驴血清胆碱酯酶抑制法快速检测蔬菜中农药残留

采用驴血清丁酰胆碱酯酶作为酶源,对不同的有机磷农药的检测条件和方法进行了研究,同时通过酶抑制法对锦州地区的部分蔬菜进行了农药残留检测。结果表明:乐果、敌百虫、敌敌畏、马拉硫磷对驴血清丁酰胆碱酯酶(BChE)的IC50分别为0.094、0.179、0.124、0.0078mg/mL,驴血清BChE对这4种有机磷农药灵敏度的大小顺序为:马拉硫磷>乐果>敌敌畏>敌百虫。乐果、敌敌畏对丁酰胆碱酯酶的最佳抑制时间为15min;敌百虫、马拉硫磷对丁酰胆碱酯酶的最佳抑制时间为20min。用酶抑制法检测3个农贸市场的蔬菜样品,发现韭菜有2例检测结果超标,油菜有1例检测结果超标,尖椒有2例检测结果超标;蔬菜样品合格率为86.1%。      

驴血清胆碱酯酶的生化性质

从不同的动物组织中筛选胆碱酯酶,研究胆碱酯酶的酶学性质和检测有机磷农药残留的条件。实验结果表明:驴血清胆碱酯酶活力较高,确定驴血清为检测有机磷农药的最佳酶源。胆碱酯酶最适反应温度为35℃,最适pH值为7.5～8.0,底物碘化硫代丁酰胆碱对驴血清胆碱酯酶没有过量底物抑制现象,最适浓度为5mmol/L;该酶热稳定性较好,在35℃保温60 min,酶活力基本不变。以有机磷农药—敌敌畏检测为例,对胆碱酯酶的半抑制浓度IC50为0.124 mg/mL,抑制时间为15 min。     

鸡血清丁酰胆碱酯酶与马血清丁酰胆碱酯酶对农药的敏感性的对比研究

测定鸡血清丁酰胆碱酯酶(butyrylcholinesterase,BChE)对农药的敏感性,为农药残留快速检测提供新的敏感酶源。本文以马血清丁酰胆碱酯酶为对照,以碘化硫代丁酰胆碱为底物,采用Ellman法,研究了鸡血清丁酰胆碱酯酶的酶学性质及其对有机磷和氨基甲酸酯类农药的敏感性,计算相关半抑制浓度(half-inhibitory concentration,IC50)。结果表明,两种BChE在35℃、pH 8.0时达到最佳的反应活性,无底物抑制效应,对毒扁豆碱敏感,对盐酸多奈哌齐相对不敏感;鸡血清BChE对敌百虫、克百威、灭多威、速灭威、敌敌畏的IC50值分别为0.77、31.99、1.14、5.49、0.95μmol/L;马血清BChE对这五种农药的IC50值分别为3.88、1.22、22.58、24.18、5.46μmol/L。除克百威外,鸡血清BChE对供试农药的敏感性均高于马血清BChE。因此,鸡血清BChE具有较好的农药敏感性,可以作为农药残留快速检测的候选酶源。     

鸭血清胆碱酯酶抑制法检测果蔬农药残留的研究

对农药残留快速检测方法——胆碱酯酶抑制法进行了研究。以二次盐析后的鸭血清丁酰胆碱酯酶(BChE)为农药残留的检测用酶,碘化硫代丁酰胆碱(BTChI)为底物,5-5'-二硫代-二硝基苯甲酸(DTNB)为显色剂,410nm比色测定吸光值变化,计算胆碱酯酶的抑制率,从而推算农药残留情况。当抑制率大于35%时,表明农药含量超标。检测过程只需20～40min,可同时检测多个样品,与气相色谱检测结果的符合率大于85%。     

绵阳生态基地蔬菜农药残留含量分析

对四川绵阳青莲、农门、九岭3个生态基地生产的主要蔬菜共计13个样品中的8种有机磷农药(即辛硫磷、敌敌畏、甲拌磷、乐果、杀螟松、马拉硫磷、对硫磷、喹硫磷)残留含量按照GB/T 5009.20-2003进行分析检测,并根据GB 18406.1-2001标准判定.结果表明:6个蔬菜马拉硫磷含量超标,4个蔬菜对硫磷含量超标,所有蔬菜均未受喹硫磷污染,其余5种农药残留均未超出标准要求.     

一种商品化酶抑制-比色法快速检测农药残留试剂盒对10种有机磷农药的敏感性测定

目的了解酶抑制-比色法快速检测试剂盒对不同农药的敏感性。方法通过使用一种商品化酶抑制-比色法试剂盒对敌敌畏等10种农药残留分别迚行5个浓度的测定,用抑制率和农药浓度的常用对数拟合回归曲线,同时计算对应的IC50和IC10。结果商品化的酶抑制-比色法试剂盒不是对所有的有机磷农药都敏感,即不是蔬菜中的所有的有机磷农药用酶抑制法都可以测定出来;该试剂盒对10种农药残留的敏感性依照敌敌畏、敌百虫、辛硫磷、喹硫磷、巴胺磷的顺序依次降低;试剂盒对地虫磷、杀螟硫磷、乐果、甲基嘧啶磷、倍硫磷不敏感,该试剂盒对含有浓度为3mg/kg以下的这些农药的样品没有响应。结论建议在日常检测中只要抑制率高于10%的样品建议复检,同时使用色谱、质谱定性定量。     

同时测定蔬菜中15种有机磷农药的残留方法

了解当前本市农产品市场中关于蔬菜中有机磷农药残留的相关状况,制定相关对策,建立一种适用于多种有机磷农药快速检测的气相色谱方法。根据农药的相关性质,该气相色谱法可同时检测15种有机磷农药,其中包括:敌百虫、敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、灭线磷、甲拌磷、氧乐果、特丁硫磷、乐果、甲基对硫磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、对硫磷、倍硫磷、水胺硫磷。通过对不同型号色谱柱的选择、柱温箱升温程序的控制,实现对15种常见有机磷农药的快速、便捷、准确度好的定性和定量的分析。     

酶抑制法快速检测蔬菜中有机磷农药残留的最佳条件研究

采用酶抑制分光光度法快速检测蔬菜中有机磷农药残留,以抑制率为指标,研究了抑制时间、抑制温度、底物(碘化硫代丁酰胆碱)加入量和酶液加入量4个因素对检测条件的影响,通过正交试验和极差分析,得出4因素的主次关系为抑制时间>底物量>酶液量>温度,确定了蔬菜中有机磷农药残留的最佳检测条件为抑制时间15min、抑制温度35℃、底物加入量100μL、酶液加入量100μL。     

小麦酯酶提取及其对有机磷农药检测初探

研究从小麦面粉提取小麦酯酶提取条件及其粗酶液对4种有机磷农药最低检测限和灵敏度。运用单因素实验和正交实验对小麦酯酶提取条件进行优化,确定适宜提取条件,提取液为0.15 mol/L NaCl溶液、料液比1∶4、40℃振荡提取60 min,提取粗酶液酶活为1.675 U/mL;并确定粗酶液对敌敌畏、敌百虫、乐果和毒死蜱等4种有机磷农药最低检测限分别为0.05 mg/kg、0.04 mg/kg、0.05 mg/kg和0.07 mg/kg,均低于国家规定农药最大残留量,且粗酶液对敌敌畏灵敏度最佳。     

臭氧和碱水降解枸杞中四种有机磷农药残留技术对比研究

枸杞中有机磷农药残留超标成了影响其品质的问题。通过臭氧处理和碱处理对比研究,观察两种方法对枸杞中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、三唑磷这四种有机磷农药残留的降解效果。实验结果表明,臭氧和碱水对以上四种有机磷农药均有不同程度的降解作用,其中臭氧对枸杞中敌敌畏的降解率达到了97.83%,碱水对枸杞中敌敌畏的降解率达到了98.68%。