复合生物保鲜剂对金黄色葡萄球菌的抑菌作用研究

研究了壳聚糖、溶菌酶与茶多酚配制而成的复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的抑菌作用。采用琼脂平板打孔法确定复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC),结合抑菌率、抑菌活力、细菌生长曲线、膜完整性、AKP活性与细菌超微结构,综合评价复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的影响。结果得出,复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的MIC与MBC分别为0.8 mg/mL与1.6 mg/mL,随着作用时间的延长,复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的生长抑制明显,菌体的细胞壁与细胞膜完整性受到破坏,菌体细胞中的AKP量增多,影响菌体细胞的代谢循环,菌体内部的核酸与蛋白质外泄,抑制其正常生长。由细菌超微结构观察发现,菌体细胞经复合保鲜剂处理后,造成菌体扭曲变形,细胞壁破裂,细胞质外渗。表明复合保鲜剂可破坏菌体的细胞壁,影响胞膜稳定性与胞内环境,最终导致菌体死亡。     

复合保鲜剂对腐生葡萄球菌的抑菌活性及其作用机理

以山梨酸钾、双乙酸钠和异抗坏血酸钠作为复合保鲜剂的基本成分,研究其对虾皮中腐生葡萄球菌的抑菌作用。通过酶标法来确定复合保鲜剂对腐生葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC),测定抑菌活力、细菌生长曲线、细胞膜完整性、碱性磷酸酶(AKP)含量等指标,并结合细菌超微结构观察,综合评价复合保鲜剂对腐生葡萄球菌的作用效果。结果表明:复合保鲜剂能明显降低腐生葡萄球菌的生长速率,其最低抑菌浓度(MIC)为109μg/mL,最低杀菌浓度(MBC)为219μg/mL,抑菌活力均在使用初期的作用最强(约3h);随着作用时间的延长,菌液中的碱性磷酸酶量显著增多,在260nm处的吸收值显著增加,表明菌体内部核酸与蛋白质外泄,菌体细胞壁与细胞膜受到破坏。此外,电镜扫描结果显示,试验组的菌体发生干瘪破裂现象,细胞质从细胞内大量渗出。故一定浓度的复合保鲜剂对虾皮中的腐生葡萄球菌有抑制(杀灭)作用,对细胞体有一定破坏作用。     

卵黏蛋白抑菌活性及其作用机制

研究了卵黏蛋白对导致禽蛋腐败的常见微生物——金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌以及对致龋齿的变异链球菌的抑菌活性及作用机制。采用最小抑菌浓度(MIC)和牛津杯法测定卵黏蛋白的抑菌活性,分析卵黏蛋白对其中3种菌生长动力曲线的影响;利用流式细胞仪与扫描电镜分析其抑菌机制。结果表明:卵黏蛋白对金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、变异链球菌的MIC分别为62.5,125,1 000μg/m L,并有明显的抑菌圈产生;对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌的抑制作用较差,无明显抑菌圈。卵黏蛋白对菌体生长起到延缓对数期或缩短稳定期的作用,并使菌体细胞膜的通透性发生改变。扫描电镜结果显示,卵黏蛋白使菌体细胞形态发生变化,细胞膜损伤或者破坏。卵黏蛋白通过对菌体细胞膜造成损害而发挥其抑菌活性。     

鹿蹄草素对金黄色葡萄球菌的抑制作用及其机理研究

对鹿蹄草素作用下的金黄色葡萄球菌生长曲线、膜通透性和结构进行了研究,探讨鹿蹄草素抑菌和杀菌机理。鹿蹄草素能够有效抑制金黄色葡萄球菌的生长,其最小抑菌质量浓度为0.16mg/mL;鹿蹄草素对金黄色葡萄球菌具有较强的杀菌作用,最小杀菌质量浓度为0.2mg/mL。鹿蹄草素作用于金黄色葡萄球菌后,细胞膜通透性与空白对照组相比显著提高。扫描电镜的结果表明,鹿蹄草素作用后菌体细胞结构被破坏,细胞壁呈溶解状,菌体细胞间相互粘结,细胞与细胞间的界限变得模糊。试验结果表明,鹿蹄草素的抑菌性和杀菌功能与其对金黄色葡萄球菌细胞膜和细胞壁结构的破坏直接相关。     

肉桂酸钾的抑菌性能研究

采用生长速率法和细胞死活染色鉴别法评价肉桂酸钾对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、芽孢杆菌和酿酒酵母的生长抑制作用,并测定其最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)。通过检测细胞膜完整性和膜电位研究肉桂酸钾对4种微生物的抑菌机制。结果显示,肉桂酸钾对4种菌的生长表现出不同程度的抑制作用,其中对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC均为5mg/m L,对芽孢杆菌的MIC为10 mg/mL,对酿酒酵母的MIC为250μg/m L。经肉桂酸钾处理的微生物细胞膜的完整性受到破坏,膜电位降低,从而影响了微生物的正常生长和繁殖。研究表明,肉桂酸钾具有广谱的抑菌能力,其在食品防腐领域具有重要的应用潜力。     

山豆根提取物抗氧化和抑菌活性的研究

研究山豆根不同溶剂(氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇)提取物的抗氧化活性和抑菌活性,通过测定四种提取物的DPPH自由基、ABTS自由基、羟自由基的清除能力以及还原能力来评估其抗氧化能力;并通过测试各提取物对7种实验菌的最低抑菌浓度(MIC)来评估它们的抑菌活性。结果表明:山豆根四种溶剂提取物均具有一定的抗氧化能力和抑菌活性,其中,对DPPH自由基的清除效果最佳,EC50均小于0.2mg/m L;乙酸乙酯提取物对金黄色葡萄球菌有明显的抑菌作用,其MIC为0.313mg/m L。     

复合生物保鲜剂对荧光假单胞菌的抑菌活性及作用机理

目的:研究由10.0 g/L壳聚糖、3.0 g/L茶多酚与0.3 g/L溶菌酶组成的复合生物保鲜剂对荧光假单胞菌的抑菌机理。方法:采用平板打孔法确定复合生物保鲜剂对荧光假单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并对抑菌率、抑菌活力、细菌生长曲线、细胞膜完整性、碱性磷酸酶(AKP)含量等指标进行测定,同时结合细菌超微结构观察,综合评价复合生物保鲜剂对荧光假单胞菌的作用效果。结果:复合生物保鲜剂对荧光假单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC)分别为3.3 mg/m L与6.6 mg/m L,其抑菌率分别为33.49%与61.54%,抑菌活力在作用初期效果最佳。结论:随着作用时间的延长,复合保鲜剂对荧光假单胞菌的生长有抑制效果,菌体细胞壁与细胞膜的完整性受到影响,细胞中的AKP量增多。同时,菌体内部的核酸与蛋白质外泄,影响细胞的代谢循环。细菌超微结构观察发现,菌体在扭曲变形的同时,还发生干瘪破裂现象,菌体外膜覆有泡状物,细胞壁发生溶解,细胞质从菌体细胞体内大量渗出,最终导致菌体死亡。     

工业大麻叶对金黄色葡萄球菌的抑菌机制

探索工业大麻叶的抑菌组成及对金黄色葡萄球菌的抑菌机制,为以工业大麻叶成分为先导化合物开发新型天然防腐剂提供理论依据。工业大麻叶乙醇提取物经乙酸乙酯萃取、硅胶柱分离,采用微量二倍稀释法确定最低抑菌浓度(MIC),获得高活性组分,GC-MS分析抑菌组成;研究作用前后菌体细胞壁完整性、细胞膜通透性、能量代谢和氧化损伤变化,探讨抑菌机制。结果表明,工业大麻叶Fr5(石油醚和乙酸乙酯的体积比为1∶1)组分抑菌效果最佳,对金黄色葡萄球菌的MIC为31.25μg/mL,GC-MS共鉴定出24种化合物;经Fr5处理后,细菌表面明显凹陷,胞外碱性磷酸酶(AKP)活力升高,培养液电导率升高,核酸相对浓度增加,可溶性蛋白质质量浓度增大,菌体三磷酸腺苷(ATP)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性均先升后降。工业大麻叶Fr5可破坏金黄色葡萄球菌细胞壁和细胞膜结构,导致细胞膜通透性增加,内容物外泄,进而影响菌体能量代谢并造成质膜氧化损伤,最终抑制细胞生长。     

大果沙棘总黄酮体外抗氧化和抑菌作用研究

研究大果沙棘总黄酮的体外抗氧化和抑菌活性。采用DPPH和ABTS自由基清除率检测大果沙棘总黄酮体外抗氧化活性;通过测定抑菌圈直径和最低抑菌浓度检测大果沙棘总黄酮的抑菌作用。100μg/m L的大果沙棘总黄酮对DPPH和ABTS自由基的清除率分别为65.1%和92.3%,接近芦丁和儿茶素对照品;抑菌试验结果显示:0.125 mg/m L~1.0 mg/m L的大果沙棘总黄酮对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌有显著的抑菌效果。     

艾叶水提物和酸提物的抗氧化及抗菌活性比较

为比较研究艾叶水提物和酸提物抗氧化及抗菌的作用。分别采用去离子水和柠檬酸溶液提取艾叶,得到两种提取物,测各自的总黄酮、总多酚和多糖含量;通过DPPH自由基、羟自由基及ABTS自由基来评价提取物的抗氧化能力;利用牛津杯法测定提取物的抑菌活性,并探讨其抑菌机制。结果表明：艾叶水提物中总黄酮、总多酚及多糖含量分别为208.03、51.77和398.72 mg/g,艾叶酸提物分别为80.39、25.44和453.45 mg/g。在一定浓度范围内,艾叶水提物和艾叶酸提物均有较强抗氧化能力,对DPPH自由基清除率的半数抑制浓度（median inhibition concentration,IC50）分别为33.10和54.52 μg/mL;对羟自由基清除率的IC50值分别为2.92和1.63 mg/mL;对ABTS自由基清除率的IC50值分别为0.17和0.32 mg/mL。艾叶水提物无明显抑菌效果;但艾叶酸提物对金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、沙门氏菌具有显著抑菌活性,最小抑菌浓度分别为0.10、0.10和0.20 g/mL。通过测定抑菌动力学、细胞膜通透性实验证实酸提物能有效抑制致病菌生长、改变细胞膜通透性;扫描电镜和聚丙烯酰胺凝胶电泳证实酸提物能破坏细菌细胞壁形态、抑制细菌的蛋白质合成。柠檬酸溶液提取法比水提法更适用于艾叶活性成分的提取,艾叶酸提物更具有食品防腐剂和抗氧化剂的潜力。     

香芹酚对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌细胞膜的影响

研究香芹酚对革兰氏阴性菌大肠杆菌(ATCC 8735)和革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌(ATCC 3101)的形态、细胞膜的完整性与通透性的影响。结果表明:与对照组相比,经香芹酚处理后的样品组具有较高的紫外吸光值、电导率值和酶活力。随着香芹酚作用时间的延长,实验组的紫外吸光值、电导率值和酶活性均有快速的增加,并达到一个相对稳定的状态。同时,扫描和透射电镜图显示,经香芹酚作用6~8h后,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的形态均有明显改变。香芹酚在最低抑菌浓度(MIC 0.31mg/m L)作用于大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,能够破坏菌体细胞膜和细胞壁的完整性、并引起细胞膜通透性和菌体形态的改变。     

银杏叶提取液对腐生葡萄球菌的作用机理

为研究银杏叶提取液对水产品特定腐败菌--腐生葡萄球菌的作用机理,作者采用肉汤稀释和平板计数法测定其对腐生葡萄球菌的最小抑菌浓度(Minimal Inhibitory Concentration, MIC),并通过细菌生长曲线、碱性磷酸酶量、电导率与蛋白质质量浓度,综合评价银杏叶提取液对腐生葡萄球菌菌体生长、细胞壁和细胞膜通透性、完整性的影响;由扫描电镜观察不同处理浓度的银杏叶提取液对腐生葡萄球菌菌体的作用效果。结果得出:银杏叶提取液对腐生葡萄球菌的MIC为100 mg/mL;MIC与2MIC质量浓度下银杏叶提取液对腐生葡萄球菌的抑菌率分别为60.58%和81.34%。提取液作用于腐生葡萄球菌后,菌体生长受到抑制,细胞壁完整性被破坏,细胞膜通透性随之提高;由扫描电镜观察表明,银杏叶提取液处理后的腐生葡萄球菌出现细胞变形、胞间粘结等现象,菌体结构受到影响,最终得出银杏叶提取液主要通过对其菌体细胞膜和细胞壁的破坏实现其抑菌效果。     

丁香油与月桂酸对金黄色葡萄球菌的协同抑制作用

该研究探讨了丁香油、百里香油、薄荷油等三种植物精油以及中链脂肪酸月桂酸对金黄色葡萄球菌的抑制作用,筛选出具有协同抑制作用的组合丁香油与月桂酸,测定协同组合对金黄色葡萄球菌生长、细胞膜通透性的影响,并将该组合制成抑菌保鲜液,应用于生鲜米粉保鲜。结果表明,丁香油、薄荷油、百里香油及月桂酸对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为2.00μg/mL、4.00μg/mL、7.50μg/mL以及9.00μg/mL,丁香油和月桂酸联合使用,在浓度为1/4 MIC丁香油+1/4 MIC月桂酸时具有协同抑菌效果,此时分级抑菌浓度系数为0.50。丁香油与月桂酸协同处理使金黄色葡萄球菌细胞膜损伤,增加通透性。抑菌保鲜液对生鲜米粉中的菌落总数、金黄色葡萄球菌均有抑制作用,对维持生鲜米粉品质具有积极影响。72 h贮藏期间,处理组初始菌落总数比对照组至少低1.50 lg CFU/g;金黄色葡萄球菌降低1.65 lg CFU/g;酸度值比对照组至少低0.8°T;感官评价得分均高于对照组。结果表明,丁香油与月桂酸协同组合制成抑菌保鲜液有可能成为生鲜米粉的可替代复合保鲜液。     

肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用及抑菌机理研究

研究了肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用及其抑菌机理。本文采用滤纸片扩散法测定抑菌圈大小,双倍稀释法测定最低抑菌浓度、最低杀菌浓度,以此评价肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌性,通过扫描电镜观察、胞膜通透性、胞膜完整性、膜电位实验,阐述肉桂醛抑菌的机理。结果表明:肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈分别为21.75 mm、29.37mm,最低抑菌浓度均为0.25μL/m L,最低杀菌浓度均为0.5μL/m L;肉桂醛破坏了菌体细胞的形态,出现形变;随着肉桂醛浓度的增大,悬液中相对电导率迅速升高,表明肉桂醛影响细菌的膜通透性,而成倍数增长的核酸、蛋白质含量表示胞膜的完整性遭到破坏,肉桂醛降低菌体膜电位,影响其代谢活性,从而抑制细菌生长。肉桂醛主要作用于细胞膜,适宜作为天然防腐剂,抑制食品中腐败菌和致病菌的生长,延长食品货架期。     

槐糖脂对金黄色葡萄球菌的抑菌机理

通过测定槐糖脂抑制金黄色葡萄球菌最低抑菌质量浓度和生长曲线,探讨槐糖脂对金黄色葡萄球菌的抑菌机理,同时利用扫描电镜和透射电镜观察金黄色葡萄球菌显微形态。结果表明:槐糖脂能有效抑制金黄色葡萄球菌生长,且抑制作用体现质量浓度依赖特性,最小抑菌质量浓度(MIC)为1.5625mg/mL。酸性和高温条件不影响槐糖脂抑菌性,表明其具有很好的稳定性。电镜结果表明,槐糖脂对金黄色葡萄球菌的抑制可能源于其对菌体细胞壁和细胞膜的破坏作用。     

壳聚糖复合保鲜剂对荧光假单胞菌的抑菌活性

该实验以质量分数1.5%壳聚糖、0.14%ε-聚赖氨酸、0.15%D-异抗坏血酸钠组成复合保鲜剂,以荧光假单胞菌为实验菌株,探究壳聚糖复合保鲜剂对水产品中的优势菌的抑菌性能和机理。实验方法：通过测定最小抑菌浓度(MIC)、抑菌圈、细菌生长曲线考察保鲜剂对荧光假单胞菌的抑菌活性,测定OD₂₆₀值、ATP酶和AKP酶活性的变化,细胞超微结构(SEM)和SDS凝胶电泳法研究保鲜剂的抑菌机制。结果表明：壳聚糖复合保鲜剂对荧光假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)为2.24 mg/m L。壳聚糖复合保鲜剂有着显著的抑菌活性,壳聚糖复合保鲜剂导致菌体的细胞壁膜通透性增大、完整性被破坏,菌体内ATP和AKP酶活性被抑制,显著低于(P<0.05)对照组;SDS凝胶电泳表明壳聚糖复合保鲜剂使菌蛋白条带颜色变浅且造成部分蛋白条带消失;细菌超微结构(SEM)显示壳聚糖复合保鲜剂使菌体发生变形破裂,内容物大量流出,导致菌体死亡。结论：该研究证明了壳聚糖复合保鲜剂良好的抑菌性能,研究了保鲜剂对荧光假单胞菌的抑菌机理,为水产品可食性涂膜保鲜的研发提供理论支持。     

茶槲寄生“螃蟹脚”正丁醇萃取相对金黄色葡萄球菌抑菌机理的研究

本文研究了茶槲寄生"螃蟹脚"醇提各萃取相的抑菌作用及正丁醇萃取相(NVBEs)对金黄色葡萄球菌的抑菌机理。采用滤纸片扩散法测定抑菌圈直径(DIZ)的大小,对倍稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),来评价"螃蟹脚"醇提各萃取相对金黄色葡萄球菌(S.aureus)、大肠杆菌(E.coli)、鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)、单核细胞增生李斯特菌(L.monocytogenes)4种食源性腐败菌的抑制性;通过光学显微镜和扫描电镜观察、胞膜通透性、胞壁完整性和酶活性等实验,研究了NVBEs抑菌机理。结果表明,"螃蟹脚"醇提各萃取相对S.aureus、E.coli、S.typhimurium和L.monocytogenes均有明显抑制效果,其中NVBEs抑菌活性较好,对S.aureus抑制效果最好,DIZ为9.84±0.57 mm,MIC为3.52 mg/m L,MBC为7.04 mg/m L。抑菌机理结果表明:NVBEs可增加S.aureus细胞壁及细胞膜的通透性,破坏菌体细胞结构,引起细胞内含物如核酸和蛋白质等外泄;引起遗传物质DNA的改变,使菌体细胞形态结构出现异常;影响菌体酶的代谢活动,从而抑制细菌的生长。     

夹江石斛水提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌作用及机制研究

探讨夹江石斛水提取物(DJWEs)对金黄色葡萄球菌的抑菌作用及抑菌机制。采用96孔板微量肉汤稀释法以及平板培养法检测DJWEs对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC),并通过测定培养液中碱性磷酸酶(AKP)、电导率、大分子物质吸光度(OD)值以及菌体DAPI的荧光强度,研究DJWEs对金黄色葡萄球菌细胞壁通透性、细胞膜通透性和核酸合成的影响。DJWEs对金黄色葡萄球菌的MIC浓度为70 mg/mL;经DJWEs处理后,金黄色葡萄球菌培养液中AKP的含量明显增高(P0.05),但电导率和大分子物质的OD值差异无统计学意义(P0.05),而DAPI染色后核酸荧光强度有显著变化(P0.01)。DJWEs对金黄色葡萄球菌有较强的抑菌作用,抑菌机理可能涉及影响金黄色葡萄球菌的细胞壁通透性和核酸DNA和RNA合成。     

10-HDA对金黄色葡萄球菌的抑菌机理研究

利用倍半稀释法确定10-HDA对金黄色葡萄球菌的最小抑菌质量浓度为0.062 mg/m L。通过对金黄色葡萄球菌生长曲线、细胞膜通透性、细胞超微结构、细胞代谢、菌体蛋白表达的影响研究,探讨10-HDA对金黄色葡萄球菌的抑菌机理。结果表明10-HDA可破坏金黄色葡萄球菌细胞的完整性,使细胞膜通透性增加,胞内大量离子以及具有紫外吸收的大分子物质泄漏,细胞代谢发生紊乱。原子力显微镜结果表明,10-HDA可破坏菌体细胞结构,导致细胞表面凹陷,形成褶皱。SDS-PAGE电泳结果显示,10-HDA对金黄色葡萄球菌蛋白表达有明显影响,可抑制部分蛋白的正常表达。结论:10-HDA通过使金黄色葡萄球菌细胞膜通透性增加,破坏菌体正常形态及代谢活力,进而使细胞生长受到抑制,最终导致死亡。     

双歧杆菌细菌素Bifidocin A对金黄色葡萄球菌的抑菌作用及其机制

Bifidocin A是由Bifidobacterium animalis BB04代谢合成的一种新型广谱高效细菌素。以革兰氏阳性的金黄色葡萄球菌为测试敏感菌,分析细菌素Bifidocin A的最低抑菌浓度及不同质量浓度下的抑菌效果,并从敏感菌细胞形态与结构、细胞膜的通透性、细胞膜的完整性以及细胞膜质子移动势的变化4个角度分别探讨该细菌素的抑菌作用机制。结果表明,细菌素Bifidocin A对金黄色葡萄球菌CVCC 26112的最低抑菌浓度为0.058μg/m L,抑菌活性较强且存在浓度依赖性;并初步推测其抑菌作用机制是通过耗散细胞膜质子移动势,增加细胞膜通透性,形成孔洞,进而破坏细胞膜完整性,并最终瓦解细胞。