苍溪红心猕猴桃不同部位抗氧化活性研究

本文以苍溪红心猕猴桃为原料,研究不同部位的总酚、总黄酮和抗坏血酸含量,并测定不同部位对自由基、ABTS⁺自由基、羟自由基的清除能力。结果表明：果皮中总酚、总黄酮和抗坏血酸含量最高,分别为1142.56 mg/100 g、419.63 mg/100 g、214.34 mg/100 g,果肉次之,果籽最低。体外抗氧化活性结果表明,果皮的抗氧化活性最强,对DPPH自由基、ABTS⁺自由基、羟自由基清除能力分别为70.50%、83.79%、67.68%;果肉次之;果籽最弱。     

36种蔬菜抑制肝癌HepG2和结肠腺癌Caco-2细胞增殖活性评价

为明确36种中国主要消费蔬菜多酚提取物的总酚含量和抑制人肝癌细胞Hep G2和人结肠腺癌细胞Caco-2增殖活性,分别采用Folin-Ciocalteu法确定了蔬菜提取物的总酚含量,采用亚甲基蓝法确定了其抗Hep G2和Caco-2细胞增殖的活性,分析了总酚含量与抗Hep G2和Caco-2细胞增殖活性之间的相关性。结果表明,36种蔬菜每百克中没食子酸当量:芥蓝(973.09±31.29)μmol/hg,莲藕(920.55±29.00)μmol/hg,它们的总酚含量最高;丝瓜(44.94±4.16)μmol/hg,其总酚含量最低。在可测出抗增殖EC50值的蔬菜中,韭菜(15.96±0.88)mg/m L和蒜苔(17.54±0.03)mg/m L,它们的抗Hep G2细胞增殖的活性最强;上海青(390.52±17.63)mg/m L和空心菜(394.25±11.89)mg/m L,它们的活性最弱。韭菜抗Caco-2细胞增殖的活性最强,为(21.08±1.67)mg/m L;青尖椒的活性最弱,为(390.17±4.78)mg/m L。这些蔬菜的抗Hep G2和Caco-2细胞增殖活性与其总酚含量相关性均不显著(R2=0.027 1,p0.05;R2=0.151 3,p0.05),表明蔬菜的抗肿瘤活性不能单从其多酚含量的高低来推测。     

中国主要水果抑制肝癌HepG2细胞和结肠腺癌Caco-2细胞增殖活性评价

分别采用Folin-Ciocalteu法测定了水果提取物的总酚含量,采用亚甲基蓝法测定了其抗人肝癌细胞Hep G2和人结肠腺癌细胞Caco-2增殖的活性,分析了总酚含量与抗Hep G2和Caco-2细胞增殖活性之间的相关性。结果显示,25种水果中李子的总酚含量最高(1686.08±96.94μmol GAE/100鲜果),西瓜(83.54±2.10μmol GAE/100 g鲜果)和哈密瓜(79.35±0.76μmol GAE/100 g鲜果)的总酚含量最低;在可测出抗增殖EC50值的水果中,李子(18.99±0.06 mg/m L)和番石榴(20.94±0.09 mg/m L)抗Hep G2细胞增殖的活性最强,梨的活性最弱(389.63±10.82 mg/m L)。李子抗Caco-2细胞增殖的活性最强(8.73±0.11 mg/m L),火龙果的活性最弱(388.07±7.04 mg/m L)。水果的抗Hep G2和Caco-2细胞增殖活性与其总酚含量相关性显著(R2=0.4147,p0.01;R2=0.4071,p0.05),该相关性表明水果中的多酚具有良好的抗肿瘤细胞增值的活性。     

紫甘薯汁抗肿瘤活性及诱导人肝癌细胞HepG2凋亡机制研究

目的:研究紫甘薯汁的抗肿瘤活性及其诱导肝癌细胞HepG2凋亡机制。方法:采用Alamar Blue、倒置显微镜、荧光显微镜、扫描电镜、琼脂糖凝胶电泳、RT-PCR和Western blotting法检测不同体积分数的紫甘薯汁对SGC-7901、HO-8910和HepG2细胞的增殖抑制作用及诱导人肝癌细胞HepG2凋亡机制研究。结果:与对照组相比,体积分数5%和10%的紫甘薯汁对SGC-7901、HO-8910和HepG2细胞具有抑制作用,呈体积分数依赖性;作用HepG2细胞48h后,能观察到细胞皱缩和凋亡小体以及凋亡细胞典型的梯状DNA条带。RT-PCR和Western blotting法检测结果显示,紫甘薯汁可以诱导HepG2细胞中Fas、FADD、Caspase-3、Caspase-8和p53 mRNA表达水平上调和蛋白表达量增加,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性裂解片段明显增高且Caspase-3酶活性显著提高。结论:紫甘薯汁体外对肿瘤细胞的增殖具有一定抑制作用且通过细胞表面死亡受体途径诱导HepG2细胞凋亡,同时p53在此凋亡过程中也起着重要的作用。     

芡实壳醇提物抑制人胃癌SGC7901细胞和人肝癌HepG2细胞增殖并促进其凋亡

为明确芡实壳醇提物对SGC7901及HepG2细胞体外抑制作用及机制。该研究采用75%乙醇对芡实壳超声提取,采用福林酚法测定醇提物总酚含量,采用CCK-8法检测醇提物对SGC7901和HepG2细胞的增殖作用抑制率并计算IC50值,使用流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期、细胞线粒体膜电位及胞内钙离子浓度。结果表明,醇提物对SGC7901和HePG2细胞具有增殖抑制作用,浓度为200 μg/mL的醇提物作用细胞48 h后,抑制率分别为92.63%和72.40%。细胞周期检测表明,浓度为200~800 μg/mL的醇提物可使SGC7901细胞阻滞于G0/G1期;浓度为50~200 μg/mL的醇提物可使HepG2细胞阻滞于S期。细胞线粒体膜电位测定表明,醇提物可使SGC7901和HePG2细胞线粒体膜电位下降且具浓度依赖性,醇提物浓度为200 μg/mL时,细胞线粒体膜电位相较对照组分别下降21.92%和53.81%。细胞钙离子浓度测定表明,醇提物可使SGC7901和HePG2细胞内钙离子浓度升高且具浓度依赖性,醇提物浓度为200 μg/mL时,胞内钙离子浓度相较对照组分别上升21.85%和14.14%。实验表明芡实壳醇提物可抑制SGC7901和HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与细胞线粒体膜电位降低及胞内钙离子浓度升高有关。     

混菌发酵对红心猕猴桃果酒品质及其抗氧化性的影响

该研究以红心猕猴桃为原料,以酵母菌AU、MA、BV、FR为发酵菌株,分别接种两种酵母菌（BV-FR、BV-MA、BV-AU、FR-MA、FR-AU、MA-AU）(1∶1)混合发酵得到红心猕猴桃果酒,对果酒酒精度、颜色参数、滋味、气味指标及抗氧化活性进行检测,并基于品质指标进行主成分分析（PCA）及聚类分析（CA）。结果表明,BV-AU发酵果酒酒精度（13.9%vol）、a~*值、鲜味的回味响应值、芳香类物质含量最高,缺陷性气味含量最低;其DPPH自由基清除率为94.18%,具有较好的抗氧化活性。PCA及CA结果表明,基于品质指标可有效区分不同混合酵母菌发酵酒样。综上,BV-AU可优先作为发酵红心猕猴桃果酒的混合菌种。     

巴西蜂胶对HepG2细胞增殖抑制活性研究

巴西蜂胶具有丰富而显著的生理活性,采用MTT法对巴西蜂胶提取物进行了HepG2细胞增殖抑制活性的研究,发现巴西蜂胶对HepG2细胞增殖具有良好的抑制活性,且呈显著的量效关系和时效关系,即剂量越大、药物作用时间越长,则对HepG2细胞的抑制率越高。     

水生蔬菜提取物抑制人肝癌HepG2细胞和人胃癌SGC7901细胞的增殖

为探究水生蔬菜不同部位提取物对人肝癌HepG2细胞和人胃癌SGC7901细胞增殖的影响。本研究对菱角、芡实、莲藕、水芋头、茭白、荸荠和慈姑等7种常见的水生蔬菜的不同部位进行醇提和水提获得15种醇提物、15种水提物。采用CCK-8法检测不同提取物对人肝癌HepG2、人胃癌SGC7901细胞增殖的影响。结果表明菱角壳醇提物、芡实壳醇提物及水提物对HepG2的增殖具有明显的抑制作用及剂量效应,其浓度在400 μg/mL时抑制率分别为70.20%、83.52%、71.89%,相同浓度下阳性药五氟尿嘧啶（5-Fu）的抑制率为73.19%。菱角壳醇提物及水提物、芡实壳醇提物与水提物、芡实肉醇提物、藕节醇提物和荸荠皮醇提物对SGC7901的增殖有较好的抑制作用及剂量效应,其浓度在400 μg/mL时抑制率分别为58.86%、46.79%、41.27%、67.11%、49.93%、57.3%、58.96%,相同浓度下阳性药五氟尿嘧啶（5-Fu）的抑制率为49.33%。Pearson相关性分析表明水生蔬菜提取物对肿瘤细胞增殖的影响与其黄酮、多酚的含量有关。     

灵芝肽诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的细胞学观察

目的：研究灵芝肽(Ganoderma lucidum peptides,GLP)在体外对人肝癌HepG2细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用。方法：HepG2细胞用含不同浓度GLP培养基培养12、24、36、48、60h,GLP分为5个浓度梯度,分别为0.25、0.5、1、2、4mg/ml,采用噻唑兰(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法观察细胞生长抑制作用,用可见光显微镜、荧光显微镜观察细胞形态学变化、激光共聚焦(laser scanning confocal microscopy,LSCM)观察细胞内钙离子浓度的变化。结果：MTT法显示灵芝肽能显著抑制人肝癌HepG2细胞的生长,且存在浓度及时间依赖性。镜下可见细胞出现典型凋亡细胞形态学改变：细胞染色质浓缩,细胞体积缩小、核固缩深染、细胞膜出泡、凋亡小体形成;LSCM观察到胞内钙离子浓度明显增加。结论：0.25～4.0mg/ml的GLP体外可显著抑制人肝癌HepG2细胞增殖,存在量效关系和时效关系,能诱导人肝癌HepG2细胞凋亡,并且提示细胞内钙离子浓度的升高可能是细胞凋亡的机制之一。     

红心猕猴桃蒸馏果酒风味物质分析及研究

研究了采用红心猕猴桃发酵蒸馏制得猕猴桃蒸馏酒和白兰地,利用顶空固相微萃取技术和气相色谱-质谱联用技术(HS-SPME-GC-MS)分析了红心猕猴桃蒸馏酒和红心猕猴桃白兰地的风味物质。从果酒样品中分别鉴定出14种香气成分,其中醇类6种、酯类5种、醛酮类1种、其他类3种。乙酸乙酯、乙醇、异戊醇、糠醛、乳酸乙酯和丁二酸二乙酯等化合物为主要香气物质;白兰地经过橡木桶陈酿一年后,风味物质种类基本相同,但其含量有所差异,其中乙醇、乳酸乙酯、糠醛、丁二酸二乙酯和苯乙醇香气成分显著性下降,而乙酸乙酯、异丁醇、异戊醇含量明显有所上升。     

红心火龙果酒贮藏过程中抗氧化活性变化的研究

为探讨红心火龙果酒贮藏过程中甜菜红素与抗氧化活性的变化关系和护色技术,该文通过研究自酿3种红心火龙果酒和市售红心火龙果酒的甜菜红素含量差异及其羟自由基清除能力、还原能力与ABTS+自由基清除能力的变化,并对贮藏过程中果酒的甜菜红素含量与其抗氧化能力进行相关性分析。结果表明：随着贮藏时间的延长,添加茶多酚与乙二胺四乙酸二钠两种护色剂的红心火龙果酒的甜菜红素保存率最高,基本保持在81.22%之间。4种果酒的抗氧化能力强弱为：复配护色剂的红心火龙果酒＞单一护色剂的红心火龙果酒＞红心火龙果原酒＞市售红心火龙果酒。随着贮藏时间的延长,红心火龙果酒的抗氧化活性呈下降趋势,且色素的降解与其抗氧化性大小呈极显著正相关（R2=0.9～0.998）,在红心火龙果酒中添加复配护色剂可以有效护色和保持红心火龙果酒的抗氧化能力。     

豌豆蛋白水解物体外及对HepG2细胞的抗氧化活性

为了全面评价豌豆蛋白水解物(pea protein hydrolysates, PPH)及其超滤分离组分的体外及细胞抗氧化能力,以豌豆蛋白为原料,采用碱性蛋白酶和复合蛋白酶协同水解制备PPH,然后超滤分级得到PPH1(分子质量<3 kDa)、PPH2(分子质量3～5 kDa)、PPH3(分子质量>5 kDa)3个组分,使用不同的化学方法研究PPH和超滤分离组分的抗氧化活性,从中选择抗氧化能力最高的组分进一步考察其细胞内自由基清除能力并用H₂O₂应激的HepG2细胞评估其对氧化应激的保护作用。结果表明,各组分中PPH1具有最高的体外化学抗氧化活性,其氨基酸组成分析表明,抗氧化功能氨基酸占比高;在实验设定浓度下,PPH1能够显著抑制H₂O₂应激损伤HepG2细胞内活性氧的积累,对细胞应激损伤有明显的保护作用。研究认为,PPH及其超滤分离组分具有良好的体外化学及细胞抗氧化活性,对H₂O₂应激的HepG2细胞具有保护作用,能够为其作为一种天然源抗氧化剂...     

红曲色素的抗氧化活性及对HepG2氧化损伤的保护作用研究

目的 研究纯化后的红曲色素(monascus pigments,MPs)抗氧化活性及对HepG2细胞氧化损伤的修复作用。方法 以红曲米粉为原料,对其含有的MPs进行提取、纯化和鉴定。通过测定MPs的总抗氧化能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2’-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) ammonium salt, ABTS]阳离子自由基清除率评估了其抗氧化活性。同时,选用0.20 mmol/L的H2O2建立氧化应激模型,探索不同浓度MPs对细胞氧化损伤的保护机制。结果 纯化后的MPs含有4种MPs单体,分别为安卡红曲黄素、红曲玉红素、红曲素和潘红胺。MPs的总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）、DPPH自由基和ABTS阳离子自由基清除率与其浓度呈正相关。用不同浓度的MPs预处理后,与MC组相比,较低浓度（10 μg/mL）的MPs能显著提高细胞的存活率,但较高浓度的MPs (20 μg/mL)显著降低了细胞的存活率,这可能是H2O2与MPs协同作用导致的。随着MPs浓度增加,细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)累积量逐渐减少。当MPs浓度为20 μg/mL时,过氧化氢酶(catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性分别从14.75 U/mL±0.04 U/mL、3.87 U/mL±0.09 U/mL提升至15.25 U/mL±0.05 U/mL、8.28 U/mL±0.68 U/mL。结论 MPs有较强的自由基清除能力,对H2O2诱导的氧化损伤有保护作用,这可能是与MPs提高了抗氧化酶活性,降低了细胞内ROS累积量有关。     

采用HepG2细胞模型评价酒醅中短肽VPD和KGP的抗氧化活性

本研究针对前期实验从白酒酒醅中分离、提取和鉴定出的两种短肽Val-Pro-Asp (VPD)和Lys-Gly-Pro (KGP)的细胞水平抗氧化活性进行研究。以AAPH诱导氧化损伤的人体肝癌细胞(Human hepatoma cell,HepG2 cell)为模型,测定短肽对细胞内活性氧(ROS)含量、抗氧化酶的活性等指标。结果表明,VPD和KGP具有细胞内抗氧化活性,其作用机制体现在可以显著降低细胞内ROS含量,提高过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)三种酶的活力以及还原型谷胱甘肽(GSH)的含量,同时也能够通过降低细胞内脂质过氧化水平,如丙二醛(MDA)的含量来保护细胞免受氧化损伤,并且两种多肽的抗氧化能力随着浓度的上升基本呈现一定的增强趋势。综上所述,两种短肽在细胞水平具有一定的抗氧化能力,这为后续通过调整白酒蒸馏工艺条件,从而提高酒醅中功能性多肽进入白酒中的含量提供了可能。     

红心猕猴桃不同部位提取物抗肿瘤活性研究

为评价乐业红心猕猴桃不同部位提取物体外抗胃癌MGC-803、宫颈癌Hela和肝癌HepG2 3种细胞株的生物活性。使用酒精-水混合溶剂分别提取红心猕猴桃不同部位(根、枝、叶和果实)获得不同部位提取物;使用MTT法评价不同部位提取物体外抗胃癌活性,使用CCK-8法评价不同部分体外抗宫颈癌和肝癌活性。结果表明在抗胃癌MGC-803活性中,枝的乙酯组分、果实的90%酒精组分和果实组分的活性较好,而在抗宫颈癌Hela活性中,枝的水组分、果实50%酒精组分和果实水组分活性比较好。因此乐业红心猕猴桃具有一定抑制胃癌MGC-803和宫颈癌Hela细胞生长活性,其中果实部位活性最好。     

鸡肉酶解物对HepG2细胞抗氧化活性及小鼠血清抗氧化酶活性的影响

为了研究鸡肉酶解物SSPH(Salt Soluble Protein Hydrolysate,SSPH)及MFH(Muscle Fibrin Hydrolysate,MFH)的抗氧化作用,实验测定了鸡肉酶解物的HepG2细胞内活性氧的清除能力,以及小鼠胃饲28 d实验后的体内抗氧化酶活性。SSPH和MFH是特定工艺条件下提取鸡胸肉的盐溶蛋白及肌纤蛋白,经酶解制备的、95%以上分子量小于1000 u的酶解物。研究结果显示,在HepG2细胞培养中,鸡肉酶解物SSPH和MFH的添加浓度为500 μg/mL时,HepG2细胞的成活率为84.50%和89.87%,鸡肉酶解物对HepG2细胞均不存在毒性。细胞抗氧化实验中,实验组的HepG2细胞内荧光强度均显著降低于(P<0.05)空白对照组,并随鸡肉酶解物浓度增加而荧光强度降低;当SSPH及MFH的浓度为150 μg/mL时,细胞活性氧清除率,即抗氧化活性(Cellular Antioxidant Activity,CAA)值分别达到43.17%和46.64%,表明二者均具有良好的HepG2细胞活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)清除能力,且呈良好的剂量-效应关系。小鼠实验以生理盐水及鸡肉匀浆为对照组,经28 d胃饲,30 min游泳后取血清分析血清SOD、CAT及GSH-Px抗氧化酶活性,结果显示,除胃饲鸡肉酶解物SSPH剂量为40 mg/kg·bw·d组的CAT酶活性与实验对照组间差异不显著外,胃饲SSPH及MFH剂量为40 mg/kg·bw·d 和200 mg/kg·bw·d的实验组小鼠,血清SOD、CAT及GSH-Px等抗氧化酶活性均极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)高于实验对照组,表明鸡肉酶解物SSPH及MFH能够有效提高实验小鼠体内抗氧化酶活性。     

泽漆醇提取物抗氧化活性及对油酸诱导HepG2细胞脂肪堆积的影响

为了探究泽漆醇提取物体外抗氧化作用及其对油酸诱导HepG2细胞脂肪堆积的影响。本研究采用浸渍法分别以25%、50%、75%甲醇和乙醇对泽漆粉末进行提取,评估不同泽漆提取物的体外抗氧化活性,并测定其总酚和总黄酮含量。建立HepG2细胞脂肪堆积模型,不同浓度（20、40、60μg/mL）泽漆50%乙醇提取物处理24 h,观察细胞内脂滴形成情况;测定细胞中甘油三脂（triglyceride,TG）含量、总谷胱甘肽（glutathione,GSH）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的活性及总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）。结果表明,泽漆醇提取物均具有抗氧化活性,且有浓度依赖性,其中50%乙醇提取物在一定浓度范围内抗氧化效果最佳（P<0.05）,且总酚（8.813%±1.344%）和总黄酮（17.938%±0.819%）含量也较高。与模型组比较,泽漆50%乙醇提取物能够降低HepG2细胞内脂滴和TG值,提高细胞GSH、T-AOC含量和SOD活性（P<0.05）,具有浓度依赖性。综上可知,50%乙醇提取物...     

海湾扇贝多肽混合物对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

采用CCK-8（Cell Counting Kit-8）法检测海湾扇贝多肽混合物对体外培养的人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用,利用倒置显微镜及流式细胞仪观察、分析其对HepG2细胞的形态和细胞凋亡的影响。结果表明：不同质量浓度海湾扇贝多肽混合物（4、6、8、10、12 mg/mL）能够抑制人肝癌HepG2细胞的生长,且抑制率随海湾扇贝多肽混合物质量浓度的增加而升高。经12 mg/mL海湾扇贝多肽混合物处理后,HepG2细胞的形态发生了明显改变,表现为细胞皱缩、透明度降低、细胞核固缩等,并出现了凋亡小体。海湾扇贝多肽混合物可诱导HepG2细胞凋亡。     

巴莲莲子生物碱提取物对人肝癌细胞HepG2的体外抗癌效果

本研究对巴莲莲子生物碱提取物的体外抗癌效果进行研究,以证实巴莲莲子生物碱提取物的生理活性作用。采用噻唑蓝法、4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染色法和实时荧光定量聚合酶链式反应法检测巴莲莲子生物碱对人肝癌细胞HepG2的体外增殖抑制作用和凋亡诱导作用。巴莲莲子生物碱可以抑制HepG2细胞的体外增殖,但是对正常肝细胞L02无毒性,不影响其增殖。通过对癌细胞形态的观察发现随着巴莲莲子生物碱质量浓度的提高,更多的癌细胞被诱导凋亡从而死亡。同时,巴莲莲子生物碱能上调HepG2细胞的Bax、caspase-3、caspase-8、caspase-9、p53、p21基因表达和下调Bcl-2、Bcl-x L基因表达,从而促进癌细胞凋亡。巴莲莲子生物碱是一类生物活性成分,实验条件下具有较好的体外抗癌效果。     

不同酿酒酵母对软枣猕猴桃果酒理化特性及抗氧化特性的影响

选取9种广为使用的酿酒酵母(CEC01、CECA、NSD、MST、CM、DV10、BV818、D254、EC1118)酿制软枣猕猴桃果酒,通过对发酵过程中可溶性固形物的变化以及发酵结束后的基本理化指标、色泽指标、生物活性成分含量和抗氧化活性等指标进行测定分析,综合比较筛选出适合软枣猕猴桃果酒发酵的酿酒酵母。结果表明：酵母D254发酵速度快,酿制的果酒酒精度最高,残糖最低,但果酒的色泽、生物活性成分含量及抗氧化活性都较差;而酵母BV818发酵的软枣猕猴桃果酒色泽最优,并且能更好地保留软枣猕猴桃果酒的抗氧化性能。综合考虑,酵母BV818更适合软枣猕猴桃果酒的发酵。