藏灵菇中乳酸菌的鉴定及细菌素生物特性研究

从藏灵菇中筛选出一株具有抑菌活性的菌株,采用生理生化鉴定、16S rDNA序列分析确定菌种属性,采用硫酸铵沉淀法对该菌所产生的细菌素进行粗提取并对其抑菌活性和稳定性进行研究。结果显示,该菌为植物乳杆菌,除去有机酸和过氧化氢的影响,该菌产生的细菌素具有较好的抑菌活性。该菌所产的细菌素热稳定性较好,在100℃处理30 min抑菌活性降至54%,且对酸碱不敏感,在p H3~9的范围内都具有抑菌活性,在p H为3.82时抑菌活性最佳,对胃蛋白酶、α-凝乳酶有较强的耐受性,对蛋白酶K较敏感,在37℃下处理2 h抑菌活性为处理前活性的47.36%。对植物乳杆菌产细菌素的分析证明该菌产的细菌素在食品加工防腐中具有潜在的使用价值。     

瑞士乳杆菌产生的细菌素的抑菌活性研究

主要通过研究对从建昌板鸭发酵过程中分离瑞士乳杆菌产生细菌素的抑菌活性,考察不同温度,不同p H,不同种类酶作用对细菌素抑菌活性的影响。结果证明:蛋白酶能一定程度抑制细菌素的抑菌活性,且胰蛋白酶的抑制程度最强;该细菌素的抑菌活性对温度的耐受力强,即使在100℃处理后仍具有抑菌活性,在-20℃条件下保存时抑菌活性最强;该细菌素p H在1.5~4.0时具有抑菌活性,在p H为1.5时抑菌活性最强。     

1株产细菌素植物乳杆菌的筛选及其细菌素抑菌性质研究

从广西巴马地区取样的米粉中共分离出31株乳酸菌,以单核细胞增生李斯特菌为指示菌,采用牛津杯平板扩散法检测抑菌物质,筛选得到1株产细菌素的乳酸菌M23。通过微生物形态学与16S rRNA基因序列分析,鉴定该菌株为植物乳杆菌。植物乳杆菌M23代谢产生的乳酸菌细菌素在p H 2.0~10.0范围内具有良好的抑菌活性,121℃处理15 min的条件下依然具有抑菌活性,表明其具有良好的酸碱稳定性和热稳定性。发酵试验表明,该乳酸菌素的最佳收获时间为乳酸菌培养14 h。抑菌谱试验表明,该乳酸菌素能够有效抑制部分食源性革兰氏阳性、阴性致病菌。     

嗜酸乳杆菌细菌素Lactobacilin XH1发酵条件优化

以细菌素相对抑菌效价为考察指标,通过单因素和正交试验对嗜酸乳杆菌细菌素Lactobacillin XH1发酵条件进行优化,研究了培养基初始pH、培养温度、培养时间及接种量4个因素对细菌素产生的影响。结果表明,优化后最佳发酵条件为培养基初始pH 6.5、培养温度35℃、接种量为2.5%和培养时间28 h,在此条件下细菌素Lactobacillin XH1相对抑菌效价值达到247.49±1.05 AU/mL,比优化前提高了2倍。     

嗜酸乳杆菌凝胶糖果的工艺探讨

为了强化嗜酸乳杆菌在凝胶糖果中活菌数,研究了嗜酸乳杆菌微胶囊化包埋层数对活菌数的影响;接着以3层包埋微胶囊嗜酸乳杆菌为原料,研究不同凝胶糖果在调配时糖浆水分含量、p H值、温度对嗜酸乳杆菌活菌数的影响;同时研究嗜酸乳杆菌凝胶糖果在保质期内最佳贮藏温度。结果表明:调配时糖浆水分含量20%、p H3.6、温度75℃,凝胶糖果中嗜酸乳杆菌活菌数最大;当嗜酸乳杆菌凝胶糖果贮藏温度小于5℃时,凝胶糖果中嗜酸乳杆菌的活菌数能达到产品标准(1×10~7 cfu/g)。     

嗜酸乳杆菌细菌素对鲜乳保质期的影响及防腐技术体系的建立

研究嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）产细菌素lactobacillin XH1对鲜乳保质期的影响。将0.5 g/kg嗜酸乳杆菌细菌素lactobacillin XH1分别添加到鲜乳和消毒鲜乳中,分析其在4 ℃贮藏期间抑菌活性、酸度、感官特性的变化趋势。通过在消毒鲜乳中添加嗜酸乳杆菌细菌素lactobacillin XH1,建立消毒鲜乳防腐应用中的危害分析和关键环节控制点（HACCP）技术体系。结果表明,4 ℃条件下贮藏,添加细菌素lactobacillin XH1的乳样的抑菌活性显著大于未添加细菌素lactobacillin XH1的乳样,且酸度变化趋势平缓,仍保持产品原有的风味、色泽、质构等感官特性,有效地延长鲜乳保质期2 d,消毒鲜乳保质期4～6 d。并建立了嗜酸乳杆菌细菌素lactobacillinXH1在消毒鲜乳防腐应用中的HACCP体系,确保产品的安全性。     

不同pH对嗜酸乳杆菌分选酶相关基因表达及菌体黏附能力的影响

为探究嗜酸乳杆菌在小肠中黏附调控机制,嗜酸乳杆菌黏附与细胞壁分选酶及其相关蛋白的基因表达之间的关系。实验构建体外模型研究了不同p H培养条件下嗜酸乳杆菌的黏附能力、测定了分选酶基因和分选酶相关蛋白基因相对表达差异。实验结果表明:在p H5.5~7.5培养条件下,随着p H升高嗜酸乳杆菌菌体黏附性显著增加,srt基因及其相关蛋白的基因表达量显著上调。研究结果为p H对嗜酸乳杆菌的黏附效应的影响机制提供了相关理论依据。     

新疆酸马奶中乳酸片球菌所产细菌素05-8的理化特性及分子量确定

首先时分离自新疆酸马奶中的乳酸片球菌所产细菌素05-8的理化特性进行研究,通过酶敏感性实验,确定乳酸片球05-8所产抑菌物质为细菌素,该细菌素在100℃ 90 min和121℃ 10 min具有较好的热稳定性,同时在pH值为2～8的范围内有抑菌活性.当细菌生长到稳定期时,达到最大产量1 280 AU,最佳收获期为13 h.以单核细胞增生李斯特氏菌为指示菌,确定其对细菌的作用方式为杀死细菌.此外,还能抑制戊糖片球菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌La4、短乳杆菌AS1.12等革兰氏阳性菌.然后通过Tricine-SDS-PAGE活性抑菌实验测定此细菌素的分子量在14.4 ku以下,初步确定细菌素05-8为Ⅱa类细菌素.     

抑制牛乳房炎嗜酸乳杆菌的筛选和抑菌物质的研究

牛乳房炎是造成重大经济损失的疾病之一,通过6株嗜酸乳杆菌对4株导致牛乳房炎的致病菌进行细菌素、H202等各种因素的抑菌实验,阐述了各个乳酸菌的抑菌能力以及影响其抑菌能力的主要抑菌物质,结果发现:6株乳酸菌普遍对金黄色葡萄球菌抑菌效果显著,其中嗜酸乳杆菌NCFM(H7)上清液对4株致病菌抑菌效果最好,KLDSAD3(H6)细菌素对无乳链球菌抑制效果最好,KLDS L6(H3)细菌素对乳房链球菌、大肠杆菌抑菌能力最强,且其H2O2对乳房链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌抑菌活性较强,KLDS AD2(H5)细菌素对金黄色葡萄球菌抑制效果最好,其中L6(H3)抑菌活性物质耐热能力较强,AD2(H5)抑菌活性物质热敏性很强,而且这些抑菌活性物质只有在酸性条件下才具有更强的抑菌活力.     

低聚半乳糖对植物乳杆菌生长及部分代谢的影响

以一株能产细菌素的植物乳杆菌KLDS1.0391为研究对象,将MRS培养基中的葡萄糖用等量的低聚半乳糖替代,采用体外发酵方式,研究37℃培养36 h过程中活菌数、p H和滴定酸度的变化,同时分别测定培养28 h和24 h时有机酸和细菌素的产量。结果表明:随培养时间的延长,培养物的p H先迅速下降,至12 h后下降速度逐步平稳,以低聚半乳糖作为碳源时促生长作用显著高于葡萄糖(p0.05),且菌体衰退较为缓慢。而且该菌株代谢低聚半乳糖时所产生的有机酸及抑菌活性均更高,其中有机酸主要为乳酸、乙酸和丙酸。     

1株产乳酸菌素植物乳杆菌的鉴定及功能研究

乳酸菌素是一种天然生物防腐剂。本试验鉴定了1株产乳酸菌素的植物乳杆菌并研究其所产乳酸菌素的理化性质。采用16S r RNA序列分析法鉴定菌株LD-1为植物乳杆菌,其发酵上清液具有抑菌活性。采用吸附法粗提所产乳酸菌素,经Tricine-SDS-PAGE分析其分子质量在4.6~6.5 ku之间。由乳酸菌素产量与乳酸菌生长的关系试验得出乳酸菌素的最佳收获时间为发酵培养14 h。管碟法抑菌试验表明,该乳酸菌素抑菌活性的最适p H范围为2~8;100℃处理90 min后抑菌活性仍很明显;对胃蛋白酶、胰蛋白酶、蛋白酶K敏感,在人体内可被消化吸收;对单核增生李斯特细菌、粪肠球菌、大肠杆菌、都柏林沙门氏菌有较强的抑制作用。该乳酸菌素为开发抑菌谱广的天然生物防腐剂提供研究基础。     

乳杆菌源抗菌肽的代谢条件优化及其特性研究

探讨乳杆菌代谢产抗菌肽的条件及其生物学特性。通过琼脂扩散法分析嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌和发酵乳杆菌抑菌活性差异,采用正交实验分析获得干酪乳杆菌代谢产抗菌肽的最佳条件为:装液量20%、接种量2%、培养温度30℃,静置培养42h。研究发现该抑菌物质热稳定性好,在低p H条件下能够保持较好的抑菌活性,可被胰蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解而不被胃蛋白酶酶解。进一步的研究发现,该抑菌物质的作用方式为杀菌,且抑菌谱广,可抑制或杀灭多种革兰氏阴性菌和部分革兰氏阳性菌,对多种食源性病原菌有较强的抗性,其可开发为食品防腐剂和用于畜禽养殖的饲料添加剂。     

产乳酸菌素菌株的筛选鉴定及其特性分析

本实验对广西巴马村天然发酵米粉中的乳酸菌进行分离鉴定,筛选出一株具有抑菌活性的植物乳杆菌M44,并研究了其所产乳酸菌素的基本性质。采用微生物形态学和16S r DNA序列分析法鉴定菌株M44为植物乳杆菌,其发酵上清液具有抑菌活性,抑菌物质确定为蛋白类。采用盐析法粗提所产乳酸菌素,确定最佳硫酸铵沉淀浓度为60%。由乳酸菌素产量与菌株生长的关系实验得出乳酸菌素的最佳收获时间为发酵培养12 h。管碟法抑菌实验表明,该乳酸菌素在p H范围2~8时有良好的抑菌活性;121℃处理15 min后仍具有抑菌活性;胃蛋白酶、胰蛋白酶处理后抑菌性消失;对单核增生李斯特细菌、大肠杆菌、沙门氏菌,金黄色葡萄球菌均有抑制作用。该乳酸菌素为天然生物防腐剂的开发与应用提供了研究基础。     

嗜酸乳杆菌N X 2 - 6 液体发酵产细菌素培养基及其主要影响因子筛选

筛选嗜酸乳杆菌NX2-6 产生细菌素发酵条件的主要影响因素。在确定MRS 培养基为菌株NX2-6 产细菌素最适培养基的基础上,利用Plackett-Burman 试验设计,对影响细菌素产量的内在因素(蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸出粉、葡萄糖、吐温80、乙酸钠、K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O、MnSO4·H2O、C6H5Na3O7·H2O及起始pH 值)和外在因素(接种量、培养温度及培养时间)进行筛选。结果表明：葡萄糖(p ＝ 0.0006)、乙酸钠(p ＝0.0002)、柠檬酸三钠水合物(p ＜ 0.0001)和培养时间(p ＝ 0.0002)对细菌素产生具有显著影响。     

戊糖乳杆菌细菌素的抑菌特性研究

乳酸菌产生的细菌素具有防腐抑菌的作用,越来越受到人们的重视。但乳酸菌产生的细菌素多只对近缘乳酸菌菌株有抑制作用,研究旨在研究一株戊糖乳杆菌产生的细菌素对食品中常见的腐败菌的抑制作用。利用滤纸片法以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、青霉作为指示菌进行抑菌研究,探讨了p H、Na Cl浓度、发酵时间和热处理对细菌素抑菌效果的影响。得出发酵培养基初始p H为3,不添加Na Cl,发酵36 h时戊糖乳杆菌产生的细菌素抑菌效果最好,为戊糖乳杆菌细菌素的应用提供科学依据。     

枯草芽孢杆菌SH-1发酵条件优化及抑菌活性物质稳定性研究

为开发应用于生物防治的生物农药,应用于食品防腐的新型高效的食品防腐剂,对一株能够抑制多种食品腐败菌和植物致病菌生长的芽孢杆菌菌株进行生理生化和16S分子生物学鉴定,初步确定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为SH-1。用蜡样芽孢作为指示菌对SH-1菌株发酵条件进行优化,并研究活性物质稳定性。结果表明,SH-1菌株发酵条件在接种量2%、初始p H7.0、发酵时间为24 h、转速为180 r/min、温度37℃时抑菌活性最强,抑菌直径高达22 mm;SH-1菌株发酵液在p H(3.0~9.0)之间抑菌活性较稳定,p H9.0以上抑菌活性逐渐降低,p H达到11后活性丧失;发酵液经100℃内处理具有较高活性,121℃活性丧失;经不同时间段紫外线照射后,其发酵液抑菌活性缓慢降低并趋于稳定。     

产细菌素屎肠球菌的筛选鉴定及其抑菌特性

从采自四川红原的传统发酵酸乳中分离得到308 株疑似乳酸菌,通过96 孔板法初筛和平板打孔法复筛,筛选出1 株具有明显抑菌作用的菌株SC-Y112。通过形态学观察、16S rDNA序列同源性分析和ropA管家基因序列同源性分析结合生理生化实验,鉴定该菌株为屎肠球菌（Enterococcus faecium）。通过排酸及排除H2O2影响后,该菌株的发酵上清液仍具有明显抑菌活性,经蛋白酶处理后,抑菌效果明显消失或下降,说明发酵上清液中的抑菌成分具有蛋白质性质。进一步探究该菌株所产细菌素的生物学特性、遗传稳定性及抑菌特性表明,该细菌素在菌株接种后6 h产生,12 h达到最高;菌株在连续传代86 代内,产细菌素能力较为稳定;细菌素在 pH 3.0～7.0的条件下稳定,在100 ℃处理30 min后仍具有抑菌活性;SC-Y112所产细菌素具有广谱抗菌性,对单核细胞性李斯特菌有明显的抑菌活性。     

食品加工环境因素对双歧杆菌细菌素BB04抑菌作用的影响

为预测双歧杆菌细菌素BB04在食品工业中的实际应用效果,本研究分别从抑菌效果和吸附特性两个角度探讨了食品加工过程中常涉及到的温度、p H和盐等因素对细菌素作用于敏感菌单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)的影响。结果表明:细菌素对单核细胞增生李斯特菌作用方式为杀菌;37℃、p H6.0时,抑菌效果最佳;实验所选取的Na Cl、KCl、Mg Cl_2、Ca Cl_2四种盐对细菌素的抑菌作用都有一定协同效应,各盐之间及同种盐内不同浓度间差异显著(p0.05)。吸附特性实验结果发现,p H对该细菌素吸附单核细胞增生李斯特菌细胞有一定影响,在p H6.0吸附效果最佳,吸附率可达91.40%;所选取的四种盐对细菌素的吸附作用都有一定拮抗效应,各盐之间及同种盐内不同浓度间差异显著(p0.05);温度对其吸附作用影响不显著(p0.05)。研究结果为该细菌素在食品防腐保鲜中合理应用提供一定的科学依据和理论参考。     

产细菌素乳酸菌的选育及其抑菌特性的研究

采用牛津杯琼脂扩散法,从实验室保存的乳酸菌中筛选到具有较高抑菌活性的菌株嗜酸乳杆菌A、戊糖片球菌M和戊糖片球菌T,它们产生的抑菌物质经排除酸、过氧化氢后,仍具有抑菌活性,然而经蛋白酶处理后其抑菌活性明显下降,确定其抑菌物质为细菌素,进一步的抑菌实验表明,3株菌所产细菌素具有较宽的抑菌谱,适宜用作生物型防腐剂。     

提高酸乳中嗜酸乳杆菌活性的研究

从市售合生元中分离鉴定出嗜酸乳杆菌,以脱脂乳培养基或MRS液体培养基培养菌株,探讨嗜酸乳杆菌的生长特性,研究不同pH、保藏温度以及西红柿汁含量对嗜酸乳杆菌活性的影响。结果表明:嗜酸乳杆菌在pH6.5培养基中培养6h后的活菌数最大,且在pH2.5的培养基中0～2h内保持106CFU/mL以上,即能在较低的胃酸环境保持其益生作用;嗜酸乳杆菌酸乳在4℃下保藏活菌存活期较长;在脱脂乳培养基中添加西红柿汁对嗜酸乳杆菌的生长起促进作用,且以添加15%的西红柿汁效果最佳。