富硒乳酸菌筛选及其富硒工艺初探

首先对含有嗜酸乳杆菌(La),保加利亚乳杆菌(Lb),嗜热链球菌(St)的分离样品进行分离,纯化,筛选出纯菌种,然后分别进行富硒试验,通过抗性筛选和三角瓶发酵培养获得富硒能力优良的菌株和富硒条件。试验结果表明,嗜酸乳杆菌(La)富硒能力最强,其富硒条件初步确定为:选用番茄汁液体培养基,亚硒酸钠添加量为18μg/mL,pH6.6,37℃,培养24h,富硒能力为62.22%。      

乳酸菌富硒技术初步研究

本文首先对含有嗜酸乳杆菌(LA),保加利亚乳杆菌(LB),嗜热链球菌(ST)的分离样品进行分离,纯化,筛选出纯菌种,然后分别进行富硒试验。通过抗性筛选和三角瓶发酵培养获得富硒能力优良的菌株和富硒条件,试验结果表明:嗜酸乳杆菌(LA)富硒能力最强,其富硒条件初步确定为:选用番茄汁液体培养基,亚硒酸钠添加量为18μg/ml,pH6.6,37℃,培养24h,富硒能力为62.22%。     

富硒乳酸菌种的筛选

本实验从样品中分离,纯化,筛选出嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus,简称 LA),保加利亚乳杆菌(Lactobacillus Bulgaria,简称 LB),嗜热链球菌(Streptococcus thermopiles,简称 ST)。通过富硒抗性筛选,确定了 LA 为耐硒菌种。通过对其发酵培养获得富硒能力优良的菌株和富硒条件,试验结果表明:选用番茄汁液体培养基,接种量 10%,加硒量 18μg/ml,pH 6.8,37℃培养 24h,有机硒含量可达 12.99μg/ml,转化率为 72.17%。     

富硒乳酸菌种的筛选

本实验从样品中分离，纯化，筛选出嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus，简称LA)，保加利亚乳杆菌(Lactobacillus Bulgaria,简称LB)，嗜热链球菌(Streptococcus thermopiles，简称ST)。通过富硒抗性筛选，确定了LA为耐硒菌种。通过对其发酵培养获得富硒能力优良的菌株和富硒条件，试验结果表明：选用番茄汁液体培养基，接种量10％，加硒量18ug／ml，pH6．8，37℃培养24h，有机硒含量可达12．99μg／ml，转化率为72．17％。     

富硒乳酸菌的制备

课题以嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animals)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜热链球菌(Streptococcus thermopiles)作为供试菌株,进行富硒发酵试验,测定菌株的富硒能力及确定其适宜硒浓度。采用单因素试验和正交试验优化了益生菌的培养基组成。采用响应面法研究了富硒益生菌的发酵工艺,获得了富硒菌粉。结果显示:(1)在选购的4种乳酸菌中,嗜酸乳杆菌的富硒能力最强,且硒添加量为0～1 000 mg/kg时,嗜酸乳杆菌冻干粉的活菌数均能达到千亿级(即1×1012);优化的益生菌的培养基配方为蔗糖5%、蛋白胨与酵母膏的总添加量0.35%、蛋白胨-酵母膏比例3∶2、K2HPO4的总添加量0.1%;(2)优化嗜酸乳杆菌的最佳富硒工艺,并进行验证试验:菌种硒含量为2 902.81 mg/kg,加硒量为15.30 mg/kg,加硒时间为6.64 h。在此条件下,富硒益生菌产品得率为498.46 mg/kg,硒含量为13 039.62 mg/kg。     

富硒乳酸菌的分离、筛选、驯化及富硒研究

从酸奶中分离纯化出保加利亚杆菌(LactobacillusBulgaria,LB)和嗜热链球菌(StreptocociusThermopiles,ST),通过耐硒筛选,确定嗜热链球菌为耐硒菌种,以浓度梯度法对其驯化,从而得到富硒菌株,并进行富硒实验。初步确定富硒条件为:采用蕃茄酵母培养基,接种量10%,培养温度39℃,pH7,第6小时时加硒,硒浓度为15μg/mL,培养11h,富硒率为72.8%。     

利用富硒菌体制备富硒酸乳

以Lyofast LH 13瑞士乳杆菌和Lyofast LB 8保加利亚乳杆菌为原料菌,研究复合菌体富硒条件。在单因素试验基础上,利用响应面得出,最优富硒条件为:Lyofast LH 13瑞士乳杆菌和Lyofast LB 8保加利亚乳杆菌接种复合比例1∶1,加硒质量浓度10μg/mL,接种量5%,复合菌体培养后25 h后加入硒溶液,培养时间60 h。在该最优条件下,复合菌体含硒量554μg/g。硒转化率为55.4%。利用富硒的复合菌种发酵剂发酵的酸乳在贮藏期内有机硒含量达27.7μg/kg,具有较高的硒含量,且在贮藏期中,各项理化指标均处于较优水平。     

富硒微生物的筛选、富硒条件优化及鉴定

从富硒土壤中筛选富硒微生物、并进行富硒条件优化和分子鉴定.选取加硒质量浓度、加硒时间和培养温度3个因子,设计富硒条件优化正交试验.用原子荧光法测定菌体中硒含量,得到其富硒的最优条件为Na2SeO3溶液质量浓度20μg/mL,加硒时间5h后,培养温度37℃.在此条件下培养菌体硒含量平均为0.7108μg/mL,富硒率为58.3％.经鉴定该富硒微生物为一株枯草芽孢杆菌.     

乳酸菌富硒优化及其活性评价

为开拓富硒食品新途径,得到具有较强富硒能力的乳酸菌。以不同浓度的亚硒酸钠作用于5种乳酸菌,通过观察菌体情况,结合菌落数筛选出1株富硒优势乳酸菌。采用单因素实验结合响应面法对富硒条件进行优化,并对富硒优化后的乳酸菌活性进行评价。筛选出植物乳杆菌为富硒优势菌,优化后最佳富硒条件为Na Cl质量浓度为2 g/100mL、亚硒酸钠质量浓度为16μg/m L、接种量为3%,富硒率为84. 26%。扫描电镜分析富硒植物乳杆菌菌体未出现变形,且经富集后表面有少量单质硒析出。在模拟胃肠道消化中富硒植物乳杆菌经消化后活菌数均在7 lg CFU/m L以上,存活率显著高于未富硒组(P <0. 05)。说明在此富硒培养条件下植物乳杆菌能发挥更好的功能性和益生性,为后续研究富硒乳酸菌发酵食品提供实验数据支撑。     

乳酸菌发酵改善脱脂富硒米糠的抗氧化活性

富硒米糠是生产富硒精米过程中的主要副产品，富含硒、膳食纤维及酚类化合物等活性物质，但其高值化利用尚未充分开发。本研究利用4种乳酸菌(嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌)对脱脂富硒米糠进行发酵处理，比较了发酵后富硒米糠理化指标、营养特性、微观结构、物化特性及抗氧化活性。结果表明，乳酸菌发酵使脱脂富硒米糠非水溶性膳食纤维/水溶性膳食纤维增加20%～45%。发酵后富硒米糠总酚、总黄酮质量分数分别增加5%～6%、16%～31%，且无机硒转化为SeCys₂的效力提高42%～49%。发酵使富硒米糠粒径变小，颗粒表面疏松多孔，水合特性、胆固醇吸附力和抗氧化活性增强。主成分分析综合得分排序为植物乳杆菌>保加利亚乳杆菌>嗜热链球菌>嗜酸乳杆菌，其中植物乳杆菌体外抗氧化活性相对最强，总酸、SeCys₂、总酚和总黄酮含量相对最高。本研究为促进富硒米糠的精深开发利用提供了一定的理论依据。