金钗石斛脂溶性生物碱提取物诱导人结肠癌 HT-29 细胞凋亡

目的:研究金钗石斛脂溶性生物碱提取物对人结肠癌HT-29细胞生长的抑制作用及其诱导细胞凋亡的分子机制。方法:MTT法检测金钗石斛脂溶性生物碱提取物对HT-29细胞存活率的影响,Hoechst33342染色法观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测胞内活性氧水平、线粒体膜电位、细胞周期和细胞凋亡率变化;蛋白免疫印迹检法测蛋白Caspase-3,9和胞内细胞色素C的表达。结果:金钗石斛脂溶性生物碱提取物能降低HT-29结肠癌细胞存活率,呈剂量和时间效应,48 h半数抑制浓度(IC50)为0.72 mg/m L;金钗石斛脂溶性生物碱提取物能诱导HT-29细胞凋亡,并诱导细胞周期阻滞于G2期;金钗石斛脂溶性生物碱提取物诱使线粒体膜电位降低,胞内活性氧浓度升高;激活型Caspase-9,3与胞内细胞色素C表达水平增高。结论:金钗石斛脂溶性生物碱提取物对HT-29结肠癌细胞的生长具有抑制作用并诱导细胞凋亡,其可能通过线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡。     

γ-生育三烯酚对体外培养的人结肠癌HT-29细胞生长的抑制作用

为了探讨γ-生育三烯酚对体外培养的人结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用,采用MTT、分裂指数、集落形成、形态学观察法测定细胞活力,Hoechst 33258荧光染色法和DNA ladder法检测检测细胞凋亡。结果表明:γ-生育三烯酚能够显著抑制HT-29细胞的增殖(P0.05),且存在剂量-效应关系,其48 h半数抑制浓度(IC 50)为35.45μmol/L;形态学观察和DNA ladder结果显示受试物能够诱导HT-29细胞凋亡。γ-生育三烯酚对人结肠癌HT-29细胞具有生长抑制作用,此作用可能与其凋亡诱导效应有关。     

瘤果黑种草子总黄酮成分对结肠癌细胞株SW480增殖、迁移能力的影响及机制

目的探讨瘤果黑种草子总黄酮成分对人结肠癌细胞株SW480增殖、迁移能力的影响及可能的作用机制。方法用不同浓度的瘤果黑种草子总黄酮成分药物干预的结肠癌细胞株SW480,MTT法检测SW480细胞株的增殖能力,倒置显微镜观察对结肠癌细胞株SW480细胞形态的影响,划痕实验检测对细胞的迁移能力的影响,实时荧光定量PCR检测瘤果黑种草子总黄酮成分对细胞中BECN1、MAPILC3B基因表达的影响。结果瘤果黑种草子总黄酮对人结肠癌细胞株SW480体外增殖的抑制作用明显,并呈浓度依赖性抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖,在25μg/mL时达到最大的抑制率,抑制率为81.28%。倒置显微镜观察,用瘤果黑种草子总黄酮成分药物干预后,人结肠癌细胞株SW480形态学发生明显变化,瘤果黑种草子总黄酮成分可抑制人结肠癌细胞株SW480迁移能力,同时,可上调自噬相关基因BECN1、MAPILC3B的表达量。结论瘤果黑种草子总黄酮成分可抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖、迁移能力,机制可能与能影响细胞中BECN1、MAPILC3B基因表达量有关。     

姜黄素对结肠癌细胞增殖抑制和凋亡诱导的作用研究

本文研究了姜黄素对结肠癌LoVo细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用。不同浓度姜黄素作用体外培养的人结肠癌LoVo细胞后,倒置显微镜观察LoVo细胞的形态学变化,采用MTT法检测姜黄素对LoVo细胞的增殖抑制能力;RT-PCR技术检测Bax、Bcl-2和Caspase-3的mRNA表达水平;Annexin V-FITC/PI标记检测细胞凋亡率;Western blotting和免疫荧光细胞化学染色检测姜黄素作用前后c-myc蛋白表达的差异。结果表明,姜黄素可显著抑制人结肠癌LoVo细胞的増殖,具有明显的量效和时间依赖性,24、48和72 h姜黄素抑制LoVo细胞的IC50分别为(26.45±0.41)、(19.13±0.09)和(10.12±0.04)μmol/L;姜黄素可激活细胞中Bax和Caspase-3的mRNA表达,抑制Bcl-2的mRNA和c-myc蛋白的表达,姜黄素可诱导LoVo细胞发生凋亡。姜黄素通过上调Bax和Caspase-3表达,下调Bcl-2和c-myc的表达来抑制人结肠癌LoVo细胞的增殖并促使其凋亡。     

鼓槌石斛毛兰素诱导人结肠癌Caco-2细胞凋亡

目的:研究毛兰素对人结肠癌Caco-2细胞增殖的抑制作用及其诱导细胞凋亡的分子机制。方法:采用SRB法检测毛兰素对Caco-2细胞增殖的抑制作用,用Hoechst33342染色法观察细胞的形态学改变,流式细胞术检测细胞的凋亡率和细胞周期;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测细胞凋亡相关蛋白Caspase-3的表达水平。结果:与对照相比,毛兰素能抑制结肠癌细胞Caco-2的增殖,且抑制率随着药物浓度与时间增加,呈剂量时间效应,48 h半数抑制浓度IC50为0.845μg/m L;毛兰素能诱导Caco-2细胞凋亡,并诱导细胞周期阻滞于G_2期;Caspase-3活性裂解片段表达增高。结论:毛兰素对肿瘤细胞的增殖具有一定抑制作用且通过线粒体途径诱导Caco-2细胞凋亡。     

工程蝇蛆体内活性物质体外抗肿瘤作用的研究

对工程蝇蛆体内活性物质及体外抗肿瘤作用进行了研究。选用SephadexG-50初步分离蝇蛆体内活性物质;采用MTT法测定K562细胞的生长抑制率;通过倒置显微镜观察K562细胞的形态变化。实验结果表明:峰1组分半致死浓度IC50为100μg/mL,峰2组分半致死浓度IC50为80μg/mL。随所添加活性物质浓度的增大,肿瘤细胞受抑制作用增强;活性物质作用于K562细胞前后其细胞形态发生明显变化,受抑制细胞由一个完整细胞变为多个凋亡小体,因此可以说明工程蝇蛆体内活性物质在体外对K562细胞具有抑制生长的作用。     

魔芋葡甘聚糖对人结肠细胞株基因组稳定性的影响

为探究魔芋葡甘聚糖（Konjac gluconnan,KGM）对结肠上皮细胞基因组稳定性的影响,以正常结肠细胞株NCM460和结肠癌细胞株SW620、HCT116为研究材料,用质量浓度为0、0.625、1.25、2.5、5、10、20、40 mg/mL的KGM处理受试细胞24、48、72 h,以四氮唑蓝（MTT）法检测细胞活力;并以CBMN-Cyt实验检测质量浓度分别为5、20、30 mg/mL的KGM处理72 h后受试细胞的基因组不稳定性（Genome instability,GIN）、核分裂指数（nuclear division index,NDI）及凋亡水平。结果显示,不同质量浓度KGM作用72 h后,在5~40 mg/mL 范围内NCM460细胞活力显著上升（P<0.05）,其GIN在KGM质量浓度为5 mg/mL时极显著降低（P<0.001）,而30 mg/mL时则极显著升高（P<0.01）;5~40 mg/mL 的KGM显著抑制HCT116细胞的活力（PP<0.05）,在40 mg/mL时SW620细胞活力极显著被抑制（P<0.01）,且在KGM质量浓度为5~30 mg/mL时,SW620和HCT116这2株细胞的GIN和细胞凋亡率均显著增加（P<0.001）,NDI显著降低（P<0.05）。结果表明,低质量浓度（5 mg/mL）的KGM有利于维护正常结肠上皮细胞NCM460的基因组稳定性,各质量浓度（5~30 mg/mL）的KGM都会增加结肠癌细胞SW620和HCT116 GIN的凋亡发生率,这可能是其维护肠道健康的分子基础。     

黄芪多糖对COLO205人结肠癌细胞株抑制作用研究

目的：研究黄芪多糖对COLO205人结肠癌细胞株增殖及凋亡的影响。方法：黄芪多糖（25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL）与结肠癌细胞共同培养24、48、72h,利用MTT法检测细胞增殖抑制率、免疫组化法检测细胞增殖核抗原（PCNA）表达情况、TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果：50μg/mL以上浓度的黄芪多糖对体外培养的COLO205人结肠癌细胞株生长具有抑制作用（抑制率〉30.0%,P〈0.01）,并呈量效和时效关系;与对照组相比,黄芪多糖处理组（50μg/mL、100μg/mL）PCNA表达降低,细胞凋亡增加（凋亡指数〉31.47%,P〈0.01）。结论：黄芪多糖使COLO205人结肠癌细胞增殖减慢,凋亡增加,PCNA表达降低,可能是黄芪多糖抗肿瘤机制之一。     

芹菜素对甲状腺癌BCPAP细胞生长及细胞周期的影响

研究芹菜素对人乳头状甲状腺癌BCPAP细胞生长的抑制作用及对细胞周期的影响。采用MTT法检测不同浓度芹菜素在24h对BCPAP细胞的抑制作用,以及12.5,25.0,50.0μmol/L芹菜素分别在24,48,72h对BCPAP细胞的抑制作用;通过明场细胞形态学照片分析,对比不同浓度芹菜素对BCPAP细胞形态的影响,评价其对细胞生长的抑制作用。利用流式细胞仪检测BCPAP细胞周期和凋亡。结果表明,不同浓度(12.5~100.0μmol/L)芹菜素对BCPAP细胞的毒性有明显剂量和时间依赖性,其24h的IC50值为40.65μmol/L。芹菜素对BCPAP细胞的形态学变化有显著影响,高浓度芹菜素强烈抑制BCPAP细胞数目的增长。芹菜素可使BCPAP细胞周期的构成发生明显的变化并诱导细胞凋亡。芹菜素对BCPAP细胞有较明显的细胞毒性和生长抑制作用,其抑制机制可能是使BCPAP细胞生长停滞在G2/M期并诱导细胞凋亡,使得细胞生存率下降,从而抑制细胞活性和数目增长。     

提升苹果二氢查尔酮对结肠癌细胞抑制功效的研究

本文采用结肠癌细胞模型,探究了增强苹果来源二氢查尔酮对结肠肿瘤抑制功效的方法。一方面,采用MTT法考察了根皮素及其类似物对结肠癌细胞增殖的抑制作用,发现200μmol/L根皮素对HT29、SW620与HCT116三种结肠癌细胞作用72 h的抑制率分别为74.18%、52.91%与72.78%,抑制活性与普遍性强于多种二氢查尔酮类似物,并呈现剂量与时间效应。另一方面,通过根皮素与多种果蔬功效成分的联合作用,发现在SW620与HCT116细胞中,根皮素与白藜芦醇及姜黄素之间存在相互作用。尤其对HCT116细胞,根皮素与姜黄素联合使用时的IC50值分别为69.78μmol/L与4.27μmol/L,显著低于单独使用时的153.88μmol/L与8.80μmol/L,两者以20:1的剂量比使用时,其联合指数均小于1,表现为协同效应,且在低浓度时更为显著。本研究为深入研究苹果二氢查尔酮的结肠癌抑制功效奠定了理论基础,并为指导消费者合理搭配膳食提供了科学依据。