热带假丝酵母对苹果酒风味物质合成的影响

为探究热带假丝酵母(Candida tropicalis)对苹果酒风味物质合成的影响。试验将分离自苹果的1株Candida tropicalis用于苹果酒发酵试验,改变酿酒酵母和Candida tropicalis混菌发酵接种比例,测定苹果酒相关理化指标和挥发性风味物质。结果表明:酿酒酵母和Candida tropicalis不同接种比例下苹果酒中共鉴定出38种挥发性风味物质,包括7种酸、15种醇、7种酯、8种羰基化合物和2种萜烯类化合物。通过热图聚类,酿酒酵母纯种发酵及接种Candida tropicalis的混菌发酵的挥发性风味物质明显区分;酿酒酵母纯种发酵下,以乙酯类化合物的合成为主;而Candida tropicalis添加则主要影响乙酸乙酯、乙酸异戊酯、高级醇和呋喃类化合物的合成。基于共现性网络分析表明,Candida tropicalis的加入对苹果酒风味物质相互作用影响较大,提高了苹果酒风味物质的复杂性。试验结果为Candida tropicalis在苹果酒酿造中的应用提供理论数据。     

一株热带假丝酵母木糖醇高产新菌株的筛选

自木糖厂环境样品中分离出一株编号为1-18的产木糖醇分离物。在初始木糖浓度200g/L的条件下重复循环利用1-18细胞摇瓶发酵,木糖醇转化率高达0.91(木糖醇g/木糖g),接近理论极限值;木糖醇生成速率达6.7g/L·h。无论产物浓度,产物生成速率与产物转化率都达到了令人满意的高水平。1-18发酵液以40ml/kg·d的最大剂量饲喂小白鼠一周,受试动物未出现中毒反应。分离物1-18在木糖醇生产中显然具有重要的生物工程应用潜力。根据常规形态鉴别,生理生化实验测定,以及26S rDNA D1/D2区域核酸序列同源性比较分析,证实分离物1-18属于Candida tropicalis(热带假丝酵母)。分离物1-18已保存于中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCC M 205067,其26S rDNA D1/D2区域核酸序列在GenBank的核酸序列登记号为DQ176428。     

一株柱状假丝酵母产脂肪酶条件的优化研究

对一株柱状假丝酵母菌的产酶条件进行了优化。确定最佳培养基配方为橄榄油6 g/L、酵母膏9 g/L、吐温-80 1%、Ca Cl20.5 g/L、K2HPO42 g/L、Mg SO4·7H2O 2 g/L、p H自然;确定最优发酵条件为培养基初始p H 5.2、培养时间25 h、摇床转速150 r/min。在最适产酶条件下,重复发酵5批后柱状假丝酵母所产脂肪酶平均酶活在(15.00±0.05)U/m L,RSD为2.34%,重复性较好。该株酵母菌生存环境为酸性,并在p H为5.2时产酶效果最好,推导该脂肪酶为酸性脂肪酶,对油脂水解产生的游离脂肪酸将会有一定程度的抵抗作用。此外,柱状假丝酵母培养25 h后即可获得最佳产酶效果,发酵周期短,既能节约成本,又能提高单位时间产酶量,适用于工业化生产。     

以产朊假丝酵母为原料生产风味酵母抽提物工艺的研究

以产朊假丝酵母为原料制备酵母抽提物,以氨基态氮含量和抽提物得率为主要指标考察了对酵母自溶影响关键的几个因素,包括均质压力、均质次数、自溶温度、自溶p H、外加蛋白酶的种类及添加量、自溶时间,并在此单因素实验基础上对酵母自溶进行正交实验,最后确定了酵母抽提物的最佳工艺条件为:15%浓度的酵母悬浮液,75MPa压力下循环均质2次后,调初始p H6.5,并添加1.5%(w/w)的复合风味酶,温度50℃下水浴自溶48h。在此最佳工艺条件下,制得的酵母抽提物的氨基态氮含量和得率分别达到650.6mg/100m L和50.1%,该酵母抽提物有酱香并略带酯香,口感浓郁有鲜甜味。     

产甘油假丝酵母酸性磷酸酯酶突变株的选育及其性质研究

运用化学诱变法从高产甘油的工业生产菌株产甘油假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａｇｌｙｃｅｒｏｌｇｅｎｅｓｉｓ）ＷＬ２００２－５（Ｈ－）筛选获得两类酸性磷酸酯酶突变株．一类为阻遏型酸性磷酸酯酶缺失突变株;另一类为对磷调节不敏感的部分去阻遏调节突变株,并研究了它们的发酵性能     

一株假丝酵母合成GSH的发酵条件优化

通过对1株假丝酵母诱变株发酵合成谷胱甘肽的条件进行研究,发现最佳培养基为葡萄糖4％,蛋白胨1.7％,磷酸二氢钾o.2％,硫酸铵0.6％,硫酸镁0.14％,硫酸锌0.001％,控制发酵条件初始pH值5.0,发酵温度25℃,装液量40mL/250mL,发酵时间66h,发酵后谷胱甘肽的产量达到了200.62mg/L.     

高强度产甘油假丝酵母突变株的选育及其发酵性状

以一株产甘油假丝酵母为出发菌株 ,采用化学诱变 ,通过玉米浆和外加无机磷组成的磷质量浓度为 3 40mg/L的磷源选择培养基 ,得到了一株发酵时间较原菌株缩短了 8h左右 ,产甘油能力 (甘油产量约为 1 40 g/L ,甘油转化率为 5 6% )和原菌株相似的突变株 ,并研究了突变株的发酵性状 .     

酿酒糟醅中生香酵母的筛选及培养条件

为了提高浓香型白酒品质,作者以酿酒糟醅为原料,采用平板涂布法分离纯化出酵母菌,再通过液态发酵筛选出高产酯的菌株,并对其进行生理生化鉴定及26S rDNA同源性分析,最后采用响应面法对菌株的培养条件进行优化。结果表明：作者从酿酒糟醅中分离出1株产香浓郁的菌株,编号为S5。经鉴定S5菌株为异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）。优化后的最佳培养条件为初始pH 4.95,发酵时间3 d,初始糖（葡萄糖）质量浓度6 g/dL,在此条件下发酵液中总酯质量浓度为7.67 g/L,比优化前提高了64.2%.由此可见,S5菌株对浓香型白酒品质的提高具有潜在的应用价值。     

产碱性脂肪酶热带假丝酵母LYSC-3的筛选、鉴定及发酵条件的优化

以橄榄油为唯一碳源,以溴钾酚紫为显色剂,采用琼脂平板法从富含油脂的土壤中筛选到一株产碱性脂肪酶野生型菌株LYSC-3。经形态学、生理生化和分子生物学的鉴定,确定菌株LYSC-3为热带假丝酵母（Candida tropicalis）。经发酵条件优化,菌株LYSC-3的最佳产碱性脂肪酶的发酵条件为:橄榄油10g·L-1、蛋白胨5g·L-1、蔗糖20g·L-1、（NH4）2SO40.5g·L-1、MgSO4·7H2O0.2g·L-1,K2HPO40.2g·L-1,pH8.0,35℃,150r·min-1摇床振荡培养3d,获得碱性脂肪酶最高酶活力达38.6U·mL-1。      

产碱性脂肪酶热带假丝酵母LYSC-3的筛选、鉴定及发酵条件的优化

以橄榄油为唯一碳源,以溴钾酚紫为显色剂,采用琼脂平板法从富含油脂的土壤中筛选到一株产碱性脂肪酶野生型菌株LYSC-3。经形态学、生理生化和分子生物学的鉴定,确定菌株LYSC-3为热带假丝酵母(Candida tropicalis)。经发酵条件优化,菌株LYSC-3的最佳产碱性脂肪酶的发酵条件为:橄榄油10g·L-1、蛋白胨5g·L-1、蔗糖20g·L-1、(NH4)2SO40.5g·L-1、MgSO4·7H2O0.2g·L-1,K2HPO40.2g·L-1,pH8.0,35℃,150r·min-1摇床振荡培养3d,获得碱性脂肪酶最高酶活力达38.6U·mL-1。     

近平滑假丝酵母发酵产甘露醇

从甘蔗汁中筛选出1株利用葡萄糖产甘露醇的菌株,经鉴定为近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)。研究其发酵生产甘露醇的条件,通过单因素实验和正交实验优化后,培养基配方为:200 g/L葡萄糖,30 g/L酵母膏,0.05 g/L CaCl2·2H2O,0.02 g/L FeCl3·2H2O,0.5 g/L MgSO4·7H2O,此条件下摇瓶培养甘露醇产量为61.7 g/L。进行30 L发酵罐扩大培养,根据发酵曲线得知72 h时甘露醇最大产量为80.3 g/L。     

热带假丝酵母制取天然调味料—酵母抽提物

本文收集了工业化生产天然调味料—酵母抽提物过程中自溶部份的生产结果记录,并对其进行了分析和总结。     

大曲丢糟生产假丝酵母饲料蛋白的研究

白酒酿造产生大量的酒糟废弃物,其可转化为营养丰富、易被动物吸收的高效价生物活性蛋白饲料。以大曲丢糟为主要原料,假丝酵母为菌种进行饲料蛋白的发酵研究,通过正交试验得到最佳的饲料生产工艺条件为丢糟:麸皮=4:1,30℃培养3d,发酵终产物的粗蛋白和还原糖的含量分别达到了17.5%和1.13%。     

适应进化筛选耐高温产木糖醇麦芽糖假丝酵母

适应进化是一种有效的菌种筛选优化方法.该研究通过对生产木糖醇的优良菌株麦芽糖假丝酵母进行高温适应进化,获得一株耐高温进化菌株.该进化菌株在38℃条件下转化木糖生产木糖醇的能力与出发菌株在30℃条件下接近,转化率达到0.63g/g.高温发酵生产不仅容易满足炎热夏季的工业生产环境,还可以减少发酵过程的冷却水使用以及降低染菌机率,从而使该进化菌株具有极大的工业应用潜力.     

产香酵母发酵面团挥发性风味物质分析

采用分离自山东酵子具有优良发酵和产香特性的酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）CGMCC No.24005,制成干粉发酵剂,并分析其生长发酵特性及发酵面团的香气成分。结果表明,该酵母的最适生长温度、pH分别为28℃、6;发酵16 h时面团体积最大。利用此酵母发酵面团整体香气较强,酯类与醇类的种类及含量显著高于未发酵组（P<0.05）,果香、花香、酒香、甜香等特征明显,其中乙酸异戊酯、异戊醇、辛酸乙酯、苯乙醇等是不同发酵时间产物呈现不同香气特征的关键物质。说明该发酵剂能显著增加面团挥发性物质种类及含量,可提升发酵面食的品质,为传统发酵面食的标准化生产提供理论参考。     

产朊假丝酵母利用有机酸的研究

在有机酸为唯一碳源的培养中培养产朊假丝酵母(Candida utilis)时,以L-苹果酸、乳酸、琥珀酸或柠檬酸为碳源的培养基经过48h后,有机酸浓度均由初始浓度5.0g/L下降到0.0g/L。以乙酸、草酸和富马酸为碳源的培养基有机酸浓度始终没有明显变化,说明产朊假丝酵母能够利用细胞外的L-苹果酸、乳酸、琥珀酸和柠檬酸,不能利用乙酸、草酸和富马酸。当葡萄糖和L-苹果酸、乳酸、琥珀酸和柠檬酸中的某种有机酸共同做碳源时,葡萄糖浓度均可以在32h内从20.0g/L降到0.0g/L,而各有机酸在0~24h内浓度变化不大,24~48h浓度均有不同程度的下降,说明当培养基中有葡萄糖时,有机酸的利用受到抑制。当浓度均为2g/L的L-苹果酸、乳酸、琥珀酸和柠檬酸同时做碳源培养产朊假丝酵母时,乳酸大约经过40h浓度首先降到0.0g/L,L-苹果酸、柠檬酸、琥珀酸浓度在0~16h过程中没有明显变化,16~48h下降趋势明显,最后也都被菌体完全利用,说明乳酸比较容易被菌体利用,而L-苹果酸、琥珀酸和柠檬酸在被菌体利用先后顺序上没有明显区别。     

产朊假丝酵母核酸高产株的选育及其发酵性能研究

为了获得一株发酵性能优良的高核酸酵母,以产朊假丝酵母(Candida utilis)CL1501为出发菌株,采用紫外-亚硝基胍复合诱变,筛选获得一株高核酸含量的突变株CL15013,经测定其核酸含量占菌体干质量的16.8%,高于出发菌47.8%。对比研究其流加及分批培养工艺,流加培养细胞收获量为16.9 g/L,比分批培养提高94.3%;正交试验设计优化流加培养条件后,CL15013的收获量达21.3 g/L,比分批培养提高144.8%,具有良好的生产应用潜力。     

产朊假丝酵母生长条件的优化

通过安瓿管复壮的产朊假丝酵母,用YPD培养基进行生长曲线的测定,得出12h是此种酵母菌的生长最优条件。对产朊假丝酵母进行单因素条件筛选,包括培养温度、摇床转速、碳氮比,实验得出温度在30℃、转速180r/min、碳氮比(葡萄糖和蛋白胨的质量比)为3∶1时菌体密度最高。通过采用L9(34)正交实验设计确定各因素对酵母菌生长的影响,优化条件为培养时间13h、温度30℃、转速160r/min、碳氮比约3∶1,此时菌体密度最高。     

产朊假丝酵母发酵培养基的优化研究

对产朊假丝酵母高产菌体量的液体发酵培养基进行了研究,结果表明其优化后的培养基为:葡萄糖40g/L,蛋白胨10g/L,KH2PO42g/L,MgSO4·7H2O0.3g/L。摇瓶发酵结果菌体干重达到6.37g/L,比基础培养基发酵结果增加了47%。     

1株产木糖醇菌株的筛选鉴定

经过平板筛选培养基初筛,从土壤中共分离得到110株可利用木糖作为唯一碳源进行代谢的菌株,经过HPLC初步定性定量分析,复筛得到6株木糖醇转化率较高的菌株,其中转化率最高的菌株为SK36.001,由于木糖代谢产物中具有同分异构体,因此将SK36.001的主要发酵产物通过分离柱分离,经过冻干浓缩后做LCMS、1H-NMR分析鉴定产物结构,确认产物为木糖醇。后利用26S r DNA的D1/D2区域序列分析法对该菌株进行分子生物学鉴定,结合形态学、生理生化特征鉴定结果确认该菌株为热带假丝酵母,并命名为Candida tropicalis SK36.001(Gen Bank登录号为KT945155)。通过对其发酵生产木糖醇过程的研究发现,在30℃,200 r/min,木糖初始质量浓度为50 g/L的条件下,摇瓶分批培养至30 h时可以达到最高木糖醇转化率为58.2%,转化速率达到0.986 g/(L·h)。