梅花鹿鹿角盘多肽双酶水解工艺及优化研究

鹿角盘是一味中药,具有温补肝肾、益脾胃、强筋骨、活血化瘀、治疗乳痈初起等功效。研究以鹿角盘粉为原料,用水解度和多肽得率作为衡量最佳提取工艺的指标,筛选出最佳双酶组合,水解制得鹿角盘多肽,在单因素实验的基础上,应用Box-Benhnken的中心组合实验设计和响应面（RSM）分析法,确定了最佳酶解工艺为:温度49℃、p H8.0、加酶量11000 U/g、酶活比（木瓜蛋白酶∶胰蛋白酶）为2∶1、底物质量浓度为6 g/100 m L、水解时间270 min。在此条件下,水解度达到15.91%。      

响应面法优化超滤提纯无梗五加果多糖工艺

研究响应面法优化超滤提纯无梗五加果多糖工艺。在单因素试验的基础上,利用Minitab 15软件设计了响应面试验。研究超滤压力、超滤时间、超滤温度、料液质量浓度对超滤膜通量的影响并确定最佳工艺参数。结果表明超滤压力0.30MPa、超滤时间10min、超滤温度40℃、料液质量浓度1.8mg/mL,预测超滤膜通量达到理论值最高0.077mL/(cm~2·min),实际膜通量值为0.070mL/(cm~2·min),与预测值基本相符。     

响应面法优化海参多肽脱色工艺

为除去海参多肽中有色物质以利于生物活性肽的分离纯化,经酶解法制备海参多肽酶解液,以脱色率和多肽回收率为评价指标,考察不同脱色剂对海参多肽酶解液的脱色效果,从中筛选出XX型粉末活性炭。在单因素试验的基础上,利用响应面法对脱色条件进行优化。最佳脱色条件为:活性炭用量0.9 g/100 mL,时间32 min,温度50℃,pH 2.2,在此条件下,海参多肽液的脱色率达到(85.39±2.25)%,多肽回收率达到(88.57±1.86)%,与理论值无显著差异。     

响应面法优化超滤提取菠萝蛋白酶工艺条件

采用超滤法从菠萝加工下脚料中提取菠萝蛋白酶。考察膜截留分子量、压力、超滤pH和超滤时间等因素对酶活截留率的影响。在单因素试验的基础上,根据中心组合设计原理,采用四因素三水平的响应面法对超滤条件进行优化,依据回归方程对各影响因素进行分析,获得最佳提取工艺条件为:膜截留分子量20 kD,压力0.14 MPa,超滤pH3.98,超滤时间42 min,在最优条件下,菠萝蛋白酶的酶活截留率达93.8%。     

响应面法优化油茶籽多肽制备的工艺研究

针对油茶籽加工副产物利用率低,油茶籽多肽制备得率和纯度不高等问题,本研究利用中性蛋白酶对油茶籽蛋白进行水解,研究了酶解pH、酶解温度、底物浓度、加酶量和酶解时间5个单因素对油茶籽多肽制备的影响,在单因素试验的基础上,选取了底物浓度、酶解温度和加酶量3个因素,采用综合平衡法,以酶解后油茶籽蛋白的水解度、游离氨基酸浓度和多肽浓度隶属度的综合分为指标,进行三因素二次旋转试验设计,并进行响应面分析,以优化油茶籽多肽的制备条件,优化结果底物浓度3.00%、酶解温度47.0℃、加酶量6 440 u/g底物,在该优化条件下的试验显示,油茶籽蛋白水解度19.25%、游离氨基酸浓度76.60μmol/mL、油茶籽多肽浓度61.35 mg/mL,综合分0.985,优化结果理想,说明该工艺可生产质量较好的小分子多肽,为油茶籽多肽的开发应用奠定了一定的理论基础。     

响应面法优化带鱼蛋白多肽螯合亚铁制备工艺

以带鱼鱼糜为原料,研究带鱼蛋白多肽和亚铁离子的螯合工艺条件。分别以螯合反应p H、螯合温度、时间、Fe Cl2溶液与酶解液体积比、抗坏血酸添加量为主要研究对象,在单因素实验进行螯合率测定的基础上,通过Box-Behnken设计响应面优化实验。结果显示,螯合反应的最佳工艺参数为p H6.9,温度29℃,螯合时间30 min,Fe Cl_2溶液与酶解液体积比为1∶50,抗坏血酸添加量为酶解液质量的0.1%,该条件下得到的螯合率为80.46%。红外图谱研究表明,螯合前后结构发生改变,证明带鱼蛋白多肽和亚铁离子确实形成新的螯合物。     

响应面法优化鱼皮胶原蛋白多肽螯合锌工艺

采用响应面法优化鱼皮胶原蛋白多肽与硫酸锌进行螯合反应的条件,制备胶原肽螯合锌产品.以胶原肽与硫酸锌的质量比、时间、温度和pH值4因素3水平进行Box-Behnken中心组合实验,运用Design-Expert7.0数据统计分析软件,建立螯合率的回归方程.结果表明,最佳螯合工艺条件为胶原肽与硫酸锌的质量比2.8∶1,时间33.2min,温度40.1℃,pH值7.3.在此条件下,螯合率为67.25％,与模型的预测值67.36％接近.紫外光谱检测结果初步显示,胶原肽与锌发生了螯合并产生了一种新型螯合物.     

响应面法优化发酵大豆多肽工艺条件研究

以大豆分离蛋白为原料,通过米曲霉发酵作用生产大豆多肽。先以水解度为指标通过单因素实验初步得到发酵工艺条件,再根据Box-Benhnken的中心组合实验设计原则,在单因素实验的基础上采用3因素3水平的响应面分析法,建立了大豆多肽含量与各影响因子的回归方程,并得到以大豆多肽含量为响应值的响应面图和等高线图,进而得出米曲霉发酵大豆多肽的最佳工艺条件:发酵液初始pH6.03、发酵温度29.0℃、摇瓶转速154.5r/min、发酵时间60～70h,在此条件下大豆多肽的理论含量可达0.765mg/mL。     

响应面法优化带鱼蛋白多肽螯合亚铁制备工艺

以带鱼鱼糜为原料,研究带鱼蛋白多肽和亚铁离子的螯合工艺条件。分别以螯合反应p H、螯合温度、时间、Fe Cl2溶液与酶解液体积比、抗坏血酸添加量为主要研究对象,在单因素实验进行螯合率测定的基础上,通过Box-Behnken设计响应面优化实验。结果显示,螯合反应的最佳工艺参数为p H6.9,温度29℃,螯合时间30 min,Fe Cl₂溶液与酶解液体积比为1∶50,抗坏血酸添加量为酶解液质量的0.1%,该条件下得到的螯合率为80.46%。红外图谱研究表明,螯合前后结构发生改变,证明带鱼蛋白多肽和亚铁离子确实形成新的螯合物。      

响应面法优化牛骨制备骨多肽工艺的研究

以牛骨为原料,利用蛋白酶对牛骨水解进行单因素实验,在单因素基础上,根据中心组合实验设计原理运用响应面法,以水解度和多肽得率为响应值,得到最佳酶解条件为:酶解时间3.45 h,加酶量10500 U/g,底物浓度12%,温度45℃,p H7.5,此参数下水解度(DH)为14.29%,多肽得率69.76%,接近响应面预测值。结果表明,酶水解牛骨可以有效分解骨蛋白产生短链肽类,对牛骨蛋白利用以及开发活性肽有十分重要意义,为牛骨资源的精深加工提供实验依据。      

响应面法优化酱油中多肽的脱色工艺

为除去酱油中有色物质以利于对生物活性肽的分离纯化,以脱色率和肽损失率为评价指标研究活性炭对酿造酱油多肽溶液的脱色条件,在单因素实验的基础上,确定脱色时间40min后,利用响应面法对脱色条件进行优化,得到最佳脱色条件为:活性炭用量1.8%(w/v,%),脱色温度54.9℃,pH为6.4,在此条件下,酱油多肽液的脱色率达到80.94%±0.45%,与模型值81.09%无显著差异。该脱色工艺简单可靠,脱色效果好。该方法得到的活性肽能够用于后期进一步分离纯化、序列分析及生物活性的研究,为开发富含功能因子的酱油奠定理论基础。      

响应面法优化猪脾免疫活性多肽提取工艺研究

目的通过响应面法,优化猪脾中免疫活性多肽的提取工艺。方法选择适当的酶水解猪脾脏,并在单因素试验的基础上,采用Box—Behnken设计优化提取工艺,建立各因素与提取液中多肽含量的数学模型,最后采用淋巴细胞转化试验初步验证其活性。结果获得了猪脾中免疫活性多肽提取工艺：料液比1：2．6g／mL,温度40℃,pH7．0,胰蛋白酶浓度485U／g,中性蛋白酶浓度1711U／g,每100g含活性多肽2．930g,与理论计算值2．929g基本一致,活性约为对照组的1．5倍。结论确定了猪脾免疫活性多肽最佳提取工艺。     

响应面法优化酶解制备核桃多肽工艺

以高蛋白核桃粉为原料,采用酶解法制备核桃多肽。在单因素实验基础上,根据Box-Behnken中心组合实验设计原理,以多肽质量浓度和水解度为响应值,研究p H、温度、加酶量和时间对其影响,在此基础上将酶解液通过超滤系统分离得到不同分子量多肽,并测定不同分子量多肽的抗氧化活性。结果表明:料液比1∶20 g/m L磨浆时蛋白质溶出较充分,碱性和木瓜蛋白酶按1∶1复配,风味蛋白酶添加量2000 U/g辅助酶解时水解效果较好,酶解法提取核桃多肽最优工艺:p H 7.10,温度50℃,加酶量8000 U/g,时间3.0 h,该条件下多肽质量浓度为10.01 mg/m L,水解度为11.45%,接近理论值。经超滤分离后得到≤5、5¹0、10³0和≥30 k Da四种分子量多肽,不同分子量多肽都具有一定的抗氧化活性,并且≤5 k Da多肽的还原力(IC₅₀=5.47 mg/m L)、DPPH·清除能力(IC₅₀=1.03 mg/m L)、·OH清除能力(IC₅₀=5.02 mg/m L)、O-2·清除能力(IC₅₀=0.68 mg/m L)和总抗氧化能力（14.18 U/m L）均高于其它三种多肽。本研究为核桃产品的深加工和开发提供了一定的理论指导。      

响应面法优化鱼籽多肽酶解液脱色工艺

采用活性炭对鱼籽多肽酶解液进行脱色,以脱色率和多肽回收率为评价指标,分别考察活性炭用量、时间、温度、p H对脱色效果的影响,在单因素实验的基础上,采用响应面法优化鱼籽多肽酶解液的脱色工艺。结果表明:鱼籽多肽最佳脱色工艺条件为10.5%(m/m)、时间41 min、温度55℃、p H2.8,在此条件下,脱色率77.51%±1.49%、多肽回收率82.26%±2.82%,与理论值差异不显著。该脱色工艺简单可靠,脱色效果好,多肽回收率高,为鱼籽多肽产品后期研发提供依据。      

响应面法优化梅花鹿胎盘多肽超声波杀菌工艺

以酶解获得的梅花鹿胎盘多肽为原料,进行超声波杀菌,研究超声功率、超声时间和脉冲时间对多肽杀菌率的影响。利用响应面分析法确定了超声波杀菌的最佳工艺参数为：超声功率850 W、超声时间4.6 min、脉冲时间7 s,此时梅花鹿胎盘多肽的损失率为20.2%,多肽的杀菌率为87.5%,其中细菌总数为68 CFU/mL,大肠杆菌最大可能数为零,均符合国家标准。在最佳杀菌工艺条件下获得的梅花鹿胎盘多肽,对超氧阴离子自由基的清除率比未经杀菌处理的多肽仅降低了3.3%,对羟自由基的清除率降低了1.1%,对DPPH自由基的清除率降低了1.7%。这说明超声波杀菌后的梅花鹿胎盘多肽既达到了商业无菌的标准,又有效地保持了其生物活性。     

响应面法优化羊胎粉中抗氧化多肽制备工艺的研究

选用胃蛋白酶为水解酶,采用响应面法(RSM)优化羊胎粉水解条件,制备抗氧化多肽。研究反应温度、pH、酶与底物浓度比(w/w)对水解度(DH)和产物还原能力的影响,水解条件不同对水解度和铁还原力都有显著性影响(p<0.05)。结果表明,水解产物还原力最强的工艺条件为:温度36.48℃,pH1.05,酶与底物浓度比(w/w)2.03%。     

响应面分析法优化鹰嘴豆多肽的酶法提取工艺

利用2709碱性蛋白酶对鹰嘴豆分离蛋白进行水解制备鹰嘴豆多肽,以多肽得率和水解度为评价指标,采用单因素试验及响应面分析设计法优化鹰嘴豆多肤的最佳酶法提取工艺为:底物浓度4.15％,温度55.98℃,加酶量2013.5 U/g,pH8.7,酶解时间6h.在此条件下水解度和多肽得率分别为16.18％和75.25％.     

响应面法优化菊黄东方鲀肌肉多肽制备工艺

为优化菊黄东方鲀肌肉多肽酶解法制备工艺,该实验选择响应面法对菊黄东方鲀肌肉制备工艺进行研究.该实验用酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶这6种蛋白酶对菊黄东方鲀肌肉进行酶解,以水解度为指标,进行蛋白酶的筛选,并选择风味蛋白酶进行后续实验.通过单因素法研究料液比、pH、酶解时间、温度、酶添...     

响应面法优化菌草灵芝多肽-硒螯合物的制备工艺

采用响应面分析法优化菌草灵芝多肽-硒螯合物的制备工艺,以螯合物中硒含量为指标,考察亚硒酸钠溶液与多肽溶液体积比、反应温度、反应时间和pH值对螯合反应的影响,同时建立螯合物制备工艺的二次项数学模型并验证其可靠性,并利用红外光谱法对菌草灵芝多肽-硒螯合物进行表征。结果表明:影响菌草灵芝多肽与硒离子螯合的因素主次顺序为pH值反应温度体积比反应时间,最佳的螯合工艺条件为反应时间60 min、反应温度75℃、pH 9、亚硒酸钠溶液与多肽溶液体积比1∶2,最佳制备工艺条件下,螯合物中硒含量为(2 985.89±10.59)μg/g。采用红外光谱法对螯合物进行表征,表明所得物质为菌草灵芝多肽与硒的螯合物。本研究为合成有机硒化合物提供了一种新的原料,也为菌草灵芝的开发利用提供了一个新的思路。     

响应面分析法优化山杏仁多肽发酵制备工艺条件

以山杏仁饼为原料,经脱脂后通过黑曲霉发酵制备山杏仁多肽,对发酵工艺条件进行了优化.在单因素实验的基础上,采用四因素三水平的响应面法对影响山杏仁多肽含量的4个主要因素,即液料比、初始pH、接种量和发酵温度进行分析优化.结果表明,山杏仁多肽发酵制备工艺的最佳条件为:初始pH6.4,液料比12∶1,接种量10.5％,发酵温度30℃.在此条件下,测得山杏仁多肽含量为4.768 mg/mL,与理论预测值的相对误差为1.058％.