分级介孔SiO2空心微球氨基修饰及木瓜蛋白酶固定化

为了提高SiO₂载体材料的酶固定化性能,分别采用接枝法和原位法对自制的分级介孔SiO₂空心微球进行氨基修饰,并考察其木瓜蛋白酶固定化性能。与未修饰的样品相比,接枝法修饰后微球一级最可几孔径(8.68～8.70 nm)减小,二级最可几孔径(29.30～29.89 nm)无明显变化,表明氨基主要修饰在一级孔道中。原位法修饰后样品的一级最可几孔径(4.47～7.34 nm)、二级最可几孔径(14.49～19.78 nm)均有明显减小,表明一、二级孔道中均有氨基修饰。与未修饰和接枝法修饰的样品相比,原位法修饰后样品的最大木瓜蛋白酶固定量为750 mg·g^-1,相对酶活力为121.0%,均高于未修饰和接枝法修饰的样品。原位法氨基修饰在提高SiO₂载体材料的酶固定化性能方面更具优势。     

多孔框架材料固定化酶研究进展

金属有机框架材料（MOFs）和共价有机框架材料（COFs）具有多孔性、比表面积大、结构可修饰、孔道可调节、框架可设计、易功能化等优点,是固定化酶的优良载体。本文简要介绍了MOFs和COFs的结构、性能以及功能化方法,主要综述了这两种材料在固定化酶领域的最新研究进展,并对二者进行了比较。MOFs和COFs均具有一维、二维、三维结构,其中三维和少量二维结构呈现多孔性。通过预先修饰法、原位修饰法或后合成修饰法可在MOFs表面引入官能团,固定化酶的方法有包埋法、孔道扩散法和表面固定法,固定化酶的种类丰富;而COFs主要通过后合成修饰法引入官能团,以孔道扩散法或表面固定法固定化酶。最后指出,MOFs的水稳定性和酸碱稳定性较差,COFs的制备条件恶劣,MOFs和COFs固定化酶的重复利用性均较差,今后的发展方向是探索更为有效的修饰策略以提高MOFs的稳定性,开发更为安全的COFs制备方法,以及提高固定化酶的重复利用性。     

改性玉米芯固定化脂肪酶研究

以玉米芯为原料,分别用饱和氢氧化钾和2%磷酸浸泡处理,采用三羟甲基氨基甲烷作为活化剂,活化温度60℃,活化时间3.5~4 h,活化剂浓度8%。利用改性玉米芯对脂肪酶固定化。实验结果表明:活化玉米芯载体固定化脂肪酶的最佳工艺条件为:液态酶/载体比为11.5∶1,酶固定化时间10 h,固定化温度35℃,所用缓冲液p H 6.8。     

分子筛固定氨基酰化酶I的研究

以Y型分子筛为载体,分别采用吸附法、吸附-戊二醛交联法、偶联法和偶联-重氮法4种方法对氨基酰化酶I进行固定化。 研究发现偶联法获得的分子筛固定化酶的活性最高,达0.258 IUmg-1,并对分子筛固定化酶最适pH值、最适反应温度、重复使用性和米氏常数进行了测定;结果表明该载体适合氨基酰化酶I的固定,可以获得较高的酶活力,分子筛固定化酶的最适pH值、最适反应温度都有所拓宽。     

磁性SiO2纳米粒子的制备及其用于漆酶固定化

以氨基修饰的磁性SiO2纳米粒子为载体,通过交联剂戊二醛固定漆酶,对固定化条件进行了优化,比较了固定化酶与游离酶的酶学性质. 结果表明,漆酶固定化的最佳条件为戊二醛浓度8%(w),固定化时间6 h,缓冲液pH值7.0,初始酶液浓度0.15 g/L. 固定化的漆酶的最适pH为4.0,最适温度为20℃. 在60℃条件下保温4 h,固定化漆酶仍能保持酶活力60.9%,在连续10次操作后,酶活力仍能保持55%以上,其热稳定性和操作稳定性均比游离酶高.     

分子筛固定氨基酰化酶Ⅰ的研究

以Y型分子筛为载体,分别采用吸附法、吸附-戊二醛交联法、偶联法和偶联-重氮法4种方法对氨基酰化酶I进行固定化。 研究发现偶联法获得的分子筛固定化酶的活性最高,达0.258 IUmg-1,并对分子筛固定化酶最适pH值、最适反应温度、重复使用性和米氏常数进行了测定;结果表明该载体适合氨基酰化酶I的固定,可以获得较高的酶活力,分子筛固定化酶的最适pH值、最适反应温度都有所拓宽。     

Cu~(2+)修饰低固载量固定化漆酶的活性研究

由于漆酶这种生物蛋白酶有容易变性失活且不可重复使用的特性,限制了漆酶的应用和发展。因此如何提高漆酶的活性,稳定性以及重复使用性尤为重要。本文采用交叉偶联技术,将漆酶固定在具有核壳结构的磁性纳米粒子Fe3O4/SiO2上,并研究了用Cu2+修饰后的低固载量固定化漆酶的活性变化以及修饰后固定化漆酶的稳定性。实验结果显示:Cu2+修饰后的低固载量固定化漆酶的相对活性提高了54%;而且在温度不太高的情况下,修饰后的低固载量固定化漆酶的相对活性优于修饰前的固定化漆酶;修饰后的固定化漆酶降解浓度为10mg·L-1的普施安染料,重复利用13次后降解率仍然可以达到92%。     

Eudragit L-100固定β-葡萄糖苷酶的性能研究

以Eudragit L-100(E)为载体,对β-葡萄糖苷酶(CB)进行固定化修饰,考察了各种因素对固定化酶活力收率的影响。并使用红外光谱、圆二色谱及荧光光谱对固定化产物进行表征。结果表明,酶的较佳固定化条件为pH=11.0,w(E)=1%,ρ(CB)=2mg/mL,固定时间60min,沉淀时间30min,固定化温度25℃,固定化酶活力收率为83%。固定化酶溶解度的变化条件为pH5.2时呈可溶性,pH4.5时呈不溶性。固定化酶的热稳定性有了一定的提高,并且固定化酶重复利用5次后仍保留41%的初始酶活力。     

文摘

<正> 固定化真菌漆酶稳定性的改进 Andxiej Jawed M Sarkar and Jean-Marc Bollag. Appl. MicroBiol Biotechnol 29(2/3)129-135 1988 担子菌(栓菌属、杂色曲菌)中的漆酶固定在经3—氨基丙基三乙氧基甲硅烷和戊二醛活化的多孔玻璃球上。在此载体上固化100％的酶,其活性可保持90％,固定化之     

纳米载体固定化酶的研究

介绍了纳米载体固定化酶的研究,包括纳米载体材料的种类及分类、纳米载体固定化酶的主要方法及应用现状、纳米载体固定对酶活力、稳定性、特异性、结构和功能等的影响,对该技术的研究做了分析和展望.     

用于酶固定化的高分子载体材料研究进展

固定化酶是一种高效、高选择性和反应条件温和的生物催化剂。近年来,高分子材料作为酶固定化载体的研究越来越受到重视,相关的研究报道很多。对近十多年来用于固定化酶的高分子载体材料以及它们的优缺点进行了综述,并对用于酶固定化高分子载体材料的发展前景作了展望。     

Investigation on Conjugation Capacity of New Chitosan Carriers Based on Conjugated Model Toward Enzyme Delivery

In this work, for the first time, the authors report their observations on cross-linking condition, and its effects on conjugation capacity of a bioactive model. Therefore, carriers of chitosan films and microspheres were produced by using glutaraldehyde as bifunctional cross-linking agent. The following stages were carried out: preparation of cross-linked chitosan films and microspheres, conjugation of drug model on films and microspheres, investigation on the properties of the synthesized carriers and finally enzyme immobilization studies. Based on our results, degree of cross-linking and drug conjugation capacity, as two important factors, affect simultaneously the thermal, morphological, and hydrolytic behavior of the carriers in film and microsphere forms. From the experimental data, with increasing the degree of cross-linking and drug conjugation capacity, the drug release was increased up to 12% w/w of glutaraldehyde; however, on further increasing the degree of cross-linking (18% w/w), the drug released in a burst manner. Also, regarding to the results from drug and enzyme conjugates, it is possible to design diversity of the chitosan derivatives based on different degree of cross-linking as well as enzyme conjugation capacity as reliable carriers.     

介孔材料中酶固定化的影响因素

介孔材料因具有均一可调的孔径、高的比表面积和规整的孔道结构以及易于表面功能化等优点,可广泛用于生物大分子分离、酶固定化等方面。酶固定化易受介孔材料的影响,本文综述了介孔材料的孔径、表面特性、形貌及溶液的pH等因素对酶固定化的影响,并对改性材料中酶固定化的发展前景进行了预测。     

固定化酶研究进展

固定化酶有许多优点,尤其是稳定性和可重复使用性使其在许多领域得到广泛应用.固定化酶技术是一门交叉学科技术,目前已得到长足的发展.介绍了固定化酶制备的传统方法以及一些新方法,同时对酶在一些性能优良的载体上的固定进行了综述.     

酶/MOFs复合材料催化性能调控及应用

金属有机框架（MOFs）具有比表面积大、设计性强和生物相容性好等优良特性，可以作为固定化酶的理想载体，从而提高游离酶的稳定性和催化性能，许多酶/MOFs复合材料也显示出比游离酶更好的催化性能。因此，酶/MOFs复合材料已应用于生物传感、检测、催化等领域，已成为传统催化剂的环保替代品。综述了酶在MOFs上的3种固定化方法（表面固定、孔封装和原位包埋法），重点介绍了4种影响酶/MOFs复合材料催化性能的因素及调控方法，对酶/MOFs复合材料在催化方面的应用也进行了总结，并对酶固定化的未来进行了展望。     

酶定向固定化方法及应用的研究进展

传统固定化方法常会导致酶活性大幅度下降,回收率较低,而酶定向固定由于固定化后可完全暴露其活性部位,因而可以保持较高的酶活回收率。本文主要综述了定向固定化酶的两种方法,分别为共价定向固定和非共价定向固定。其中非共价定向固定化主要是抗体与抗原、亲和素/链霉亲和素和生物素以及组氨酸标签与Co2+/Ni2+之间的亲和作用;共价定向固定化主要是通过半胱氨酸残基上的巯基与载体作用。简述了其在生物传感器、分子识别、酶生物燃料电池及酶纯化方面的应用。最后指出今后的主要研究方向为探索新的定向固定化标签以降低对酶活性部位的影响,应用新的载体以提高固定化酶酶活回收率,优化固定化过程及简化固定化步骤等。     

Preparation and application of magnetic microsphere carriers

Magnetic microsphere carriers have received considerable attention, primarily because of their wide applications in the fields of biomedicine and bioengineering. In this paper, preparation methods, surface modification and application of magnetic carriers are reviewed. Emphasis will be placed on recent biological and biomedical developments and trends such as enzyme immobilization, cell isolation, protein purification, target drugs and DNA separation.     

金属有机骨架材料载体用于酶固定化的研究进展

现有的固定化酶技术存在低稳定性、低回收利用率等缺点,而金属有机骨架材料（MOFs）凭借自身独特的性质如特定的主-客体相互作用及限域效应,极大提高了酶的负载率以及限制酶分子的流失,甚至极端环境下仍能维持酶的活性,近年来成为固定化酶载体的研究热点。本文从酶-MOF复合物的合成策略出发,介绍了利用MOFs载体完成酶固定化包括表面吸附、共价结合、孔道包埋和原位合成这4种方法的优劣势,重点概述了酶-MOF复合物在微反应器构建、级联反应等应用领域的巨大潜力。研究进展表明,有巨大优势的新型MOFs载体将有力促进酶-MOF复合物作为优异的催化剂、生物传感器等在多学科领域的发展。     

生物磁性分离研究进展(Ⅰ)磁性载体制备和表面化学修饰

磁性分离在生物化学和生物医学工程中,特别是在细胞分离、免疫检测、靶向药物、固定化酶及亲和分离等诸多方面展现出重要的应用前景。本文对磁性分离载体制备工艺和表面化学修饰方法的研究进展情况进行了综述。     

Reaktive polymere Träger für die Immobilisierung von Enzymen

Reactive and hydrophilic carriers with macroreticular structure and with excellent mechanical stability were synthesized by copolymerization of 4-isothiocyanato styrene and acrylic acid with different amounts of 1,4-divinylbenzene as crosslinking agent in the presence of petroleum ether. The porosity and the swellability of the carriers was investigated. The binding ability for trypsin was determined in dependence of the composition and of the grain size of the carriers and as a function of the offered amount of the enzyme during the immobilization. For the immobilized enzyme the pH/activity-profiles and the effectiveness were determined and the effects of buffers were investigated.