具有良好风味嗜热链球菌的筛选及其产香特性分析

嗜热链球菌作为酸奶发酵剂的常用菌株之一,在牛乳发酵和贮藏过程中可以赋予产品优良的质地、丰富的营养价值和独特的风味.本实验在前期研究的基础上,以商业发酵剂为对照组,以分离自不同地区传统发酵乳中的具有良好发酵特性的7株嗜热链球菌为实验菌株,采用固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术对发酵终点,即pH4.5时发酵乳中的挥发性风...     

分子生物学法快速筛选具有优良产酸特性的嗜热链球菌

目的:嗜热链球菌具有优良的发酵特性及生物学功能,是发酵乳制品中常用的发酵剂之一。由于高产酸菌株有助于提高生产效率,因此在工业生产中备受亲睐。方法:通过发酵乳的发酵试验,结合分子生物学技术对分离自自然发酵乳产品中的28株嗜热链球菌进行了筛选。结果:共筛选出5株高产酸菌株,分别是IMAU80844、IMAU80809、IMAU10636、IMAU80287、IMAU80846。基于产酸基因序列构建的系统发育树与发酵试验结果一致,可将高产酸菌株和低产酸菌株区分开,进一步验证了结果的可靠性。结论:本试验结果证实分子生物学方法能够快速筛选具有优良产酸特性的嗜热链球菌菌株,为今后筛选高产酸菌株提供新思路。     

产碱性蛋白酶的嗜热菌株筛选及发酵条件研究

在河南商丘盐碱地堆肥土壤样中分离到1株产碱性蛋白酶的嗜热菌株SR-15,经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。摇瓶发酵研究表明,其适宜培养条件为:玉米粉40g/L,黄豆粉40g/L,MgSO40.5g/L,NaCl10g/L,K2HPO41.0g/L,起始pH10.0,培养温度45℃,摇瓶转速190r/min,250mL三角瓶的装液量100mL,48h后发酵液酶活为1180U/mL。     

保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌产酸产黏特性研究

研究了保加利亚乳杆菌(LBZ)和嗜热链球菌(STZ)单一及混合菌种(LSZ,GST)发酵及冷藏过程中产酸和产黏特性。结果表明:①混合菌种产酸能力较单一菌种强,混合菌种中LSZ高于GST,单一菌种中STZ远强于LBZ,其凝乳时间与产酸能力相适应;②乳酸菌发酵过程中的产酸能力均强于冷藏过程中的产酸能力;③混合菌种的产黏能力强于单一菌种,混合菌种中GST产黏能力远远超过LSZ,单一菌种中STZ的产黏能力约是LBZ的2倍,GST和LSZ分别在凝固后36h和24h黏度最大,最大值分别为11570mPa.s和4300mPa.s;④混合菌种在发酵及贮藏过程中黏度值出现2个峰,而单一菌种仅有1个峰;⑤LSZ适宜加工凝固型酸奶发酵剂,GST适宜制作搅拌型酸奶发酵剂。     

Nisin抗性嗜热链球菌的筛选

采用两倍稀释法在脱脂乳培养基和乳清培养基中测定了nisin对嗜热链球菌9的最小抑菌浓度(MIC)。在脱脂乳培养基中逐渐增加nisin的浓度，驯化嗜热链球菌9，直到其抗性达到300IU／ml。经生产性能鉴定和遗传性状实验，获得两株适宜做酸奶发酵剂的nisin抗性嗜热链球菌9.31和9．4。     

瑞士乳杆菌和嗜热链球菌产酸特性的研究

研究了瑞士乳杆菌和嗜热链球菌单一及混合菌种在发酵过程中产酸特性。结果表明:瑞士乳杆菌产酸能力较嗜热链球菌强;不同比例的混合菌种产酸均比单一嗜热链球菌产酸快;瑞士乳杆菌与嗜热链球菌(1:1)混合培养后酸化弱。     

嗜热链球菌促生长物质研究及增殖培养基优化筛选

研究了在MRS培养基中添加不同营养物质对嗜热链球菌生长的影响,进一步采用正交试验优化筛选了嗜热链球菌的增殖培养基。结果表明:在MRS培养基中添加玉米浆、番茄汁、啤酒液、乳糖可显著促进试验菌株的细胞生长(P<0.01),而添加蛋白胨、酵母浸膏、CaCl2对细胞生长无显著影响(P>0.01);利用L934正交试验筛选出增殖培养基的最佳配比为:在MRS培养基中添加0.3%玉米浆、7.5%番茄汁、5.0%啤酒液、1.0%乳糖;试验菌株在增殖培养基中经37℃培养24h,活菌数可达4.69×109cfu/ml,较对照MRS培养基的活菌数提高40.78倍。     

保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的产香特性研究

通过分析凝固型酸奶后发酵过程中香气物质乙醛和丁二酮的含量,研究了保加利亚乳杆菌(LBZ)和嗜热链球菌(STZ)单一及混合菌种(LSZ、GST)后发酵过程中产香特性。结果表明香气物质丁二酮:LBZ菌种基本上保持在0.09mg/L左右;STZ菌种在34h和154h分别有个峰值,但波动较大;LSZ菌种基本较为稳定,且保持在0.23~0.31mg/L之间;GST菌种在0.73~0.92mg/L之间,是LBZ菌种的10倍左右,但总的来说呈下降趋势。香气物质乙醛:LBZ在10h为高11.68mg/L;STZ出现了两个峰值(分别34h和154h);GST在34h有个峰值,其后逐渐下降;LSZ在154h有个峰值,在16.26~19.54mg/L之间波动,总的来说较稳定,因此LSZ为最佳凝固型酸奶菌种。     

嗜热链球菌的筛选及其高活性菌粉制备

为获得优良酸奶发酵剂嗜热链球菌菌株,并确定制备高活性菌粉的培养基与保护剂,利用改良TJA培养基,自市售酸奶中分离纯化出6株球菌,经生理生化试验鉴定为嗜热链球菌。进一步对它们的发酵特性进行比较,结果表明ST4发酵性能优良。以10%复原脱脂乳为基础培养基,通过正交试验方法优化得出ST4最佳增殖培养基配方为酵母粉0.5%、番茄汁7.5%、麦芽汁7.5%、乳清粉7.5%,活菌数达到1.72×109cfu/mL。正交试验优化所得ST4的最佳保护剂配方为海藻糖20%、乳糖2.5%、谷氨酸钠5%、甘油0.5%,经冷冻干燥后其活菌数达到1.56×1011cfu/g。     

一株嗜热脂肪芽孢杆菌的筛选及其产酶特性研究

从高温大曲中分离得到了一株产淀粉酶和蛋白酶的嗜热芽孢杆菌ZJY-1,研究了菌株ZJY-1的生长特性和产酶特性,并应用于强化麸曲探究其价值。经鉴定分析,菌株ZJY-1为嗜热脂肪芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus),其最适生长pH为7.0,有良好嗜热性,最适生长温度为55℃,且在65℃高温下仍生长良好;菌株酶活力检测结果表明,不同发酵时间菌株功能酶活力存在差异,淀粉酶活力最高达到了133.5 U/g±12.5 U/g,蛋白酶活力最高为175.4 U/g±4.8 U/g;通过制备强化麸曲试验表明,ZJY-1麸曲具备分泌蛋白酶和淀粉酶能力,生物量指标可达到5.7×10¹⁰±2.8×10⁹CFU/g。本研究丰富了大曲微生物菌种资源,为高温曲发展方向提供了参考价值。     

嗜热链球菌产SOD的培养条件

以嗜热链球菌为实验菌株,利用摇床液体发酵,采用完全随机化设计研究不同培养温度、不同培养时间和植物(枸杞和刺五加)提取液不同添加量对嗜热链球菌产超氧化物歧化酶(SOD)的影响,并用方差分析和回归分析对不同处理的实验结果进行比较。方差分析表明：不同培养温度对嗜热链球菌产SOD的影响差异极显著(P＜0.01),当培养温度达到41℃时,SOD平均产量达到最高(901.667U/g);不同培养时间对嗜热链球菌产SOD的影响差异极显著(P＜0.01),当培养时间为48h时,SOD平均产量达到最高(932.6667U/g);不同植物提取液添加量对嗜热链球菌产SOD的影响差异极显著(P＜0.01),植物提取液添加量为8%时,SOD平均产量达到最高(1347.0000U/g)。综合考虑降低成本,提高效益等因素,确定最优方案为：培养温度41℃、培养时间24h、植物提取液添加量为8%,此时获得较高的SOD产量,且投入与产出比较高。回归分析表明：SOD产量与培养温度之间回归关系不显著(P＞0.05);SOD产量与植物提取液添加量之间存在极显著的线性回归关系：Y=865.033+52.383X(P＜0.01);SOD产量与培养时间之间存在极显著的线性回归关系：Y=238.757+17.346X(P＜0.01)。     

三聚氰胺对嗜热链球菌生长影响的研究

通过在MRS液体培养基里分别添加0‰、0.25‰、0.5‰、1‰、2‰、3‰及饱和的三聚氰胺,接种嗜热链球菌,在42℃下培养48h,通过测定培养液的pH变化和计数细菌总数来考察三聚氰胺对嗜热链球菌生长的影响。结果表明:嗜热链球菌不能以三聚氰胺为氮源物质而加以降解利用,三聚氰胺在水溶解度范围内对嗜热链球菌的生长没有促进作用,只有微弱的抑制效果。     

猪血发酵菌株的筛选及其产蛋白酶特性的研究

为提高猪血蛋白的利用率,从实验室现有菌种中筛选具有优良猪血发酵性能的菌株。研究结果表明,黑曲霉HF-1发酵160 h后,蛋白水解程度最高,pH下降幅度也最高,具有最佳的发酵性能。酸性蛋白酶是在猪血蛋白水解过程中起主要作用的蛋白酶。黑曲霉HF-1具有更好的发酵猪血的性能,可能也与其分泌酸性蛋白酶的能力有关。     

巴西菇对嗜热链球菌生长影响的研究

通过在培养嗜热链球菌的MRS培养基中分别添加5%、10%、15%、20%的巴西菇提取液作为增殖因子,并做空白对照,37℃培养48h。每2h测定pH,最后计算并比较细菌总数。本实验结果表明,添加15%的巴西菇提取液对其生长有促进作用,巴西菇提取液对嗜热链球菌生长pH没有明显的影响。      

嗜热链球菌多位点序列分型及其特性测定

本文旨在研究嗜热链球菌多位点序列分型方法的可行性。利用多位点序列分型技术,对实验室保藏的8株和全基因组公布的6株嗜热链球菌进行基因分型,并分析菌株的同源性,最后测定8株嗜热链球菌的产酸速率和蛋白质水解等表型特征。结果显示8株实验室菌株分属于4种基因型,6株全基因组菌株分属于5个基因型;菌株亲缘关系远近不一,其中分离自中国的ND03、MN-ZLW-002和0#具有较高同源性,分离自新疆酸奶的09086、09087和09088具有较高同源性,分离自内蒙古酸奶的菌株09067、09078和09079与分离自法国酸奶的JIM8232具有较高同源性,分离自法国发酵剂的s4与分离自法国酸奶的CNRZ1066具有较高同源性;8株实验室菌株的产酸速率和蛋白质水解具有菌株特异性,且表型特性与基因分型基本一致。多位点序列分型可对嗜热链球菌进行有效分型。     

巴西菇对嗜热链球菌生长影响的研究

通过在培养嗜热链球菌的MRS培养基中分别添加5%、10%、15%、20%的巴西菇提取液作为增殖因子,并做空白对照,37℃培养48h。每2h测定pH,最后计算并比较细菌总数。本实验结果表明,添加15%的巴西菇提取液对其生长有促进作用,巴西菇提取液对嗜热链球菌生长pH没有明显的影响。     

唾液链球菌嗜热亚种荚膜多糖生理功能特性研究

通过对唾液链球菌嗜热亚种的研究发现,细胞固有发酵活性,抵抗外界不良环境能力英膜无关。破坏唾液链球菌嗜热亚种ＬＣＸ２００１的英膜,会使发酵速度加快,但同时对外界不良环境的抵抗力下降。这些研究结果表明,有无英膜,或英膜大小对同一亚种所表现出来的不同生理特性没有决定作用;破不英膜,会影响细胞体与外界物质交换能力,对细胞体许多生理功能有影响,英膜起到阻止外界物质的进入细胞和细胞内产生的乳酸向外界释放的作用     

嗜热链球菌抗噬菌体菌株的选育及其发酵特性

为了筛选到适合酸奶生产的抗噬菌体菌株,采用双层平板法及自然选育的方法,从酸奶异常发酵液中分离到3种不同的噬菌体,并获得了4株具有抗这些噬菌体能力的非溶源性抗性菌株St1、St2、St3、St4,对这4株抗性菌株进行20次传代和酸奶发酵实验,结果表明其抗性稳定,其中St3发酵酸奶产酸可达110°T,凝乳时间与出发菌株基本相当,在高噬菌体浓度下发酵,产酸正常,黏度、硬度、口感较好,凝乳时间较短、乳清析出较少并且富集培养后菌体浓度可达1010CFU/mL,适宜于工业生产。     

嗜热链球菌在脱脂乳中发酵特性的研究

本文主要探讨了5株不同嗜热链球菌菌株(ST、ST1、ST5、ST7、ST9)在脱脂乳中发酵8 h和24 h的产酸和产粘情况的对比,并从中选出两株相差较大的菌株ST5和ST9,研究其在发酵过程中的p H、滴定酸度、氨基酸态氮和粘度的变化规律。5株嗜热链球菌中,产酸能力大小顺序为:ST5>ST,ST7>ST1>ST9,产粘能力大小顺序为:ST5>ST7>ST>ST1>ST9。其中,ST5发酵乳的酸度和粘度最大,ST9则相反。对两种菌株进一步研究中发现,在不同的发酵时间,ST5的产酸能力和产粘能力均较强,其对应的发酵乳还原糖和总糖含量较低,且二者发酵乳的粘度变化均呈抛物线型,但是ST9菌株对蛋白质的降解能力大于ST5。研究发现,不同嗜热链球菌菌株在脱脂乳中的发酵特性具有差异性,且随发酵时间的增加而变化。      

二株嗜热链球菌益生特性的体外研究

对嗜热链球菌ST1和嗜热链球菌KS1的部分益生性及功能特性进行了研究。考察了ST1和KS1对酸和胆盐的耐受性,结果表明,ST1和KS1在pH值为3.0条件下培养3h的存活率分别为67.17%和67.49%,在pH值为4.0或质量分数为0.3%胆盐环境中仍可以生长,表现出较高的存活力。通过抑菌实验表明ST1和KS1可以抑制常见的致病菌金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌和福氏志贺氏菌。在对抗生素敏感实验中,ST1对其中的3种抗生素有耐药性,而KS1对6种抗生素有耐药性。研究还发现ST1和KS1还具有较高的降胆固醇的能力,胆固醇的去除率分别为65.14%和74.49%。