姬松茸多糖的提取及其对D-半乳糖诱导衰老小鼠的免疫调节作用

建立姬松茸多糖(Agaricus blazei polysaccharides,ABP)的提取方法,并研究姬松茸多糖对D-半乳糖诱导的衰老小鼠免疫调节作用。采用水提醇沉法提取姬松茸多糖,通过单因素实验和正交试验筛选并优化姬松茸多糖的最佳提取工艺;采用D-半乳糖(400 mg/kg)构建衰老小鼠模型,将小鼠随机分为5组,空白对照组(CON)、模型组(MOD)、姬松茸多糖低剂量组(ABP-L,200 mg/kg/d)、姬松茸多糖中剂量组(ABP-M,400 mg/kg/d)、姬松茸多糖高剂量组(ABP-H,800 mg/kg/d);分别测定各组小鼠胸腺和脾脏指数;CCK-8法测定ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖转化;ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6含量。结果表明,姬松茸多糖最佳提取工艺为:提取温度100℃,提取时间3 h,料液比1∶20 g/mL,提取次数3次,此时姬松茸多糖的平均得率为8.814%±0.109%;与模型组相比,姬松茸多糖高剂量组显著提高小鼠脾脏(p0.01)和胸腺指数(p0.05),姬松茸多糖高剂量组极显著促进衰老小鼠脾细胞增殖(p0.01),增加衰老小鼠血清中TNF-α(p0.01)、IL-6(p0.01)含量。姬松茸多糖对D-半乳糖诱导的衰老小鼠模型具有免疫增强作用。     

酵解姬松茸多糖对小鼠免疫指标和肠道菌群的影响

目的:采用小鼠试验检验酵解姬松茸多糖对小鼠免疫和肠道菌群的影响。方法:昆明系小鼠100只,随机分为5组,分别投喂试验饲料处理:基础饲料中添加质量分数为0%、0.15%、0.3%、0.6%剂量的酵解姬松茸多糖和0.6%的水提姬松茸多糖,酵解松茸多糖来源于酵素酵解姬松茸法提取。其中各组小鼠的半数于饲喂试验第7天处死,采用平板计数法检测小鼠盲肠中乳杆菌(Lactobacilli)、双歧杆菌(Bi?dobacteria)、肠杆菌(Enterobacteria)、肠球菌(Enterococci)的数量;另一半于饲喂试验的第14天处死,测定小鼠体质量、脏器指数、血清学指标及肠道菌群数量。另准备10只小鼠于第0天处死,测定试验起始点肠道菌数量作为参照。结果:试验14 d,对小鼠脾脏指数影响顺序:酵解姬松茸多糖处理组水提姬松茸多糖处理组0%剂量组,前面2组与0%剂量组比较差异显著。与0%剂量组比较,酵解姬松茸多糖各处理组血清中DAO、D-LA、ET和TNF-α的水平均显著降低;0.6%剂量酵解姬松茸多糖组TNF-α含量极显著(P0.01)低于0.6%剂量水提姬松茸多糖组,D-LA、ET显著降低(P0.05)。试验期间,多糖处理各组肠道菌数量,与0%剂量组比较均具有差异,并与试验起始期不同;与0.6%剂量水提水提姬松茸多糖组比较,0.3%剂量酵解姬松茸多糖组肠道中乳杆菌数量极显著(P0.01)增加;0.6%剂量酵解姬松茸多糖组双歧杆菌的数量显著(P0.05)增加,且肠杆菌、肠球菌的数量显著(P0.05)降低。结论:酵解姬松茸多糖具有与水提姬松茸多糖相似或更好地调节小鼠免疫功能和优化肠道菌群的作用。     

姬松茸多糖增强免疫作用及急性毒性研究

目的：研究姬松茸多糖对小鼠免疫功能的调节作用及急性毒性作用。方法：通过观察姬松茸多糖对小鼠免疫器官的影响及对网状内皮系统廓清血流中惰性碳粒能力的影响,分析姬松茸多糖对哺乳动物的免疫调节作用;采用改进寇氏法研究姬松茸多糖的急性毒性。结果：1）姬松茸多糖（77～150 mg/kg,灌胃,连续7 d）能促进小鼠胸腺和脾脏的增殖,120 mg/kg的姬松茸多糖能使幼鼠胸腺增长13.1%,脾脏增长8.5%,使成年鼠胸腺增长4.0%,脾脏增长18.3%;150 mg/kg姬松茸多糖使小鼠碳粒吞噬指数提高21.7%,吞噬系数增加11.8%,表明姬松茸多糖对小鼠的免疫功能有促进作用。2）静脉注射姬松茸多糖的LD50为840.8 mg/kg,相当于成人一次静脉注射6.5 g,2 周后存活小鼠体质量平均增长61.1%;灌胃给予姬松茸多糖15.0 g/kg,小鼠无一死亡,仅出现轻微的不适,该剂量相当于成人一日摄入115.4 g姬松茸多糖,相当于食入姬松茸881～1 265 g。结论：姬松茸多糖能增强小鼠的免疫调节功能,且急性毒性甚微。     

大豆多糖对S180荷瘤小鼠抗肿瘤作用的免疫机制研究

从免疫学角度出发探讨大豆多糖的抗肿瘤作用。采用动物移植性肿瘤实验观察大豆多糖对小鼠体内肿瘤细胞生长和免疫器官胸腺、脾脏的影响;MTT法测定T淋巴细胞增殖功能;流式细胞仪检测大豆多糖对S180荷瘤小鼠T淋巴细胞亚群的影响;ELISA法检测荷瘤小鼠血清中细胞因子IL-2含量。结果表明大豆多糖对S180肉瘤生长有抑制作用,且以高剂量最佳;各剂量组对脾脏指数均有显著性提高,但中、高剂量给药组对胸腺有抑制作用;能提高小鼠脾淋巴细胞的增殖活性,与阴性对照组相比,中、高剂量组差异显著。大豆多糖明显增强ConA刺激的淋巴细胞增殖,与阴性对照组比较,中、高剂量组差异显著;能够不同程度地提高S180荷瘤小鼠脾细胞CD4+细胞数,增加CD4+/CD8+细胞比值;能提高S180荷瘤小鼠外周血血清中IL-2的含量。大豆多糖通过提高T淋巴细胞的增殖活性,并促进IL-2等细胞因子的分泌,由此发挥抗肿瘤作用。     

麒麟菜多糖体内抗肿瘤机理研究

本文对麒麟菜多糖抑制小鼠体内H22肝癌细胞增殖的作用机理进行了研究。构建动物肿瘤模型,观察实验期内各组小鼠肿瘤体积及脏器指数的变化,并通过Elisa实验确定各组小鼠血清中肿瘤特异性抗体含量,流式细胞术检测小鼠胸腺、脾脏、外周血及实体肿瘤内T细胞亚群比例,HE染色和PI单染分析小鼠实体肿瘤内细胞状态。结果表明,灌喂600 mg/(kg?d)麒麟菜多糖可显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,有效保护其胸腺和脾脏,并可显著增强胸腺发育分化CD4~+T细胞的能力(p0.05),提高小鼠血液中肿瘤特异性抗体的含量(p0.05)和T细胞亚群比例(p0.05);模型组和多糖组小鼠实体肿瘤浸润淋巴细胞中均主要是CD8~+T细胞,但多糖组小鼠实体瘤内细胞凋亡率显著升高(p0.05)。因此初步断定麒麟菜多糖可显著提高荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫水平,使CD8~+T细胞在CD4~+T细胞和肿瘤特异性抗体的辅助下有效抑制H22细胞体内增殖。     

榆耳发酵液多糖对小鼠免疫功能的影响

为了探讨榆耳发酵液多糖对小鼠免疫功能的影响,用1、5和20mg/d的发酵液多糖饲喂小鼠后,测定了脾脏指数、血清溶血素水平、巨噬细胞吞噬率、T淋巴细胞转化率及CD4+/CD8+比值.结果表明,与水对照组相比,低、中、高三个剂量对脾脏指数均无影响;低剂量组可显著提高巨噬细胞吞噬率(p ＜0.01)和T淋巴细胞转化率(p＜0.05);中、高剂量组对血清溶血素水平、巨噬细胞吞噬率、T淋巴细胞转化率及CD4+/CD8+比值等四项免疫指标有显著(p＜0.05)或极显著(p＜0.01)增高.说明榆耳发酵上清液多糖对小鼠具有良好的免疫增强功效.     

姬松茸保健饮液的研制及其免疫调节功能评价

目的:研究姬松茸发酵保健饮液的制备方法并对其免疫调节活性进行评价.方法:将姬松茸液态深层发酵液浓缩后,与菌丝体提取液进行混合,再经精滤、调配、装瓶、杀菌、冷却等工序制得姬松茸保健饮液.采用昆明种小鼠经口灌胃方式给与5、10和30mg/kg·d三种多糖剂量的保健饮液,通过测定免疫器官重量、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞指数、鸡红细胞作免疫源的溶血素含量及小鼠外周血中淋巴细胞酶标记染色测定、2,4-二硝基氟苯诱发的迟发型变态反应来评价该保健饮液对小鼠免疫功能的影响.结果:姬松茸发酵保健饮液能增强小鼠的胸腺指数和脾指数,提高腹腔巨噬细胞的吞噬功能和溶血素含量,增强2,4-二硝基氟苯所致的迟发型变态反应,其最适作用剂量为10mg/kg·d.结论:姬松茸发酵保健饮液可以提高小鼠非特异性免疫、特异性免疫和细胞免疫功能.     

黄秋葵粉对衰老小鼠抗疲劳和免疫功能的影响

探讨黄秋葵果实粉(OFP)对D-半乳糖致衰老模型小鼠免疫功能和抗疲劳作用的影响。以昆明种小鼠为研究对象,颈背部皮下注射D-半乳糖造模。正常对照组、模型对照组饲喂基础饲料,实验组小鼠饲喂含受试物低、中、高剂量(32.00、64.00、128.00 g/kg)饲料,对小鼠进行抗疲劳试验、巨噬细胞吞噬试验、免疫器官指数及血液某些生化指标的测定。D-半乳糖致衰小鼠负重游泳时间、肝糖原含量、胸腺指数、脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数下降,血清尿素氮、血糖、总胆固醇、甘油三酯含量明显上升,与正常小鼠比较差异显著;饲喂不同剂量的黄秋葵果实粉后均能提高小鼠负重游泳时间、肝糖原含量、胸腺指数、脾脏指数、腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数,同时降低血清尿素氮含量、总胆固醇、甘油三酯含量,对血糖无明显影响。适量摄入黄秋葵果实粉能显著提高衰老小鼠的免疫功能和抗疲劳能力。     

牛初乳对免疫抑制小鼠免疫功能影响的研究

目的探讨牛初乳对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法将ICR雌性小鼠随机分为五组:正常对照组,模型对照组和牛初乳低、中、高剂量组。观察不同剂量牛初乳对免疫抑制小鼠脾指数、胸腺指数、细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞吞噬功能及脾脏T淋巴细胞亚群的影响。结果三个剂量组的脾指数和胸腺指数显著低于正常对照组(P<0.01)。中、高剂量组脾脏T淋巴细胞增殖能力显著高于模型对照组(P<0.01)。三个剂量组溶血空斑数均显著高于模型对照组但低、高剂量组低于正常对照组(P<0.01)。三个剂量组校正后吞噬系数α明显高于模型对照组及正常对照组(P<0.01)。中剂量组脾脏T淋巴细胞中CD4+百分比显著高于模型对照组及正常对照组(P<0.01)。结论牛初乳能够有效提高免疫抑制小鼠细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞吞噬功能和脾脏CD4+百分比。     

黄芩多糖的免疫调节活性

目的:探讨黄芩多糖的免疫调节活性。方法:通过动物试验,检测小鼠血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)含量,补体C3、C4的含量和溶菌酶活性,并测定胸腺指数与脾脏指数。结果:黄芩多糖可增加小鼠胸腺质量,显著增加小鼠脾脏质量;增加小鼠血清中IgG含量,显著增加小鼠血清中IgA含量与IgM含量;显著增加小鼠血清中补体的含量,小鼠血清溶菌酶活性。结论:黄芩多糖具有增加机体的免疫功能作用,并在一定程度上对小鼠的体液免疫有所增强,还能激活并提高小鼠非特异性免疫反应。