caco-2细胞氧化应激损伤的保护作用。通过测定细胞上清液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力和白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)质量浓度、胞内抗氧化酶活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)相对含量、相关凋亡基因(Caspase-3、Caspase-9、Bax和Bcl-2)的相对表达量,从细胞氧化还原状态和细胞凋亡两方面阐明CSSPs对损伤Caco-2细胞的抗氧化作用。结果显示,CSSPs能够通过抗氧化防御系统来减轻H₂O₂对Caco-2细胞的损伤,主要包括增加胞内抗氧化酶活性以抑制LDH释放、胞内ROS积累、MDA及IL-8的生成。此外,CSSPs抑制氧化应激损伤诱导的细胞凋亡与线粒体...     

鲑鱼皮明胶水解物的抗氧化活性及其对细胞氧化损伤的保护作用

采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶水解鲑鱼皮明胶,得到水解度为4.7%到13.5%的7个明胶水解物,分别评价明胶水解物对自由基的清除能力。明胶水解物(0.5、1、2mg/mL)预先作用BRL大鼠肝细胞2h后,通过H2O2(5mmol/L)诱导氧化损伤,分别测定细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)等细胞内抗氧化产物的含量变化。结果表明,明胶水解物的抗氧化活性随着水解度的增大呈增强趋势。明胶水解物对细胞具有保护作用,可显著提高细胞存活率,降低LDH渗出量和MDA生成量,且存在一定的剂量关系,但细胞中GSH含量变化不显著;7个明胶水解物对H2O2诱导肝细胞损伤保护时,细胞存活率与水解物的体外抗氧化活性大小显著正相关,而LDH渗出量和MDA生成量与水解物的体外抗氧化活性大小负相关。      

蛋清源活性肽对过氧化氢诱导的HEK293细胞抗氧化酶活力及白细胞介素8分泌的影响

食源性抗氧化肽由于抗氧化能力较好、安全性高,逐渐成为多肽研究领域的热点。本实验以H2O2诱导HEK293细胞损伤建立氧化损伤模型,研究了蛋清源活性肽WNWAD（Trp-Asn-Trp-Ala-Asp）及其结构改造肽WNW（Trp-Asn-Trp）、WAD（Trp-Ala-Asp）、WN（Trp-Asn）对H2O2诱导损伤的HEK293细胞的存活率、活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平、抗氧化酶活力及细胞因子白介素8（interleukin-8,IL-8）分泌的影响。结果表明：蛋清源活性肽对HEK293细胞存活率的影响极显著（P＜0.01）,不同浓度蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN作用于氧化损伤的HEK293细胞后,其存活率明显提高,呈现浓度依赖性;其中1.0 μmol/L蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN处理细胞后,存活率从损伤组的（48.0±2.4）%分别提高到（99.7±1.8）%、（69.4±3.2）%、（78.9±5.1）%、（72.1±3.6）%,与损伤组有极显著性差异（P＜0.01）;H2O2诱导HEK293细胞内ROS的产生,经过活性肽预处理后细胞内ROS的水平极显著降低（P＜0.01）;随着蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN浓度的升高,总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶3 种酶的活力均有所提高,呈现浓度依赖型关系。最后利用酶联免疫吸附测定试剂盒测定了HEK293细胞中IL-8的分泌量,经过H2O2处理的HEK293细胞上清液中IL-8含量极显著升高（P＜0.01）,加入WNWAD、WNW、WN、WAD后,细胞中的IL-8含量均有所降低,其中WNWAD和WN影响显著（P＜0.05）。以上结果显示蛋清源活性肽对降低HEK293细胞氧化应激水平和提高细胞抗氧化能力有积极的影响。     

根皮苷对雌性果蝇寿命的影响及其作用机制

目的：研究根皮苷（phloridzin）对雌性果蝇寿命的影响并探究其延缓果蝇衰老的分子机制。方法：在果蝇寿命实验中,采用2 日龄雌性果蝇作为研究对象,在其培养基中分别加入0、0.5、2.0、5.0 mg/mL根皮苷进行培养,直至果蝇全部死亡,计算果蝇的平均寿命和最长寿命;通过白草枯和双氧水急性实验测定根皮苷对果蝇氧化应激损伤的影响;试剂盒法测定果蝇体内抗氧化酶活力;实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time polymerasechain reaction,real-time PCR）检测抗氧化基因表达水平。结果：2.0、5.0 mg/mL根皮苷可以显著延长果蝇的平均寿命和最长寿命（P＜0.05）;根皮苷能够对百草枯和双氧水造成的雌性果蝇氧化应激损伤起到有效保护作用;添加 5.0 mg/mL根皮苷可以极显著提高Cu/Zn-超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和过氧化氢酶（catalase,CAT）活力（P＜0.01）,极显著降低丙二醛（malonaldehyde,MDA）含量（P＜0.01）;添加5.0 mg/mL根皮苷可以极显著上调Cu/Zn-SOD及CAT mRNA表达水平（P＜0.01）。结论：根皮苷能够延缓雌性果蝇衰老,且具有抗氧化作用,这可能与其调控抗氧化基因的表达水平相关。     

菌菇复合多糖对秀丽线虫氧化胁迫抗性的影响

目的:研究菌菇复合多糖(FHP)的抗氧化效果及作用机制.方法:用化学方法评价FHP体外自由基清除效率,通过秀丽线虫的氧化胁迫存活率试验评价FHP体内抗氧化效果;通过线虫体内氧化胁迫水平检测,胁迫应激关键转录因子活性及其效应基因表达检测和抗氧化酶活性试验等研究FHP的抗氧化活性;通过线虫的寿命试验及脂褐素水平检测研究FH...     

麦胚清蛋白抗氧化肽的筛选及对细胞氧化损伤的保护作用

本研究运用超滤与凝胶层析等分离纯化技术逐级分离麦胚清蛋白中性蛋白酶酶解产物,以氧化自由基吸收能力（oxygen radical absorbance capacity,ORAC）与2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonicacid),ABTS）阳离子自由基清除率为评价指标,筛选具有较高抗氧化活性的产物组分,并以该组分为研究对象,利用液相色谱-串联质谱结合PeptideRanker数据库活性预测技术筛选出具有高抗氧化活性的小肽,并通过高糖诱导血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）及H2O2诱导HepG2细胞与VSMCs建立细胞氧化应激模型,评价小肽对细胞氧化损伤的保护作用。结果表明,经超滤与层析筛选出分子质量较小的V组分抗氧化活性最高,液相色谱-串联质谱鉴定出该组分主要由20 个小肽组成,PeptideRanker预测与抗氧化实验验证发现肽序列LNYPPY（765.3 Da）抗氧化活性最高（ORAC 3.01 μmol TE/μmol）、ABTS阳离子自由基清除率95.58%）。肽序列LNYPPY对H2O2诱导的HepG2细胞和VSMCs氧化损伤具有很好的保护作用,但对高糖诱导的VSMCs异常增殖以及活性氧水平上升无明显影响。综上,肽LNYPPY具有良好的体外抗氧化活性,且对H2O2诱导的细胞氧化损伤具有保护作用,研究可为麦胚清蛋白的开发利用提供重要的理论参考。     

水杨酸和硝普钠协同处理对芒果贮藏品质及抗氧化活性的影响

为探究水杨酸（salicylic acid，SA）和一氧化氮（nitric oxide，NO）处理在采后芒果果实贮藏品质和抗氧化能力维持中的协同作用，以‘台农’芒果为材料，研究经2 mmol/L SA和0.25 mmol/L NO供体硝普钠（sodium nitroprusside，SNP）处理后常温贮藏期间果实外观品质、风味品质、抗氧化物质含量、总抗氧化能力、活性氧水平、丙二醛含量、抗氧化酶活力的变化。结果表明：与CK组（蒸馏水处理）相比，SA和SNP单独及复合处理均能有效延缓芒果采后果实色泽转黄和硬度下降，降低质量损失率和病情指数，抑制果实可滴定酸质量分数、VC和总酚含量的下降，提高果实中超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶活力，增强总抗氧化能力，进而降低超氧阴离子产生速率和过氧化氢含量，减少丙二醛积累，缓解氧化损伤，其中SA和SNP复合处理效果最好。综上，SA和SNP复合处理对于保持芒果贮藏品质效果最好，结果可为芒果贮藏保鲜提供参考。     

Liposome-assisted activity of superoxide dismutase under oxidative stress

A biological membrane is the front line of defense for cells against various environmental stresses such as heat and reactive oxygen species (ROS) and is expected to play an important role in the antioxidant system with antioxidant enzymes, similarly to its chaperone-like function in cooperation with heat shock proteins. The oxidative stress response of superoxide dismutase (SOD), which is known to catalyze the dismutation of O(2)(-) to H(2)O(2), was investigated in the presence of artificial membranes, liposomes, in order to obtain fundamental information on the biological ROS scavenging system. SOD lost its activity in the presence of H(2)O(2) and was found to have two loops including one which contains an alpha-helix which presents the substrate O(2)(-) to the activity center of SOD (Cu(II)). From circular dichroism analysis of SOD in the presence of H(2)O(2), the contents of the alpha-helix in SOD were found to decrease in correspondence with the inactivation and conformational change of SOD, suggesting that the conformation of the alpha-helix loops affects SOD activity. In the presence of liposomes composed of 1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (POPC), SOD was not inactivated in the presence of H(2)O(2) although the contents of its alpha-helix structure were decreased. The oxidized SOD was found to interact with the liposome surface under oxidative stress using dielectric dispersion analysis. Based on these results, a possible mechanism of SOD protection against ROS on liposomes was presented.     

韩国产芝麻酱油对AAPH诱发LLC-PK1细胞氧化应激的保护作用

以芝麻酿造酱油乙醇提取物(ethanol extract sesame sauce,SSE)为研究对象,探讨其对1 mmol/L 2,2’-偶氮二异丁基脒二盐酸盐(2,2’-azobis(2-methylpropionamidine)dihydrochloride,AAPH)引发的LLC-PK1猪肾近曲小管上皮细胞氧化应激损伤的保护作用。方法:LLC-PK1细胞与不同质量浓度(10~100μg/m L)的SSE预先共同培养24 h后,用含AAPH的DMEM培养液继续培养4 h建立细胞损伤模型。细胞存活率用四甲基偶氮唑蓝法检测,细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和总活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平分别以硫代巴比妥酸比色法和2’,7’-二氢二氯荧光黄双乙酸钠探针法测定。细胞内过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、谷胱甘肽巯基转移酶(glutathione S-transferase,GST)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthetase,γ-GCS)活力和谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量按试剂盒说明书以比色法测定。结果表明,SSE预处理可以提高受损细胞存活率,降低细胞内总ROS水平和MDA含量。同时,SSE还能提高受损细胞内抗氧化酶(CAT、SOD、GSH-Px)及γ-GCS活力并提高细胞内GSH含量。实时荧光定量聚合酶链式反应分析也提示SSE能上调细胞内抗氧化物酶(CAT、SOD和GSH-Px)的m RNA表达量。此外,SSE可以通过提高细胞内源性抗氧化系统能力来降低细胞内MDA和ROS水平,并由此缓解AAPH对LLC-PK1细胞所造成的氧化应激损伤。     

紫薯提取物对秀丽隐杆线虫抗氧化作用的影响

目的:以秀丽隐杆线虫为对象,研究紫薯提取物(purple sweet potato extract,PSPE)抗氧化作用及其可能的作用机制。方法:将秀丽隐杆线虫饲喂于含有不同质量浓度(70、140、280μg/mL)PSPE的线虫生长培养基,研究PSPE对线虫寿命、抗氧化酶活力以及相关基因表达水平、急性氧化应激的影响。结果:PSPE能明显延长秀丽隐杆线虫的寿命,提高超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力,上调daf-16、ctl-1、sod-3、sir-2.1基因表达水平,下调age-1、daf-2基因表达水平,同时延长在H_2O_2、胡桃醌及百草枯氧化应激的存活时间。结论:PSPE能够有效延缓秀丽隐杆线虫的衰老、抑制脂褐素累积、提高抗氧化酶活力及抗氧化基因表达水平,增强对H_2O_2、胡桃醌及百草枯急性氧化应激的抵抗能力。     

多管藻提取物的抗氧化作用

对小鼠补充不同剂量多管藻提取物(PUE),采用标准化方法制备PUE,以FD 法测定总酚含量,以体内实验进行提取物的抗氧化活性评价,采用单细胞凝胶电泳法测定淋巴细胞的DNA 损伤,以试剂盒测定血浆中超氧化物歧化酶(SOD) 、丙二醛(MDA) 含量。结果表明,PUE 中的总酚含量为68.54 %,其LD50 ＞ 3160 mg/ kg,属于低毒,说明PUE 可能会有食用安全问题。PUE 中剂量组的血淋巴细胞DNA 损伤与高剂量组和空白对照组比较差异有统计学意义( p ＜ 0.05)。PUE 各剂量组小鼠血中MDA 的含量与空白对照组比较均降低,差异有统计学意义( p ＜ 0.05) 。PUE 有一定的抗脂质过氧化作用。