~(35)S-α-dATP用于膜上DNA与DNA杂交方法的研究

随着分子生物学的发展,用cDNA探针检测核酸特异序列的分子杂交技术的应用日益广泛,~(32)P、~3H及~(125)I的标记化合物被用于标记DNA和分子杂交已有多年。将~(35)S取代与磷酸结合的氧原子而成的~(35)S标记核苷酸类似物是近年开发的新技术。由于~(35)S发射的β射线能量适中(0.167MeV),防护比~(32)P容易,探测比~3H方便,故用作常规放射自显影比~(32)P、~3H都优越;     

高比活度脱氧腺苷5′-[α-~(35)S]硫代三磷酸的研究制备

~(35)S标记的脱氧腺苷硫代三磷酸化合物是开展分子生物学和基因工程研究的必不可少的。重要支撑物之一。 关于高比活dATP_α~(35)及前体~(35)S、dAMP~(35)S的制备流程未见报道,而在示踪量制备流程方面的报道仅限于从堆照KCl靶子物的湿法还原-氧化法得到[~(35)S]——元素硫,再制得~(35)SPCl_3,然后合成dAMP~(35)S及dATP_α~(35)S。在高比活及强辐射场下操作时可发现:①若不加载体的高强度~(35)S处在水相、有机相及有氧的条件下,它的化学态难以控制,总是以~(35)SO_4形式存在,故得不     

麦饭石对溶液中碘、钙、dCTP的吸附行为的研究

一、前言随着分子生物学的发展,核酸、蛋白质等生物大分子的研究工作十分活跃。放射性同位素标记。示踪是分子生物学研究中不可缺少的方法。如用[α-~(32)P」dCTP通过缺口转移标记DNA,研究调钙蛋白时用~(45)Ca示踪,研究蛋白质、多肽、激素时用~(125)I标记。这样在     

~3H和~(35)S双标记环硫铂(SHP)

铂络合化合物是近几年出现的重要抗癌药物。其中有环己二胺二氯铂(环氯铂,DDP)和环己二胺硫酸铂(环硫铂,SHP)。为了药理研究的需要,对以上铂络合物进行了氚标记。为了测定药物在动物体内是否发生降解,又进行了~3H和~(35)S双标记环硫铂的工作。     

高效液体色谱法分析~(32)P-dATP

一、前言~(32)P-dATP(三磷酸脱氧腺苷)在生物化学中的应用日益增多,在遗传工程和酶学研究中起着重要作用。~(32)P-dATP的标记分两部分进行,首先是由H_3~(32)PO_4和dA(脱氧腺苷)缩合反应生成~(32)P-dAMP(一磷酸脱氧腺苷),然后由~(32)P-dAMP在酶的作用下生成~(32)P-dATP。对于核苷和核酸的分析有较多的报道,但对于放射性磷标记脱氧腺苷这一系列的分     

^35S标记L型胱氨酸的生物合成

一、前言~(35)S标记L型胱氨酸是研究蛋白质代谢的重要示踪剂之一。制取~(35)S记标记L型胱氨酸产品,以生物材料酵母微生物为原料,此酵母在含有无载体Na_2~(35)SO_4的培养基内培养,在通气的情况下,孵育48h。     

含^32P硫片灼烧后^32P的残留率

利用硫片的~(32)S(n,p)~(32)P核反应测量快中子通量是常用的简便方法。照射后的硫片通常要灼烧,以除去硫本身和副核反应产生的其他核素,~(32)P绝大部分留在残渣中。所以,用硫片测量快中子通量的准确性在很大程度上取决于灼烧后~(32)P残留率的准确性。Rein-hardt和Davis将硫片灼烧后残渣的~(32)P比放射性计数除以由外推到硫片重量为零时的~(32)P比放射性计数,得到灼烧后~(32)P残留率为92%。他们又用Nal闪烁计数计分别测量滴加了     

5′-脱氧腺苷[α-硫代]-三磷酸盐的~(31)P核磁共振测定

利用~(31)P核磁共振技术,对脱氧腺苷-[α-硫代]三磷酸盐的构型进行了研究。在~(31)P-NMR实验中观察到在δ43.1ppm处,有两个三重峰,根据其化学位移和偶合裂分提供的信息,确证了这化合物是5′-脱氧腺苷-[α-硫代]三磷酸盐。同时~(31)P-NMR图谱表明,此化合物是以单一的SP或RP异构体存在。     

掺入遗传物质的氚——NCRP 63号报告介绍

NCRP(美国辐射防护和测量委员会)第63号报告的全名是《掺入遗传物质的氚及其他放射性核素标记的有机化合物》,1979年出版。全书有正文40页,论述~3H,~(14)C~(32)P,~(35)S,~(131)I,~(125)l等放射性核素掺入核酸的生物效应以及剂量估算。另有80页是附篇和参考文献,内容有:制订辐射防护标准的原则,氚的环境污染及体内代谢,DNA、RNA及其先质的代谢和干细胞的动力学,致癌和遗传效应等。掺入遗传物质的氚是本书的主题,现就这一问题作一粗浅的述评。     

氚标记脱氧三(单)磷酸腺苷的制备

脱氧核糖核酸是生物遗传信息的携带者,并通过核糖核酸控制蛋白质的生物合成,因而氚标记其基本组成的核苷酸在研究生物遗传信息与蛋白质的合成工作中是很重要的。本工作是根据上海生物化学研究所及上海实验生物研究所的冷实验条件进行的,以8-溴-脱氧三(单)磷酸腺苷为前体,用钯-硫酸钡为催化剂进行卤氚催化取代而生成氚标记化合物,其比度为17—20居里/毫克分子,放化纯度为90—92%。反应式如下:     

镱-169通过DTPA标记γ-球蛋白和单克隆抗体的化学研究

本文研究了~(169)Yb标记羊抗人IgG的化学条件,考查了影响标记率的各种因素。~(169)Yb不能直接稳定地与IgG结合。我们采用了环状酸酐法将双功能螯合剂DTPA连接到蛋白质分子上,再与~(169)Yb结合,制成了稳定的标记物~(169)Yb-DTPA-IgG。影响标记率的主要因素是DTPA环状酸酐与IgG的摩尔比(C/P)。摩尔比越高,连接到蛋白质分子上DTPA越多,络合金属越多。     

~(89)Zr标记放射性药物应用进展

正电子发射计算机断层显像(PET)具有灵敏度高、可定量等优点,是当前发展迅速的分子显像技术。~(89)Zr是一种新型正电子显像核素,半衰期及能量适中,适于大分子生物活性物质的标记及临床应用。本文对~(89)Zr的生产、标记方法以及~(89)Zr标记化合物的研究进展进行综述。     

化学和酶促兼用的方法研制5''''-[α-~(32)P]脱氧三磷酸腺苷

本文采用化学和酶促合成兼用的方法,使用无载体~(32)P-正磷酸(或盐)标记5’-[α-~(32)P]脱氧三磷酸腺苷。产物的比活度达到20—160 Ci/m M,实际收率21—40%,放化纯度94—97%,化学合成中生成的~(32)P-脱氧单磷酸腺苷占总放射性量的69—86.7%。反应所需的二种激酶采用高速离心的方法除去抑制酶反应的硫酸铵。本工作还对影响化学合成的因素进行了一些研究。     

双标记药物放射性活度比值测定方法的探讨

环已二胶硫酸铂(SHP)系抗肿瘤新药。本文介绍用氚和~(35)S两种放射性核素标记SHP。然后给正常大鼠及H_(22)瘤鼠腹腔注射,在不同时间测定大鼠血液中~(35)S/~3H值。结果在给药1.5h后,其比值开始迅速下降(9.4下降到0.25)。[~3H,~(35)S]SHP的放射性曲线与腹腔注射~(35)S-H_2SO_4大鼠血液中的~(35)S放射性曲线相似,提示[~3H,~(35)S]SHP在     

~(211)At、~(131)I标记蛋白质的合成

~(211)At和~(131)I通过氯胺T和过氧化氢直接氧化标记牛血清白蛋白和胰蛋白酶,采用凝胶色谱Sephadex G-75柱洗脱分离蛋白质,γ计数测量和相对比较法计算标记产额。一般认为~(211)At标记蛋白质时使用H_2O_2较好,~(131)I标记蛋白质时则适合使用氯胺T,且蛋白质的结构强烈影响标记结果。在八个不同的实验中,过氧化氢氧化标记的~(211)At-牛血清白蛋白产率为96.9％,氯胺T氧化标记的~(131)I-牛血清白蛋白产率为66.1％。     

~(11)C标记缬氨酸、亮氨酸和环戊氨基酸的快速合成

近年来,在核医学领域中短寿命放射性同位素~(11)C(半衰期20.4分钟)引起了人们的重视。碳是人体内重要的生理元素之一,也是构成药物分子所必需的元素,所以用~(11)C标记化合物,可不改变其分子结构,又能直接利用其放出的正电子或正电子湮灭产生的二个光子(0.511MeV)来检测。若能与γ闪烁照相机或正电子断层计算机扫描仪组合使用,则在生物医学研究和临床疾病诊断中可以显示出~(11)C所具有的独特的优点。 1976年美国橡树岭实验室R.L.Hayes等人报道了~(11)C标记的某些氨基酸能浓集于肿瘤和胰腺,有可能作为定位剂进行阳性扫描,并快速合成了~(11)C-环戊氨基酸。1978年又发表了其他~(11)C标记的氨基酸的合     

美国放射化学试剂销售近况

【美国《化学工程新闻》1981年6月8日号第10页报道】美国放射化学试剂1981—1985年期间平均年增长率将为7.4％。这里所说的放射化学试剂包括氚、碳-14、磷-32和硫-35等的标记化合物,但不包括氘和碳-13等的标记化合物,也不包括临床诊     

双标记样品图算测试法

~(140)Ba,~(131)I与~3H相互配合成双标记探针在遗传学、单克隆技术和分子生物学研究中应用较多。因为它们可以动态观察多因素、多指标变化的影响。 我们用最小二乘法处理数据后,经公式推导设计出~(140)Ba,~(131)I与~3H等长半衰期化合物的双标记算图,可以快速、简便地解答问题。算图使用很简单,只是把数学公式图形化。在原理上使用了~(140)Ba,~(131)I衰变快而~3H衰变慢的原理,从它们的差别中分出各自的含量。     

14MeV中子引起~(133)Cs(n,α)反应所形成的~(130)I的氧化价态分布

我们用14MeV中子引起~(133)Cs(n,α)反应所形成的~(130)I热原子的氧化价态分布来研究核反应直接形成的热原子碘的状态。首先用~(131)I合成~(131)I~-,~(131)I~0,~(131)IO_3~-等标记化合物,详细测定了各价态之间的同位素交换。结果表明除了I_2~0-I-之间外,各价态之间在20±50℃、30-     

Wilzbach气曝法氚标记三尖杉酯碱的定位效应研究

本文首次采用CNDO/2法研究了Wilzbach(气曝)法氚化三尖杉酯碱的定位效应,计算了三尖杉酯碱的各个部位的亲电超离位度S_r~(E),亲核超离位度Sr~(N)和自由基超离位度S_r~(R)。理论计算能很好地与实验结果符合。还证实了Wilzbach自辐照-诱导标记是一种亲电反应,参加反应的质点(粒子)是HeT+,T_2~+,T+,T_3~+,而不是氚原子和氚分子.Wilzbach高频气曝氚化法是从外部输入能量并活化。解离氚分子成原子,自由基等,参加反应的质点(粒子)是电子,氚原子。二者的反应机理不同,导致~3H标记位置的不同。该法可作为预测氚标记中草药定位效应的一种参考办法。