乳清浓缩蛋白中的α-乳白蛋白的分离纯化

以乳清浓缩蛋白(WPC80)原料,分离纯化得到高纯度的α-乳白蛋白.采用选择性沉淀法,通过搅拌沉淀、离心、NaCl清洗和复溶等过程分离纯化α-乳白蛋白,同时采用SDS-PAGE电泳和反相高校液相色谱分析各阶段蛋白溶液,以筛选出各阶段反应的最佳条件.最终获得的α-乳白蛋白制备品的纯度为73%,其回收率为85%左右,并除去了WPC中95%的β-乳球蛋白.采用此种方法分离纯化的α-乳白蛋白纯度高,可以应用于婴儿配方食品的生产.     

牦牛β-乳球蛋白分离纯化及在不同pH值温度的变性研究北大核心CSCD

通过采用反向液相色谱(RP-HPLC)对不同方法分离乳清蛋白的结果进行分析,同时检测分离纯化的牦牛β-乳球蛋白进行,其蛋白纯度达到90%以上。另外使用非变性凝胶电泳(Native-PAGE)对不同pH值、不同加热温度条件下牦牛β-乳球蛋白的变性条件及变性进行了研究。结果表明,牦牛β-乳球蛋白的变性温度在80℃左右。蛋白变性含量随着加热温度和pH值的增加成上升趋势。加热至90℃后蛋白变性质量分数增加显著在pH6和pH9条件下未变性蛋白质量分数分别为24%和9%。     

牦牛β-乳球蛋白分离纯化及在不同pH值温度的变性研究

通过采用反向液相色谱(RP-HPLC)对不同方法分离乳清蛋白的结果进行分析,同时检测分离纯化的牦牛β-乳球蛋白进行,其蛋白纯度达到90%以上。另外使用非变性凝胶电泳(Native-PAGE)对不同pH值、不同加热温度条件下牦牛β-乳球蛋白的变性条件及变性进行了研究。结果表明,牦牛β-乳球蛋白的变性温度在80℃左右。蛋白变性含量随着加热温度和pH值的增加成上升趋势。加热至90℃后蛋白变性质量分数增加显著在pH6和pH9条件下未变性蛋白质量分数分别为24%和9%。     

α-淀粉酶法制备小麦胚芽蛋白的研究

小麦胚芽用超临界CO2脱脂,用α-淀粉酶水解麦胚蛋白提取液中的淀粉,酸沉淀麦胚蛋白,使麦胚蛋白含量和得率均较碱溶酸沉淀法明显提高,分别达到94.5%和81.36%,用高效毛细管电泳鉴定小麦胚芽蛋白的纯度,SDS-PAGE电泳测定小麦胚芽蛋白的分子量。     

水牛乳中主要过敏原的分离纯化

牛乳和水牛乳存在免疫交叉反应,牛乳过敏患者可能对水牛乳过敏。因此,分离纯化出水牛乳中各种过敏原将为进一步的工作奠定物质基础。实验中以摩拉水牛乳为原料,通过等电点沉淀、凝胶柱层析法和阴离子交换法分离纯化水牛乳的酪蛋白、β-乳球蛋白α-乳白蛋白,得到了SDS-PAGE纯(纯度≥90%)的β-乳球蛋白α-乳白蛋白。离子交换层析分离β-乳球蛋白、α-乳白蛋白的得率分别为50.26%、52.86%;凝胶层析分离β-乳球蛋白、α-乳白蛋白的得率分别为49.39%、84.19%。实验结果表明,等电点沉淀、凝胶柱层析法和阴离子交换法适合于分离水牛乳中主要过敏原成分。     

牦牛奶中不同酪蛋白的提取及其功能特性研究

本研究以新鲜牦牛乳为原料,添加钙盐后利用其等电点分离提取牦牛奶中的不同酪蛋白,利用单因素实验筛选牦牛奶中α-、β-、κ-酪蛋白的提取分离参数;并利用电泳(SDS-PAGE)分析牦牛乳不同酪蛋白纯度。同时对牦牛乳中α-、β-、κ-酪蛋白的溶解性、乳化性、发泡性进行分析比较。结果表明:牦牛奶不同酪蛋白分离的最佳Ca~(2+)浓度为0.08 mol/L,最佳温度2℃,此时牦牛乳中α-、β-酪蛋白分离效果较好。牦牛乳不同酪蛋白在等电点(p I)附近时,α-、β-、κ-酪蛋白溶解性、乳化性、发泡能力最低,泡沫稳定性最好。等电点附近酪蛋白的溶解度最低,α-、β-酪蛋白pH值在2.1时溶解度最高(分别为60%、80%),而k-酪蛋白在pH值6.22时最高(43%);在40～80℃范围内,κ-酪蛋白溶解度受温度影响显著;当pH值为2.1时,α-、β-、κ-酪蛋白的乳化能力和发泡能力都最大,其乳化稳定性则是远离等电点后逐渐上升;本研究旨在为牦牛乳酪蛋白的利用和深加工提供思路,为云南特色乳制品的开发利用提供科学依据。     

利用壳聚糖选择性去除乳清中β-乳球蛋白

采用壳聚糖对浓缩乳清蛋白溶液进行处理以除去牛乳中主要过敏原β-乳球蛋白(β-Lg).在室温条件下,应用响应面分析法对反应条件进行优化,以β-乳球蛋白的减少量来评价反应的程度,得到的最适条件:pH值为6.69,壳聚糖添加量为2.04 g/L;此条件下可去除94.89%的β-乳球蛋白,剩余78.68%的α-乳白蛋白(α-La和35.41%的牛血清白蛋白(BSA).此外,对β-乳球蛋白和壳聚糖的回收进行研究,采用正交试验设计考察pH、醋酸钠溶液浓度和添加比例β-乳球蛋白回收率的影响.结果表明,最佳工艺条件为pH值为9.0,醋酸钠溶液浓度0.2 mol/L,添加比例1:15,此条件下可回收87.23%的β-乳球蛋白,纯度为84.1%.     

酪蛋白组分分离技术及消化性测定

本研究以牦牛乳干酪素为原料，分离得到纯度为74．2％的α-酪蛋白组分和纯度为75．0％的B．酪蛋白组分，其得率分别为69．5％和26．5％。通过酸凝性实验观察到在37℃，pH4．0条件下，α-酪蛋白组分形成了颗粒较大的凝块，而β-酪蛋白组分形成的是松软的絮凝物。体外消化实验结果亦显示β-酪蛋白组分的消化性要明显好于α-酪蛋白组分和牛乳酸沉酪蛋白。因而分离得到的β-酪蛋白组分可作为生产利于婴儿消化的新式配方乳粉的基料。     

牛乳中α-乳白蛋白的分离纯化工艺研究

本文以牛乳为原料,离心脱脂后采用酸沉法分离酪蛋白,微滤除菌后得到乳清蛋白溶液,结合膜分离法和离子交换色谱法分离纯化乳清蛋白溶液中的α-乳白蛋白,并利用高效液相色谱法检测其纯度.结果表明,分离酪蛋白沉淀得到的上清溶液,经0.45μm的陶瓷膜微滤除菌后,除菌率可达99％以上,微滤得到的乳清蛋白溶液蛋白质含量可以达到6.53...     

α-乳白蛋白油酸复合物对SGC-7901细胞增殖的影响

分别采用了MTT法检测细胞增殖,Hoechst33258染色观察细胞形态变化,以及电泳法观察DNA梯形条带研究经油酸诱导的牛乳α-乳白蛋白分别以不同浓度不同时间作用于胃癌SGC-7901细胞对其增殖作用的影响。结果表明,α-乳白蛋白油酸复合物对胃癌SGC-7901细胞的确有明显的促凋亡作用。     

钙盐沉淀法从酮酸发酵液中提取α-酮戊二酸

酮戊二酸作为一种重要的有机酸,在食品、化工、医药等领域具有广泛的用途。目前,发酵法是生产α-酮戊二酸最具优势的方法。但在解脂亚洛酵母发酵生产α-酮戊二酸的过程中,丙酮酸作为副产物总是大量积累。这2种酮酸物化性质相似,为下游分离提取过程造成了很大的困难。研究对比3种不同钙盐对酮酸分离的影响,建立了一种有效分离发酵液中α-酮戊二酸的钙盐沉淀方法。采用CaCO3为α-酮戊二酸的最佳沉淀剂,α-酮戊二酸的回收率和纯度分别为82.5%和98.89%。同时,结果表明在偏中性和高温作用下,丙酮酸的稳定性受到影响,丙酮酸分离不适用于钙盐沉淀法。该研究可为酮酸的分离提取过程提供重要的理论参考。     

牛乳中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白含量的变化特性

为研究牧场牛乳中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白随季节变化规律,利用毛细管电泳法分别检测1～12月份牛乳样品中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白含量.结果表明,α-乳白蛋白含量1月份最高(1.34 mg/mL),7月份含量最低(0.68 mg/mL);β-乳球蛋白含量2月份最高(3.46 mg/mL),8月份最低位(2.15 mg/mL).说明牛乳中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白含量与季节气候温度负相关.     

毛细管电泳法对乳及乳制品中乳源蛋白的测定

采用毛细管电泳方法对乳及乳制品中乳源蛋白成分进行检测.选择聚乙烯醇涂层毛细管,采用柠檬酸缓冲体系,在紫外检测214 nm、分离电压20 kV条件下对乳及乳制品中的α-乳白蛋白(α-La)、β-乳球蛋白(β3-Lg)、α-酪蛋白(α-CN)、β-酪蛋白(β-N)和k-酪蛋白(k-N)进行分离测定.五种蛋白线性良好,线性相关系数均大于0.997 8,各蛋白峰面积的相对标准偏差为1.76％～3.28％,加标回收率范围为88.1％～110.8％.应用该方法对液态奶、酸奶及奶粉中的乳源蛋白进行测定.本法准确、简便、易行,适于测定液态奶、酸奶、奶粉中蛋白质的检测.     

CE法检测α-乳白蛋白和β-乳球蛋白

建立区带毛细管电泳法分离检测乳粉中α-乳白蛋白(α-Lac)和β-乳球蛋白(β-Lg)含量的分析方法,检测条件为未涂层柱子、60 mmol/L磷酸盐缓冲体系(pH 6.5)、检测波长214 nm、分离电压15 kV。应用本法对市场上10个品牌的13个婴幼儿乳粉样品进行了检测,具有成本低廉、操作简便、准确快速等优点。     

帕米尔牦牛乳蛋白分离及α-乳白蛋白纯化研究

帕米尔牦牛分布在新疆克孜勒苏柯尔克孜自治州和喀什地区境内的帕米尔高原,帕米尔牦牛乳蛋白含量高,营养丰富,是当地牧民重要的食物来源。该研究利用等电点沉淀法对新疆帕米尔牦牛乳中大分子蛋白进行分离,得到乳清蛋白和酪蛋白,对其含量进行测定,并采用硫酸铵分级沉淀和离子交换层析等方法对α-乳白蛋白(α-lactalbumin,α-La)进行纯化。结果表明,帕米尔牦牛乳中总蛋白含量为(2.81±0.23) g/100mL,其中乳清蛋白和酪蛋白质量比为43∶57;帕米尔牦牛乳蛋白质包含α-La、β-乳球蛋白(β-lactoglobulin,β-Lg)、酪蛋白、血清白蛋白、乳铁蛋白和免疫球蛋白G等多种活性蛋白;另外,用饱和度为80%的硫酸铵可将α-La和β-Lg有效分离;再用DEAE-Sepharose离子交换层析进一步纯化,可除去β-Lg,得到高纯度的α-La。该研究可为新疆帕米尔牦牛产业发展及牦牛乳产品开发提供理论基础。     

纳豆中SOD的分离纯化及性质的研究

通过采用不同的溶液、pH和温度处理探讨了对SOD提取物活性的影响,采用硫酸铵沉淀法粗提,葡聚糖凝胶过柱,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法判定纯度.结果表明,提取时纳豆捣碎与否结果没有差异,采用缓冲液效果较好.采用50℃以上的温度处理影响酶活性,硫酸铵饱和度在65％～90％时得到较纯的酶粗提物,pH5.9的条件下有利于分离纯化,得到了分子量为3.86×104u的Fe-SOD型SOD.     

聚丙烯酰胺凝胶电泳研究硫酸铵盐析分离猪血清IgG

通过聚丙烯酰胺凝胶电泳对硫酸铵盐析分离猪血清G型免疫球蛋白进行了研究，结果显示pH值7．4时，猪血清IgG主要沉淀区间为硫酸铵饱和度25-40％，10倍稀释猪血清IgG最佳硫酸铵沉淀参数为：pH值7．4，硫酸铵饱和度37％，此时IgG得率为80．5％，纯度为72．9％。沉淀的血清蛋白中还含有约12％白蛋白和9％其它γ-球蛋白。沉淀时IgG活性保持不变。     

两种分离β-乳球蛋白方法的比较

以乳清粉为原料,比较研究了硫酸铵沉淀加凝胶层析法和高盐低pH加透析法两种技术路线分离纯化β-乳球蛋白的得率与纯度.实验结果表明,高盐低pH加透析法所得β-乳球蛋白浓度为11ms/mL、SDS-PAGE检测纯度达90%以上;硫酸铵沉淀加凝胶层析法所得β-乳球蛋白浓度为1mg/mL、纯度>90%.     

绿茶中茶多酚的提取工艺研究

研究了Ca2 沉淀法提取茶多酚(TeaPolyphenols,简称TP)的工艺,确定Ca2 沉淀茶多酚的最佳pH为7.5,钙盐加入量与茶叶质量之比约为1∶2,茶多酚-钙盐的最佳转溶条件为用2mol/L的硫酸溶液,以料酸体积比1∶2于20℃下转溶15min。结果表明,该提取工艺简单,无毒性,产品得率较高,纯度好。     

亲和毛细管电泳法和荧光猝灭法分析α-乳白蛋白与离子液体相互作用

以溴化1-乙基-3-甲基咪唑(1-ethyl-3-methylimidazolium bromide,[C2mim]Br)为原料,采用中和法合成氨基酸离子液体1-乙基-3-甲基咪唑-2-氨基-1,3-戊二酸盐(1-ethyl-3-methylimidazolium 1-aminopropane-1,3-dicarboxylic acid salt,[C2mim][Glu])。分别采用亲和毛细管电泳法和荧光猝灭法考察α-乳白蛋白与[C2mim][Glu]、α-乳白蛋白与[C2mim]Br的相互作用。结果得到二者结合常数均在10~6 L/mol量级,且α-乳白蛋白-[C2mim][Glu]的结合常数大于α-乳白蛋白-[C2mim]Br,结合比约为1∶1。实验结果为进一步研究α-乳白蛋白与离子液体相互作用机理、开发高效环境友好的α-乳白蛋白萃取体系具有一定的参考意义。