骨髓活检组织超薄切片及细胞化学技术的研究

本文对骨髓异常增生综合症患者的骨髓活检组织,作了环氧树酯包埋前染色的电镜观察,现将此技术方法的初步体会报导如下:取材用骨髓活检针钻取髂后上嵴骨髓组织(5mm×1mm)一块,迅速投入1％戊二醛内(用0.1M二甲胂酸缓冲液pH7.2～7.4配制)。固定将活检组织切成1mm×1mm小块,再放入1.0％戊二醛内固定15分钟,同上的缓冲液清洗3次,每次10分钟。标本分作2份,1份用2.5％的戊二醛继续固定2小时,同上的缓冲液清洗3次后,再用1％O_sO_4(0.2M二甲胂酸缓冲液配制)固定1小时,留作常规超微结构标本制备用。另一份放入0.1M二甲胂酸缓冲液内留作     

果蝇卵和幼虫的冷冻扫描电子显微镜观察

生物界种类繁多。对质地柔软、含水量较高的样品,若采用常规戊二醛固定、乙醇(或丙酮)系列脱水、崁稀或临界点干燥及离子镀膜等处理后。生物组织常发生皱拆变形而失真,及致造成细致结构难以辨认。本文就果蝇(Drosophila melanogaster)的卵和幼虫为材料。在实验方法上作某些探讨。冷冻制样方法:将样品在生理盐水中清洗数次,用小毛笔把样品安置在样品托上。连续样品运载器迅速插入     

淡水藻类扫描电镜样品制备法

游离单细胞藻类形态结构的扫描电镜观察存在着样品支持膜的制备、细胞均匀分布,牢固贴附、防止细胞变形等问题。国内外对游离血细胞、各种培养细胞的扫描电镜样品制备技术曾有报导,然而,单细胞藻类这方面的报导极少,本文根据我们的工作需要,反复试验,建立了单细胞藻类扫描电镜样品制备方法,获得了满意的结果。四眼鼓藻、钝角星鼓藻、短角美壁藻等十种藻由中国科学院水生生物研究所五室藻种库提供。培养液中的藻低速离心,2.5％戊二醛固定2小时,1％锇酸后固定1小时,分别制成藻的细胞悬液备     

纤毛细胞膜特化结构的冷冻蚀刻研究

六十年代以来,冷冻蚀刻技术的应用和发展,能较满意地揭示生物膜上某些特化区域的蛋白分子排列方式和三维图象。本文应用此技术,研究纤毛细胞表面特化结构。家兔整体麻醉后,开胸取新鲜气管上皮层数条,用0.IM磷酸缓冲液配制的2％戊二醛(PH7.2)在4C固定一小时,洗涤24小时后浸入30％甘油生理盐水,待组织条沉没数分钟后,取出样品,置于样品台上,用液氮冷冻后,迅速放入FD—3A 冷冻蚀刻仪中,在真空优于2×~(-6)Torr下做断裂,蚀刻和喷涂白金及碳,用10％次亚氯酸钠溶化喷涂样品,洗净复型膜,捞取在载网上,待干后用TEM—100CXⅡ电镜观察。     

干冰微粒喷射法清洗ITO玻璃的研究

对干冰微粒喷射法和低频超声波法清洗ITO玻璃的效果进行了比较研究.用接触角测量仪、SEM和XPS测量了清洗前后ITO玻璃表面的浸润性、污染颗粒数量和元素成分及含量等洁净度指标.研究表明,与超声波法清洗相比,干冰微粒喷射法清洗可以使ITO玻璃表面的接触角更小,有机碳含量减少40.5%,污染颗粒数量也显著减少,是一种清洗ITO玻璃的有效方法.     

一种国产戊二醛精制方法

戊二醛(OHC(cH_2)_3CHO)作为固定剂已被广泛地应用到电镜生物样品制备技术中,由于市售的国产戊二醛中含有大量的杂质(图1.d),并极易氧化影响固定效果,众所周知的处理方法很多,诸如活性碳、氯化钡过滤法,经紫外光谱测定该方法得到的戊二醛虽能对颜色、pH值有所改善,对其中所含杂质(如对苯二酚、聚合物等)则不能排除;直接用蒸馏法虽能得到纯品,但在减压蒸馏过程中极易聚合,经气相色谱分析聚合物中含有较多的戊二醛(图1.b)。因此收率很低,在20—30％左右。     

适用于扫描电镜的拟南芥蜡质样品制备方法

扫描电镜是观察植物表皮蜡质结构的极佳方法。由于蜡质成分不同,不同的植物有不同的样品干燥方法。本文以拟南芥叶片为实验材料,比较FAA固定和戊二醛－锇酸双固定,CO2临界点干燥和冷冻干燥,以及乙醇、乙酸异戊酯、丙酮和叔丁醇等不同的固定方法、不同的干燥方法和不同的有机溶剂对蜡质的溶解作用后,认为更适于拟南芥表皮蜡质观察的样品制备方法是：戊二醛－锇酸双固定,叔丁醇与乙醇梯度脱水,叔丁醇冷冻干燥。     

水稻胚囊内组成细胞的微细构造

开花植物的大配子体,或称为胚囊,经常被用来研究胚胎发育早期的过程。典型的开花植物的大配子体成熟时包含一个卵细胞、一个具有两个极核的中央细胞、两个助细胞以及三个反足细胞,其中只有卵细胞核及两极核会分别与精核融合成胚或胚乳。本文观察水稻授粉后4小时的大配子体中各组成细胞的微细构造。为了观察早期与授精有关的种种现象,选择在合宜的时机固定材料很重要。故在水稻开花后24小时内每隔2小时取样,以2.5％戊二醛(pH7。2)固定。其馀遵循电显镜样品备制的一般步骤,并以spurr＇包埋剂包埋。本研究主要的困难在於切片,由于样品体积很小且要顾及其方位,     

如何对电路板进行正确的超声波清洗

超声波清洗技术在国外是一种很成熟的清洗技术,广泛应用于机械、电子等领域.焊接后电路板的清洗是其中很重要的一个应用.国内在这方面的应用也较为普遍,但是,不能不说,很多厂家并没有搞清超声波清洗的基本原理,因此,在应用超声波清洗技术时存在十分不规范的一面,介绍了超声波清洗技术的基本原理,并对正确的超声波工艺提出了自己的建议.     

犬心脏心肌间质网络的扫描电镜观察

心肌的间质网络结构对心脏的收缩和舒张起着很重要的作用。近年来引起许多学者的关注 ,目前有关心肌间质网络的电镜报导甚少 ,本实验对犬心脏心肌间质网络关系的研究提供超微形态学基础。材料与方法取成年犬的左心室的心肌组织 ,分别横切与纵切成组织块 ,戊二醛 4℃固定 2 4h,置于 2 N的Na OH溶液中 ,室温浸泡 7日 (目的是腐蚀去掉心肌细胞 ,而只保留心肌间质网络 ) ,双蒸水清洗3日 (每日更新 3次 ) ,单宁酸浸泡 1 h,双蒸水清洗 1 h,1 %锇酸后固定 1 h,酒精梯度脱水 ,醋酸异戊脂中间液置换 ,CO2 临界点干燥。未经腐蚀的样品常规扫描电镜…     

放线菌扫描电镜样品制备方法比较研究

目的:比较和筛选放线菌扫描电镜样品制备方法。方法:通过培养获得插片、菌饼和发酵液3种待处理样品,根据单因素试验设计原则采用双固定、单固定、磷酸缓冲液清洗、生理盐水清洗、蒸馏水清洗、丙酮脱水、乙醇脱水和直接表面镀金等8种方法对样品进行处理。结果:取样时间直接影响观察样品形态的丰富度;插片样品扫描获得的结果较为理想;不同的固定、清洗和脱水等处理过程也对样品的细节产生了影响。结论:插片样品直接干燥喷金扫描观察是一种简便、快速的方法,对于常规的放线菌观察与鉴定较为实用,也为其它微生物扫描电镜观察提供了参考。     

一种简易快速的扫描电镜样品干燥的方法

在扫描电镜观察大多数制样采用临界点干燥法。这里向大家介绍的是用HMDS法,这一新的方法的全过程,包括组织先在3.1％戊二醛溶液中固定,再用1％锇酸后固定,并进行系列乙醇脱水,HMDS干燥,再离子测射,最后通过扫描电镜观察。我们经过对小鼠的脏器,兔的主动脉,培养细胞以及立克次氏体等样品的制备,并通过扫描电镜的观察,发现不仅在样品的表面形态,而且在微细结构方面均与临界点干燥法无明显差别。常规干燥方法,采用临界点干燥法,它需要临界点干燥仪,还需要高纯度二氧化碳。在夏季特别是室温超过30℃时,液态CO_2难于装满干燥仪的样品室。因此,在样品室加热时,CO_2液面要穿过样品,     

电镜包埋块快速制备中污染物的实验观察

临床诊断电镜工作的开展 ,必然要求改变以往周期长的制样过程 ,而包埋块制备过程所花时间最多 ,人们用微波聚合、高温聚合等条件以缩短聚合时间 ,并在实际工作中得以应用 [1]。但常为了快速 ,而在样品固定到包埋前的处理中忽视了某些细节 ,造成包埋块制备中的人为污染 ,影响电镜观察 ,这些污染无法通过返工来弥补。本文就此污染物产生进行模拟实验与探讨。材料与方法正常小鼠乙醚麻醉后 ,快速取肾组织入 3%戊二醛 - 1 .5 %多聚甲醛的前固定液中 ,后固定液用 1 %锇酸 - 1 .5 %亚铁氰化钾 ( 1∶ 1 ) ,70 %酒精饱和铀液块染过夜 ,系列酒精、丙…     

心肌纤维的ODO高分辨扫描电镜观察

本文采用ODO高分辨扫描样品制备技术,观察了小白鼠、大白鼠和犬心肌纤维表面及断面的微细结构,并讨论了高分辨扫描电镜观察法的技术特点,分析了心肌纤维的超微结构及其与功能之间的关系。技术方法按常规取材、将样品修成梭形,放入1％锇酸中固定1～2小时;继以1/15M磷酸缓冲液清洗,用25％、50％的二甲基亚砜分别浸泡20分钟,并在TF-2型冷冻割断台上将样品割断;尔后,用1％锇酸对样品作后固定,0.1％锇酸软化细胞基质,再以1～2％单宁酸对样品作导电处理,用1％锇酸对样品进行终末固定;最后,对其进行脱水、干燥、镀膜处理后,用扫描电镜观察。     

含水生物样品的环境扫描电镜观察

目前，在常规的扫描电镜中观察含水的生物样品有两种方法：（１）用戊二醛和锇酸固定细胞的骨架，再用乙醇脱水，二氧化碳临界点干燥后喷金，然后放入扫描电镜观察。（２）样品深度冷冻后使用冷冻样品台放入扫描电镜观察。以上两种制备方法都会使样品失去原来的自然面貌。...     

人体耳蜗扫描电镜观察

耳蜗的扫描电镜观察对于研究工业噪声和军事噪声的危害、老年性和遗传性耳聋,以及某些抗生素的毒理作用都具有重要意义,但是由于人体耳蜗深藏于坚硬的颞骨岩部之中,难以及时进行固定,常常因为自溶使结构受到损坏。为了探求合理保存人体耳蜗表面结构的方法,以便描述我国人体耳蜗的形态特点,我们从两具新鲜死体在死后一小时内取下颞骨标本保存在2.5％戊二醛溶液中,在死后四小时内打开卵园窗和园窗并以成二醛经窗反复灌注数次,继续放在戊二醛中固定24小时,再从0.2M二甲砷酸盐缓冲液经窗冲洗数次,投入10％EDTA二钠溶液中脱钙约7—10天,待其骨质表面硬度降低即转入磷酸缓冲液中,并以解剖显微镜观察以牙科钻头减薄骨质,逐渐暴     

扫描电镜生物标本制备的超快微波处理技术

由于生物标本含有较多的水分,而扫描电镜内部是高真空的,它要求放入的标本必须干燥,但在样品空气干燥时由于液体表面张力的作用样品发生皱缩、龟裂,样品表面发生塌陷,使细胞外形发生明显改变、与生活形态的形状相差太多。为此,须对扫描电镜观察的生物样品进行固定、脱水,最后用临界点干燥器进行干燥,临界点干燥是传统的常规干燥方法。国外曾有人使用连续的微波照射固定扫描电镜样品,我们根据自己的实验经验,改进了微波固定样品的方法,使用微波照射干燥扫描电镜洋品取得很好的效果。胃和小肠,经缓冲液洗后,放入磷酸缓冲的2.5％戊二醛(pH7.3)中。实验共分三组:第1组为对照组;第2     

电路板清洗后白渣的形成原因及解决办法

印刷电路板组装清洗后,常常留有许多白色残渣,这些残渣由许多的化学物反应而成.松香焊剂和水溶性焊剂、电路板上的残留环氧树脂和其它树脂、元器件的材料和其它一些污染物都对这些复杂的化学反应有所贡献.讨论了许多印制板上残留物的形成原因和解决这些问题的方法,清洗方法着重介绍了超声波清洗技术.     

植物材料干燥法比较及其在分类中的意义

应用扫描电镜观察植物材料的微形态特征是植物分类学研究中的主要手段。 植物叶片微形态特征保存的好坏,与其所用的干燥方法有密切关系;同时,微形态特征在植物分类运用中也是至关重要的。本实验采用六甲基二硅胺烷干燥法,单固定（戊二醛）微波辐射临界点干燥法,单固定（戊二醛）临界点干燥法及双固定（戊二醛、我酸）临界点干燥法,对数十种植物叶片进行了干燥处理并用扫描电镜对其观察比较。经多次试验结果表明：单固定（戊二     

微小生物的扫描电镜样品制作方法

外表面带有粘性的微小生物扫描电镜样品比较容易制作,一些长度在0.1毫米以下而表面不带粘性的微小生物,例如血吸虫、钩虫的幼虫等,在取样制做扫描电镜样品过程中大家关心的一个问题就是如何防止样品流失。笔者为防止样品流失采用以下方法处理样品后。即可进行清洗、固定、干燥等常规操作,详见图1及操作说明。用不锈钢棒加工制作直径10毫米,高10毫米壁厚1毫米的园筒一只。上端再做一个活动盖子。筒底中央钻一3毫米直径的小孔,在小孔处固定一只直径3毫米400目左右的铜网。因铜网孔径很小,一般微小生物放入园筒内进行清洗、固定、脱水、干燥时不容易流失,而且园简可用镊子夹住在液体内上下左右晃动,将圆筒夹出容器(称