玉米超氧化物歧化酶的提取与纯化工艺

为优化玉米超氧化物歧化酶(SOD)提取与纯化工艺。研究不同浸提条件及沉淀分离工艺对玉米SOD提取及纯化效果的影响。最佳诱导和浸提的原料与缓冲液配比分别为1∶1.5~1∶3、1∶2,最佳诱导和浸提时间分别为25 h~30 h、1.5 h。采用50、60℃分别处理15、10 min两次热变性除杂蛋白、丙酮沉淀SOD的纯化效果最好。DEAE-纤维素柱层析纯化后,SOD比活为1 699.7 U/mg,回收率为31%,纯化倍数为30.7。该方法高效且低毒污染少,适于工业化生产。     

从猴头菇中提取纯化SOD

研究了从猴头菇中提取并纯化SOD的方法和最佳条件.采用乙醇-氯仿法通过均匀实验获得最佳提取条件为1g猴头菇加入到0.15mol·L-1的NaHCO3 5mL中,加入乙醇-氯仿(2:1,v/v)溶液6mL,在30℃下提取3.5h测得粗酶液活性为321.26U.采用丙酮二级纯化法,纯化所得SOD的酶比活为95.58U·mg-1.     

大蒜细胞溶质中超氧化物歧化酶的分离纯化

采用热变性、聚乙二醇 (PEG) 60 0 0沉淀作用和DEAE 纤维素柱层析 3种方法对大蒜细胞溶质中的超氧化物歧化酶进行分离纯化。经过 3步分离纯化 ,从 5 0 0 g大蒜中得到15 6mg产品 ,比活为 314 5 5U/mg。酶的类型是Cu·Zn SOD ,在紫外区的最大吸收峰是 2 5 8nm。     

SOD乳酸菌高产菌株筛选鉴定及SOD分离纯化

筛选出一株产SOD乳酸菌,并对SOD进行分离纯化。采用平板富集、革兰氏染色等方法进行初筛。再通过邻苯三酚自氧化法检测SOD酶活进行复筛。并经形态学、生理生化试验、16Sr DNA基因序列分析进行菌种鉴定。通过硫酸铵沉淀、超滤、Sephadex-G100、DEAE-Sepharose FF等方法进行纯化。筛选得到一株产SOD相对较高菌株SD006,经鉴定为Lactobacillus plantarum,纯化后酶活达37 959.2 U/g。细菌SD006是一株产SOD的植物乳酸菌,乳酸菌是一种人体益生菌,乳酸菌SOD可作为食用SOD添加到食品中,具有潜在开发价值和广阔应用前景。     

云芝菌丝体超氧化物歧化酶的分离纯化及性质研究

从云芝菌丝体中分离纯化超氧化物歧化酶(SOD),并对其性质进行了研究。结果表明,SOD粗酶液经膜过滤、硫酸铵分级盐析、SephadexG-75凝胶柱层析分离后,SOD纯化了12.6倍,总回收率为50.6%,获得SOD酶比活为4.61U/mg蛋白。提纯SOD在257nm处有特征吸收峰,其活性受氯仿-乙醇影响不明显,但受到H2O2明显抑制,酶活在50℃以下较稳定,超过50℃以上,活性随温度升高而降低。说明云芝菌丝体SOD以Cu,Zn离子为辅基,并具有较好的热稳定性。     

黑脉羊肚菌SOD的纯化及特性研究

采用热击法和硫酸铵分级沉淀法对所提取的黑脉羊肚菌SOD进行纯化,对纯化后酶的热稳定性、p H稳定性、敏感性及同工酶类型等进行研究。结果表明:热击法最佳热击温度为60℃,最佳热击时间为15 min;硫酸铵分级沉淀法最佳盐溶条件是采用40%饱和度硫酸铵,最佳盐析条件是采用85%饱和度硫酸铵;所纯化的SOD表现出良好的热稳定性和p H稳定性,在60℃下保存60 min,其酶活保留超过50%,p H适应范围为6~9;Mn2+对羊肚菌SOD有明显的激活作用,Fe2+对其有明显的抑制作用;该SOD能耐受过氧化氢,但对氯仿-乙醇和SDS较为敏感,黑脉羊肚菌SOD属于Mn-SOD类型。     

玉米超氧化物歧化酶(SOD)的研究进展

综述了玉米超氧化物歧化酶(SOD)的提取方法,简述了玉米SOD的沉淀分离纯化及层析分离纯化方法,并介绍了玉米SOD酶活测定、SOD类型的鉴定、SOD等电点的测定、SOD的N-末端氨基酸测定、SOD分子量的测定等。     

毕赤酵母表达重组人源Cu/ZnSOD的分离纯化与稳定性表征

通过乙醇沉降、强阳离子交换、强阴离子交换等纯化方法对毕赤酵母表达的重组人源Cu/Zn SOD进行分离,并测定该纯化蛋白的热稳定性和pH稳定性.试验结果表明通过这些方法获得比活为12 881 U/mg的目标蛋白,该蛋白达到反相色谱纯.纯化后的SOD蛋白无论在低于75℃或在pH 3～10条件下放置2h,均能保持85％以上的活力.采用毕赤酵母体系生产SOD,产量大,纯化成本低,蛋白稳定性高,有利于重组人源Cu/Zn SOD的大规模生产及应用.     

甘薯叶中SOD的分离纯化研究

通过比较几种提取的方法对纯化的倍数和酶活收率的影响,得到了甘薯叶上清液的较优提取纯化方法,即采用热变性,有机物丙酮沉淀及凝胶过滤纯化相结合的方法。热变性最佳时间为15min、温度为60℃,加入丙酮的量为其粗酶液的1.4倍。经凝胶过滤纯化,最终SOD酶活收率为61.5%,蛋白质去除率为97.9%,比活力达到1126.87U/mg,纯化倍数为30.32。     

螺旋藻抗氧化肽的制备及其体外活性研究

为了制备高活性的螺旋藻抗氧化肽,通过优化木瓜蛋白酶酶解条件,并结合超滤、凝胶过滤层析等方法,从钝顶螺旋藻酶解液中分离、纯化抗氧化肽,并对其体外抗氧化活性进行研究。结果表明,木瓜蛋白酶酶解钝顶螺旋藻的最适工艺条件为:酶底比1.6%、温度60℃、水解时间9 h、pH7.0。相对分子质量范围为0到3 000的螺旋藻酶解液的抗氧化活性最高。该部分酶解液通过凝胶层析纯化获得更高活性的螺旋藻抗氧化肽,其DPPH·清除率、OH·清除率和总抗氧化能力分别相当于质量浓度为(1.01±0.07)×10-2、(4.77±0.28)×10-1、(3.79±0.81)×10-2mg/mL的抗坏血酸溶液,从而为螺旋藻抗氧化肽用于抗氧化功能食品和生物制药方面奠定基础。     

超声协同等电点沉淀法提取螺旋藻藻胆蛋白工艺的优化

以螺旋藻粉为原料,通过正交试验,对超声波细胞破碎及等电点沉淀提取藻胆蛋白进行研究,并优化其工艺条件。结果表明,在藻液质量分数5%、630W(额定功率为900W)条件下超声20min,效果最佳;而采用冰醋酸作为等电点沉淀介质,在pH4.0 的条件下,从提取液中低温沉淀藻蛋白,其操作较为简便。由于冰醋酸溶液易挥发分离,简化了生产工艺。最后通过冷冻干燥,得到粗蛋白粉末。利用本法优化工艺后,提取液中藻蓝蛋白的含量高达4.36%;而经沉淀干燥得到的粗蛋白粉末得率为52.5%,其中藻蓝蛋白含量为7.7%、别藻蓝蛋白含量为7.9%、藻红蛋白含量为0.8%。     

富硒螺旋藻对急性高脂血症小鼠血脂水平的影响

通过在Zarrouk培养基中添加亚硒酸钠的方法获得了硒含量达758.6 μg/g的富硒螺旋藻。采用量子共振技术检测富硒螺旋藻的主要氨基酸、维生素及抗癌能力、免疫功能、抗高脂血症相关功能性指标的量价值,发现富硒螺旋藻以上各项指标的量价值均高于普通螺旋藻。同时考察富硒螺旋藻对急性高脂血症小鼠血脂水平的影响,给予小鼠连续2 周灌胃富硒螺旋藻,通过尾静脉单次注射400 mg/kg的Triton WR-1339建立急性高脂血症小鼠模型,18 h后检测小鼠血清中血脂水平。结果表明：与Triton WR-1339对照组相比较,富硒螺旋藻高剂量组小鼠的血清中甘油三酯（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoproteincholesterol,LDL-C）含量明显降低（P＜0.01）,高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）含量明显升高（P＜0.01）。与普通螺旋藻高剂量组相比,富硒螺旋藻高剂量组小鼠的血清中TG、LDL-C含量显著降低（P＜0.05）,HDL-C含量显著上升（P＜0.05）。富硒螺旋藻对急性高脂血症有良好的保健功效。     

培养条件对糖蜜发酵废水中螺旋藻的生长和废水处理效果的影响

探讨糖厂酒精车间发酵废液（ＣＯＤ〉４０００ｍｇ／ｌ）的一种生物处理方法。经石灰絮凝，Ｚ氏培养基系列稀释的４００ｍｌ糖蜜发酵酒精废水，在一定的光强下通气培养螺旋藻，约两周后可获得最高生物量达１ｇ干重／ｌ，叶绿素达３．５６ｍｇ／ｌ，同时糖分去除率达８１％，ＣＯＤ去除率达７４．３％。实验表明，螺旋藻在５０％稀释度废水中的生理活性与１００％Ｚ氏培养基中的十分接近。     

一株螺旋藻溶藻菌的分离、鉴定及溶藻特性初步研究

从黄化的螺旋藻体中分离出一株溶藻菌ES1,经形态、生理生化、16S rDNA序列分析鉴定为盐单胞菌属(Halomonas sp.)。该菌对螺旋藻有较好的溶解效果,能在24h使螺旋藻絮凝成团、黄化死亡,加入15%体积分数的菌液2d后螺旋藻去除率就可达到70.71%。实验表明,经0.22μm的微孔滤膜过滤,高温、低温灭菌处理的滤液,仍能强烈抑制螺旋藻生长,说明起溶藻作用的是ES1菌株的代谢产物,且该代谢产物在高温121℃和低温-80℃下稳定。ES1菌株生长速度快,对盐、碱有较强的耐受性,并能通过自身代谢产物调节pH至适合其生长的9.2左右,该菌的存在会使螺旋藻在短时间内大量死亡,对螺旋藻的大规模工业化养殖危害极大。     

钝顶螺旋藻藻蓝蛋白提取和纯化工艺研究进展

藻蓝蛋白不仅是藻类的主要捕光色素蛋白，而且具有重要的开发利用价值。钝顶螺旋藻是藻蓝蛋白提取纯化的主要来源。简要介绍了螺旋藻和藻蓝蛋白的主要应用前景，综述了近些年从钝顶螺旋藻中提取和纯化藻蓝蛋白工艺的进展和现状，列举并比较了一些主要的提取和纯化方法。     

螺旋藻富碘培养效果及现状

螺旋藻生长速度快,培养方便,具有较强的富集金属离子的能力,可将无机碘转化为人体易吸收的有机碘,从而获得富含有机碘的螺旋藻,提高螺旋藻的品质和开发高附加值产品.该文从螺旋藻的富碘机理入手,简要介绍了螺旋藻的富碘效果及研究现状.     

pH值对钝顶螺旋藻生长的影响

pH值不但影响培养液中营养基质的离解程度，而且对螺旋藻的生长、代谢乃至细胞形态都造成显著的影响。本文得出：钝顶螺旋藻生长的pH范围为8.5～10．0，最适生长pH为9．0～9．6，pH值超过10．5时，对螺旋藻的生长产生抑制作用。混合营养培养时，通过对螺旋藻生长过程中pH值变化的研究，得出：与无机碳源相比，有机碳源作为营养源更易被螺旋藻利用并合成细胞物质。     

钝顶螺旋藻提取物对细菌群体感应的抑制作用

以mini-Tn5突变株Chromobacterium violaceum CV026为报告菌检测系统,研究钝顶螺旋藻甲醇提取物的群体感应抑制活性及对大菱鲆腐败菌Shewanella putrefacens生物膜形成的影响。结果表明:螺旋藻75%甲醇提取物(0.125～1.000g/100mL)不仅能显著降低Chromobacterium violaceum CV026细菌紫色菌素的产生,而且能显著抑制外源信号分子N-已酰化高丝氨酸内酯(10μmol/L C6-HSL)诱导的报告菌紫色菌素的增加。当螺旋藻提取物添加质量浓度为1.000g/100mL时,对报告菌紫色菌素的抑制率达87.67%,对Shewanella putrefacens生物膜的形成抑制率达77.05%,与对照差异均达显著水平(P<0.05)。抑菌实验表明,在给定的质量浓度范围内,螺旋藻提取物对报告菌的生长无显著影响;螺旋藻提取物抑制紫色色素的产生与生物膜的形成不是通过抑制细菌的生长来实现的,而与抑制信号分子诱导的群体感应现象有关;螺旋藻提取物具有较强的细菌群体感应抑制活性,可作为细菌群体感应抑制剂用于新鲜食品及其制品的贮藏与保鲜。     

螺旋藻的光生物反应器高密度培养

利用自制的光生物反应器对螺旋藻的生长进行了研究。结果表明 :光照强度和液体循环速度对藻体细胞的生长有极显著的影响 ,培养温度对生长有显著的影响 ;通过流加和碳源的供给形式的改变等培养条件和培养工艺的改进使藻体的生长速率、生物量产率和生物量产量分别达到了 0 .4 1 1 /d、3 2 .2 5g/m2 · d和 3 .93 g/L的水平 ,最大生长速率达到了0 .566/d。     

环境因素对螺旋藻富集硒和锌及生长的影响

研究了光照强度、ｐＨ、锌盐等３种环境因素对富锌和硒的钝顶螺旋藻生长和富集量的影响,表明光照强度对藻生长和富集量的影响具有同步增长的态势,而锌盐、ｐＨ对藻生长和富集量的影响却出现不同步性。根据实验结果,调整培养条件,得到新的培养条件,使藻的生长速度加快,对硒富集量提高２０．７％,锌富集量提高２５．２％。