聚乙二醇-硫酸铵双水相体系萃取α-葡聚糖酶

采用聚乙二醇-硫酸铵(PEG-(NH4)2SO4)双水相体系对α-葡聚糖酶进行萃取,以两相比、酶活、蛋白浓度、比活力以及萃取率为参数进行比较,探讨了使用不同分子量的PEG、不同的PEG浓度以及不同(NH4)2SO4浓度下对酶分配行为的影响。实验结果表明,α-葡聚糖酶在质量分数13%的PEG4000以及13%的(NH4)2SO4的双水相系统中,可获得较高的比活力2364.97 U/mg以及萃取率99.94%。     

聚乙二醇/硫酸铵双水相萃取猪胃蛋白酶工艺研究

采用聚乙二醇/硫酸铵[PEG/（NH4）2SO4]建立稳定的双水相体系以分离猪胃蛋白酶。通过上下相体积比（VR）、比活力（SA）、纯化因子（PF）、酶活回收率（η）和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析测定萃取效果。结果表明,萃取猪胃蛋白酶的最佳配比体系为25%PEG1000:18%（NH4）2SO4,所萃取的猪胃蛋白酶酶活回收率为91.5%,SDS-PAGE结果显示,萃取的蛋白质和猪胃蛋白酶对照品分子量大小一致。      

聚乙二醇-硫酸铵双水相体系萃取螺旋藻藻蓝蛋白的研究

对聚乙二醇-硫酸铵双水相体系直接从螺旋藻破碎液中萃取藻蓝蛋白的技术进行了研究。结果表明,对于藻蓝蛋白含量为0.282mg/mL的螺旋藻细胞破碎液,10%PEG2000与20%的硫酸铵双水相体系萃取藻蓝蛋白的效果最佳,经2次萃取,藻蓝蛋白总萃取率为96.1,藻蓝蛋白纯度达到1.2。     

聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取大豆脂肪氧合酶的研究

采用聚乙二醇(PEG)/硫酸铵[(NH4)2SO4]双水相体系对大豆中脂肪氧合酶进行分离萃取研究;通过综合考察酶分配系数、相比和回收率,探讨了(NH4)2SO4、PEG2000、Na Cl浓度以及p H对脂肪氧合酶萃取的影响,并通过正交实验进一步优化实验条件,结果表明在单一因素下的最佳工艺条件为:(NH4)2SO415%(wt%)、PEG2000 13%(wt%)、Na Cl 1%(wt%)、p H5.8;正交实验优选出的最佳工艺条件为:(NH4)2SO417%(wt%)、PEG2000 13%(wt%)、p H5.2,可获得酶的分配系数最高可达9.710,萃取率为87.6%。      

非离子表面活性剂双水相萃取氨基酸研究

该文对氨基酸萃取液在非离子表面活性剂双水相体系中的萃取分配相行为进行研究。采用脂肪醇聚氧乙烯醚AEO–7/盐双水相萃取L–苯丙氨酸,考察了加盐(NaCl、Na2SO4、Na3PO4)、AEO–7含量、萃取时间、加入萃取物L–苯丙氨酸的含量以及萃取温度对双水相及萃取分离L–苯丙氨酸的影响。结果表明,AEO–7/Na3PO4双水相萃取L–苯丙氨酸的适宜条件是当AEO–7的体积浓度为8%,Na3PO4·12H2O的质量浓度为85 g/L,温度为40℃,L–苯丙氨酸的质量浓度为0.532 8 g/L,时间为60 min时L–苯丙氨酸的萃取率可以达到98.7%,分配系数为15.3。     

聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取葡萄糖氧化酶的研究

采用聚乙二醇/硫酸铵[PEG/(NH4)2SO4]双水相体系对葡萄糖氧化酶的萃取进行了研究。以双水相系统的上、下相的酶活、比酶活、相比R、分配系数K和萃取率Y等为参数,探讨了PEG质量分数、不同PEG浓度和不同硫酸铵浓度对葡萄糖氧化酶在PEG/(NH4)2SO4双水相系统中分配行为的影响。实验结果表明:葡萄糖氧化酶在25%的PEG4000和10%硫酸铵的双水相体系中可获得较高的萃取率达81.11%,分配系数为0.134。      

聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取葡萄糖氧化酶的研究

采用聚乙二醇/硫酸铵[PEG/(NH4)2SO4]双水相体系对葡萄糖氧化酶的萃取进行了研究。以双水相系统的上、下相的酶活、比酶活、相比R、分配系数K和萃取率Y等为参数,探讨了PEG质量分数、不同PEG浓度和不同硫酸铵浓度对葡萄糖氧化酶在PEG/(NH4)2SO4双水相系统中分配行为的影响。实验结果表明:葡萄糖氧化酶在25%的PEG4000和10%硫酸铵的双水相体系中可获得较高的萃取率达81.11%,分配系数为0.134。     

TritonX-100-硫酸铵双水相体系分离地榆根总黄酮

目的:研究利用双水相体系萃取地榆根总黄酮提取的最佳工艺条件。方法:探讨了Triton X-100质量分数,硫酸铵质量分数,黄酮粗提液质量分数、Na Cl质量分数和p H等因素对总黄酮萃取率的影响,并采用Box-Benhnken实验确定了最佳实验条件。结果:双水相萃取黄酮最佳条件为,确定双水相体系组成15%Triton X-100/15%硫酸铵,黄酮粗提液质量分数12%、Na Cl质量分数0.5%、p H6,地榆根总黄酮前萃取率达到80.02%;反萃取的最佳条件:取1.5m L黄酮萃取上相和2m L乙酸丁酯混合,反萃取率为80.03%。结论:采用双水相萃取地榆根总黄酮简单、易行,生产成本低,在中药提取中具有良好应用前景。      

TritonX-100-硫酸铵双水相体系分离地榆根总黄酮

目的:研究利用双水相体系萃取地榆根总黄酮提取的最佳工艺条件。方法:探讨了Triton X-100质量分数,硫酸铵质量分数,黄酮粗提液质量分数、Na Cl质量分数和p H等因素对总黄酮萃取率的影响,并采用Box-Benhnken实验确定了最佳实验条件。结果:双水相萃取黄酮最佳条件为,确定双水相体系组成15%Triton X-100/15%硫酸铵,黄酮粗提液质量分数12%、Na Cl质量分数0.5%、p H6,地榆根总黄酮前萃取率达到80.02%;反萃取的最佳条件:取1.5m L黄酮萃取上相和2m L乙酸丁酯混合,反萃取率为80.03%。结论:采用双水相萃取地榆根总黄酮简单、易行,生产成本低,在中药提取中具有良好应用前景。     

响应面优化双水相萃取分离酵母源MT工艺

采用聚乙二醇（polyethylene glycol,PEG）-(NH4)2SO4双水相体系,分离铜诱导的诱变酿酒酵母菌所表达的金属硫蛋白。以PEG质量分数、(NH4)2SO4质量分数及pH值为考察因素,萃取率为响应值,结合Design-Expert 8.0.6软件做响应面优化分析,优化到最佳萃取条件：PEG相对分子质量2 000、PEG和(NH4)2SO4质量分数分别为22.5%和17.46%、pH 5.98。获取的金属硫蛋白主要分布在上相,萃取率可达81.69%。此方法操作简单、高效、成本低,是酵母源金属硫蛋白分离提纯的新方法。     

聚乙二醇-硫酸铵双水相体系分离纯化黄花蒿黄酮的研究

采用聚乙二醇-硫酸铵双水相体系分离纯化黄花蒿黄酮。通过单因素实验考察聚乙二醇平均分子量、（NH4）2SO4质量分数、聚乙二醇质量分数、pH和体系温度等对分配系数、萃取率的影响,并通过正交实验对萃取工艺条件进行进一步的优化,获得最佳工艺条为:双水相体系组成30%PEG600-25%（NH4）2SO4,体系温度45℃,体系pH为3。在此条件下,黄花蒿黄酮主要分布在上相,分配系数为21.86,萃取率达到96.33%。      

乙醇-磷酸氢二钾双水相体系萃取测定椒蒿中总黄酮的含量

采用乙醇-磷酸氢二钾双水相体系测定了椒蒿中黄酮的含量,研究了乙醇和盐的用量对双水相体系的影响,确定了最佳的双水相萃取体系.在乙醇用量为7.0mL,K2HPO4用量为1.5g的萃取条件下,用紫外分光光度法测定了椒蒿提取液中黄酮的含量.     

聚乙二醇/硫酸钠双水相萃取赖氨酸

根据赖氨酸的理化特性,设计采用聚乙二醇(PEG)/硫酸钠双水相体系对其进行萃取分离。以萃取率和分配系数为指标,通过单因素和正交试验探讨了双水相的物质浓度、pH值、温度以及主要因素间的交互作用对赖氨酸萃取的影响。结果表明,赖氨酸主要分配于下相盐相中,双水相的物质浓度、pH值、Na2SO4的质量分数与pH值间的交互作用对赖氨酸的萃取影响极显著。实验确定最佳萃取工艺为:20%PEG 1000、14%Na2SO4、pH 5.5、30℃,在此条件下分别萃取1.0 mg/mL赖氨酸标准液和模拟发酵液,平均萃取率分别为96.5%和94.8%,分配系数分别为0.033和0.057。     

乙醇-硫酸铵双水相体系萃取坛紫菜多糖

探究不同系线长度的乙醇-硫酸铵双水相体系对坛紫菜多糖萃取的影响。采用浊点滴定法绘制乙醇-硫酸铵双水相相图,选取不同系线长度体系,测定其对紫菜多糖分配情况。结果表明：在乙醇质量分数27%、硫酸铵质量分数18%（即系线长度为40）、体系相比R为1.1时,紫菜多糖的回收率可达79.8%,分配系数K为0.23;其蛋白去除率明显高于传统醇沉法（双水相萃取多糖蛋白含量为1.20%,醇沉多糖蛋白含量为6.17%）,且具有较好的脱色效果,可用于紫菜多糖的分离纯化。     

双水相体系萃取分离L-组氨酸的研究

采用PEG-(NH4)2SO4双水相体系萃取分离L-组氨酸。实验考察了pH、温度、聚乙二醇加入量、L-组氨酸初始浓度、硫酸钠及L-赖氨酸的存在对萃取分离的影响。结果表明:L-组氨酸在该双水相体系的分配系数K随体系pH和聚乙二醇加入量的增大而减小,随着L-组氨酸初始浓度和L-赖氨酸加入量的增大而增大,而温度和Na2SO4的影响不明显;L-组氨酸在该双水相体系的萃取率η随体系pH和聚乙二醇加入量的增大而增大,随着L-组氨酸和L-赖氨酸加入量的增大而减小,而温度和Na2SO4的影响同样不明显。     

双水相体系萃取分离L-组氨酸的研究

采用PEG-（NH4）2SO4双水相体系萃取分离L-组氨酸。实验考察了pH、温度、聚乙二醇加入量、L-组氨酸初始浓度、硫酸钠及L-赖氨酸的存在对萃取分离的影响。结果表明:L-组氨酸在该双水相体系的分配系数K随体系pH和聚乙二醇加入量的增大而减小,随着L-组氨酸初始浓度和L-赖氨酸加入量的增大而增大,而温度和Na2SO4的影响不明显;L-组氨酸在该双水相体系的萃取率η随体系pH和聚乙二醇加入量的增大而增大,随着L-组氨酸和L-赖氨酸加入量的增大而减小,而温度和Na2SO4的影响同样不明显。      

乙醇/硫酸铵双水相体系分离纯化葡萄籽总黄酮

利用乙醇-硫酸铵双水相体系分离纯化葡萄籽中总黄酮,首先对无水乙醇、(NH4)2SO4、黄酮粗提取液质量分数、pH值、NaCl质量分数进行单因素研究,确定双水相体系组成为23%无水乙醇-17%(NH4)2SO4。然后利用Box-Benhnken Design实验,对黄酮粗提取液质量分数、pH值、NaCl质量分数进行了优化,结果表明:黄酮粗提取液质量分数21.3%、pH 7.2、NaCl质量分数1.97%,此条件下葡萄籽总黄酮的萃取率可达到98.8%;与预测值96.437 2%接近。     

超临界CO2萃取芦笋中总黄酮的工艺研究

采用超临界CO2萃取技术对芦笋中的黄酮类化合物进行了萃取研究，运用L9（3^4）正交表系统研究了萃取压力，萃取温度，萃取时间以及夹带剂用量对萃取率的影响。确定了超临界CO2萃取芦笋总黄酮的最佳工艺条件为：温度为70℃、时间为2h、压力为30MPa、夹带剂（75％乙醇）用量为2．0mL／g。此条件下得到总黄酮比率为1．35％，其黄酮得率是常规溶剂乙醇提取法总黄酮得率的2．7倍。     

响应面试验优化双水相萃取大吴风草总黄酮工艺及抑菌活性测定

目的：优化大吴风草总黄酮（total flavonoids of Farfugium,TFF）双水相萃取体系并研究其抑菌活性。方法：超声波辅助C2H5OH-(NH4)2SO4双水相萃取TFF,依据Box-Behnken试验设计原理,采用三因素三水平响应面分析法,以TFF萃取率为响应值进行方差分析,获取多元二次线性回归方程;采用K-B纸片扩散法测定6 种供试菌种的抑菌圈直径,对比最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）和最小杀菌浓度（minimumbactericidal concentration,MBC）确定其抑菌活性。结果：24% C2H5OH-18% (NH4)2SO4双水相萃取体系条件下TFF萃取率最高,响应面试验方差分析表明,粗提液质量分数显著影响TFF萃取率（P=0.023 9＜0.05）,而pH值和NaCl质量分数对萃取率的影响不显著;最佳双水相萃取条件为粗提液质量分数20%、pH 7.64、NaCl质量分数2.68%,萃取率模型预测最大值为96.366 7%（P=0.994）;TFF对枯草芽孢杆菌抑制作用最强,高剂量作用下抑菌率可达98.67%,MIC为1.56 mg/mL;对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌抑制作用次之,对青霉和黑曲霉抑制作用最弱。结论：粗提液质量分数对萃取率影响较大,pH值和NaCl质量分数对萃取率的影响较小;TFF对6 种供试菌种均表现出较强的抑菌活性,抑菌率与TFF质量浓度呈正相关,TFF对细菌的抑制效果相对强于真菌。     

响应面法优化乙醇/硫酸铵双水相体系萃取洋葱黄酮的研究

以洋葱为原料,以黄酮提取率为主要指标,对乙醇/硫酸铵双水相体系萃取洋葱黄酮进行研究。通过单因素试验,考察了乙醇质量分数、硫酸铵质量分数、洋葱粉加量对双水相萃取洋葱黄酮分配情况及提取率的影响。并采用Box-Behnken中心组合试验和响应面分析,对洋葱黄酮提取条件进行优化。试验结果表明,乙醇/硫酸铵双水相体系萃取洋葱黄酮的最佳条件为:乙醇质量分数32.1%,硫酸铵质量分数20.4%,洋葱粉加量0.45g,在此条件下,洋葱黄酮的提取率达3.74%。