杨桃多糖的免疫活性研究

通过对小鼠的脏器/体重比、胸腺指数和脾细胞中的IL-2和IL-6含量测定以及足跖增厚法、小鼠鼠碳廓清实验,结果发现,各剂量组的脏器质量和脏器/体重比值、胸腺相对重量和胸腺指数与对照组相比均有显著性差异(p<0.05);杨桃多糖各剂量组的吞噬指数比对照组都有增加,中、高剂量组有明显差异;杨桃多糖中、高剂量组小鼠的IL-2和IL-6水平均显著高于对照组。说明杨桃多糖对小鼠单核-巨噬细胞的吞噬功能有明显的增强作用,对小鼠的细胞免疫功能有一定的增强作用,可以显著增强组成机体特异性免疫的细胞免疫功能,对机体的特异性体液免疫应答有增强作用。     

卡介苗溶菌黏膜免疫调理剂对实验性免疫功能低下小鼠的免疫调节作用

目的观察卡介苗溶菌黏膜免疫调理剂(BCG-b)对实验性免疫功能低下小鼠的免疫调节作用。方法将BALB/c小鼠分为BCG-b高、中、低剂量组,每只分别隔日灌服BCG-b20、5和1U/0.2ml;阳性对照组每只隔日灌服阿胶液0.2ml,阴性对照组每只隔日灌服生理盐水0.2ml;正常对照组不给任何药物。除正常对照组外,其余各组均服药10次,并于首次服药后第14日皮下注射环磷酰胺,100mg/kg,建立免疫功能低下小鼠模型。以碳粒廓清法、血清溶血素测定法及3H-TdR掺入法分别检测各组小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能、特异性体液免疫功能以及T淋巴细胞转化功能。结果与阴性对照组相比,BCG-b3个不同剂量组小鼠单核-巨噬细胞的吞噬功能和特异性抗体血清溶血素含量明显提高,小鼠T淋巴细胞转化功能呈双向性调节作用,即高、中剂量表现为抑制作用,低剂量表现为促进作用。结论BCG-b对实验性免疫功能低下小鼠具有明显的免疫调节作用。     

红花三七骨碎补胶囊干预小鼠对免疫功能的影响

目的：探究红花三七骨碎补胶囊对小鼠免疫功能的影响,为其推广使用提供理论依据。方法：给予小鼠不同剂量的红花三七骨碎补胶囊（0.167 g/kg bw、0.333 g/kg bw、1.000 g/kg bw）,连续灌胃30 d,比较4组小鼠（对照组和低、中、高剂量组）体质量、脾脏指数、胸腺指数、溶血空斑、NK细胞活性。结果：低剂量组动物第3周体质量、高剂量组动物第2周、第3周及试验末体质量均高于对照组,差异有统计学意义（P <0.05）;与对照组相比,各剂量组小鼠溶血空斑、NK细胞活性显著增大（P <0.05）。结论：红花三七骨碎补胶囊干预后的雌性昆明小鼠的溶血空斑和NK细胞活性在正常水平内有所增强,说明红花三七骨碎补胶囊有助于强化小鼠免疫功能。     

燕麦葡聚糖、壳寡糖与中药配伍降血糖的协同作用研究

探讨燕麦葡聚糖、壳寡糖与中药配伍的降血糖作用。选择健康雄性小鼠60只,分为正常对照组、模型对照组及剂量Ⅰ组(燕麦葡聚糖、壳寡糖、富铬酵母)、剂量Ⅱ组(黄精提取物、桑叶提取物、苦瓜提取物、富铬酵母)、剂量Ⅲ组(燕麦葡聚糖、壳寡糖、黄精提取物、桑叶提取物、苦瓜提取物、富铬酵母),每组10只,灌胃给予,实验期30d,测定小鼠体重、空腹血糖值及血糖曲线下面积。结果表明,三个剂量组均具有明显的降血糖作用,且剂量Ⅲ组降血糖作用优于剂量Ⅰ组和剂量Ⅱ组。     

消渴健脾胶囊对2型糖尿病小鼠降血糖作用研究

为研究消渴健脾胶囊对2型糖尿病小鼠的降血糖作用,取75只昆明种雄性小鼠,除正常对照组10只外,其余小鼠腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病小鼠模型,将造模成功的糖尿病小鼠随机分为模型组,阳性组(盐酸二甲双胍150.00 mg·kg~(-1)),消渴健脾胶囊低(238.88 mg·kg~(-1))、中(477.75 mg·kg~(-1))、高(955.50 mg·kg~(-1))剂量组,每组10只,正常对照组和模型组给予0.1 mL·(10 g体重)~(-1)蒸馏水,连续给药28 d后,测定小鼠体重、空腹血糖(FBG)值、糖耐量(GT)、糖化血清蛋白(GSP)水平及血清胰岛素(INS)水平。结果表明,与模型组比较,给药28 d后,消渴健脾胶囊各剂量组小鼠体重显著增加,差异具有统计学意义(P0.05);消渴健脾胶囊各剂量组小鼠FBG值显著降低,差异具有统计学意义(P0.05或P0.01);消渴健脾胶囊中、高剂量组小鼠GT显著降低,差异具有统计学意义(P0.05或P0.01);消渴健脾胶囊各剂量组小鼠GSP水平显著降低,差异具有统计学意义(P0.05或P0.01);消渴健脾胶囊高剂量组小鼠INS水平显著升高,差异具有统计学意义(P0.05)。消渴健脾胶囊对链脲佐菌素所致2型糖尿病小鼠有一定的治疗作用。     

枸杞多糖对亚健康小鼠免疫功能及抗疲劳作用的影响

目的探讨枸杞多糖对亚健康小鼠机体免疫功能及抗疲劳作用的影响及其作用机制。方法采用复合因素建立亚健康小鼠模型,随机分为模型组、枸杞多糖高剂量组(400 mg/kg体重)和低剂量组(200 mg/kg体重),另设对照组(未建模),经小鼠灌胃给药,每天1次,灌胃21 d,对照组和模型组给予等量蒸馏水。对建模小鼠进行行为学评价;检测各组小鼠的免疫功能(脾脏和胸腺指数、T和B淋巴细胞增殖能力及CD4+/CD8+值)和抗疲劳能力(游泳力竭时间、下丘脑5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)和多巴胺(Dopamine,DA)含量及海马区谷氨酸受体NR2A m RNA表达水平)。结果模型小鼠体重、自主活动次数、挣扎时间及游泳力竭时间明显低于对照组(P0.05),避暗穿梭次数明显高于对照组(P0.05)。模型组小鼠的胸腺、脾脏指数、B淋巴细胞增殖能力、CD4+/CD8+值、游泳力竭时间、下丘脑DA含量及海马区NR2Am RNA的表达均显著低于对照组(P0.05),5-HT含量明显高于对照组(P0.05);枸杞多糖高剂量组小鼠胸腺指数、脾脏指数、B淋巴细胞增殖能力、CD4+/CD8+值、游泳力竭时间、下丘脑DA含量及小鼠海马NR2A m RNA的表达均显著高于模型组(P0.05),且5-HT含量明显低于模型组(P0.05);各组间T细胞增殖能力无明显变化。结论成功建立亚健康小鼠模型,枸杞多糖可提高亚健康模型小鼠的免疫功能及抗疲劳作用,为枸杞多糖的临床应用提供了实验依据。     

王不留行提取物的急性毒理学研究

探究了王不留行提取物对小鼠的毒性剂量并对其毒性表现进行观察。采用常规急性毒理学研究的方法,选用ICR小鼠探究最小致毒量和最小致死量,HE染色观察其主要器官形态学变化,玻璃毛细管法测定血液凝固时间,生化法测定组织SOD活力、MDA含量及血清BUN、AST、ALT含量。结果显示:(1)致毒剂量:王不留行提取物对小鼠的最小致毒量为100 mg/kg,最小致死量为1500 mg/kg;(2)毒性表现:低剂量组(200 mg/kg)给药后1 d凝血时间缩短,其余指标与对照组相比无显著差异,高剂量组(1000 mg/kg)小鼠自主活动减少,体重增长率明显下降,给药后1 d血液凝固时间缩短,主要器官形态学明显改变,心脏SOD活性降低,MDA含量升高,血清BUN含量升高,其余指标未见明显改变。王不留行提取物高剂量(1000 mg/kg)对小鼠的血液凝固、心和肾脏有一定的毒性作用。     

生产场地变更后甲型肝炎灭活疫苗(人二倍体细胞)的抗原特性

目的研究生产场地变更后,原生产工艺制备的甲型肝炎灭活疫苗(人二倍体细胞)的抗原特性。方法采用双抗体夹心ELISA法检测在新场地制备的甲肝灭活疫苗病毒浓缩液和疫苗原液的甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)抗原含量。SDS-PAGE和Western blot分析二者的蛋白组分和特异性;疫苗成品(成人剂量)稀释为不同剂量(640、320、160、80和40 EU),免疫ICR小鼠(并设铝佐剂对照组),采用竞争ELISA法检测小鼠血清中HAV抗体效价;同时称量免疫后不同时间小鼠体重。结果病毒浓缩液和疫苗原液的HAV抗原含量分别为12 800和3 200 EU/ml。疫苗原液中仅含HAV结构蛋白组分,且可与HAV抗体特异性结合。初免后28 d,640、320和160 EU剂量疫苗组小鼠血清抗体阳转率为100%,80和40 EU剂量疫苗组二免后血清抗体阳转率达100%和90%,所有免疫组小鼠血清抗体效价二免后14 d较初免28 d上升约2倍;疫苗免疫组小鼠体重及体重增幅与佐剂对照组相比,均无药物作用引起的异常变化(P0.05)。结论在新场地采用原生产工艺制备的甲型肝炎灭活疫苗原液有单纯的抗原蛋白组分和免疫学特异性,且与前期研究结果相比,其免疫原性及安全性具有一致性。     

玉米须缓解脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的:探讨玉米须缓解脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用。方法:将60只小鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(0. 005g/kg. d)、玉米须低、中、高剂量组(2. 5、5、10 g/kg. d),每组10只。灌胃给药,每天1次,连续给药10 d,末次给药2 h后除正常组小鼠气管滴注等量生理盐水外,其他各组小鼠气管滴注脂多糖(10 mg/kg),12 h后眼球采血,处死小鼠,取新鲜肺组织,ELISA检测血清中TNF-α和IL-1β水平以及肺组织中MPO活性,计算肺组织湿/干重比值,HE检查肺组织的病理变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠肺组织湿/干比值、血清中TNF-α和IL-1β水平、肺组织中MPO活性均显著性升高(P 0. 05,P 0. 01)。与模型组比较,地塞米松组、玉米须中剂量和高剂量组小鼠肺组织湿/干比值、血清中TNF-α和IL-1β水平、肺组织中MPO活性均显著性降低(P 0. 05,P 0. 01),并改善了肺组织损伤。结论:玉米须能够对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤有一定的保护作用,其机制可能与抑制体内炎性介质释放有关。     

玛咖提取物作为流感疫苗佐剂的体液免疫效果及安全性

目的探讨玛咖提取物作为流感疫苗佐剂的体液免疫效果及安全性。方法将BALB/c小鼠随机分为4组,每组10只,玛咖提取物佐剂组:含血凝素1.8μg,玛咖提取物0.2 mg;氢氧化铝佐剂组:含血凝素1.8μg,氢氧化铝0.2 mg;无佐剂疫苗组:含血凝素1.8μg;生理盐水组:生理盐水。分别于0、21 d经小鼠腿部肌肉注射免疫2次,0.2 m L/(只·次)。初次免疫后,每隔7 d收集血清,测定小鼠血凝抑制抗体效价。初免后7 d内,每天称量1次小鼠体重,监测各组小鼠体重变化。结果 14、21、28、35、42、49和56 d时间点,玛咖提取物佐剂组小鼠血清血凝抑制抗体效价均显著高于无佐剂疫苗组,差异有统计学意义(P0.05);与氢氧化铝佐剂组比较,玛咖提取物佐剂组小鼠血清血凝抑制抗体效价7、14和21 d差异无统计学意义(P0.05),28、35、42、49和56 d差异有统计学意义(P0.05);组内不同时间点的血凝抑制抗体效价差异有统计学意义(P0.05);各组小鼠体重变化差异无统计学意义(P0.05),注射部位未见不良反应。结论玛咖提取物作为疫苗佐剂具有良好的安全性,且佐剂效果明显,有望成为流感灭活疫苗的新型免疫佐剂。     

卡介菌多糖核酸注射液对继发性暂时性免疫功能低下儿童的调节作用

目的观察卡介菌多糖核酸注射液对继发性暂时性免疫功能低下儿童的调节作用。方法选择临床上反复呼吸道感染的儿童,检测T细胞亚群和免疫球蛋白,以其中至少一项指标低于同年龄段正常值最低限的52名为观察对象,给予卡介菌多糖核酸注射液治疗,疗程3个月。3个月后复查T细胞亚群和免疫球蛋白。结果治疗后细胞免疫和体液免疫均得到不同程度的改善,治疗前后各项指标相比,差异均有非常显著或显著意义。结论卡介菌多糖核酸注射液对反复呼吸道感染所致免疫功能低下儿童疗效确切。     

乙型脑炎活疫苗与灭活疫苗诱导小鼠体液和细胞免疫应答的比较

应用检测特异性CTL活性的方法检测乙脑活疫苗的细胞免疫应答 ,并以灭活疫苗作对照。结果显示活疫苗免疫小鼠后诱导的CTL均值为 79 2 % ,较灭活疫苗 2 9%高 5 0 2 % ,表明活疫苗具有较强的特异性CTL活性。用同批活疫苗免疫小鼠后其中和抗体效价为 1:5 ,而同批的灭活疫苗为 1:2 0 ,活疫苗的免疫效力 (ID5 0 ) 3 6× 10 6(ml)显著高于灭活疫苗的 4 0× 10 - 4 ～ 4 2× 10 4(ml)。表明乙脑活疫苗诱导的免疫应答中细胞免疫在保护效力中占有重要地位。     

Rhamnolipid Biosurfactants as New Players in Animal and Plant Defense against Microbes

Rhamnolipids are known as very efficient biosurfactant molecules. They are used in a wide range of industrial applications including food, cosmetics, pharmaceutical formulations and bioremediation of pollutants. The present review provides an overview of the effect of rhamnolipids in animal and plant defense responses. We describe the current knowledge on the stimulation of plant and animal immunity by these molecules, as well as on their direct antimicrobial properties. Given their ecological acceptance owing to their low toxicity and biodegradability, rhamnolipids have the potential to be useful molecules in medicine and to be part of alternative strategies in order to reduce or replace pesticides in agriculture.     

The tularaemia vaccine

Tularaemia is a disease caused by the facultative intracellular bacterium Francisella tularensis. Vaccination resulting in protective immunity is induced by live vaccine only. Such vaccination can be performed by scarification utilizing the live vaccine strain of F. tularensis (F. tularensis LVS), which results in good but not complete protection. Humoral as well as cell-mediated immunity are induced by vaccination and it has been shown that cell-mediated immunity is a prerequisite for protection. Since the live vaccine strain is attenuated and the genetic background of attenuation is unknown it is important to consider process parameters so that the immunogenicity of the vaccine is preserved.     

人用狂犬病脂质体疫苗的免疫效果

目的对狂犬病脂质体疫苗进行免疫效果评价。方法用狂犬病脂质体疫苗和无佐剂疫苗分别免疫小鼠,以NIH法检测保护效力,RFFIT法检测中和抗体,流式细胞仪检测淋巴细胞表面标记,体外实验法检测淋巴细胞增殖能力,乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞活性,ELISA检测试剂盒检测免疫后小鼠IL-2和IFN水平。结果狂犬病脂质体疫苗与无佐剂疫苗相比,可提高效力2~3倍,脂质体疫苗组中和抗体水平明显高于无佐剂疫苗组,两组之间差异有显著意义。狂犬病脂质体疫苗可增强细胞免疫,小鼠CD4+/CD8+比例、淋巴细胞增殖指数、NK细胞活性、IL-2及IFN活性与无佐剂疫苗相比,差异均有显著意义。结论狂犬病脂质体疫苗可同时增强细胞免疫和体液免疫。     

不同乙型肝炎表面抗原配制的免疫复合物的免疫原性

目的研究不同乙型肝炎表面抗原配制的免疫复合物(IC)的免疫原性,并进一步优选治疗性乙型肝炎疫苗最佳抗原。方法用不同重组乙型肝炎表面抗原(HBsAg)与不同的乙型肝炎表面抗体(anti-HBs)制备IC,分别免疫BALB/c小鼠,检测体液免疫及细胞免疫应答水平。结果IC诱生的抗-HBs效价、抗-HBsIgG2a/IgG1的比值及IFN-γ形成细胞数,YHB-IC组总体上略高于CHO-IC组,但差异无显著意义。结论IC的免疫效果优于单独HBsAg;不同乙型肝炎表面抗原配制的IC之间免疫原性差异无显著意义。     

Hepatitis B Flare in Hepatitis B e Antigen-Negative Patients: A Complicated Cascade of Innate and Adaptive Immune Responses

Chronic hepatitis B virus (HBV) infection is a dynamic process involving interactions among HBV, hepatocytes, and the host immune system. The natural course of chronic hepatitis B (CHB) is divided into four chronological phases, including the hepatitis B e antigen (HBeAg)-positive and HBeAg-negative phases. During HBV flare, alanine aminotransferase (ALT) levels abruptly rise to >5× the upper limit of normal; this is thought to occur due to the immune response against an upsurge in serum HBV DNA and antigen levels. Hepatitis flares may occur spontaneously, during or after antiviral therapy, or upon immunosuppression or chemotherapy in both HBeAg-positive and HBeAg-negative patients. The clinical spectrum of HBV flares varies from asymptomatic to hepatic decompensation or failure. HBeAg seroconversion with ≥ 1 year of consolidation therapy is accepted as an endpoint of oral antiviral therapy in HBeAg-positive patients, but recommendations for treating HBeAg-negative patients differ. Thus, the management of HBeAg-negative patients has attracted increasing interest. In the current review, we summarize various types of HBV flares and the associated complex cascade of innate and adaptive immune responses, with a focus on HBeAg-negative CHB patients. Hopefully, this review will provide insight into immunopathogenesis to improve the management of HBV flares in HBeAg-negative CHB patients.     

人黏蛋白1串联重复区DNA疫苗诱导小鼠的免疫应答

目的观察人黏蛋白1串联重复区(MUC1 VNTR)DNA疫苗诱导BALB/c小鼠的体液及细胞免疫应答。方法将含有33个黏蛋白1重复区序列(33m)的重组质粒pVR1012-33m,经肌肉注射免疫BALB/c小鼠,并加强免疫2次,每次100μg,间隔2周,分别以空载体pVR1012和生理盐水为对照。末次免疫后取小鼠血清及脾淋巴细胞,Western blot检测血清抗体特异性,LDH法检测CTL反应活性,MTS/PMS法检测脾淋巴细胞增殖活性。结果重组质粒免疫组小鼠血清中检出了MUC1 VNTR抗原特异性抗体。用重组质粒pVR1012-33m免疫BALB/c小鼠后,在效靶比为100:1和33:1时,可显著地诱导特异性CTL应答。在MUC1 VNTR抗原肽的刺激下,免疫小鼠脾淋巴细胞得到增殖,与空载体和生理盐水对照组相比,差异均有显著意义。结论DNA疫苗pVR1012-33m在BALB/c小鼠体内可诱导特异性细胞免疫和体液免疫应答,为预防、治疗性MUC1 VNTR疫苗的研制提供了一定的实验依据。     

腮腺炎病毒蛋白组分疫苗的免疫效果

目的观察腮腺炎病毒蛋白组分疫苗的免疫效果。方法SP株腮腺炎病毒液经灭活、浓缩、裂解后,采用SP SepharoseTM Fast Flow阳离子层析柱及Sepharose CL-4B分子筛层析柱纯化,收集各峰样品,经12%SDS-PAGE、Western blot分析及HPLC检测。并取第1峰样品免疫ICR及BALB/c小鼠,检测血清中和抗体效价及CTL杀伤活性。结果所收集的第1峰样品为单一的腮腺炎病毒蛋白组分。免疫ICR小鼠可诱导产生中和抗体,其免疫后各检测时间点的GMT水平与减毒活疫苗组相比,差异均无统计学意义;免疫BALB/c小鼠可诱导产生针对HN肽段的CTL杀伤活性,而减毒活疫苗组则未能诱导此特异性CTL反应。结论腮腺炎病毒蛋白组分疫苗在小鼠体内可诱导特异性细胞免疫和体液免疫应答,为新型腮腺炎疫苗的研制提供了实验依据。     

Immunological Mechanisms in the Pathophysiology of Non-Alcoholic Steatohepatitis

Non-alcoholic steatohepatitis (NASH) is characterized by the presence of steatosis, inflammation and hepatocyte injury and constitutes hepatic manifestation of the metabolic syndrome. The pathogenesis of NASH is complex and implicates cross-talk between different metabolically active sites, such as liver and adipose tissue. Obesity is considered a chronic low-grade inflammatory state and the liver has been recognized as being an “immunological organ”. The complex role of the immune system in the pathogenesis of NASH is currently raising great interest, also in view of the possible therapeutic potential of immunotherapy in NASH. This review focuses on the disturbances of the cells constituting the innate and adaptive immune system in the liver and in adipose tissue.