大孔树脂纯化沉香叶黄酮工艺优化及纯化前后抗氧化性比较

研究沉香叶黄酮的大孔树脂纯化工艺及其抗氧化性。通过静态和动态实验,考察树脂种类、粗提液浓度、洗脱剂、上样流速、洗脱流速对沉香叶黄酮吸附解吸性能的影响,确定最佳纯化工艺条件;采用羟自由基法、DPPH自由基和ABTS自由基法,比较纯化前后沉香叶黄酮的抗氧化性。结果表明,NKA-9大孔树脂纯化沉香叶黄酮效果最好,最佳条件为:以1.5 mL/min速度将5.0 mg/mL粗提液上柱,用70%(v/v)乙醇以2.0 mg/mL速度洗脱,此条件下沉香叶黄酮纯度提高至76.58%±3.46%。沉香叶黄酮纯化后清除羟自由基、DPPH自由基和ABTS自由基IC₅₀值分别为(0.120±0.008)、(0.016±0.009)、(0.042±0.002)mg/mL,远低于纯化前的(0.300±0.015)、(0.170±0.008)、(0.160±0.009)mg/mL,说明沉香叶黄酮纯化前后均具有较强的抗氧化性,纯化后抗氧化性明显增强。NKA-9大孔树脂适合分离纯化沉香叶黄酮。     

秋葵黄酮的纯化和体外抗氧化活性研究

研究通过静态吸附试验比较NKA-9、AB-8、HPD-400、D101等4种大孔树脂对秋葵中黄酮类物质的吸附与解吸性能,并以VC为对照,对其还原力及羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)、DPPH自由基(DPPH·)、ABTS~+自由基(ABTS~+·)清除能力进行探讨。结果表明,最适合分离纯化秋葵黄酮的树脂类型为AB-8型,通过动态吸附-洗脱试验得出AB-8树脂分离纯化秋葵黄酮的最佳工艺为上样浓度0.60 mg/m L,上样流速0.70 m L/min,洗脱剂为70%乙醇,洗脱流速0.40 m L/min,纯化后秋葵黄酮纯度由39.2%提高到67.3%。抗氧化结果显示秋葵黄酮对秋葵黄酮总还原力高于VC,对·OH、O_2~-·、DPPH·、ABTS~+·的IC_(50)值分别为0.56、0.42、0.62、0.52 mg/m L,其最大清除率分别为90.4%、80.4%、77.6%、88.4%,具有良好的体外抗氧化活性。     

大孔树脂富集酸枣仁总黄酮工艺及其体外抗氧化性研究

研究大孔吸附树脂富集纯化酸枣仁总黄酮的最佳条件,并进行了总黄酮体外抗氧化能力的测定。利用静态吸附和动态吸附实验对5种不同极性的大孔吸附树脂进行筛选,并对上样液质量浓度、上样量、洗脱剂体积分数、洗脱剂体积以及洗脱剂流速等条件分别进行考察。采用DPPH自由基和ABTS+自由基的清除率以及铁氰化钾的还原能力作为指标考察纯化后总黄酮的体外抗氧化能力。结果表明AB-8大孔吸附树脂为纯化酸枣仁总黄酮的最佳树脂,纯化工艺为上样液质量浓度1.99 mg/m L,上样量50 m L,洗脱剂体积分数50%乙醇,洗脱剂体积50 m L,洗脱剂流速1 m L/min。抗氧化结果显示总黄酮对DPPH和ABTS+自由基具有明显的清除能力(IC50值为0.70 mg/m L和0.15 mg/m L),并对铁氰化钾表现出了较强的还原能力。     

梨幼果多酚的纯化及其抗氧化性

采用5种大孔吸附树脂分离纯化梨幼果多酚,并测定其抗氧化性。结果表明,综合分析吸附与解吸效果,NKA-9大孔树脂性能较好,最适合用来纯化梨幼果多酚;NKA-9大孔树脂对梨幼果多酚进行纯化时,最适宜的条件为:将2 mg/m L的多酚提取液调至p H值为5.0,设定进样流速为1 m L/min,充分吸附,然后用70%的乙醇为洗脱液进行动态洗脱,洗脱流速为1 m L/min,用此方法纯化后的梨幼果多酚的纯度从6.23%提高到30.68%;梨幼果多酚粗品对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radicals,DPPH)自由基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate)radicals,ABTS~+·)、亚硝酸基的IC50值分别为:151.07、152.48、490.35μg/m L;梨幼果多酚纯品对DPPH自由基、ABTS~+·、亚硝酸基的IC_(50)值分别为:122.12、130.78、392.09μg/m L;纯化后的多酚样品抗氧化能力比粗品有所增强。     

大孔树脂纯化黄秋葵黄酮及其体外抗氧化活性研究

以黄秋葵为原料,以总黄酮为研究对象,开展了总黄酮提取、分离纯化及抗氧化活性的研究。采用静态和动态吸附-解吸实验对8种不同型号大孔树脂进行筛选,以吸附、解析效果为指标,考察大孔树脂纯化黄酮的工艺参数,并利用DPPH、ABTS、Fe3+法测定黄秋葵黄酮体外抗氧化活性。结果表明AB-8型大孔吸附树脂纯化效果最好,最佳工艺条件如下:上样液质量浓度为0.927 mg/m L,上样量为50 m L,用5 BV的30%乙醇作为解吸剂,以1.0 m L/min的洗脱速度进行解吸。抗氧化结果显示黄酮提取物对DPPH、ABTS自由基有明显的清除能力(IC50值分别为0.440 mg/m L和0.256 mg/m L),并对Fe3+表现出了较高的还原能力。     

大孔树脂分离纯化菠萝蜜果皮黄酮工艺及其抗氧化活性研究

本实验以菠萝蜜果皮的黄酮粗提液为供试液,通过静态吸附解析从6种极性不同的大孔树脂中筛选出NKA树脂作为最佳分离纯化树脂,并对NKA柱层析的动态吸附解析条件进行探索,得到最佳上样浓度为0.90 mg/m L、上样体积为200 m L、洗脱剂用量为120 m L;通过柱层析的单因素和正交实验,得到最佳纯化工艺为:上样流速和洗脱流速4 m L/min,上样p H5,以70%乙醇洗脱,此条件下,黄酮回收率高达96.02%;过柱后样品的黄酮纯度由原来的16.74%提高到84.42%,提高了4.04倍,表明NKA树脂对菠萝蜜果皮黄酮的富集纯化效果显著。对比纯化前后黄酮的体外抗氧化活性,结果表明,经NKA柱层析后,随着黄酮纯度提高,样品的体外抗氧化活性也显著提高。     

高良姜残渣黄酮的分离纯化及其抗氧化活性

本研究以提取挥发油后的高良姜残渣为原料提取黄酮,采用7种大孔树脂进行静态吸附和解吸试验,筛选出最佳分离纯化树脂,再通过柱层析的动态吸附和洗脱试验,优化出分离纯化条件,并测定纯化前后的黄酮纯度和抗氧化活性。结果表明,XDA-6树脂最适合分离纯化高良姜黄酮,最佳纯化条件为上样流速2 BV/h,上样液浓度2 mg/mL,上样液体积31.6 BV,洗脱液为70%(v/v)乙醇,洗脱液流速2.5 mL/min,洗脱液用量3.1 BV,在此条件下,黄酮的纯度由43.55%±0.15%提高到85.42%±0.64%;纯化后的高良姜黄酮对DPPH与超氧阴离子自由基的清除率和还原能力均有所提升,清除DPPH和超氧阴离子的IC₅₀值分别由纯化前的0.014、0.222 mg/mL降低到纯化后的0.012、0.186 mg/mL。     

金针菇黄酮的制备、纯化及对PC12神经细胞的保护作用

优化了金针菇黄酮超声辅助提取的工艺条件,比较了D101,D103,NKA-9,AB-8和HPD100 5种大孔树脂对金针菇黄酮静态吸附率和解吸率的影响,筛选出适合分离金针菇黄酮的大孔树脂,并优化分离纯化参数。评价金针菇黄酮的体外抗氧化能力,同时考察金针菇黄酮对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用。结果表明:金针菇黄酮的最佳提取工艺条件是:乙醇含量70%(v/v),提取温度60℃,超声功率200 W,料液比1∶40(g/m L);AB-8大孔树脂为分离纯化金针菇黄酮的最佳树脂,其分离纯化金针菇黄酮的动态吸附和解吸最佳工艺参数为上样质量浓度1.6 mg/m L、上样流速2.0 BV/h、洗脱剂为90%乙醇,洗脱流速2.0 BV/h。纯化的金针菇黄酮对DPPH、ABTS和羟基自由基的半数有效质量浓度值分别为(38.7±0.08)μg/m L、(33.4±0.12)μg/m L和(30.2±0.05)μg/m L,具有一定的铁离子还原能力。金针菇黄酮预处理能明显改善H_2O_2诱导PC12细胞损伤的细胞形态,并浓度依赖性抑制H_2O_2诱导的PC12细胞损伤。与模型组(37.73%)相比,金针菇黄酮预处理组(10~50μg/m L)明显提高了H_2O_2诱导的PC12细胞存活率(45.7%~82.6%)。金针菇黄酮预处理能显著降低细胞LDH的泄漏率,与模型组(388.0%)相比,30,40μg/m L和50μg/m L金针菇黄酮预处理组细胞LDH泄露率分别为249.2%,179.3%和134.3%,表明金针菇黄酮对H_2O_2诱导损伤的PC12细胞有显著的神经保护作用。     

地榆多酚分离纯化及其抗氧化性研究

通过比较7种大孔树脂对地榆多酚的吸附率和解吸率的影响,筛选出XAD-8树脂适宜分离地榆多酚。地榆多酚分离纯化的条件为:上样浓度2.5 mg/m L,p H5.0,平衡吸附时间3 h,洗脱液乙醇体积分数60%,上样流速1.0 m L/min,洗脱流速1.5 m L/min,纯化后地榆多酚纯度由20.79%提高到62.97%。地榆多酚具有较强的抗氧化能力,清除羟自由基和还原能力均高于VC,地榆多酚对羟自由基和DPPH自由基的半抑制质量浓度(IC50)分别为0.179 mg/m L和0.691 mg/m L。     

利用AB-8大孔树脂纯化‘黑宝石’李果实花色苷的研究

本文以‘黑宝石’李果实为材料,实验通过AB-8大孔树脂静态和动态条件下的吸附和解吸优化了AB-8大孔树脂纯化花色苷的条件,同时对纯化前后花色苷的成份和含量及抗氧化能力的变化进行了研究。结果表明,最佳纯化工艺条件:以浓度0.015 mg/m L、p H3.5的提取液,流速1.0 m L/min进行上样;以流速0.5 m L/min、80%的乙醇进行洗脱。纯化花色苷的抗氧化能力有所提高,在浓度小于100μg/m L时,纯化花色苷对DPPH自由基的清除能力明显高于粗提物对DPPH自由基的清除能力;在浓度为10和15μg/m L时,纯化花色苷样品对ABTS+·自由基的清除能力分别为粗花色苷的1.24和1.07倍。‘黑宝石’李中的花色苷为矢车菊素-3-葡萄糖苷和矢车菊素-3-芸香糖苷,纯化后两种花色苷单体的含量分别达到261.6 mg/L和26.6 mg/L。研究成果将为李花色苷性质研究、李资源开发和深加工转化提供理论依据和技术支撑。     

大孔树脂分离纯化黑穗醋栗叶片总黄酮的研究

黑穗醋栗叶片中含有丰富的黄酮类物质,此类物质具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌消炎等多种功效,是一类非常重要的天然产物。本文采用6种大孔树脂(AB-8、NKA-9、D101-1、X-5、D4006、D4020)对从黑穗醋栗叶片中得到的黄酮粗提液进行分离纯化,通过对大孔树脂的静态吸附及解吸的研究,初步筛选出吸附和解吸能力较好的3种大孔树脂(NKA-9、D4020、D101-1)。继续进行大孔树脂分离纯化黑穗醋栗叶片总黄酮吸附及解吸动力学和吸附等温线的试验,最终确定大孔树脂分离纯化黑穗醋栗叶片中总黄酮的最佳条件:在25℃下,使用NKA-9大孔树脂,纯化浓度为0.9311 mg/m L的黄酮粗提液,体积60 m L,流速1.0 m L/min;洗脱剂(无水乙醇)用量100 m L,流速1.0 m L/min。用Sephadex LH-20凝胶分离得到的黄酮化合物组份Ⅰ,通过高效液相色谱测定并计算得到标准曲线,测得纯度为86.37%。     

微波辅助提取雪莲果中绿原酸及其纯化的工艺研究

通过单因素实验和正交实验建立了微波辅助提取与大孔吸附树脂纯化雪莲果中绿原酸的工艺。最佳提取工艺参数为:40%乙醇为溶剂,料液比1:18,中火提取4 min。在此条件下,雪莲果中绿原酸的提取量为0.4455 mg/g。比较了NKA-Ⅱ和NKA-9两种大孔吸附树脂的静态吸附特性,确定出NKA-9型大孔吸附树脂是一种吸附分离雪莲果中绿原酸的较佳材料。该树脂对雪莲果中绿原酸的最佳分离纯化工艺为:上样液浓度为0.2 mg/m L,p H=2,流速为1.5 m L/min,其吸附量为2.25 mg/g。采用80 m L 50%的乙醇以2.5 m L/min的流速进行洗脱,最后浓缩干燥得到纯度为37.68%的绿原酸粗品。     

龙牙楤木中黄酮类化合物的大孔树脂纯化工艺研究

以龙牙楤木嫩芽提取物为原料,采用大孔树脂对其中黄酮类化合物进行纯化,并对其黄酮含量、1,1–二苯基–2–三硝基苯肼(1,1–diphenyl–2–picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除活性进行测定。通过比较7种大孔树脂对龙牙楤木黄酮静态吸附及解吸能力,筛选出最适纯化黄酮的大孔吸附树脂AB–8,并进一步对AB–8的动态吸附及解吸条件进行优化,获得最适条件为:上样流速3 BV/h,上样浓度3.5 mg/mL,上样量3 BV;最佳洗脱条件为:乙醇洗脱剂流速1.0 BV/h,洗脱剂用量3 BV,洗脱剂体积分数为70%。在此工艺条件下,总黄酮含量由184 mg/g提升至754.4 mg/g。结果表明,大孔树脂AB–8适用于分离纯化龙牙楤木芽中总黄酮,且经纯化后的总黄酮含量提高了4.1倍,纯化后总黄酮对DPPH自由基清除能力的IC50值为0.51 mg/mL。     

甘蔗渣多酚的纯化及抗氧化活性研究

本文利用大孔吸附树脂通过静态吸附与解吸实验研究了甘蔗渣中多酚的分离纯化工艺,并利用DPPH自由基体系、邻苯三酚法检测了甘蔗渣多酚的抗氧化活性。结果表明:NKA-9型树脂是富集纯化甘蔗多酚的最好材料;NKA-9树脂的最佳动态吸附条件为甘蔗多酚液浓度2.50 mg/mL,流速1.00 mL/min,最优洗脱条件为乙醇浓度60%,洗脱流速1.00 mL/min,洗脱体积10 BV,此条件下甘蔗多酚的收率为72.32%,纯度可达39.21%;抗氧化活性实验表明,甘蔗多酚对超氧阴离子O2-.和DPPH都具有良好的清除效果,并随多酚浓度的增加,其清除效果也相应提高;与Vc相比,甘蔗多酚对DPPH的清除效果不及Vc,但对超氧阴离子O2-.的清除效果明显高于Vc;甘蔗多酚浓度为3.00 mg/mL时,对超氧阴离子的清除率最高,达到82.3%,甘蔗多酚浓度为5.00 mg/mL时,其对DPPH溶液的清除率达80.43%。     

大孔树脂纯化蓝莓总黄酮及其抗氧化活性研究

研究蓝莓总黄酮的大孔树脂纯化工艺及其抗氧化活性.以静态饱和吸附量和解析率为指标,对4种大孔树脂(AB-8、NKA-9、NKA-Ⅱ、D101)进行筛选;以回收率为指标,通过选用L9(34)正交表设计实验,确立纯化总黄酮的最佳条件.以Vc和芦丁为对照品,考察蓝莓总黄酮对DPPH自由基(DPPH·)和羟基自由基(·OH)的抗氧化活性.结果表明NKA-Ⅱ纯化蓝莓总黄酮效果最好,最佳纯化工艺为:上样浓度1.355mg·mL-1,洗脱pH为3,洗脱乙醇浓度70％,洗脱流速2mL·min-1.在此条件下纯化的总黄酮纯度可达41.41％,比未纯化前提高33.94倍.蓝莓总黄酮对DPPH·和·OH的抗氧化活性以半数抑制浓度(IC50)表示分别为0.0217和0.1037mg·mL-1.NKA-Ⅱ大孔树脂综合性能较好,适于分离纯化蓝莓总黄酮,蓝莓总黄酮具有较强的抗氧化活性.     

奶渣蛋白肽的分离纯化及其抗氧化活性研究

以牦牛奶渣为原料,采用贯筋藤蛋白酶酶解制备奶渣蛋白肽,通过超滤、Q-Sepharose FF凝胶层析进行分离纯化,并分别测定各分离组分的体外抗氧化活性值。结果表明:奶渣蛋白肽Q-Sepharose FF凝胶层析分离的最优工艺条件为NaCl洗脱浓度0.1 mol/L,上样量40 mg/mL,洗脱流速2.0 mL/min,共分离出A,B,C三个组分,其中组分A的抗氧化能力最强,对ABTS自由基清除率的IC_(50)为4.379 mg/mL,DPPH自由基的清除率IC_(50)为3.921 mg/mL,还原能力IC_(50)为1.196,羟自由基清除率IC_(50)为5.076 mg/mL。     

超声提取食用玫瑰花总酚及其大孔树脂纯化前后抗氧化活性

以昆明安宁八街食用玫瑰为原料,对其多酚提取工艺及纯化前后抗氧化活性进行研究。结果表明,提取温度是影响食用玫瑰多酚提取效果的主要因素;超声提取的最佳条件为乙醇体积分数70%、提取温度40℃、料液比1∶25(g/m L)、提取3次,提取时间每次40 min,经实验验证此条件下总多酚含量为93.81 mg/g;通过9种树脂静态吸附及解析性能比较,确定XAD-7型树脂为多酚分离纯化的理想树脂;对比纯化前后玫瑰花多酚对DPPH自由基、ABTS自由基的氧化能力,纯化前对DPPH自由基和ABTS自由基清除能力IC50值分别为209.27、505.67μg/m L;纯化后分别为96.30、378.09μg/m L;结果表明玫瑰花多酚经XAD-7型大孔树脂纯化后能提高其抗氧化活性。     

芍药花多酚的纯化及其抗氧化活性研究

研究大孔吸附树脂纯化芍药花多酚的条件和纯化后多酚的抗氧化能力。采用静态试验和动态试验确定纯化条件,计算纯化后多酚的含量。在供试的9种大孔吸附树脂中,HPD100树脂的吸附和洗脱效果最好。在室温下,以50%乙醇为洗脱剂,吸附流速和洗脱流速均为10 m L/min时,纯化的芍药花多酚含量为721.72 mg GAE/g DW,是未纯化前的1.57倍。通过DPPH、FRAP和ABTS三种方法测得纯化后芍药花多酚的抗氧化能力是未纯化前粗提物的1.35、1.44、1.62倍。     

荸荠皮总黄酮的纯化及其抗氧化活性研究

利用大孔吸附树脂纯化荸荠皮总黄酮,探讨总黄酮的纯化条件,并通过总抗氧化性能试验、ABTS试验和DPPH试验评价了总黄酮抗氧化活性。试验结果表明,用乙醇水溶液梯度洗脱D101大孔吸附树脂,获得纯度高、抗氧化活性好的荸荠皮总黄酮,黄酮收率为58.52%,纯度为70.64%。所得总黄酮具有良好的还原能力,为0.60 mmol TE(Trolox当量)/g,和良好的ABTS·+、DPPH自由基清除活性,IC50分别为1.86、0.49 mmol TE/g,其中ABTS·+自由基清除性能均大于对照物Trolox和芦丁,DPPH自由基清除性能大于芦丁。     

大孔树脂纯化酸浆果实多酚及其生物活性研究

以酸浆果实为研究对象,多酚经乙醇浸提,采用9种大孔吸附树脂对酸浆果实多酚进行初步纯化,利用化学方法对酸浆果实多酚的抗氧化活性以及对酶活性的抑制作用进行了研究。结果表明AB-8树脂纯化酸浆果实多酚效果较好,最佳纯化条件为:样液质量浓度0.3 mg/m L、p H为样品本身的p H值、上样流速1 m L/min、乙醇体积分数为80%,洗脱流速为1 m L/min。酸浆果实多酚具有一定还原能力,对OH自由基和DPPH自由基的IC50分别为0.604 4 mg/m L和2.262 mg/m L;并对胰脂肪酶、α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶有抑制作用,其IC50值分别为0.826 2 mg/m L、0.817 8 mg/m L和1.011 mg/m L。本研究表明酸浆果实多酚具有一定的体外抗氧化活性,并对胰脂肪酶、α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的活性有抑制作用。