利用海洋低值小杂鱼制备生物活性肽的研究

小肽是蛋白质降解过程中产生的中间产物,是由2～10个氨基酸片断组成的活性短肽物质.小肽物质因具有高吸收性、高转化率和免疫刺激作用,作为饲料添加剂应用于水产、畜禽饲料加工.试验进行了小肽制剂最佳酶解条件方面的研究.得到的主要工艺参数有:最佳酶解时间4 h,最适加酶量480 U/g,最适酶解温度50℃,最适酶解pH6.0,小肽的得率为10%,并利用层析柱分离得到小肽的初级产品     

双酶酶解豆粕蛋白制备低苦味肽

利用不同蛋白酶酶解豆粕蛋白,根据蛋白溶出率和游离氨基氮含量选择最佳用酶为碱性蛋白酶。分析了酶解时间、酶/底物比、底物浓度对豆粕蛋白酶解的影响。在单因素实验基础上,采用Design-Expert7.0响应面分析法对三因素各水平进行优化。确定酶解最佳工艺条件为:碱性蛋白酶酶解时间4h、酶/底物比6900u/g、底物浓度6%,此时蛋白溶出率最高为74.38%。利用荧光探针法,确定了Flavorzyme风味蛋白酶酶解制备低苦味肽的最佳条件为酶解时间6h,酶/底物比80u/g。      

酶水解高温豆粕制备高水解度大豆肽的研究

采用碱性蛋白酶水解高温豆粕制备高水解度大豆肽,通过单因素和响应面实验确定酶解高温豆粕的优化条件。以水解度为指标,考察温度、时间、pH、加酶量、底物浓度等因素对水解度的影响。优化的酶解条件为:温度50℃、时间5h、pH8.60、加酶量17700U/g底物、底物浓度10.25%,该条件下得到大豆肽的水解度为37.20%。     

双酶酶解豆粕蛋白制备低苦味肽

利用不同蛋白酶酶解豆粕蛋白,根据蛋白溶出率和游离氨基氮含量选择最佳用酶为碱性蛋白酶。分析了酶解时间、酶/底物比、底物浓度对豆粕蛋白酶解的影响。在单因素实验基础上,采用Design-Expert7.0响应面分析法对三因素各水平进行优化。确定酶解最佳工艺条件为:碱性蛋白酶酶解时间4h、酶/底物比6900u/g、底物浓度6%,此时蛋白溶出率最高为74.38%。利用荧光探针法,确定了Flavorzyme风味蛋白酶酶解制备低苦味肽的最佳条件为酶解时间6h,酶/底物比80u/g。     

双酶分步水解制备菜籽蛋白肽

实验选取Alcalase 2.4 L碱性蛋白酶和复合风味蛋白酶分步水解菜籽蛋白。结果表明双酶分步水解制备菜籽肽的最佳工艺为Alcalase碱性蛋白酶在pH值9.5,温度55℃,底物质量分数3%,酶活性5 500 u/g条件下酶解5.5 h,水解度为21.14%,再用复合风味酶在pH值6,温度50℃,酶活性900 u/g条件下继续酶解3 h。单因素试验和正交实验研究粗肽液用活性炭脱色的优化条件为:在活性炭质量分数1.5%,pH值4.5,温度55℃条件下脱色50 min,脱色率达32.15%,氨基酸损失率为25.15%。     

分步酶解制备鲢鱼抗氧化肽的工艺研究

用分步酶解法制备鲢鱼抗氧化肽,首先从碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶中筛选出碱性蛋白酶作为第一步酶解用酶,以水解度作评价指标,并得到酶解工艺条件:底物浓度15%,pH9.0,温度50℃,加酶量为24AU/kg。再从剩下的三种酶中筛选出胰蛋白酶与碱性蛋白酶复配,作为第二步酶解用酶,用响应面法进一步优化酶解工艺,考虑到成本和工艺的要求,最终确定的酶解工艺为:碱性蛋白酶水解时间为59.12min,胰蛋白酶水解时间为82.24min,两种酶的添加比例为1:1.48,即碱性蛋白酶添加量为24AU/kg,胰蛋白酶的添加量为35.5AU/kg。最终得到的鲢鱼抗氧化肽可溶性氮70.84%,多肽69.38%,水分4.21%,灰分25.67%;多肽浓度为2mg/mL时对DPPH自由基清除率为19.33%。      

双酶分步酶解谷朊粉制备短肽的研究

本文通过比较酶种类、加酶量、底物浓度、酶解温度、酶解时间对短肽得率和水解度的影响,采用二次回归正交旋转组合设计优化分步酶解制备谷朊粉短肽的最佳工艺。在复合蛋白酶(Protamex)水解谷朊粉91.50 min后加入中性蛋白酶(Neutrase)继续酶解121.50 min,Protamex添加量为665.00 U/g底物,Neutrase添加量为5 290.00 U/g底物,水解温度50℃,质量浓度12%,在此条件下,短肽得率为69.88%,水解度25.74%。经高效液相色谱测定,分子质量小于1 000 Da的水解产物占100%。采用Protamex与Neutrase分步酶解谷朊粉制备谷朊粉短肽,与现有制备谷朊粉短肽方法相比,避免了后续脱盐步骤,简化工艺,且具有制备条件温和,TCA-NSI和DH高,纯度高,分子量集中分布于1 000 Da以下等特点。     

双酶分步酶解红花籽粕制备抗氧化肽

利用红花籽粕为原料,研究双酶分步酶解对籽粕酶解效率及抗氧化活性的影响,通过正交试验确定双酶最佳酶解工艺,结果表明:第一步采用木瓜蛋白酶酶解,第二步采用中性蛋白酶的双酶分步酶解方法最佳;木瓜蛋白酶酶用量3 200 U/g, pH 7.0, 55℃酶解1 h后,中性蛋白酶酶用量6 400 U/g, pH 7.2, 55℃酶解2 h后,水解度为87.93%±0.86%,还原力为0.489±0.002,说明籽粕水解效果好,酶解后具有一定抗氧化能力。     

分步酶解法制备菜籽降血压肽

以菜籽蛋白为原料,用两种蛋白酶将其分步水解制备降血压肽。从4种酶的两两组合中筛选出了最佳酶组合碱性蛋白酶和中性蛋白酶,采用紫外检测法对酶解产物中血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽活性进行测定。对酶解工艺进行优化,在单因素试验的基础上采用Box-Behnken模型响应面设计试验,运用Design-Expert软件处理,建立制备菜籽降血压肽的三元二次回归正交模型。结果确定最佳酶解条件为:碱性蛋白酶和中性蛋白酶为分步水解的酶、底物的质量浓度5.65g/100mL、加酶量6.5%、酶解温度54.9℃,ACE抑制率理论值为50.303%,在此条件下进行验证实验制备出ACE抑制率为50.12%的菜籽降血压肽。     

微生物酶水解酪蛋白的最佳工艺

研究来源于黑曲霉的酸性蛋白酶酶解酪蛋白的最优工艺条件.在单因素试验的基础上,根据Box-Benhnken的中心组合实验设计原理,采用四因素三水平的响应面分析法,建立了微生物酶水解酪蛋白的二次多项数学模型,并以水解度为响应值作响应面和等高线,得出微生物酶水解酪蛋白的最佳工艺为:底物浓度2.5％,酶浓度3.0％,温度57℃...     

小梅鱼水解过程中的分析方法研究

采用２８０ｎｍ和２６０ｎｍ紫外吸收、双缩脲法、甲醛法、凯氏定量氮法以及６４０ｎｍ可见光吸收法对小酶鱼酶法水解过程中蛋白质，核酸、α氨基氮和总氮含量以及浊芳变化等指标进行了过程监控。实验结果表明可以用２８０ｎｍ紫外吸收法代替凯氏定氮法分析小梅鱼水解过程中清液的总氮含量变化，过程中２８０ｎｍ紫外吸收值的变化呈规律性递增。水解产物中总氮含量与２８０ｎｍ紫外吸收值的关系为Ｙ＝２．０１６Ｘ－０．０４。２６０     

鱼粉生产废弃榨汁的中性蛋白酶水解技术研究初探

本研究探讨了用中性蛋白酶法酶解鱼粉榨汁蛋白质的水解工艺以及水解液氨基酸组成和相对分子量的分布范围。应用正交试验法研究了鱼粉榨汁蛋白质酶解条件。结果表明:最佳酶解条件是酶量400U/g,酶解温度55℃,酶解时间6h,pH7.5,鱼粉榨汁蛋白质水解度平均为52.3%。应用氨基酸分析仪和高效液相色谱分析了该水解液的氨基酸组成和相对分子量的分布范围,水解液中相对分子质量为132～1500的2～10肽水解物占80%,氨基酸组成平衡、必需氨基酸含量丰富。鱼粉榨汁可以作为保健食品、营养强化剂的高品质原料,同时对于解决鱼粉加工行业的废水污染具有重要意义。     

挤压玉米粉液化酶促反应研究

通过扫描电镜观察经挤压变性后的玉米粉的组织状态,分析其有利于酶促反应的作用机理;考察了a-中温淀粉酶作用挤压玉米粉,反应温度、pH值、加酶量、底物浓度对酶解速率的影响规律,初步确定了酶解条件。结果表明：在底物浓度0．33mg/mL,温度70-78℃、pH值6．5～6．7,加酶量2～4u／m/L时,反应进行20min,液化液DE值在15％～18％范围。     

变性豆粕康氏木霉固态发酵及酶水解的研究

为了充分利用变性脱脂豆粕资源,对脱脂豆粕固态发酵产酶及酶水解过程影响因素进行了研究,影响康氏木霉固态发酵的主要因素为温度、pH值、培养基液固质量比及培养时间,影响纤维素酶水解的条件主要为温度、pH值及时间,结果表明:较适宜的产酶条件是温度为30℃,pH值 4.5,培养基液固质量比2.5:1 时间为4d,产纤维素酶活力为7.98U/g,以所产纤维素酶进行酶水解,较适宜条件为:温度50℃、pH值5.0、时间3d、还原糖为5.32%。 研究结果为变性脱脂豆粕进一步开发利用利用提供了参考数据。     

双酶水解蚕蛹蛋白工艺研究

研究了碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶法水解蚕蛹蛋白的工艺条件。通过单因素试验探讨了温度、加酶量、底物浓度、水解时间、酶质量比(碱性蛋白酶∶木瓜蛋白酶)对蚕蛹蛋白水解效果的影响,然后通过正交试验优化水解工艺务件。结果表明,影响水解率的主次关系依次为:温度、底物浓度、时间、酶用量、酶比。优化的工艺条件为:温度55℃,加酶量3.0%,底物浓度3%,水解时间6 h,酶质量比4∶1,上述条件下蚕蛹蛋白水解率达25.04%。     

双酶法制备玉米肽酶解条件研究

利用双酶法水解玉米蛋白粉制备玉米肽,探讨各因素对水解度(DH)的影响,旨在确定玉米肽制备的最佳酶解条件。结果表明：最佳酶解条件为温度55℃、底物质量浓度5g/100mL、pH8.5,按4% 的酶与底物比加碱性蛋白酶水解1.5h 后,调整pH 值至7.5,之后再按3.5% 的酶与底物比加木瓜蛋白酶水解1.5h。在此条件下,水解液中DH 为80.97%。与单酶法相比,DH 明显提高。     

玉米短肽的制备及其抗氧化活性的研究

酶解玉米蛋白对生产高营养且易于吸收、高附加值的具有生物学功能特性的生物产品具有重要意义。本文通过Alcalase AF2．4L和风味蛋白酶在适当条件下酶解玉米蛋白，酶解2h，水解度可达31％，短肽得率超过70％以上。经Sephadext^TMG-25进行分离，对其分离后的各组分进行抗氧化活性的研究，经测定，玉米短肽在浓度为1mg／ml时对邻苯三酚（PR）的自氧化抑制率达43．9％，相当于5U／ml SOD的抗氧化活性。     

海洋鱼蛋白低聚肽结构和抗氧化活性的体外消化稳定性

本研究通过体外模拟胃肠道消化海洋鱼蛋白低聚肽,运用高效凝胶过滤色谱、紫外全波长扫描、圆二色光谱表征其消化前后结构变化,测定其消化前后DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除能力、铁离子还原能力(FRAP)及氧自由基吸收能力(ORAC)的变化,以探究模拟胃肠道消化对海洋鱼蛋白低聚肽结构及抗氧化活性的影响.分子量分布数据揭...     

低值鱼蛋白多肽-钙螯合物的制备和抗氧化、抗菌活性研究

探讨了以南海低值鱼蛋白为原料,采用木瓜蛋白酶和风味酶的复合酶水解制备多肽复合物,并制备多肽-钙螯合物,对螯合工艺及螯合产物的结果及抗氧化和抗菌功能特性进行了初步研究.结果表明:DH为5%的多肽与钙离子螯合效果最佳,螯合率为81.75%;化学分析及红外光谱说明活性肽与钙离子螯合并形成稳定结构的螯合物;未经过乙醇沉淀的螯合钙具有明显的抗氧化活性,其抗氧化作用相当于生育酚的94.43%,经过80%乙醇沉淀的螯合物具有显著的抗枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌活性,其抑菌圈均直径分别为16mm和16mm.通过本研究,不仅为低值鱼的深精加工与综合利用开辟了新的途径,而且也为低值鱼酶解多肽螯合物的广泛应用奠定了基础.