REGγ敲除对细胞浸润的抑制作用

研究蛋白酶体激活因子REGγ对免疫细胞浸润能力的影响,分别腹腔注射李斯特菌于野生型和REGγ敲除小鼠,通过存活率检测、克隆形成、流式细胞术和苏木精-伊红染色实验研究,发现REGγ敲除小鼠表现为较低的存活率和李斯特菌清除能力.REGγ敲除显著抑制了中性粒细胞和单核细胞向感染部位的浸润.表明REGγ敲除后免疫细胞不能募集至感染部位,导致细菌未能被有效清除而在体内大量繁殖,最终引发败血症的发生,降低小鼠的存活率.     

烫伤大鼠腹腔巨噬细胞释放细胞因子作用的研究

研究严重烫伤大鼠腹腔巨噬细胞释放TNF-α、IL-1β、IL-10等细胞因子的作用。通过建立烫伤动物模型，使用ELISA检测烫伤大鼠血浆TNF-α、IL-1β、IL-10的水平；收集烫伤大鼠及未烫伤大鼠的腹腔巨噬细胞，分别加入LPS（脂多糖）、LPS＋DEX（地塞米松）共孵育；使用ELISA检测上清液中TNFα、IL-1β、IL-10的水平，比较两组大鼠间的差异。烫伤大鼠血浆出现高水平的TNFα、IL-1β、IL-10；接受LPS刺激后，烫伤大鼠腹腔巨噬细胞分泌的TNF-α、IL-1β和IL-10的水平明显高于对照组。DEX对烫伤组大鼠腹腔巨噬细胞分泌细胞因子的抑制减少量显著低于对照组。由研究可知严重烫伤大鼠腹腔巨噬细胞释放的细胞因子与高细胞因子血症形成密切相关；烫伤可抑制巨噬细胞对DEX的反应性。     

巨噬细胞中FBW7沉默对其杀菌能力的抑制

采用小干扰核糖核酸(siRNA)介导Hela细胞、原代巨噬细胞和RAW264.7细胞中FBW7基因沉默,研究其对NF-κB信号通路、细胞因子表达、巨噬细胞吞噬和杀伤细菌能力的影响.通过流式细胞术、抗生素保护试验、实时荧光定量聚合酶链式反应和报告基因的研究方法,发现FBW7沉默不具有调控RAW264.7细胞吞噬细菌的能力,但能显著抑制原代巨噬细胞和RAW264.7细胞的杀菌能力及一氧化氮合成酶(nitric oxide synthase,iNOS)表达,抑制Hela中NF-κB报告基因活性,降低Hela细胞中TNFα、IL-1β和IL-6,以及原代巨噬细胞、RAW264.7细胞中MCP-1和IL-1β表达.结果表明,FBW7沉默可通过影响NF-κB活性抑制巨噬细胞对细菌的杀伤能力.     

CyPA与急性肾损伤相关性及作用研究

研究亲环素A(Cy PA)在正常人群及急性肾损伤(AKI)患者外周血中的浓度变化,探讨Cy PA是否与急性肾损伤有关及其可能的作用机制.检测急性肾损伤患者外周血中厄贝沙坦治疗前后Cy PA、Ang II、TNFα、IL-6、IL-1α、MCP-1水平,并以正常人为对照组.结果发现AKI组外周血Cy PA水平治疗前高于正常对照组.AKI组Cy PA与Ang II及TNFα、IL-6、IL-1α正相关,与MCP-1负相关,相关系数分别为0.6,0.539,0.688,0.693,-0.725.说明Cy PA作为一种炎症细胞介质,可能协同Ang II,参与了AKI患者炎性反应,加重肾小管上皮细胞损伤及细胞凋亡.通过选择性地抑制或阻断Cy PA或Ang II受体可能为我们提供一条对急性肾损伤的新治疗途径.     

脂多糖协同MSU诱导THP1分泌IL-1β和IL-18

通过合成尿酸钠结晶(monosodium urate crystals,MSU)分析其对人外周血单核细胞系THP1的促炎作用,分别以0、1.0、10.0和100.0μmol/L的MSU刺激THP1细胞4 h,检测不同浓度的MSU对炎症体组分Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白水解酶(caspase-1)及促炎因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-18的信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)表达的影响.为研究toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)的配体脂多糖的作用,用1.0 ng/m L的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)预刺激THP1细胞3 h,再加100.0μmol/m L的MSU刺激细胞,通过实时荧光定量聚合酶链式反应及酶联免疫吸附试验,检测LPS对MSU诱导的促炎因子IL-1β和IL-18的mRNA及蛋白水平.研究发现,在THP1细胞中,100.0μmol/L的MSU即可显著激活炎症体的mRNA,但其对促炎因子IL-1β及IL-18的mRNA表达的诱导作用却不明显,加入1.0 ng/m L LPS预刺激3 h后,MSU诱导的THP1细胞IL-1β和IL-18的表达量显著增加.证明脂多糖对MSU诱导THP1细胞产生IL-1β和IL-18有协同作用.     

IL-37对白塞病患者单核细胞分泌炎症因子的影响

通过合成白介素37(interleukin-37,IL-37)重组蛋白,对分离的活动期白塞病患者的外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)进行预刺激,研究IL-37对白塞病炎症的影响.通过荧光定量PCR及酶联免疫吸附试验对白塞病人及正常人的外周血单核细胞中炎症细胞因子interleukin-1β(IL-1β)、interleukin-17A(IL-17A)和tumor necrosis factor alpha(TNF-α)的基因和蛋白表达水平进行分析,发现IL-37能有效降低白塞病PBMC中IL-1β、IL-17A及TNF-α的mRNA表达,减少炎性细胞因子IL-1β、IL-17A及TNF-α的细胞外分泌,从而证明IL-37在体外对白塞病的炎症具有抑制作用.     

翼茎羊耳菊提取物对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的抗炎作用

研究了中药翼茎羊耳菊(IP)在脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7巨噬细胞中的抗炎活性和信号传导通路.通过Griess法测定一氧化碳(NO)水平;通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)和酶联免疫吸附测定(ELISA)等方法检测药物对于LPS诱导产生的IL-6、IL-1β、TNF-α、iNOS在mRNA水平和蛋白质水...     

牦牛乳中主要过敏原研究

为分析牦牛乳中主要的过敏原,腹腔注射牦牛乳蛋白质免疫Balb／C小鼠．未次免疫后,小鼠摘眼球取血,测定特异性抗体和组胺质量浓度．在无菌条件下收集并培养脾淋巴细胞．Western-Blotting方法分析牦牛脱脂乳中主要过敏原组分．结果显示,牦牛脱脂乳中主要的过敏原组分为β-乳球蛋白、α-酪蛋白和β-酪蛋白,这3种过敏原蛋白质致敏强度的大小为β-乳球蛋白>α-酪蛋白>β-酪蛋白．因为脾淋巴细胞产生的细胞素IL-4、IL-5质量浓度较高而IFN-γ较低,所以牦牛乳蛋白质为Th2应答．     

Anti-inflammatory effects and mechanisms of usnic acid

The anti-inflammatory effect and mechanism of Usnic acid (UA) were explored on lipopoly-saccharide (LPS)-stimulated RAW264.7 cell line.The effects of UA on pro-inflammatory cytokines including tumor necrosis factor-alfa (TNF-α),interleukin-6 (IL-6) and interleukin-1 beta (IL-1β),pro-inflammatory mediators such as nitric oxide (NO),inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) were studied by sandwich ELISA,real-time PCR and western blot analyses.Similarly,the effect of UA on anti-inflammatory cytokine interleukin-10 (IL-10) and anti-inflammatory mediator heme oxygenase-1 (HO-1) were also studied following the same methods.Furthermore,nuclear factor-κB (NF-κB) was assayed by immunocytochemistry.The results showed that UA has anti-inflammatory effect by down-regulatinng iNOS,COX-2,IL-1β,IL-6 and TNF-α,COX-2 gene expression through the suppression of NF-κB activation and increasing anti-inflammatory cytokine IL-10 and anti-inflammatory mediator HO-1 production.     

LPS与巨噬细胞中htrα2的表达及相关性研究

通过LPS(lipopolysaccharide)分别刺激树突状细胞和巨噬细胞,发现巨噬细胞中HtrA丝氨酸蛋白酶2(HtrA serine peptidase 2,htra2)基因的表达随着刺激时间的延长呈现下调的变化趋势,提示巨噬细胞中的htra2受到LPS的调控.为了进一步证实LPS刺激的特异性,实验建立VSV(vesicular stomatitis virus)病毒感染巨噬细胞模型,采用荧光定量PCR,免疫荧光方法分别从htra2的蛋白水平和定位上研究htra2的变化与LPS刺激巨噬细胞产生效应的相关性;构建了htra2基因过表达的质粒pKH3-htra2-HA,采用ELISA,Western Blot及荧光定量PCR等方法,检测过表达htra2对巨噬细胞产生和分泌炎症因子IL-6(Interleukin-6)及IL-1b(Interleukin-1b)的影响.实验结果表明:htra2仅在LPS刺激巨噬细胞的体系中受到调控,且过表达的htra2会上调巨噬细胞IL-1b和IL-6的表达水平.     

硫酸化茯苓多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

研究硫酸化茯苓多糖(SP)对脂多糖(LPS)诱导的体内外小鼠巨噬细胞氧化损伤的影响.体外实验中,制备小鼠腹腔巨噬细胞,加入不同质量浓度(0~100mg/mL)的SP和1mg/mL的LPS诱导剂,24h后检测细胞活力、一氧化氮(NO)、超氧阴离子自由基(O-2)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.体内实验中,42只ICR小鼠随机分为空白组、模型组和预防组,采用腹腔注射法连续给药7天后收集腹腔巨噬细胞,检测多种生化指标.实验结果表明:LPS可降低巨噬细胞的活性,增加O-2的释放和NO、TNF-α的分泌;SP能够显著降低NO的水平,提高巨噬细胞抗O-2的活力,对于TNF-α的含量没有显著影响.SP可有效地改善LPS对小鼠腹腔巨噬细胞的氧化损伤作用.     

一致光滑Banach空间中φ-半压缩映象不动点的Noor迭代逼近

设X是实一致光滑Banach空间,K是X的非空凸有界子集,T:K→K是φ-半压缩映象。{α_n}n≥0,{β_n}n≥0,{γ_n}n≥0是[0,1]中的实数列满足如下条件: ①α_n→0,β_n→0,γ_n→0(n→∞) ②sum from n=0 α_n(1-α_n)=∞ 则对任意的x_0∈K,由Noor迭代过程 z_n=(1-γ_n)x_n+γ_nTx_n,y_n=(1-β_n)x_n+β_nTz,x_(n+1)=(1-α_n)x_n+α_nTy_n,n≥0所产生的序列{x_n}n≥0,强收敛于T的唯一不动点。相关结果处理了关于φ-强拟增生算子的非线性方程的迭代解。     

光谱法研究氯霉素与环糊精的包合作用

运用紫外光谱、红外光谱和核磁共振法表征氯霉素与α,β,γ环糊精的包结作用.结果表明氯霉素与环糊精形成摩尔比为1:1的包结物,其稳定常数(K)分别为13,205,36 L/mol(293 K),这表明β环糊精包结氯霉素的能力大于α和γ-环糊精,说明β-环糊精的孔径大小适合包结氯霉素分子.而且,氯霉素与α,β,γ环糊精相互作用形成包结物时,苯基可能插入在环糊精空腔内,且不同的环糊精与氯霉素的包结方式也不一样.     

山竹抗细菌内毒素有效成分的研究

研究山竹Garcinia mangostana L.果壳中具有拮抗细菌内毒素(endotoxin/lipopo-lysaccharide,LPS)作用的化学成分。以LPS生物学活性中心lipid A为靶点导向分离有效成分,根据波谱数据鉴定化合物结构,亲和生物传感器测定化合物与lipid A的亲和力常数,鲎试验检测内毒素对LPS的体外中和作用,酶联免疫吸附法检测内毒素对LPS诱导RAW264.7细胞释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的抑制作用。结果表明:从山竹果壳中分离得到3个化合物,经鉴定为表儿茶素(Ⅰ)、α-mangostin(Ⅱ)和γ-mangostin(Ⅲ);化合物Ⅰ与lipid A具有直接结合作用,可显著抑制LPS介导的鲎试剂凝集反应;化合物Ⅰ～Ⅲ均能选择性抑制LPS诱导RAW264.7细胞释放TNF-α,显示出抗LPS活性;首次发现化合物Ⅰ体外对LPS具有拮抗作用,是山竹中一种新的抗LPS活性物质。     

抑制性受体FcγRIIB在肝细胞癌中的表达

研究了抑制性受体FcγRIIB在肝细胞癌(HCC)中的表达,为探讨肝脏炎癌转化的调控机制提供理论基础.利用肿瘤基因组图谱(TCGA)、基因表达综合数据库(GEO)和肿瘤数据库(Oncomine)分析肝癌中FcγRIIB mRNA的表达,采用实时定量PCR(qRT-PCR)验证FcγRIIB在临床HCC患者肿瘤样本中的表达,通过单次注射N-亚硝基二乙胺(DEN)诱导小鼠HCC并检测FcγRIIB的表达.生物信息学分析显示FcγRIIB在HCC中低表达;qRT-PCR结果显示,临床HCC患者肿瘤样本和DEN诱导小鼠肝癌模型中FcγRIIB的表达均降低.生物信息学、临床样本和小鼠模型三方面得出一致结论,即FcγRIIB在HCC中低表达,提示FcγRIIB可能成为肝癌诊断或预后新的生物标志物,并在肝脏炎癌转化中发挥重要作用.     

一种新型miRNA功能测定系统的建立

找到一种降低内源microRNA(miRNA)背景对let-7α荧光效应元件干扰的方法.选择Hela细胞系作为工具细胞系,先分别转染敲除miRNA加工成熟通路上的蛋白Dicerl,Drosha的siRNA表达载体,或转染直接敲除内源miRNA let-7α的siRNA表达载体,然后再次转染含有let-7α靶点HMGA2 3'UTR的荧光效应元件,之后观测let-7α荧光效应元件荧光恢复程度.结果显示pcDNA3-H1-sh-A-R-let-7α对含有HMGA2 3'UTR的荧光效应元件恢复荧光的效果最好.     

以α,β,γ(α+β+γ<π)为内角的三角形存在性

在罗伯切夫斯基平面上,任意一三角形其内角之和都是小于π。本文借助庞加莱模型证明任意以α,β,γ(α+β+γ<π)为内角的三形形是存在的。     

一致光滑Banach空间中ψ—半压缩映象不动点的Noor迭代逼近

设X是实一致光滑Banach空间,K是X的非空凸有界子集,T:K→K是ψ－半压缩映象。{αn}n≥0,{βn}n≥0,{γn}n≥0是[0,1]中的实数列满足如下条件：（1）αn→0,βn→0,γn→0(n→∞）;(2)∑n=0^∞αn(1-αn)=∞,则对任意的x0∞K,由Noor迭代过程zn=(1-γn)xn γnTxn,yn=(1-βn)xn βnTzn,xn 1=(1-αn)xn αnTyn,n≥0所产生的序列{xn}n≥0,强收敛于T的唯一不动点。相关结果处理了关于ψ－强拟增生算子的非线性方程的迭代解。     

南极磷虾油对小鼠免疫功能的调节作用

为研究南极磷虾油对小鼠免疫功能的影响,分别将高、中、低剂量(400、200、50mg/kg)全脂型虾油组(WKO)和磷脂型虾油组(PKO)每日灌胃1次。4周后测定小鼠免疫器官指数、淋巴细胞增殖能力、巨噬细胞吞噬能力及血浆IL-2、INF-γ水平。与空白组相比,高剂量PKO组小鼠胸腺指数显著升高;低、高剂量WKO组小鼠脾脏指数显著升高;中、高低剂量WKO组和低、中剂量PKO组小鼠淋巴细胞增殖能力显著提高;低、高剂量WKO组和中剂量PKO组小鼠巨噬细胞吞噬能力显著提高;3个剂量WKO组和低剂量PKO组小鼠血浆IL-2水平显著升高;低、高剂量WKO组和中剂量PKO组小鼠INF-γ水平显著升高。     

一类缺项的负系数解析函数

Let S(P)be the class of functions f(z)=z~p-sum form n=k to ∞a_n+_pz~(n-p)(p=2,3,…)which areanalytic in the unit disc D={z∶|z|<1}.For 0≤x≤1,0≤β<1 and 0<γ≤1,Let P_k(α,β,γ)be the class of those functions f(z)of S(P)which satisfy the condition