超声预处理双酶分步水解制备滑菇抗氧化肽

研究超声预处理双酶分步水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,为滑菇蛋白高附加值产品的开发提供理论依据。以羟自由基(·OH)清除率为指标,单因素试验研究功率、温度、时间等超声预处理参数对碱性蛋白酶水解效果的影响。从中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶等4种酶中筛选第二步水解的最适酶,通过正交试验优化其水解工艺。结果表明,超声波预处理的最佳工艺参数为:功率300 W、温度40℃、时间20 min,碱性蛋白酶水解产物的·OH清除率最高,为86.15%。风味蛋白酶作为第二步水解的最适酶,各因素对·OH清除率的影响程度依次为:水解时间酶浓度p H温度,其最佳水解工艺条件为:酶浓度3 000 U/g、p H 7.0、温度55℃、水解时间1.5 h。在此条件下,水解产物·OH清除率为93.17%。超声波预处理双酶分步水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺可行。     

卵白蛋白多肽的酶解制备及抗氧化活性研究

以DPPH自由基清除率和水解度为指标,采用碱性蛋白酶酶解卵白蛋白制备抗氧化活性肽,考察底物质量分数、酶解时间、加酶量、温度等因素对制备的影响。正交实验结果表明,碱性蛋白酶的最佳水解条件为:底物质量分数4%、酶解时间6h、加酶量5500U/g,温度65℃,此条件下DPPH自由基清除率达到96.92%、水解度为57.14%。酶解时间对DPPH自由基清除率的影响最大,而底物质量分数对水解度的影响最大。     

脱脂米糠抗氧化肽的制备工艺研究

为了得到脱脂米糠抗氧化肽的最佳制备工艺,研究了胰蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶酶解脱脂米糠蛋白的进程特性以及不同的酶解条件对脱脂米糠抗氧化肽活性的影响。从5种蛋白酶中筛选出最合适的酶,通过单因素实验考察了底物浓度、加酶量、pH、温度以及时间对酶解产物水解度和ABTS自由基清除率的影响,在单因素实验的基础上,以酶解产物的ABTS自由基清除率为响应值,进行Box-Behnken中心组合实验。结果表明:选用碱性蛋白酶制备脱脂米糠抗氧化肽效果最好;最佳酶解工艺条件为加酶量1.8%、温度50℃、时间276 min、pH9.0、底物浓度5%;在最佳酶解工艺条件下,所得脱脂米糠抗氧化肽对ABTS自由基清除率可达71.85%。     

蚕蛹蛋白酶解工艺及其水解产物抗氧化性

以蛋白水解度为指标,利用中性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解蚕蛹蛋白。通过单因素试验和正交试验对影响蚕蛹蛋白水解度的因素进行优化试验,分析了两种蛋白酶对蚕蛹蛋白酶解效果的影响,并测定水解产物抗氧化活性。结果表明,中性蛋白酶酶解蚕蛹蛋白时,最优工艺条件为底物浓度为1.2%、酶解时间3.5 h、酶解pH 10.0、酶与底物比5.0%,此时,蚕蛹蛋白水解度最高为27.38%;木瓜蛋白酶酶解蚕蛹蛋白时,最优工艺条件为底物浓度为1.5%、酶解时间5.0 h、酶解pH 10.0、酶与底物比9.0%,此时,蚕蛹蛋白水解度最高为18.26%。最佳工艺条件下,中性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解产物DPPH清除率分别为83.84%和81.24%,超氧阴离子自由基清除率分别为6.36%和9.72%,羟基自由基清除率分别为43.30%和62.24%。综上所述,木瓜蛋白酶对酶解产物的抗氧化效果较好。     

双酶水解玉米醇溶蛋白制备抗氧化肽的工艺优化

为了制备抗氧化活性肽,利用Alcalase碱性蛋白酶和中性蛋白酶分步酶解玉米醇溶蛋白。在单因素的基础上,以1.1-二苯基苦基苯肼(DPPH·)自由基清除率、羟基自由基清除率和水解度(DH)为响应值,采用响应面(RSM)中心组合实验,选取Alcalase碱性蛋白酶加酶量、中性蛋白酶与Alcalase碱性蛋白酶活力之比、底物浓度为自变量,探讨最佳酶解工艺条件。采用Design-Expert软件,通过响应面优化确定修正后各因素的最佳工艺条件为:Alcalase碱性蛋白酶加酶量12880 U/(g底物)、中性蛋白酶与Alcalase碱性蛋白酶活力之比为1∶4,底物浓度为3.4%。在此修正条件下,DPPH·自由基清除率为42.98%,水解度为32.18%,与预测值的相对误差为1.04%。浓度为20 mg/m L时,玉米醇溶蛋白的DPPH·自由基清除率和羟基自由基清除率分别为同浓度VC的85.8%和67.0%。     

微波酸处理对骨胶原蛋白酶解效果的影响研究

以骨胶原蛋白为原料,采用微波酸处理辅助酶解制备胶原蛋白肽,以水解度及抗氧化能力为指标确定最佳水解条件。通过比较实验确定最佳微波酸处理条件为:微波功率510W作用270s;通过对酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶及碱性蛋白酶水解结果比较,确定中性蛋白酶水解产物的水解度及ABTS、DPPH自由基清除率最高;通过单因素实验及正交实验优化中性酶最佳酶解条件为:酶与底物比10%,底物浓度4%,反应温度55℃,pH7.0。结果表明,与单独酶解相比,微波酸处理能够使骨胶原蛋白酶解时间缩短1/2,水解度上升3.2%,产物的ABTS、DPPH自由基清除率分别提高8.7%和3.1%。     

响应面优化碎米蛋白水解及多肽抗氧化研究

为研究碎米蛋白水解工艺条件及其水解产物的抗氧化特性,实验以碎米为原料,以水解度为指标,筛选最适酶解大米蛋白的酶,在单因素的基础上以温度、底物质量分数、酶添加量、pH为响应因子,以碎米蛋白的水解度为响应值,采用Design-Expert 8.0.6.1软件对水解工艺进行优化,并对米蛋白肽的抗氧化活性进行研究。结果表明:碱性蛋白酶是生产米蛋白肽的最适合酶类;碎米蛋白最佳水解工艺为:温度63.7℃、底物质量分数4.4%、酶添加量6.8%、pH为8.5,水解度预测值为24.56%,得到水解度的实际值为25.2%。此条件下得到的碎米蛋白肽具有显著的羟自由基和超氧自由基清除能力,在水解180min、210min时羟自由基和超氧自由基清除率出现最高值为28%、33%,因此,水解180min为制备抗氧化肽的最佳时间。     

芸豆蛋白酶解工艺的研究

以芸豆蛋白为原料研究芸豆抗氧化活性肽的酶解工艺。首先以DPPH.清除率和水解度为评价指标筛选最适用酶,并采用单因素及正交实验设计优化酶解工艺。结果表明,Alcalase碱性蛋白酶对芸豆蛋白水解能力最强,酶解产物的抗氧化能力最高;最佳酶解工艺条件为底物浓度4.0%,温度55℃,加酶量2000u.g-1,pH9.0,时间6h,该条件下水解度和DPPH.清除率分别为16.16%和74.10%,比优化前分别提高4.95%和7.63%;芸豆活性肽显示出较强的抗氧化活性。     

酶解鱼鳞蛋白制备抗氧化肽的研究

以鱼鳞蛋白为原料,采用Neutrase蛋白酶酶解鱼鳞蛋白制备抗氧化活性肽,结合单因素实验筛选关键因子,通过响应面分析法,以·OH自由基的清除率为响应值,确定制备鱼鳞抗氧化活性肽的最佳工艺条件为:酶解时间5h、酶解温度50℃、底物浓度5.51%、pH5.64、酶用量4.12%,该务件下得到的鱼鳞抗氧化活性肽对·OH的清除率达78.82%.     

裸燕麦谷蛋白酶解条件的优化

以裸燕麦为原料,采用Osborne蛋白分级方法分离提取裸燕麦谷蛋白,利用蛋白酶水解后以水解度和对·OH清除率为指标,通过正交试验对酶解裸燕麦谷蛋白的工艺进行探索。SDS-PAGE电泳结果显示裸燕麦谷蛋白分子量范围在(20~97)ku,且最佳水解蛋白酶为碱性蛋白酶。谷蛋白酶解最佳工艺为:底物浓度10 g/L,酶用量10%,p H值8.5,温度55℃。在最佳酶解条件下水解度近40%,·OH清除率达60%以上。     

不同苦荞蛋白酶解产物抗氧化活性研究

以苦荞蛋白作为底物,采用碱性蛋白酶Alcalase 2.4 L、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶以及胃蛋白酶加胰蛋白酶模拟体内蛋白消化,制备苦荞麦蛋白水解物。采用DPPH及ABTS~+·法比较不同的蛋白水解物与水解前苦荞蛋白的体外抗氧化活性。结果表明:不同蛋白酶水解产物水解度由高到低的顺序为:碱性蛋白酶胃蛋白酶~胰蛋白酶胃蛋白酶木瓜蛋白酶胰蛋白酶,其中碱性蛋白酶水解苦荞蛋白水解度达29.95%。苦荞蛋白本身具有一定的抗氧化能力,其中DPPH清除率及ABTS~+·清除率最高分别达71.91%及11.25%,但均显著低于阳性对照Vc。随着水解程度的增加,苦荞蛋白水解产物抗氧化能力逐渐增强。其中,以碱性蛋白酶酶解产物抗氧化活性最高,其DPPH清除率及ABTS~+·清除率最高分别为91.65%(0.5 mg/mL)及16.67%(1 mg/mL),均显著高于原苦荞蛋白。其中,碱性蛋白酶水解产物的DPPH自由基清除率在高浓度(0.5mg/mL)条件下,与阳性对照Vc持平。同时碱性蛋白酶酶解产物抗氧化性(DPPH清除率及ABTS~+·清除率)显著优于其他蛋白酶解产物。因此,苦荞麦蛋白采用碱性蛋白酶解制备苦荞水解产物可作为天然的抗氧化剂。     

棉籽肽的制备工艺、抗氧化活性及部分特性研究

以水解度(DH)及DPPH·清除率为考察指标,利用单因素实验和正交实验探讨碱性蛋白酶酶解棉籽蛋白制备棉籽肽的最佳工艺条件。以VC为对照研究了棉籽肽的总还原力、对·OH及O-2·的清除作用及部分特性。结果表明,棉籽肽的最佳制备条件为:反应时间180 min,p H 9.5,温度55℃,底物质量浓度3.00 mg/m L,碱性蛋白酶加酶量50 U/m L。在最佳条件下,棉籽肽的DPPH·清除率为63.42%,DH为85.90%。棉籽肽的·OH及O-2·清除率均随其质量浓度增大而增强,半数抑制浓度(IC50)分别为0.044 mg/m L和0.046 mg/m L,且均强于VC。棉籽肽总还原力与其质量浓度呈剂量依赖关系,稍弱于VC。棉籽肽等电点约为p H 2,不同p H下,棉籽肽的·OH清除率均在60 min时达到最大,但在不同温度下,棉籽肽·OH清除率随时间变化不大,60℃时达到最大值。     

不同酶对藜麦蛋白肽制备的影响及其抗氧化活性研究

本实验以藜麦蛋白为原料,采用碱性蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶分别对藜麦蛋白进行水解,制备藜麦蛋白肽。通过单因素实验对五种酶水解制备的藜麦蛋白肽以蛋白水解度、DPPH自由基清除能力、·OH自由基清除能力、ABTS+自由基清除能力、·O2-自由基清除能力为测定指标,研究五种蛋白酶对藜麦蛋白的水解能力和抗氧化活性影响,选出效果相对较佳的酶水解工艺。综合各指标的结果表明,碱性蛋白酶和复合蛋白酶水解能力较强,制备的藜麦蛋白肽抗氧化活性较其他两种酶更好。碱性蛋白酶和复合蛋白酶最佳酶解工艺分别为:酶与底物比0.5%(w/w),底物与水为1∶25(w/v),水解温度50℃,水解时间5h,pH10.0;酶与底物比0.5%(w/w),底物与水为1∶25(w/v),水解温度55℃,水解时间5h,pH8.0。本研究为藜麦蛋白的后期的深加工利用提供一定理论依据。     

复合风味蛋白酶酶解麦麸蛋白制备麦麸抗氧化肽的研究

以麦麸蛋白为原料,复合风味蛋白酶为水解酶,探讨麦麸蛋白水解度(DH)与麦麸肽抗氧化能力的关系,并以超氧阴离子自由基(O2-·)清除率为指标,采用正交试验设计优化制备麦麸抗氧化肽的工艺条件.试验结果表明,制备麦麸抗氧化肽的最佳酶解条件为pH 5.0,加酶量为6000U/g麦麸蛋白,底物浓度5%,温度55℃,酶解7.5h,在该条件下制得的麦麸抗氧化肽清除超氧阴离子自由基的清除率可达53.70%.     

碱性蛋白酶水解苦荞蛋白工艺优化及其抗氧化活性

采用碱性蛋白酶对苦荞蛋白进行酶解,以水解度(DH)作为指标,采用单因素试验和正交试验优化苦荞蛋白酶解工艺。以VC作为对比,检测苦荞蛋白肽的体外抗氧化能力。结果表明:苦荞蛋白最佳酶解条件为:底物浓度3%, pH 10,温度45℃,加酶量5%,酶解时间4 h。在此条件下水解度DH为19.42%,制备的苦荞蛋白肽羟自由基的清除率IC50为1.372 mg/mL,抑制羟自由基的能力为17.55 U/mg。表明苦荞蛋白肽具有较好的抗氧化能力。     

双酶分段水解制备紫花芸豆肽工艺优化及抗氧化测定

研究紫花芸豆蛋白双酶分段水解的最佳工艺及产物的抗氧化特性。以水解度和抗氧化能力为测定指标,筛选酶种类及双酶组合方式,采用正交实验优化双酶分段水解工艺参数,提高紫花芸豆肽的水解度和抗氧化能力。最终确定胰蛋白酶+碱性蛋白酶分段水解为最佳水解工艺,参数为胰蛋白酶添加量7%、pH 10、温度50℃、时间4.5 h;碱性蛋白酶添加量7%、pH 9、温度60℃、时间3 h,水解度达到58.58%;对水解产物进行抗氧化性分析得到:当水解时间分别为6.5 h、7.0 h时,抑制脂质过氧化能力、超氧阴离子清除能力达到最大为46.53%、44.25%。结果均表明胰蛋白酶+碱性蛋白酶双酶分段水解工艺能显著提高紫花芸豆肽的水解度和抗氧化能力。     

扁杏仁抗氧化肽的制取工艺研究

研究了扁杏仁抗氧化肽的酶解制备工艺及其体外抗氧化活性。以羟基自由基的清除率和水解度为考察指标,用响应面分析法研究酶用量、底物浓度、温度和p H对扁杏仁抗氧化活性肽酶解工艺的影响。得出优化后的酶解条件为:碱性蛋白酶-风味蛋白酶的复合酶用量6725 U/g(碱性蛋白酶为3645 U/g,风味蛋白酶为2690 U/g)、底物质量分数为3%、温度60℃、p H8.28,在该条件下制备的扁杏仁抗氧化活性肽对羟基自由基的清除率和水解度分别为84.18%和20.87%。     

花生蛋白酶水解产物抗氧化活性研究

利用蛋白酶水解花生蛋白并对水解产物的抗氧化活性进行研究.采用中性蛋白酶AS1.398和低温高碱性蛋白酶水解花生蛋白,AS1.398的水解条件为:温度55℃,pH6.5,底物浓度5.0%,酶用量1.0%,水解时间6 h;碱性蛋白酶的水解条件为:温度40℃,pH7.5,底物浓度5.0%,酶用量2.0%,水解时间6 h.在此条件下进行水解、灭酶、离心除去不溶性的成分,水解产物冷冻干燥.酶水解产物的抗氧化活性用油脂的过氧化值进行评价.产物添加到猪油中,65℃恒温保存30 d,每隔一定时间取样测定其过氧化值.Rancimat也用于评价花生蛋白酶水解产物的抗氧化活性,添加不同的酶水解产物后测定样品的氧化诱导期,用诱导期作为花生蛋白酶水解产物的抗氧化活性的评价指标.研究结果表明,花生蛋白酶水解产物具有一定的抗氧化性能.     

Alcalase蛋白酶水解花椒籽蛋白制备抗氧化肽的条件优化

本研究以花椒籽蛋白质抗氧化肽水解度(DH)和DPPH自由基清除率为指标,对酶解花椒籽蛋白制备抗氧化肽的水解用酶及其酶用量、底物浓度、酶解温度、时间等酶解条件进行研究,以期优化得到酶解法制备花椒籽抗氧化肽的最优条件。结果表明Alcalase蛋白酶水解花椒籽蛋白制备抗氧化肽效果最好,通过响应面分析法优化出该酶最佳酶解花椒籽制备抗氧化肽的条件为:底物浓度5%,温度55℃,pH 8.5,加酶量4%;该方法可用于花椒籽蛋白制备抗氧化肽,在此条件下花椒籽水解液DPPH自由基清除率可达到61.00%,水解度为12.00%。     

核桃多肽的制备及其体外抗氧化性研究

以核桃蛋白为原料,以水解度为指标,通过单因素和正交试验优化了碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备抗氧化肽的工艺参数。得到碱性蛋白酶最佳酶解条件为酶添加量5%,底物浓度3%,酶解温度55℃,酶解p H为9.0,酶解时间6 h;在各酶最佳条件下获得的核桃多肽具有一定的抗氧化性。