RP-HPLC法测定洋金花中东莨菪碱的含量

建立一种快速测定洋金花中东莨菪碱含量的方法。采用SGE protecol C18(5μm,4.6×250mm)色谱柱,流动相为乙腈-0.07 mol/L磷酸钠溶液(1∶2,v/v),其中磷酸钠溶液含0.0175 mol/L十二烷基硫酸钠,用磷酸调p H值至6.0,检测波长为216 nm,流速1.0 m L/min,进样量20μL。东莨菪碱在35~560μg/m L范围内呈线性,相关系数R=0.9999,该方法目标物质保留时间短,且重复性、精密度、稳定性及回收率均符合要求。本方法用于测定洋金花中东莨菪碱的含量,具有简便、准确和高效等特点。     

RP-HPLC法同时测定新疆野山杏果肉中10种有机酸成分

利用反相高效液相色谱建立同时测定新疆野山杏果肉中草酸、奎宁酸、酒石酸、苹果酸、抗坏血酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸以及富马酸10种有机酸含量的方法。采用60%甲醇超声提取新疆野山杏果肉中有机酸,以Inertsil ODS-SP(4.6 mm×250 mm)C_(18)柱为分析柱,甲醇-(NH_4)H_2PO_4水溶液(p H=2.4)(3∶97,v∶v)为流动相,检测波长210 nm,流动相流速0.5 m L·min~(-1),柱箱温度30℃。结果表明,10种有机酸成分色谱峰分离度良好,方法回收率为93.20%~108.26%之间,RSD3%;检出限为0.01~0.73μg/m L;定量限为0.03~2.39μg/m L。对野山杏果肉有机酸提取方法的考察表明超声提取比回流提取更方便快捷有效。     

HPLC检测黑皮鸡枞菌中的水溶性维生素

研究建立一种简单、快速、可同时检测新鲜黑皮鸡枞菌和菌粉中7种水溶性维生素(维生素C、维生素B_1、维生素B_2、维生素B_6、维生素B_(12)、烟酸和叶酸)的高效液相色谱(high performance liquid chromatographic,HPLC)方法,为黑皮鸡枞菌的深度开发和加工提供科学依据。采用Inertsil ODS-SP(5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,流动相A为0.05 mol/L的KH_2PO_4溶液(pH=6.0),流动相B为甲醇,流速0.8 mL/min,柱温为室温,检测波长为268 nm,梯度洗脱,反相高效液相色谱,紫外检测器。7种维生素标准曲线的线性相关系数R2在0.999 6～1.000 0之间,相对标准偏差RSD在0.31%～2.17%之间,加标回收率在88.07%～106.01%之间,最低检出限为0.15μg/mL～1.52μg/mL,定量限为0.49μg/mL～5.08μg/mL。利用所建方法检测出新鲜黑皮鸡枞菌中含有4种水溶性维生素,菌粉中含有5种水溶性维生素且都以维生素C和烟酸为主,水溶性维生素总量分别达到22.25μg/g和242.41μg/g。     

HPLC测定注射用米铂的含量

目的建立HPLC法测定注射用米铂的含量。方法采用Thermo BDS HYPERSIL-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.1 mol/L磷酸氢二钠溶液(磷酸溶液调节p H值至5.0)(75:25)为流动相;流速为1.0m L/min;检测波长为220 nm。结果米铂在60.02~240.08μg/m L浓度范围内线性较好(r=0.9999),平均回收率为99.85%,RSD为0.33%。结论本方法准确、可靠、操作性强,可用于注射用米铂含量的测定。     

双柱串联反相高效液相色谱测定苹果醋中的有机酸

建立了双柱串联高效液相色谱紫外检测器测定苹果醋中6种有机酸的测定方法。样品用水稀释后采用双C18色谱柱(4.6 mm×250 mm×5μm)进行色谱分离,流动相为0.01 mol/L的磷酸氢二铵溶液(p H2.7),流速1.0 m L/min,在紫外检测器波长为210 nm处进行测定。结果表明:在优化色谱条件下,6种有机酸在线性范围内相关性良好,相关系数R2≥0.999,各添加水平回收率在92.82%~102.12%之间,方法的精密度均小于5.0%,方法的检出限在0.1~0.7 mg/L范围。本方操作简单、准确,适合于分析苹果醋中有机酸的含量。     

高效液相色谱法测定牛羊杂碎等肉类中嘌呤及尿酸

建立同时测定肉类食品中尿酸、鸟嘌呤、次黄嘌呤、黄嘌呤和腺嘌呤的高效液相色谱分析方法,并测定肉类样品中上述4种嘌呤及尿酸的含量。色谱条件:资生堂CAPCELL PAK-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃;流动相为7×10~(-3)mol/L KH_2PO_4-H_3PO_4(pH=3.83),流速1.0 mL/min;检测器为紫外检测器,检测波长254 nm;进样量10μL。结果:在上述条件下4种嘌呤和尿酸分离和测定效果良好,4种嘌呤和尿酸的质量浓度和峰面积在0.05~50μg/mL线性范围内线性关系良好,相关系数均在0.999 6以上,检出限在0.010~0.024μg/mL之间,精密度检测RSD为0.25%~0.81%,各组分回收率为92.0%~105.0%,方法精密度RSD为6.27%~11.09%。结论:该方法简便,快捷,可靠,各组分分离度好,可应用于肉类食品中嘌呤和尿酸的同时分析测定。     

高效液相色谱法测定糕点中丙酸钠、丙酸钙的不确定度评定

正材料与方法(1)检验依据:《食品中丙酸钠、丙酸钙的测定高效液相色谱法》(GB/T 23382-2009)。(2)检验仪器:高效液相色谱仪Varian920/940-LC二极管阵列检测器。色谱条件:色谱柱C18 4.6 mm×250mm 5μm不锈钢柱;流动相为1.5 g/L磷酸氢二铵溶液,用1 mol/L磷酸溶液调p H2.7~3.5(使用时配制),经0.45μm微孔滤膜过滤;流速1.0 m L/min;柱温25℃;进样量20μL;波长214 nm     

利用钛胶高效液相色谱法测定食品中叶酸含量

建立了利用钛胶高效液相色谱法测定食品中叶酸含量的方法。色谱条件:钛胶固定相(250mm×4.6mmi.d.,5μm),流动相为水:甲醇=70:30(v/v)、流动相中含磷酸盐(PBS)20mmol/L,流速0.9mL/min,柱温60℃,检测波长280nm。线性范围为5～25μg/mL,检出限1.9220μg/mL,回收率为92.7%～95.1%,RSD(n=8)<0.68%。应用于食品样品中叶酸的测定,结果满意。     

UPLC-MS/MS测定牛奶中9种青霉素

建立超高效液相色谱-串联四极杆质谱多反应离子监测模式同时测定牛奶中9种青霉素类抗生素(包括羟氨苄青霉素、氨苄青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素、乙氧柰胺青霉素、苯唑青霉素、苄青霉素、苯氧甲基青霉素、甲氧苯基青霉素)残留量的检测方法。样品采用乙腈沉淀蛋白、脱脂后,过HLB小柱净化、富集。以0.01 mol/L乙酸铵水(甲酸调节p H 4.5)-乙腈梯度洗脱,经Agilent Eclipse plus C18色谱柱(2.1×100 mm,粒径1.8μm)分离后,采用MRM模式进行定量定性分析。结果:结果表明9种抗生素在0.1μg/L~100μg/L范围内线性关系良好,高中低浓度回收率在67.7%~92.8%,相对标准偏差(n=6)小于15%,各组分定量限为0.1μg/kg~4μg/kg。     

高效液相色谱法同时测定鸡尾酒中7种合成色素

建立高效液相色谱同时测定鸡尾酒中7种人工合成色素(柠檬黄、胭脂红、苋菜红、亮蓝、诱惑红、日落黄、赤藓红)的方法。方法:利用ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm×5μm)反相色谱柱,流动相为0.02 mol/L乙酸铵-甲醇梯度洗脱,流速0.8 m L/min,柱温35℃,进样量10μL。该方法检出限为0.05~0.1μg/m L,在1.0~50μg/m L范围内线性良好,相关系数R2均大于0.999 88回收率为96.7%~103.3%,RSD为0.61%~1.65%。     

低温碱性脂肪酶型时间-温度指示剂的研究

利用碱性脂肪酶催化三乙酸甘油酯分解导致p H降低,以酸碱指示剂显示颜色变化,研究并确定低温环境的TTI(时间温度指示剂)的反应体系及基本特性。该时间温度指示剂(25 m L)的反应体系为:5 m L三乙酸甘油酯∶20 g/L聚乙烯醇乳化液(v∶v=1∶19,均质10000 r/min,每次3 min,间隔5 min,共两次)、19.50 m L 0.05 mol/L p H10.60Gly-Na OH缓冲液、0.05 m L 1 g/L碱性脂肪酶液、0.25 m L 0.10 mol/L CaCl_2溶液、0.20 m L百里香酚蓝-酚酞-百里酚酞混合指示剂。通过测定反应体系在不同温度下的p H下降速率,最终确定该反应体系的Ea为60.14 k J/mol。该反应体系可应用于监测低温环境下食品中酶反应或脂肪分解的程度,间接判断对应食品的品质状况。     

产油真菌高山被孢霉中叶酸类化合物的提取及检测

二氢叶酸(FH_2)和四氢叶酸(FH_4)是重要的叶酸化合物,作为一碳基团的载体参与多种生物学反应。考察了不同破壁方法和纯化手段对叶酸类化合物提取的影响,优化了叶酸类化合物的色谱检测条件。结果表明:高山被孢霉经陶瓷珠机械研磨破壁,利用添加0.1%Vc和20 mmol/L醋酸铵的80%甲醇溶液进行萃取,最后用液相色谱进一步分离得到了FH_2和FH_4,并采用四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱对结果进行定性分析。色谱分析条件为采用TSK gel Amide-80(150mm×2.0 mm,2.0μm)色谱柱,采用5 mmol/L醋酸铵及乙腈作为流动相进行梯度洗脱,质谱选择离子扫描设为441.65 m/z和443.66 m/z。方法检测FH_2和FH_4的检出限分别为0.001μg/mL和0.002μg/mL,实验结果显示方法能快速并准确地检测叶酸类化合物,为解析叶酸代谢途径在脂质合成中的作用奠定基础。     

凝胶渗透色谱-高效液相色谱法测定植物油中苯并芘

建立了用凝胶渗透色谱-高效液相色谱法测定植物油中苯并芘的方法。该方法以乙酸乙酯-环己烷(1:1,v/v)提取样品,凝胶渗透色谱净化,以ZORBAXSB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm)分离,流动相为甲醇和水(90+10),流速1.0mL/min,激发波长365nm,发射波长412nm,柱温25℃,进样量25μL。该方法的检出限0.4μg/kg,线性范围0.1~10.0μg/L,加标回收率98.7%~109.2%,相对标准偏差为3.81%~8.76%。     

高效液相色谱法测定秘鲁鱿鱼肌肉中的有机酸

研究建立了高效液相色谱(HPLC)同时测定秘鲁鱿鱼肌肉中多种有机酸的方法。有机酸的分离采用Atlantis T3色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为0.08 mol/L KH_2PO_4(pH 3.00),流速0.5 mL/min,柱温30℃,检测波长210 nm。丙酮酸、苹果酸、α-酮戊二酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、富马酸、丁二酸、丙酸等9种有机酸均能够得到很好的分离,其相关系数均在0.999以上,相对标准偏差为0.03%~0.37%,有机酸的回收率为94.5%~105%。     

超高效液相色谱-电化学检测法测定石斛中的石斛酚

建立石斛中石斛酚含量测定的超高效液相色谱-电化学检测方法。方法中样品采用70%甲醇超声提取10 min,提取液经0.22μm滤膜过滤后进行色谱分离。以Waters XBridge BEH C18柱(2.1 mm×150 mm,填料粒径1.7μm)为固定相, 25 mmol/L乙酸铵溶液(p H 3.6)-乙腈65%︰35%为流动相等度洗脱,流速0.4 m L/min。电化学检测器的检测电压为525 m V。结果显示,石斛酚的质量浓度在0.1～10 mg/L范围内与其峰面积具有良好线性关系,相关系数R2=0.999 6,以3倍信噪比计算检出限为0.8μg/L。400, 800和1 600 mg/kg这3个浓度的平均加标回收率为97.53%～103.24%,相对标准偏差为2.37%～4.01%(n=6)。同液相色谱紫外检测法相比,方法分析时间短,灵敏度高,适合不同品种石斛中石斛酚的测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定运动饮品中的叶酸

利用超高效液相色谱-串联质谱法建立了一种分析运动饮品中叶酸的方法。样品经10%乙醇提取后,采用T_3色谱柱(2.1 mm×150 mm,3μm)分离,以10.0%甲醇-0.1%甲酸为流动相,采用超高效液相色谱-串联质谱仪进行检测。结果表明叶酸组分在2.0~100.0 ng/m L浓度范围内线性良好,相关系数R~2为0.9992,检出限为1.0μg/kg,定量限为3.0μg/kg,加标回收率为91.9%~96.0%,相对标准偏差(RSD)为2.6%~3.2%。该方法具有前处理简单、灵敏度高和检测速度快的优点,适用于运动饮品中较宽浓度范围的叶酸含量的分析,为其测定提供参考。     

HPLC法测定吡咯喹啉醌(PQQ)中咪唑并吡咯喹啉(IPQ)的含量

目的:建立吡咯喹啉醌(PQQ)中IPQ的含量测定方法。方法:采用TCI Kaseisorb LC ODS 2000色谱柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相为乙腈-缓冲溶液(配制10mmol的磷酸氢二钾和15mmol的四丁基溴化铵水溶液,用磷酸调节p H至7.4)[28∶72];紫外检测器,检测波长为259nm;流速为1.0m L/min;进样量为20μL。结果:IPQ在0.05μg/m L～0.2μg/m L范围内线性关系良好,相关系数大于0.999。IPQ的回收率在104%～113%之间,RSD最大为3%。结论:该方法具有良好的专属性、检测灵敏度、精密度、线性和准确度,适用于PQQ中IPQ的质量控制。     

一株产蛋白酶不动杆菌的分离与酶学性质

以脱脂奶粉或羊毛粉为唯一碳氮源,从环境样品中筛选蛋白酶产生菌,首次获得一株高产蛋白酶的醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)E9,初步发酵优化显示,该菌株的最适发酵产酶温度35℃,培养基初始p H 6.0,接种量为质量分数4%,培养时间30 h;发酵培养基:蔗糖10 g/L,牛肉膏15 g/L,K_2HPO_4·3H_2O 7 g/L,KH_2PO_4 3 g/L,MgCl_2·6H_2O 1 g/L。酶学性质初步研究表明,不动杆菌E9所产的蛋白酶属于中性蛋白酶,最适作用温度50℃,最适pH 8.0,在p H5.0~8.0及40℃以下时具有良好的稳定性,酶反应动力学参数Km为7.067 mg/m L,Vmax为966.7μg/(m L·min)。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定运动饮料中的叶酸

建立了一种超高效液相色谱-串联质谱分析运动饮料中叶酸的方法。样品前处理用体积分数10%乙醇沉淀提取后,采用Waters Atalantis T_3色谱柱(2.1mm×150mm,3μm)分离,以0.1%甲酸-10.0%甲醇为流动相的梯度洗脱模式下,叶酸组分在1.0~200.0 ng/m L内线性良好,相关系数r2为0.999 5,检出限为0.4μg/kg,定量限为1.5μg/kg,加标回收率为91.0%~98.6%,相对标准偏差(RSD)为2.1%~3.7%。该方法具有前处理简单、灵敏度高和检测速度快的优点,适用于运动饮料中较宽浓度范围的叶酸含量的分析。     

微生物法测定蔬菜中叶酸含量

采用微生物法使用鼠李糖乳杆菌测定了某地区25种常见蔬菜的叶酸含量。结果显示,在当地常见蔬菜中菠菜叶酸含量最高（236μg/100 g）,西兰花（137μg/100 g）的叶酸含量也较高。其他叶类蔬菜的叶酸含量在45～100μg/100 g,瓜类、豆类和根茎类蔬菜的叶酸含量低于叶类蔬菜。菠菜和大白菜的叶酸在放置一周后仅保留23.0%和42.9%。