柱层析法分离纯化大豆磷脂酰胆碱

利用硅胶柱层析法,通过梯度洗脱对大豆粉末磷脂中的磷脂酰胆碱进行分离纯化.比较氯仿/甲醇和异丙醇/甲醇两个洗脱体系所得磷脂酰胆碱的纯度和回收率.梯度洗脱时,在氯仿/甲醇体系中氯仿:甲醇的比例为3:2(体积分数),异丙醇/甲醇体系异丙醇:甲醇的比例为1:1(体积分数)洗脱,是获得磷脂酰胆碱的最佳洗脱条件.结果表明:在氯仿,甲醇洗脱体系获得磷脂酰胆碱的纯度为97.0%、回收率为86.5%.异丙醇/甲醇洗脱体系获得磷脂酰胆碱的纯度为95.0%、回收率为83.0%.     

三氧化二铝柱层析法分离大豆磷脂中磷脂酰胆碱的研究

研究了三氧化二铝柱层析法,以95%乙醇为洗脱剂从大豆磷脂中分离磷脂酰胆碱的方法。通过本方法可使磷脂酰胆碱的含量及柱上的洗脱得率达90%以上,为用色谱法工业化生产磷脂酰胆碱提供了实验依据。     

HPLC-ESLD法分离测定大豆磷脂酰胆碱

通过HPLC-ELSD对大豆磷脂中的大豆磷脂酰胆碱进行了分离和检测.使用硅胶柱,以三氯甲烷-甲醇(88/12,V/V)为流动相,大豆磷脂酰胆碱在10 min内出峰.该法具有比HPLC-UV有更少的干扰、更高的检测灵敏度和更节省时间,同时该法具有良好的线性关系、分析准确度和分析精密度.该法可以方便地检测大豆磷脂中大豆磷脂酰胆碱的含量.     

乙醇冷冻法纯化分离大豆磷脂酰胆碱研究

以大豆粉末磷脂为原料,结合乙醇萃取和乙醇冷冻纯化两个步骤提取纯化磷脂酰胆碱;重点探讨乙醇冷冻纯化步骤工艺条件,考察冷冻时间、冷冻温度、料液比、乙醇浓度等因素对乙醇冷冻纯化效果影响,并在单因素试验基础上进行正交试验,确定最佳冷冻纯化工艺为:冷冻时间6h,冷冻温度-12℃,料液比1:8,乙醇浓度97.5%,在此条件下纯化分离,磷酯酰胆碱含量由45.8%提高至70.5%、得率为81.2%。     

高效液相色谱法测定大豆磷脂类保健食品中的磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇

目的建立高效液相色谱检测法测定大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱(phosphatidylcholines,PC)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine, PE)、磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol, PI)含量的方法。方法大豆磷脂类保健食品试样经正己烷:异丙醇(1:1, V:V)提取,经氨基柱(250 mm×4.6 mm, 5μm)分离,以流动相为无水乙醇-乙腈-水(50:40:10, V:V:V)为流动相等度洗脱,流速为0.4 mL/min,检测波长为205 nm,外标法定量。结果磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇在一定浓度范围内线性关系良好,相关系数大于0.999;检出限分别为1.3、5.0、1.0 mg/g,加标回收率分别为95.5%、99.5%、94.9%,精密度均为0.3%。结论本方法准确度高、重复性好,适用于保健食品中磷酯类物质含量的测定。     

大豆磷脂酰肌醇分离方法综述

该文阐述大豆磷脂中磷脂酰肌醇高效液相色谱法(HPLC)、柱层析法、溶剂法、酶法等分离方法,并介绍通过一些化学反应方法制备高纯度磷脂酰肌醇及其应用。     

HPLC法测定大豆磷脂及其保健品中PC、PI、PE

建立了高效液相色谱紫外检测器测定大豆保健品中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定方法。采用NH2色谱柱(3.0 mm×150 mm×5μm),流动相为乙醇∶乙腈∶水=50∶40∶10(体积比),流速0.4 m L/min下,紫外检测器波长为206 nm处进行测定。样品经正己烷∶异丙醇=1∶1(体积比)混合液溶解并使用流动相稀释后直接进样分析。在线性范围内相关性良好,相关系数R2≥0.999,各添加水平回收率为91.12%~105.61%,RSD为4.85%,日内和日间精密度均小于4%,磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇定量限分别为1.5 mg/L、1.2 mg/L和0.9 mg/L。本方操作简单、准确、成本低,适合于分析大豆磷脂及其保健品中三种主要磷脂的含量。     

柱层析法制备高纯磷脂酰胆碱

对三氧化二铝柱层析法富集大豆磷脂酰胆碱(PC)过程中产生的溶血磷脂的分离及分析进行了探讨,用高效液相色谱法对PC进行了定性和定量分析。食品级大豆浓缩磷脂经丙酮脱油、乙醇萃取后,进行三氧化二铝柱层析,经95%乙醇洗脱,制备高纯磷脂酰胆碱,同时实现了柱洗脱中间产物溶血磷脂与PC的分离,所得产品中PC纯度接近100%。     

脱油大豆磷脂的溶剂分提

大豆磷脂中的PC含有13%的胆碱,是生物利用率最高、最好的胆碱来源。为了得到较高纯度的PC产品,在实验中,以脱油磷脂为原料,进行溶剂分提富集PC。在较低的分提温度（30℃）、较低的乙醇浓度（90%）,有利于提高PC含量。     

大豆磷脂中PC、PE、PI测定方法的研究

为准确快速地对大豆磷脂中的主要成分磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰肌醇（PI）进行定量分析,对分析柱、流动相、检测波长进行了选择与优化,最终建立了以Lichrosorb Si-60为分析柱,205nm波长下,以V（正己烷）：V（异丙醇）：V（1％乙酸）=8：8：1为流动相的高效液相色谱测定法。     

柱色谱法制备高纯大豆卵磷脂和脑磷脂研究

以大豆油脚为原料,采用溶剂萃取法和柱色谱法相结合的工艺制备高纯卵磷脂和脑磷脂,研究了不同洗脱剂及不同洗脱模式对卵磷脂和脑磷脂柱色谱分离效果的影响.实验结果表明:大豆油脚先经脱水、脱油,再经95%乙醇浸提后粗分为粗卵磷脂和粗脑磷脂,以硅胶为吸附介质,分别进行柱色谱分离.粗卵磷脂为原料用无水甲醇作为洗脱剂等度淋洗,可获得大量相对含量为91.9%的卵磷脂和少量含量为74.2%的脑磷脂产品;粗脑磷脂为原料用氯仿-甲醇(2:1,V/V)、无水甲醇的梯度淋洗模式,可获得少量含量96.7%的高纯卵磷脂和大量含量82.1%的脑磷脂产品.     

Separation of phospholipids from hen egg yolk by short packed silica gel column chromatography

Short packed silica gel column chromatography has been performed to optimize the production of phosphatidylethanolamine (PE) and phosphatidylcholine (PC) from hen egg yolk with very low or no toxic solvents. The effects of silica type, sample loading amount, dimension of the glass chromatotube, and mobile phase compositions were investigated and high separation efficiency was achieved: gradient elution as 200 mL ethanol followed by 300 mL 95% ethanol to fractionate PE and PC after neutral lipids (NL) removed by 120 mL ethyl acetate, 40 mm silica gel (54 to 74 μm) bed height of the chromatotube with 22 mm inner dia (ID), and 0.25 g sample loading amount. By this procedure, 3.69 g PE and 2.88 g PC per 100 g egg yolk lipids were obtained, respectively. The refined PE and PC were identified by high-performance liquid chromatography/ultraviolet detector (HPLC-UV) with purity over 96%. The fatty acids in egg yolk revealed that PE and PC characterized higher ratios of n- 6/n- 3 (PE, 7.41; PC, 8.99). 18:2 n- 6 of PC (15.21%) predominated over PE (10.29%), whereas the level of 20:4 n- 6 of PC (8.78%) was lower than PE (15.67%).     

正相色谱法测定大豆磷脂中的磷脂酰胆碱

目的建立正相色谱法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱含量,用于大豆磷脂类保健食品生产过程中该物质含量的测定和质量控制。方法采用硅胶柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm)进行分离;色谱条件为流动相:异丙醇:正己烷:蒸馏水=70:16:14(V:V:V),等度洗脱,流速:1.0 m L/min;柱温:40℃;进样量:10μL;检测波长:205nm;并进行方法学验证,考察方法检测限、精密度、回收率等指标。结果磷脂酰胆碱峰面积与其浓度呈良好的线性关系,线性范围为0.1~0.8 mg/m L(r=0.9999),检出浓度0.04μg/m L,检出限为20μg/g,定量限为66.666μg/g,精密度(RSD)为0.6%,平均回收率99.37%(n=9)。结论本文建立的方法灵敏度高,重复性好,且具有很好的专属性,能够应用于大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱含量的检测。     

高效液相色谱法测定大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱含量

目的建立高效液相色谱法(highperformance liquid chromatography,HPLC)测定大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱含量的分析方法。方法采用高效液相色谱仪、Kromasil 100-5-SIL硅胶柱,以流动相正己烷:异丙醇:水=0.25:4:1(V:V:V),流速为0.5 mL/min,检测波长为207 nm,柱温为30℃,进样量10μL,进行检测。结果磷脂酰胆碱浓度为0.1～2.0mg/mL时,线性关系良好,回归方程的相关系数r2=0.9998,相对标准偏差(relative,standarddeviation,RSD)为0.50%,平均回收率为98.01%～98.73%。结论该方法高效,准确,简便,适合于检测大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱的含量。     

大豆油脱臭馏分重相组分中甾醇酯的柱层析法分离提取

为减少甾醇酯的生产工序，提高大豆油脱臭馏分重相组分中总甾醇得率，采用柱层析法直接分离提取甾醇酯，通过单因素试验考察吸附剂种类、上样量、洗脱剂比例和柱长直比（填料高度与直径比）对甾醇酯产品纯度和得率的影响，确定最佳工艺条件，并对最佳工艺条件下分离提取的甾醇酯产品进行傅里叶红外光谱表征，以及甾醇组成和脂肪酸组成测定。结果表明，柱层析法分离提取甾醇酯的最佳工艺条件为吸附剂为硅胶（粒径50~75 μm），上样量0.5 g，洗脱剂比例为正己烷、乙醚、冰乙酸体积比95∶ 5∶ 1，柱长直比16∶ 1。在最佳工艺条件下，甾醇酯产品纯度为(89.90±0.94)%，得率为(9615±1.49)%；傅里叶红外光谱分析证实提取的产品中含甾醇酯，甾醇酯上的甾醇组成主要为β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇，脂肪酸组成主要为亚油酸、油酸、棕榈酸、硬脂酸和亚麻酸。综上，柱层析法无需复杂工序，即可实现大豆油脱臭馏分重相组分中甾醇酯的有效回收。     

溶血磷脂酰乙醇胺硅胶柱色谱纯化技术研究

探讨了溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)硅胶柱色谱纯化的可行性。通过选择,确定以硅胶为固定相、氯仿-甲醇(体积比2∶1)为洗脱液,进行LPE纯化工艺优化。得到的最优工艺条件为:上样量1∶40(样品质量与固定相质量比),上样液质量浓度30 mg/m L,洗脱流速2.5 m L/min;在最佳工艺条件下,最终LPE产品纯度为99.05%,回收率为88.69%。研究为进一步探讨工业化制备LPE提供了基础数据和理论支撑。     

HPLC-ELSD法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱含量

该研究探讨采用HPLC–ELSD(蒸发光散射检测器)法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱含量。结果表明,选用硅胶色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),磷脂酰胆碱(PC)和溶血磷脂酰胆碱(LPC)分别在0.5 mg/mL~8.0 mg/mL和0.4 mg/mL~6.0 mg/mL范围呈良好线性关系;PC和LPC平均回收率为99.42%和99.83%,相对标准偏差(RSD)分别为1.44%和1.21%。该法对大豆磷脂PC和LPC分析均具有良好精密度和重复性。     

置换色谱法分离纯化大豆磷脂的研究

采用置换色谱法分离纯化了大豆磷脂,研究表明:以二氯甲烷-甲醇为流动相、置换剂选择10%乙醇胺、流速0.5 mL/min、上样量为110 mg,在此置换条件下,获得的PE、PC、PI含量可进一步富集,分别为从52.9%、8.7%、30%增长至78.8%、45.3%、84%,其回收率分别为48.4%、81.6%、65.9%。