具有降胆固醇能力的人源乳酸菌筛选

分离筛选出长寿人群肠道中具有益生功能的乳酸菌,并研究其体外降解胆固醇能力。结果表明分离获得的80株乳酸菌中,9株菌在模拟胃液中培养3 h的存活率较高,分别为26.60%、24.30%、22.50%、16.72%、46.61%、16.10%、19.80%、19.60%、17.80%,在0.30%、0.50%及1.00%的胆盐培养基中存活率最高的菌株为o2,存活率分别为21.31%、13.35%及12.43%;9株菌对氨苄青霉素、青霉素G、氯霉素敏感,对四环素、利福平、环丙沙星敏感或中度敏感;9株菌对三株致病菌均有抑制作用,其中V9、o2分别对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌抑制能力较强,抑菌圈直径分别为12.00 mm、11.40 mm,9株菌对大肠杆菌的抑制作用普遍较强,抑菌圈直径均大于7.00 mm;9株菌中f10、o2、T1及V9的胆固醇降解率较高,分别为45.85%、40.76%、41.70%、42.87%,经生理生化试验及16S rDNA测序鉴定分别为屎肠球菌、食窦魏斯氏菌、干酪乳杆菌及发酵乳杆菌,是良好的辅助降血脂候选菌株。     

驼乳制品中抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性乳酸菌的筛选及益生特性研究

目的:本研究以新疆阿勒泰地区的驼乳制品为研究对象,筛选对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶有抑制活性的优良乳酸菌。方法:采用稀释涂布法分离纯化菌株,DNS和pNPG法筛选对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶有抑制活性的菌株,通过耐酸性、耐胆盐、模拟胃肠道环境耐受性、抑菌性、抗氧化活性实验评价菌株的益生特性。结果:从驼乳制品中共计获得34株菌株,其中6株对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶有抑制活性,经过形态学和16S rRNA分子鉴定,确定有4株为植物乳杆菌Lactiplantibacillus plantarum,2株为副干酪乳杆菌Lactiplantibacillus paracasei。6株乳酸菌对α-淀粉酶的抑制活性都达到50%以上,其中X34对α-淀粉酶的抑制率最高达到88.59%。本实验中筛选的乳酸菌对α-葡萄糖苷酶的抑制率在11%~16%之间,X31抑制率最高为15.43%。6株乳酸菌在不同pH（1.0、2.0、3.0）和不同浓度胆盐（1、2、3 g/L）的培养基中均可存活。6株乳酸菌在模拟胃液和肠液中的存活率分别达到83%和90%以上。对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除率超过90%以上,其中X29对羟自由基的清除率最高为92.43%,对超氧阴离子自由基清除率最强的是X33清除率达到94.04%。6株乳酸菌对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌有一定的抑制作用,其中X31对大肠杆菌的最大抑菌圈直径为19.63 mm,X23对沙门氏菌抑菌圈最大达到19.85 mm,菌株X33对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径最大为19.17 mm。结论:从驼乳制品中筛选到6株具有潜在降糖活性的乳酸菌,对强酸、胆盐和胃肠液有一定的耐受性,抗氧化能力较强,具有抑制致病菌的效果,为后期研发功能性降糖饮品提供益生菌株。     

甘南州牧区优良乳酸菌耐受特性的研究

对分离自甘南州牧区酸牦牛奶中的4株优良乳酸菌的生长性能、耐酸能力、耐胆盐能力、耐渗透压能力和抑菌能力进行了研究。结果表明:4株乳酸菌均有较好的生长特性;球菌A-2-1和杆菌F-2-1在极限pH1.5仍能生长;当胆酸盐浓度达到0.5%时,杆菌B-4-2-1生长受到抑制,其余3株菌均能生长;杆菌F-2-1和G-3-2对浓度高达8%的NaCl均表现出一定的耐受力;同时4株乳酸菌也表现出良好的抑菌效果,杆菌B-4-2-1对金黄色葡萄球菌抑制作用较强,抑菌圈直径19mm,在对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑制作用中菌株F-2-1效果明显,抑菌圈直径分别为18mm和22mm,研究结果可以为其在发酵乳制品中的应用提供参考依据。      

甘南州牧区优良乳酸菌耐受特性的研究

对分离自甘南州牧区酸牦牛奶中的4株优良乳酸菌的生长性能、耐酸能力、耐胆盐能力、耐渗透压能力和抑菌能力进行了研究。结果表明:4株乳酸菌均有较好的生长特性;球菌A-2-1和杆菌F-2-1在极限pH1.5仍能生长;当胆酸盐浓度达到0.5%时,杆菌B-4-2-1生长受到抑制,其余3株菌均能生长;杆菌F-2-1和G-3-2对浓度高达8%的NaCl均表现出一定的耐受力;同时4株乳酸菌也表现出良好的抑菌效果,杆菌B-4-2-1对金黄色葡萄球菌抑制作用较强,抑菌圈直径19mm,在对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑制作用中菌株F-2-1效果明显,抑菌圈直径分别为18mm和22mm,研究结果可以为其在发酵乳制品中的应用提供参考依据。     

凝结芽孢杆菌13002的益生特性

以凝结芽孢杆菌13002为研究对象,测定了该菌株对高温、胆盐、酸的耐受性以及对有害菌的抗菌活性、对抗生素的耐药性五个方面的益生特性。结果表明:该菌株于80 ℃条件作用10 min存活率达72.3%;0.3%胆盐作用12 h存活率达69.8%;pH2.0条件下作用4 h存活率达40.0%;对有害菌株(金黄色葡萄球菌和大肠杆菌)具有一定抗菌活性,其抑菌圈直径分别达13.650和14.367 mm;对青霉素、链霉素、四环素三种抗生素具有不同程度的耐药性,其MIC值分别为0.781、0.391和0.039 mg/mL。凝结芽孢杆菌13002具有良好的益生特性。     

枯草芽孢杆菌MX-6的特性研究

以中国豆豉中筛选到的一株枯草芽孢杆菌MX-6为研究对象,分析其生长曲线、耐受性、抑菌特性及耐药性。枯草芽孢杆菌MX-6培养14h达到最大生物量,菌株的活性强、生长快,具有较高的温度耐受性,在100℃处理30min存活率亦可达到52.91%。枯草芽孢杆菌MX-6经人工胃液pH(1～4)处理1～4h,存活率均达到71.87%以上,结果表明菌株对胃液的耐受性较强。人工肠液和不同浓度胆盐对菌株均有一定的影响,0.1%～0.4%的胆盐对枯草芽孢杆菌MX-6的存活率影响不显著(P0.05),存活率达到74.13%以上。枯草芽孢杆菌MX-6的发酵液对青霉、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有较强的抑菌效果,而对乳酸菌无抑制作用,不具有耐药性。结果显示:该菌株的发酵速度快、耐受性强、抑菌特性明显、无耐药性,具有开发为益生菌制剂的潜能,有助于其工业化应用。     

酵素中具有抑菌能力乳酸菌的筛选及鉴定

该研究探讨了从酵素中分离纯化具有抗菌性能的12株乳酸菌，对其进行生理生化实验和API鉴定。利用牛津杯法对阪崎大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌和宋内志贺氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌进行抑菌特性研究，并探讨了乳酸菌是否产生物胺能力和偶氮还原酶。结果表明，酵素源的12株乳酸菌对肠道致病菌均具有不同程度的抑菌活性，其抑菌圈直径为14~22 mm，对大肠杆菌的抑菌效果较好，其抑菌圈直径为15~23 mm，对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为14~24 mm，12株乳酸菌都不具有产生物胺和偶氮还原酶的能力。通过生理和API生化鉴定确定XZJ003、XZJ006、XZJ015均为副干酪乳杆菌，通过16S rDNA和同源性确证XZJ015为副干酪乳杆菌，该研究结果对今后益生菌的深入研究和功能性食品的开发具有一定的作用。     

一株益生芽孢杆菌的分离及理化性质鉴定

研究采用改良的营养琼脂培养基,从泡菜中分离一株蜡样芽孢杆菌。经生理生化实验和16SRNA序列分析初步鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。该菌株经过pH2.0、pH3.0和pH4.0的人工胃液中处理2h和4h,存活率均超过94%;在0.1%～0.3%胆盐溶液里存活率均超过91%;拮抗实验结果表明QT12对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌K88和格氏乳球菌均具有较明显的抑制作用。研究结果表明,该菌株可以顺利通过胃酸进入小肠后开始作用,改善肠道微生态环境,具有作为微生态制剂菌株的应用潜力。     

云南乳饼中乳酸菌的筛选及其功能活性

从云南传统发酵食品乳饼中分离乳酸菌,以降解胆固醇及甘油三脂能力、耐酸耐胆盐能力、耐药性和抑菌能力为指标,筛选得到功能活性较好的菌株并进行鉴定;以DPPH自由基、ABTS自由基清除能力和铁还原能力为指标,比较其与4种商业化乳酸菌菌株的体外抗氧化能力。结果表明,分离得到的149株菌株中,菌株D16的体外降解胆固醇及甘油三酯的能力最强,降解率分别为62. 22%和37. 89%;菌株D16具有较强的耐酸耐胆盐能力,在pH 3. 0的人工胃液中16 h存活率为87. 29%,在胆盐质量浓度为1、3和5 g/L条件下16 h存活率分别为82. 36%、81. 41%及79. 26%;菌株D16对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞杆菌有一定的抑制作用,抑制率分别为54. 50%、48. 82%和62. 75%;且对青霉素、氨苄西林、丁胺卡那、庆大霉素、诺氟沙星和氯霉素6种抗生素均敏感; 16S rDNA基因序列分析结果表明,菌株D16为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum);体外抗氧化实验结果表明,菌株D16的DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力均显著高于其他商业...     

戊糖片球菌SBC5的功能特性研究及在发酵乳中的应用

采用形态观察和16S rDNA序列分析对实验室保存的一株乳酸菌进行鉴定，通过体外模拟实验测定其对胃酸和胆盐的耐受性以及耐热性和疏水性；采用体外特征分析，研究菌株及其代谢物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制特性、抗氧化性以及抑菌性；最后通过在脱脂乳中的发酵实验，探究菌株发酵过程中的变化和发酵乳储存期的性能变化。结果显示，该菌株为戊糖片球菌，命名为Pediococcus pentosaceus SBC5。P.pentosaceus SBC5在pH 2.0的胃酸条件下孵育2 h的存活率为49.42%,在0.3%胆盐浓度下2 h的存活率为65.38%。P.pentosaceus SBC5疏水性为21.58%,40℃和50℃处理后的存活率分别为98.61%和74.15%。P.pentosaceus SBC5代谢物具有良好的α-淀粉酶抑制特性、抗氧化和抑菌特性，其发酵上清液对α-淀粉酶的抑制作用为46.93%,对DPPH自由基的清除率为18.98%,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌2种指示菌的抑菌圈直径均在20 mm以上。P.pentosaceus SBC5的凝乳时间较短，为12 h;发酵过程中酸度为9...     

一株强抑菌活性植物乳杆菌的分离及益生性能研究

以健康黔北黑猪肠道黏膜内容物为原料,采用厌氧罐培养法分离出肠道细菌,结合抑菌试验筛选出其中具有强抑菌活性菌种进行分子生物学鉴定,并对其耐受性及抑菌物质的稳定性进行研究。结果表明,该菌株被鉴定为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,对金黄色葡萄球菌ATCC6538、大肠埃希氏菌ATCC25922和鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028等指示菌具有强抑制作用,其发酵上清液对3种指示菌的最大抑菌圈直径分别约为44.7 mm、23.1 mm和31.8 mm;菌株发酵上清液抑菌物质耐高温,120 ℃处理30 min抑菌活性无显著变化（P＞0.05）;胰蛋白酶处理后,上清液的抑菌圈直径显著减小（P＜0.05）,而过氧化氢酶和胃蛋白酶处理后抑菌圈直径无显著变化（P＞0.05）,表明主要抑菌物质为有机酸和活性肽;菌株经pH 2、0.3%猪胆盐或人工胃肠液处理6 h后存活率分别为0.06%、0.61%、40.80%和25.65%,显示出良好的益生性能。     

Lactic acid starter and probiotic bacteria: a comparative “in vitro” study of probiotic characteristics and biological barrier resistance

Probiotic characteristics (deconjugation of bile salts, hydrophobicity and β-galactosidase activity) and the resistance to biological barriers (gastric juice and bile salts) of 24 strains of lactic acid starter bacteria (Streptococcus thermophilus, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus and Lactococcus lactis) and 24 strains of probiotic bacteria (Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus and bifidobacteria) were compared. Among the probiotic bacteria tested, Lactobacillus acidophilus was the most interesting species since it showed high values of resistance to gastric juice and bile, hydrophobicity and β-galactosidase and bile salts deconjugation activities. Bifidobacterium bifidum strains showed the same behavior, although the values of the parameters investigated were slightly lower than those obtained for Lactobacillus acidophilus. On the other hand, it was demonstrated that Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus was the lactic acid starter species with the best probiotic characteristics among the starter species assessed. It was resistant to gastric juice and bile, and showed high values for β-galactosidase activity. On the other hand, lactic acid starter bacteria showed hydrophobicity values similar to or higher than those obtained for the strains of the Lactobacillus casei . According to the results found, the total probiotic value of a fermented dairy product should take into account not only the intestinal probiotic cultures used in the formulation but also the probiotic contribution of the lactic acid starter microflora.     

西藏牦牛粪和乳源中益生菌的筛选与鉴定

采用钙透明圈法从西藏地区牦牛粪和乳源中分离、筛选益生菌，通过形态观察及分子生物学技术进行菌种鉴定，并对其生长特性、产酸能力、耐胆盐、酸、人工胃液能力及抑制大肠杆菌能力进行分析。结果表明，共分离、筛选出25株乳酸菌，经鉴定7株为益生菌，分别为1株植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum），2株鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）和4株副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracaseium）。其中植物乳杆菌B2具有良好的生长优势、产酸能力（发酵终pH值在4左右）、耐酸（pH值为4）、耐胆盐（0.6%）、耐人工胃液能力（存活率为57.4%），且抑制大肠杆菌效果较好（抑菌圈直径为22.0 mm）。     

Lactobacillus acidophilus Group Lactic Acid Bacteria Applied to Meat Fermentation

Lactobacillus acidophilus group bacteria (L. acidophilus, L crispatus, L. amylovorus, L. gallinarum, L. gasseri, L. johnsonii) , probiotic lactic acid bacteria, were applied to meat fermentation. Of six strains, L. gasseri (predominant lacto-bacilli in human intestinal tracts) JCM1131^T exhibited greatest fermentation performance in meats. This strain resisted gastric acid and bile, and would thus have no detrimental effects in the intestinal tract. Inoculation of the strain depressed the propagation of S. aureus cells and their enterotoxin production during meat fermentation. Results suggest probiotic lactic acid bacteria could be effectively utilized for meat fermentation to produce healthy meat products.     

牦牛曲拉源乳酸菌的耐受性与抑菌性能比较

以源于牦牛曲拉的6株益生乳酸菌为研究对象,比较了耐酸能力、耐胆盐能力、耐渗透压能力和抑菌性能。结果表明:6株乳酸菌菌株的耐酸能力、耐胆盐能力、耐渗透压能力和抑菌性能各不相同。菌株G2、G4、Q1对酸性环境的耐受性最好,G2和G4的耐胆酸盐的能力最强,G2、G4、Q1对高渗透压的耐受性较强,所有菌株在模拟胃肠液环境下的存活率均在90%以上;菌株Q2对大肠杆菌的抑菌效果最强,菌株Q1次之;菌株Q1和Q2对金黄色葡萄球菌的抑制效果较好,其次是菌株G2;对沙门氏菌抑菌作用最强的为菌株Q2,抑菌能力最差为G3;对单增李斯特菌抑菌作用最强的为菌株G4。研究结果可为牦牛曲拉源益生乳酸菌的应用提供理论依据。     

新疆传统干酪中1株产广谱细菌素乳酸菌的筛选及其生物学特性

利用牛津杯法从新疆传统干酪中筛选出1株对大肠杆菌（Escherichia coli）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）均具有明显抑制作用的乳酸菌。经排除酸、过氧化氢干扰后,此菌株的发酵上清液仍然具有较强的抑菌性。经胃蛋白酶和胰蛋白酶处理后,抑菌活性明显降低,表明其发挥抑菌作用的物质是细菌素。通过对该菌株的生长特性研究和生理生化分析以及16S rRNA基因序列分析,该菌株被鉴定为肠球菌属（Enterococcus sp.）。在酸性条件下,对胃蛋白酶和胰蛋白酶敏感,发酵上清液经高温、尿素、十二烷基硫酸钠（SDS）、乙二胺四乙酸（EDTA）、聚乙二醇辛基苯基醚（Triton X-100）、吐温-80（Tween-80）处理下抑菌活性仍然保持稳定,为乳酸菌开发作为生物型防腐剂奠定基础。     

传统泡菜中抗性乳酸菌的筛选及鉴定

以传统泡菜中分离出的40株乳酸菌为对象,通过耐酸、抗人工胃液和抗胆盐试验,确定传统泡菜中具有良好抗性的乳酸菌,并使用16S rDNA序列和系统发育树分析良好抗性乳酸菌的种属关系。试验结果表明,40株乳酸菌中编号MFR-28和MFR-30两株菌对人工胃液和胆盐具有较强的耐受能力,其在人工胃液中的存活率分别为85.21%和90.47%,在0.3%胆盐中的生长效率分别为11.84%和7.37%;经16S rDNA序列和系统发育树分析,MFR-28和MFR-30均为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)。该研究筛选出的2株抗性干酪乳杆菌,可作为潜在益生菌进一步探索其生理功能,以期用于开发益生菌产品。     

川西高原发酵牦牛乳中降解亚硝酸盐乳酸菌的筛选与耐受性研究

以川西高原发酵牦牛乳中分离出的195株乳酸菌为研究对象,采用比色法测定其亚硝酸盐降解能力,从中筛选出亚硝酸盐降解能力极强的菌株。将这些优势菌株分别在人工胃液、人工肠液、胆盐和高盐4个模拟人工胃肠道消化环境中进行培养,测其耐受力。结果表明:这195株乳酸菌亚硝酸盐降解率范围为35.79%~96.51%,其中降解率在80%~90%的菌株占54.87%,仅有1.54%的菌株亚硝酸盐降解率在50%以下,有3株亚硝酸盐降解能力极强的菌株(降解率大于95%)。这3株菌在人工胃液中的活菌数随培养时间的延长而减少,培养3 h后,菌株5、26、150在pH5.5时的活菌数分别为3.7、3.6、4.1×10⁸ CFU/mL;在人工肠液中培养4 h后,菌株5、26、150的活菌数分别为4.3、6.8、5.3×10⁸ CFU/mL;在不同胆盐梯度的培养基中培养24 h后,3株菌的活菌数随胆盐浓度增大而减少,且均保持在10⁸ CFU/mL以上;在高盐环境中培养24 h后的活菌数随盐质量浓度的增加而降低,活菌数均在10⁸ CFU/mL以上。结论:川西高原发酵牦牛乳中分离出的195株乳酸菌降解亚硝酸盐的能力存在较大差异,其中降解亚硝酸盐能力极强的菌株对体外模拟消化环境具有较好的耐受力,为其在医药,食品和生物领域的应用提供了理论依据。     

芒果酸奶发酵及后熟过程中乳酸菌素的产生及其抑菌作用

为了揭示芒果酸奶在其发酵与贮运过程中抗菌物质的产生及抑菌作用机理,采用指示菌及抑菌培养试验等方法,探讨了芒果酸奶中抗菌物质的种类及作用。结果表明,在芒果酸奶正常发酵并经后熟12 h后,开始有乳酸菌素产生。乳酸菌素随着后熟时间的延长而增加,且对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有抑菌效果,乳酸菌素的抑菌作用随着胰蛋白酶、胃蛋白酶或木瓜蛋白酶的作用而消失。此外酸奶发酵过程产生的乳酸等有机酸对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用;而H 2O 2对指示菌也有微弱的抑制作用。添加复配稳定剂对酸奶的抑菌作用没有显著影响,而添加芒果酱在一定程度上增强了酸奶的抑菌效果。综上,芒果酸奶中有机酸、H 2O 2及乳酸菌素等物质共同起到抑菌作用。