响应面法优化灵芝孢子粉高压脉冲电场破壁工艺

本试验利用高压脉冲电场对灵芝孢子粉进行破壁试验以期提高其破壁率,以电场强度、脉冲个数和脉冲宽度为试验因子进行单因素试验,并在此基础上进行响应面试验。结果表明:三个试验因子对灵芝孢子粉破壁率的影响大小依次为电场强度、脉冲宽度和脉冲个数;灵芝孢子粉高压脉冲电场破壁最优工艺参数为电场强度25 kV/cm、脉冲宽度80 μs、脉冲个数40000个,破壁率可达到66.74%±0.03%;破壁孢子粉的多糖和总三萜溶出量分别达到了(0.99±0.11)g/100 g和(1.79±0.03)g/100 g。     

破壁灵芝孢子粉破壁率的测定

对破壁灵芝孢子粉破壁率的检测方法进行优化,以降低试验误差。使用血球计数板对灵芝孢子粉和破壁灵芝孢子粉进行计数,考虑到灵芝孢子粉破壁率的分析方法中出现的孢子悬液分布不均匀问题,故对超声振荡的时间和蔗糖粉末粗细程度试验条件进行优化,并对优化前后的结果进行比较。结果表明,方法优化前,破壁灵芝孢子粉破壁率测量为98%,相对标准偏差(S_RSD)为10.25%,经试验条件优化后,其破壁率测量的结果提高到99%,相对标准偏差(S_RSD)下降至1.79%,前后差异明显,效果满意。通过分析灵芝孢子粉破壁率测量误差的主要来源,并采取针对性措施,可以有效降低灵芝孢子粉计数结果的相对标准偏差,提升破壁率测量的准确度。     

响应面法优化灵芝孢子粉中灵芝酸的破壁提取工艺

目的:以超声提取法为主,漆酶破壁法为辅助提取灵芝孢子粉中的灵芝酸,对影响提取得率的几个因素进行优化。方法:借助Design-Expert软件,利用Placket-Burman实验从超声时间、超声次数、溶剂、料液比、酶量、酶解时间、酶解温度和p H这8个影响提取得率的因素中筛选出四个主要因素,分别为超声时间、超声次数、溶剂和酶解时间,在此基础上,用Box-Behnken实验设计及响应面分析法进行回归分析。结果:当超声时间为3.2 h,溶剂用97%的乙醇,超声次数2次,酶解时间1.2 h时,提取得率达到最高,为3.40%,与初始提取得率2.4%相比,提取得率提高了1.4倍。结论:采用漆酶破壁与超声提取方法较大幅度提高灵芝酸的提取得率,并缩短了提取时间。      

响应面法提取优化破壁灵芝孢子粉多糖及其分级醇沉组分的抗氧化活性研究

目的:对破壁灵芝孢子粉多糖(BGP)的最佳提取工艺、各分级醇沉多糖组分的抗氧化性进行探究。方法:以破壁灵芝孢子粉为原料,采用内部沸腾法探究提取温度、提取时间、料液比对BGP得率的影响;利用响应面法分析优化BGP的提取参数。用不同浓度的乙醇醇沉多糖,通过测定其DPPH自由基以及羟自由基的清除力,测定其抗氧化性。结果:根据回归模型分析预测结果,最佳提取工艺参数为提取温度83℃、提取时间7 min、料液比1:21。在此条件下BGP的得率为9.10%。以不同浓度的乙醇分级醇沉BGP,得到5种醇沉BGP组分。乙醇浓度为90%时,所得BGP的得率最高。抗氧化实验表明各醇沉BGP都具有一定的抗氧化活性。90%-BGP的抗氧化性稍强于其他醇沉多糖,并且随着多糖浓度的增加,各醇沉多糖的抗氧化性均有一定的增加的趋势。结论:利用最佳提取参数提取,不同乙醇浓度醇沉的BGP均具有一定的抗氧化活性。     

6个破壁灵芝孢子粉的理化性质

为更好地了解山东省破壁灵芝孢子粉的品质,收集6个灵芝孢子粉样品,对其理化性质进行分析。结果表明, 6个样品的灵芝破壁孢子粉含水率在2.013%～8.922%之间,粗脂肪含量在27.12%～34.05%之间;总糖含量在4.359%～5.769%之间,多糖含量在0.879%～1.182%之间,还原糖含量在0.196%～0.247%之间,段木栽培的破壁灵芝孢子粉多糖含量并不比代栽多糖含量高;破壁灵芝孢子粉的D[4, 3]在6.042～7.91μm之间, D50在5.723～6.284μm之间;经扫描电镜观察,发现代栽灵芝孢子粉粒径为(8.6～8.8)μm×5.6μm,而段木栽培的孢子粉粒径为8.8μm×6.6μm,碾压式孢子粉破壁率达100%。山东省破壁灵芝孢子粉多糖、重金属等含量符合中华供销总社灵芝孢子粉理化性质的行业标准。扫描电镜发现段木栽培比代栽孢子粉更饱满,但个别样品破壁率未达标。     

响应面法优化灵芝孢子粉多糖提取工艺的研究

以灵芝孢子粉多糖为研究对象,通过单因素试验考察液料比、提取温度、提取时间3个因素对提取率的影响,确定提取灵芝孢子粉多糖的最优工艺参数,并运用响应面法对3个因素进行优化,得到优化后的提取工艺,并确定该工艺条件的可靠性和高效性。结果表明:单因素试验确定提取灵芝孢子粉多糖的最优工艺为液料比20∶1(m L/g)、提取温度80℃、提取时间2 h,在此条件下灵芝孢子粉多糖提取率为4.78%;运用响应面法优化工艺参数,确定最佳工艺条件为:液料比21.27∶1(m L/g)、提取温度80.10℃、提取时间2.10 h,在此条件下预测多糖提取率为4.84%;对模型进行验证,实测结果为4.81%,与拟合方程预测值符合良好。     

长白山有机灵芝破壁孢子粉的毒理学安全性评价

目的对长白山有机灵芝破壁孢子粉作为保健食品进行毒性实验研究。方法采用小鼠急性毒性试验、遗传毒性试验,以及大鼠30 d喂养实验来评价长白山有机灵芝破壁孢子粉的毒理学安全性。结果样品给药后,ICR种雌、雄小鼠的最大耐受剂量(MTD)大于20.00 g/kg·bw,属于无毒级;遗传毒性试验结果中Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠精子畸形试验均表现为阴性;大鼠30 d喂养实验中,动物生长发育良好,各剂量组体重、食物利用率、血常规指标、血生化指标、脏器重量和系数以及病理组织学等指标均未见毒性作用。结论长白山有机灵芝破壁孢子粉均未见明显毒副作用,具有服用安全性。     

灵芝孢子粉破壁工艺优化及其抗肿瘤作用

以灵芝孢子粉为原料,采用高压均质法破壁灵芝孢子,研究灵芝孢子粉破壁优化工艺及破壁孢子粉抗肿瘤作用。选取水为破壁溶剂,以均质压力、均质次数、料液比为试验因素,以灵芝孢子破壁率为试验指标,通过单因素试验及正交试验对灵芝孢子破壁工艺进行优化。通过建立S180荷瘤小鼠模型,对破壁灵芝孢子粉的抗肿瘤作用进行研究。结果表明,最佳破壁工艺条件为均质压力150 MPa、均质次数3、料液比1∶100（g/mL）,破壁率为94.35%。抗肿瘤实验表明,破壁灵芝孢子对小鼠S180肉瘤的抑制率为43.37%～57.59%,且肝体比和肺体比变化稳定,并可显著提高小鼠的胸腺指数和脾指数。因此,破壁灵芝孢子粉具有良好的抗肿瘤作用。     

破壁提油灵芝孢子粉羧甲基化研究

以破壁提油灵芝孢子粉(SDGLS)为原料,以氢氧化钠为催化剂,氯乙酸为醚化剂,对破壁提油灵芝孢子粉的羧甲基化进行了研究。结果表明,制备羧甲基破壁提油灵芝孢子粉的较佳工艺条件为:SDGLS 1.00g,80%的乙醇20mL,氢氧化钠用量1.20g,氯乙酸用量1.18g,碱化时间2h,醚化温度45℃、醚化时间20h。此条件下,羧甲基破壁提油灵芝孢子粉的取代度(DS)达0.78,溶解率高达91%。     

对破壁处理灵芝孢子粉功能特性的测定与分析

采用球磨法对灵芝孢子粉进行破壁处理,测定对比灵芝孢子粉破壁前后的水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分的溶出量,粗多糖和总三萜的生物活性物质溶出量,测定分析了水、醇提取物DPPH·、ABTS·清除能力和还原能力。结果表明:灵芝孢子粉破壁前后水分和灰分变化不显著,粗蛋白溶出量增加了33.96%,粗脂肪溶出量提高了2.94倍;灵芝孢子粉粗多糖和总三萜活性物质溶出量分别增加了40.90%和55.21%;破壁后灵芝孢子粉抗氧化能力显著提高。     

挤压处理灵芝孢子粉提取灵芝多糖

以挤压喷爆为处理方法,孢子破壁率和灵芝多糖得率为研究对象,分析水分含量、螺杆转速、温度、进料速度对灵芝孢子的破壁率和灵芝多糖得率的影响。采用正交试验优化挤压工艺条件得出：水分含量15%、螺杆转速223r/min、温度125℃、进料速度155g/min,在此条件下灵芝孢子破壁率为78.6%,多糖得率为2.219%,通过在最佳条件下进行二次挤压,灵芝孢子破壁率提高为83.48%,多糖得率为2.37%。     

响应曲面法优选灵芝子实体多糖提取工艺

本研究采用响应曲面法对影响GLP提取率的三个主要影响因素即提取温度、提取时间和液固比进行了优化.利用Design Expert软件对GLP提取率的二次多项数学模型分析表明:在提取温度为89.35℃,提取时间1.47h,液固比29.19:l时,GLP提取率较高,最佳提取率预测值为0.776%,与实测值基本相符.利用优化工艺参数提取GLP时,可获得最大的提取率.     

灵芝孢子多糖提取工艺优化

采用响应面分析法对灵芝孢子多糖的提取工艺进行优化。考察3个变量(水料比、超声温度、微波时间)对灵芝孢子多糖提取率的影响,并通过响应面设计法确定灵芝孢子多糖提取技术的最佳工艺条件为水料比20∶1,超声提取时间为55 min,微波(200 W,60℃)提取时间20 min,在此条件下测得多糖的提取率为2.23%。     

超声提取灵芝多糖的工艺研究

采用响应曲面分析法对超声波提取灵芝多糖的工艺条件进行优化,优化后的工艺为:超声功率320W,提取温度70℃,提取时间34 min,其多糖得率为2.78%,氧自由基吸收能力(ORAC值)为1956μmolTrolox/g,与理论预测值无显著性差异。因此,采用响应面分析法优化灵芝多糖超声提取工艺,具有较好的可行性。在最佳条件下,制备的灵芝多糖分子量组成为18150 Da(20.07%)和6484 Da(79.93%),大大低于传统水提灵芝多糖的分子量。     

HPLC-ELSD测定灵芝及其孢子粉中胆碱质量分数

建立了一种运用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)测定灵芝及其孢子粉中胆碱含量的方法。实验采用Agilent公司ZORBAX 300-SCX阳离子交换色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),柱温30℃,流动相为乙腈-乙酸铵溶液,等度洗脱,流量为1.0 mL/min,进样量为10μL;蒸发光散射检测器检测,漂移管温度为60℃,喷雾器为模式加热,雾化气为净化空气,气体压力为172.4 kPa。研究结果表明,该方法精密度、重复性、稳定性和回收率均良好,在6.25~200μg/mL范围内胆碱具有良好的线性关系,检出限为6μg/mL,定量限为12μg/mL,是一种快速高效检测灵芝及其孢子粉中胆碱的方法。     

响应面法优化灵芝红茶的制作工艺

为系统地探究灵芝红茶的制作工艺,采用灵芝提取物和遵义顶级红茶为主要原料,以感官评价为主要评价指标,以单因素试验研究灵芝提取物用量、烘烤温度、烘烤时间对灵芝红茶得分的影响,采用响应面分析法和BoxBehnken试验优化灵芝红茶的最佳工艺参数,同时对灵芝红茶中主要活性成分茶多酚和多糖的含量进行测定。结果显示:灵芝提取物用量为0.93 g,烘烤温度为79℃,烘烤时间为61 min,以此工艺制备的灵芝红茶在响应面法中感官评价得分预测最大值为87.2,实测值为86.1。灵芝红茶产品中茶多酚含量为136.0 mg/g,多糖含量为36.39 mg/g,水分含量为5.38%。灵芝红茶产品外形优美,色泽乌润均匀,口感醇厚,具有灵芝甜香与红茶的混合香味。     

响应面法优化菌草灵芝多肽-硒螯合物的制备工艺

采用响应面分析法优化菌草灵芝多肽-硒螯合物的制备工艺,以螯合物中硒含量为指标,考察亚硒酸钠溶液与多肽溶液体积比、反应温度、反应时间和pH值对螯合反应的影响,同时建立螯合物制备工艺的二次项数学模型并验证其可靠性,并利用红外光谱法对菌草灵芝多肽-硒螯合物进行表征。结果表明:影响菌草灵芝多肽与硒离子螯合的因素主次顺序为pH值反应温度体积比反应时间,最佳的螯合工艺条件为反应时间60 min、反应温度75℃、pH 9、亚硒酸钠溶液与多肽溶液体积比1∶2,最佳制备工艺条件下,螯合物中硒含量为(2 985.89±10.59)μg/g。采用红外光谱法对螯合物进行表征,表明所得物质为菌草灵芝多肽与硒的螯合物。本研究为合成有机硒化合物提供了一种新的原料,也为菌草灵芝的开发利用提供了一个新的思路。     

响应面试验优化玉米淀粉挤出法糊化工艺

以玉米淀粉为原料,利用单螺杆挤出机进行挤出糊化,采用响应面优化玉米淀粉挤出法糊化工艺,对影响玉米淀粉糊化工艺的主要因素:挤出温度、水分添加量、挤出孔直径做出研究。结果表明:当挤出温度为114℃、水分添加量23%、挤出孔直径4 mm时,玉米淀粉糊化度为97.75%。方差分析结果表明,影响玉米淀粉挤出法糊化工艺的因素由强到弱为挤出温度挤出孔直径水分添加量。