灵芝深层发酵工艺优化及中药双向发酵

本文通过对灵芝发酵培养基及发酵条件的优化,研究其对灵芝的生长及产物代谢的影响。结果表明,玉米粉和葡萄糖作为碳源时有利于灵芝菌的生长及灵芝多糖和灵芝酸的积累;蛋白胨和酵母粉复配后作为灵芝发酵的氮源有助于灵芝发酵;固定碳源含量以碳氮质量比为30时有利于灵芝的发酵;发酵溶氧条件控制在20%时有助于灵芝发酵,相比对照灵芝多糖提高0.818 g/L。结合优化后的条件,研究不同中药物质对灵芝发酵的影响,结果表明黄芪、当归、山药和薏米仁对灵芝发酵都具有促进作用,尤其是黄芪的效果更加明显,添加黄芪后发酵灵芝多糖达到7.914 g/L,与对照组相比增加了3.445 g/L;灵芝酸达到0.28 g/L,相比对照增加了0.160 g/L。     

冬虫夏草液体深层发酵培养基的优化工艺研究

采用正交分析方法对冬虫夏草液体深层发酵培养基配方进行了优化,结果表明,冬虫夏草生长最适液体培养基配方为:土豆20%、牛肉膏0.08%、蛋白胨0.2%、KH2PO40.15%、MgSO4.7H2O 0.15%、蔗糖1.5%、葡萄糖2.5%;温度为23℃,转速为130r/min,初始pH值为7,培养周期4d,菌丝体生物量产率比优化前提高了2倍。     

苏云金芽孢杆菌高浓度液体发酵培养基的优化研究

以葡萄糖和甘油作碳源进行苏云金芽孢杆菌液体发酵,其发酵效果明显优于原实验室优化培养基,680 nm处的吸光度增加了5～6倍,得到的高浓度培养基成分为:胰蛋白胨5.0g·L-1、酵母膏5.0 g·L-1、葡萄糖(或甘油)20 g·L-1、KH2PO4 0.3 g·L-1、Na2 HPO4 1.1 g·L-1、MgSO4·7H2O 1.0 g·L-1、FeCl2·6 H2O 0.02 g·L-1、CaCl20.02 g·L-1、EDTA 0.2g·L-1、微液1 mL·L-1,pH值7.2.用葡萄糖作碳源进行8 L发酵罐小试,发酵过程中菌体生长正常,工业发酵采用此培养基可以大大降低发酵成本.     

新农抗2507发酵培养基优化的研究

农抗2507发酵培养基氮源多用黄豆饼粉。黄豆饼粉的优点是原材料质量稳定，染菌率低，但发酵效价相对较低。本研究对培养基配方进行改进，在黄豆饼粉配方中加人动物蛋白牛肉膏，提高了发酵水平。采用正交试验的方法，进行了农抗2507发酵培养基的筛选，最终得到最佳培养基配方：葡萄糖1．5％，玉米浆1％，黄豆饼粉2％，淀粉1．5％，牛肉膏O．35％，NaCl 0．5％，CaCO3 0．5％，(NH4)2SO4 0．5％。经摇瓶发酵试验，发酵水平比原始配方提高了696．9％。     

基于遗传算法的木糖醇发酵培养基优化研究

运用遗传算法,对利用莫格假丝酵母由木糖生产木糖醇的发酵培养基优化进行研究,用４０个实验样本完成了６种培养基成份,５０个浓度水平的优化任务。实验结果表明：利用遗传算法可优化培养基成份富量,取得更好的发酵效果。按照优化后的培养基组成,由５０ｇ／Ｌ木糖获得了２９．７ｇ／Ｌ木糖醇,比优化前提高５．７％。     

D-核糖发酵培养基优化实验研究

对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis db104)采用同源重组法构建得到的枯草芽孢杆菌转酮酶(tkt)缺失突变菌株B.sptn15-1的传代稳定性进行了检测,证明该工程菌在连续传代培养5代后仍具有92.9%的稳定性;并对该工程菌的最适发酵培养基进行了优化,使工程菌的D-核糖产量从31.70 g·L-1提高到37.44 g ·L-1,提高了18%.     

替考拉宁发酵培养基优化研究

对替考拉宁发酵培养基进行优化,选用A粉和B粉代替原配方中的淀粉和黄豆粉。采用正交实验设计方法,确定了最佳发酵培养基配方,经过10 L自动化发酵罐9批验证,平均发酵单位比原配方提高了9.26%,原材料消耗成本降低了约10%。     

海绵放线菌发酵产物抑制大肠杆菌的发酵培养基优化

本研究通过分析和对比不同培养基条件下海绵放线菌发酵产物对大肠杆菌的抑制效果,获得最优发酵培养基配方,即在ISP2培养基的基础上添加15 g/L乳糖作为附加碳源和5 g/L硫酸铵作为附加氮源。该研究结果为海绵放线菌发酵产活性物质的应用提供了一定的技术基础。     

林可霉素发酵培养基优化实验研究

本文采用L9（3^4）正交设计方法,通过对可能影响林可霉素效价的3个因素进行试验,优化林可霉素发酵培养基,提高了林可霉素发酵水平。实验结果表明,黄豆饼粉和葡萄糖对林可霉素效价的影响较大,改进后的发酵培养基通过罐上验证实验,平均发酵单位和平均放罐总亿比对照罐提高了3．77％和3．96％。     

夫西地酸发酵培养基优化

为了筛选夫西地酸高产培养基配方,提高夫西地酸发酵水平,以F17D2744为试验菌株,通过均匀设计方法,对不同碳氮源及微量元素等的配比实验,确定了最佳发酵培养基配方。试验结果表明:以蔗糖4.3%、糊精2%、酵母粉1%、蛋白胨3%、生物氮素0.59%、MgSO40.2%,KH2PO40.15%为发酵培养基配方,最终发酵效价较初始配方的发酵效价提高了234%。     

灵芝深层发酵工艺研究

对灵芝的摇床深层培养条件及反应器培养进行了研究.结果表明,最佳发酵培养基为:葡萄糖5%、玉米浆0.3%、豆饼粉1.0%、糖蜜0.6%、KH2PO4·3H2O 0.15%、MgSO4·7H2O 0.075%、三十烷醇1×10-6,初始pH值5.5～6.0.最佳摇瓶发酵条件为:种龄72～96 h、接种量5%、装液量50 mL、摇床转速150 r·min-1、温度28℃、初始pH值5.5～6.0.最佳发酵工艺条件为:温度28℃、搅拌转速150～200 r·min-1、装液量5 L、通风量3～5 L·min-1、初始pH值5.5.发酵工艺经优化后,菌丝体干重可达15.1 g·L-1、胞外粗多糖浓度达780 mg·L-1,分别比优化前提高了15.3%和18.8%.     

赤芝在气升式反应器中的深层培养实验

用1.5 L外循环气升式反应器(OALR)对赤芝菌进行深层培养实验.结果表明其最适通风量为:0～24 h,0.4 vvm;24～72 h,0.6 vvm 72～96 h,0.8 wm 96～120 h,1.0 vvm;120～144 h,1.0 vvm.培养时间较摇瓶培养大约少12 h,菌丝干重可达17.4 g·L-1.     

膜生物反应器连续发酵生产胞外灵芝多糖

产物灵芝多糖在间歇深层发酵稳定期存在浓度下降现象，采用膜生物反应器系统能够及时分离产物，控制产物的积累，有效防止灵芝多糖的消耗，而灵芝菌丝体在反应器中不断循环，浓度得到进一步提高，并不断分泌灵芝胞外多糖，可延长产多糖时间，从而提高了胞外多糖的总产量，研究了不同稀释率0－0．2hr^-1下连续发酵的多糖生成和菌丝体生长状况；连续发酵时发酵液中灵芝多糖的浓度比间歇发酵要低，并随稀释率的增大而下降，菌丝体浓度则随稀释率的增大而增大，总的菌丝体干重可比间歇发酵增加20％以上，多糖总产量可达到间歇发酵的5倍以上，连续发酵也有利于灵芝多糖与菌丝体的分离，结果表明利用膜生物反应器进行液体连续发酵是生产和分离胞外灵芝多糖的一条有效途径，并可为其它真菌胞外多糖的深层发酵生产提供借鉴。     

灵芝多糖体外抗氧化活性的研究

采用铁氰化钾还原法测定灵芝多糖的还原能力,并对灵芝多糖清除羟自由基、超氧阴离子自由基的能力进行了研究.结果表明,灵芝多糖具有抗氧化的作用和清除自由基的能力,并且其清除能力与多糖的浓度存在一定的正相关量效关系.     

虎奶菇菌丝体胞外多糖深层发酵培养基的优化

研究了营养性因子对虎奶菇菌丝体深层发酵的影响,结果表明蔗糖、马铃薯、蛋白胨和酵母膏有利于胞外多糖的形成。进一步的正交优化实验确定了虎奶菇多糖深层发酵的最佳培养基组成(g/L)为∶蔗糖2 g/100 mL,马铃薯25 g/100 mL,蛋白胨0.2 g/100 mL,酵母膏0.2 g/100 mL。     

利用响应面分析法优化鸟苷发酵培养基

目的利用响应面分析法对鸟苷发酵培养基进行优化,提高鸟苷产量。方法采用响应面分析法对鸟苷发酵培养基的3种主要成分葡萄糖、酵母粉和豆饼水解液进行优化。用Design-Expert软件对实验数据进行多元回归分析,并建立3种因素与鸟苷产量之间的函数关系。用最终优化的配方进行3次验证试验。结果通过岭脊分析,获得培养基中3因素最佳浓度为:葡萄糖12.0%,酵母粉1.4%,豆饼水解液4.0%,发酵液鸟苷最高产量可达28.3g/L。3次验证试验所测得的鸟苷产量分别为28.14、28.32和27.86g/L,平均值为28.10g/L,与预测结果基本一致。结论利用响应面分析法可优化鸟苷发酵培养基,显著提高鸟苷的产量。     

灵芝多糖的液态发酵研究

对泰山灵芝液态发酵灵芝多糖的培养基配方、发酵条件进行了优化选择，并通过分批发酵、补料分批发酵的方式获得了灵芝多糖液态发酵的一系列参数。通过60h的补料分批发酵，灵芝多糖的单位产量达到2．208g／L，为灵芝多糖的工业化发酵生产奠定了基础。     

灵芝精粉与灵芝孢子粉对Lewis肺癌模型小鼠免疫功能的影响

目的研究灵芝精粉与灵芝孢子粉对Lewis肺癌模型小鼠免疫功能的影响,并比较二者在肿瘤治疗中的免疫调节作用。方法经C57BL/6小鼠右腋皮下接种1×106个Lewis肺癌细胞,建立小鼠Lewis肺癌模型。于接种肿瘤细胞次日至第20天,分别隔日灌胃灵芝孢子粉(D1)、灵芝精粉001(D2)及灵芝精粉002(D3),剂量均为0.5g/kg,同时设立对照组和肿瘤组(灌胃等体积生理盐水)。监测各组小鼠体重及瘤体积,第21日处死小鼠,称量瘤重,并无菌制备脾细胞悬液,检测小鼠NK细胞杀伤活性,流式细胞术检测小鼠脾细胞中CD4+、CD8+T细胞和B细胞数量,淋巴细胞转化试验检测脾细胞中T、B细胞增殖功能。结果与对照组比较,肿瘤组小鼠脾细胞中T、B细胞增殖功能、细胞数量及NK细胞杀伤活性均有不同程度的下降。与肿瘤组相比,3种灵芝制剂均可提高Lewis肺癌模型小鼠NK细胞的杀伤活性和T、B细胞增殖功能,其中,以D2作用最为明显(P<0.05);3种灵芝制剂均可不同程度地提高Lewis肺癌模型小鼠CD4+、CD8+T细胞数量,其中,以D3作用最为显著(P<0.05)。3种灵芝制剂对Lewis肺癌模型小鼠的体重、瘤重、瘤体积及B细胞数量均无明显影响。结论灵芝制剂对Lewis肺癌小鼠的免疫功能具有正向调节作用,其中灵芝精粉的作用优于灵芝孢子粉。